CC BY
12
Вестник Ка^НМУ №3-2018
O.A. Mitkovskaya
Medical Center Aset-D
SUBLINGUAL ALLERGEN-SPECIFIC IMMUNOTHERAPY IN METHOD OF TREATMENT OF ALLERGIES
Resume: Allergic diseases are increasing lately, it can be assumed that the the most important cause is deterioration of internal and outer human environment, age and themes of life, psychological overload and other factors, "hygienic hypothesis". In connection with this situations, it is necessary to update methods of treatment of allergies. One of the main directions of treatment is ASIT (allergen-specific immunotherapy). We proved that the most effective and the safest is a sublingual method of treatment by antipollin. Research methods were conducted from 2002 to 2018 in different countries and cities. The serious complications were not noticed during the treatment. In this regard, we recommend antipollin for carrying out ASIT.
Keywords: allergic diseases, pollinosis, allergic reactions, ASIT (allergen-specific immunotherapy),sublingual method of treatment, antipollin
УДК 616.36-002.2-022.6-085
У.П. Набиева1, Т.А. Агзамова2, А.А. Исмаилова1, Д.Г. Адылов1
1Институт Иммунологии и геномики человека Академии наук Республики Узбекистан 2Ташкентский педиатрический медицинский институт
ВЛИЯНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ПРОТИВОВИРУСНУЮ АКТИВНОСТЬ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ HCV-ИНФЕКЦИИ
Статья посвящена исследованию соответствия генотипа гена ИЛ-28В показателям противовирусной активности больных хроническим вирусным гепатитом С в ходе получения противовирусной терапии пегилированным интерфероном а и рибавирином. Было установлено, интерфероновый статус при «благоприятных» генотипах (СС или ТТ) гена IL-28B характеризовался более высоким уровнем ИФН-альфа и ИФН-гамма при сравнительно более низком уровне анти-ИФН-альфа в отличии от состояния этого статуса при «неблагоприятных» генотипах (неСС и не ТТ), что вероятно и обуславливает эффективность или неэффективность проводимой противовирусной терапии.
Ключевые слова: хронический вирусный гепатит С, интерлейкин-28, генетические предикторы, противовирусная активность, интерфероны
Введение. НСТ-инфекция входит в число социально значимых заболеваний. По оценке ВОЗ, в мире 170 млн людей, или 3% населения, инфицированы вирусом гепатита С. Ежегодно регистрируются 3-4 млн новых случаев заражения. Хроническая НСТ-инфекция (ХВГС) снижает трудоспособность, повышает риск развития серьезной депрессии, увеличивает затраты медицинских ресурсов, увеличивает смертность.
Генетические факторы организма человека взаимосвязаны с эффективностью лечения ХВГС, так как имеются этнические различия в ответе на лечение. Показано, что два из этих SNP имеют более высокую прогностическую ценность благоприятного ответа на лечение у ВГС-инфицированных пациентов с 1 генотипом 2979860 [5, 12] и ге8099917 [4, 6,8]. Однако еще окончательно не определено, какой SNP в наибольшей степени влияет на СВО. Однако некоторые исследования доказывают большую прогностическую ценность определения SNP 2979860 по сравнению с ге8099917 [3]. Выявлено, что частота «благоприятного» аллеля С в участке Ы 2979860 гена ^28В была самой высокой у азиатов и самой низкой у афроамериканцев. Более того, частота распространенности СС генотипа 2979860 взаимосвязана со СВО в каждой популяции [5]. При высоком медико-социальном значении хронической НСТ-инфекции изучение иммунопатогенеза заболевания, а также механизмов резистентности больных к терапии основными противовирусными препаратами
(пегилированным интерфероном а и рибавирином) позволяет не только повысить эффективность лечения, но и выявить факторы, ответственные за спонтанное освобождение организма от возбудителя и развитие хронического инфекционного процесса.
Целью нашего исследования было определение частоты встречаемости полиморфизмов гена интерлейкина-28В 28В) у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С и изучение взаимосвязи значимых полиморфизмов гена
28B с показателями противовирусной активности организма.
Материалы и методы: Нами обследовано 128 больных ХВГС, в возрасте от 16 до 58 лет (средний возраст 35,6±2,8). Длительность заболевания колебалась от 1 года до 10 лет (в среднем 3,8±1,1 года). Диагноз установлен врачами инфекционистами и гепатологами на основании результатов клинического обследования, данных лабораторных и инструментальных методов исследования. Диагноз был верифицирован на основании клинико-лабораторных данных на основании приказа МЗ РУз № 5 от 05.01.2012 г. Комплекс первичного обследования включал традиционный набор клинических и биохимических лабораторных показателей, УЗИ, исследование серологических маркеров (анти-HCV-IgG). Определение интерферонового статуса (ИФН-y, ИФН-а, антитела к ИФН-а) проводили с использованием автоматического фотометра для микропланшета при длине волны 450 нм методом иммуноферментного анализа на анализаторе «Stat-Fax» (США). Наборы реагентов производства «Вектор-Бест», Новосибирск (РФ). У больных использован метод ПЦР для определения RNA-HCV в крови. Генотипы HCV (1а, 1в, 2а, 2в, 3а) и нуклеотидный полиморфизм гена IL-28B определяли с помощью ПЦР-метода с использованием специфических праймеров. Для типирования полиморфных вариантов изучаемых генов были использованы препараты ДНК, полученные из 5 мл венозной крови. Выделение ДНК из лейкоцитов венозной крови человека проводилось модифицированным спиртово-солевым методом.
Генотипирование проводилось методом
пиросеквенирования (PyroMark Q24, PyroMark Gold Q24 Reagents, Qiagen, Germany). Репликационное генотипирование проводилось методом HRM-qPCR (Stratagene M*3005P, Agilent Technologies, Germany; DT-Prime, ДНК-Технология, Россия).
ЮеиЫ1к ХажМММ №3-2018
Результаты и обсуждение.
Нами было изучены нуклеотидные полиморфизмы гена 28В по ге12979860 и ге8099917 в различных группах: контрольная группа, общая группа больных ХВГС, больные ответившие на противовирусную терапию (ПВТ), больные, неответившие на ПВТ и группа лиц, самоизлечившихся от гепатита С. Распределение встречаемости вариантов нуклеотидного полиморфизма гена ^-28В в зависимости от рассматриваемых локусов в этих группах представлено на рис. 1 и 2.
По представленным данным (рис.1) видно, что по локусу ге!2979860 наиболее часто встречаемым генотипом был СТ,
затем генотип СС, и наименьшее распространение имел генотип ТТ. Однако распространенность среди рассматриваемых групп была несколько иной: в группе лиц, самоизлечившихся от гепатита С частота генотипа СС была 80,1% случаев, в то время как в группе, ответивших на терапию в 41,6% случаев (в контрольной группе - 36,0%), а среди больных, неответивших на ПВТ данный генотип выявлен не был. Таким образом, отмечается более «благоприятная» настроенность генотипа СС относительно исходов заболевания и эффективности терапии по сравнению с другими генотипами по локусу ге!2979860.
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
87,5
-114,8 12,
□ Контроль
□ Больные ХВГС
□ Ответчики
□ Неответчики
□ Выздор-е
СС СТ ТТ
Рисунок 1 - Распределение генотипов гена ИЛ-28В по локусу ге12979860 100
□ Контроль
□ Больные ХВГС □Ответчики
□ Неответчики
□ Выздор-е
ТТ
TG
GG
Рисунок 2 - Распределение генотипов гена ИЛ-28В по локусу ге8099917
При рассмотрении распределения генотипов по локусу ге8099917, наиболее часто встречался генотип ТТ, генотип GG был выявлен только в 5% случаев в контрольной группе, у больных ХВГС данный генотип нами выявлен не был. Генотип ТТ отмечен у 100% лиц, самоизлечившихся от гепатита С, однако этот генотип был выявлен в 76,9% случаев в группе, ответивших на терапию и в 37,3% случаев в группе, не ответивших на ПВТ (в контрольной группе -57,0%).
Учитывая, что активность патологического процесса отражает степень реагирования со стороны организма на внедрение инфекта, мы изучили противовирусную активность организма на основании показателей интерферонового статуса в сравниваемых группах больных. Далее мы изучали состояние интерферонового статуса организма, имеющего важное значение в реализации противовирусного иммунитета. Нами исследованы сывороточные концентрации ИФН-альфа, Ат к ИФН-альфа и ИФН гамма. Анализ полученных результатов основных интерферонов в сыворотке крови больных ХВГС в зависимости от генотипов гена ИЛ-28В СС и не-СС, а также ТТ и не-ТТ показал, что сывороточное содержание ИФН-альфа у больных ХВГС во всех группах был достоверно
понижен. Анализ показал, что при сравнении значений ИФН-альфа между группами, нами было выявлено, что в группе больных СС генотипом уровень ИФН-альфа составил 12,5±1,4пг/мл, в группе больных не-СС генотипами -9,2±1,8пг/мл, а в контрольной группе - 16,85±3,8пг/мл. В обеих группах больных ХВГС уровень ИФН-альфа был снижен достоверно по сравнению с данными контрольной группы, причем, в группе больных не-СС сывороточная концентрация ИФН-альфа была наименьшей и достоверно отличалась от значений больных генотипом СС в 1,4 раза. При не-ТТ выявлено достоверное снижение ИФН-альфа по сравнению со значением ТТ в 1,43 раза. В группах больных не-СС и не-ТТ сывороточная концентрации ИФН-альфа были наименьшими.
По уровню антител к ИФН достоверные различия выявлены между группами больных генотипами СС т не-СС, ТТ и не-ТТ, наибольшие значения антител к ИФН-альфа вывлены в группах больных не-СС и не-ТТ в 1,2 и 1,4 раза соответственно.
Что касается больных ХВГС ТТ и не-ТТ генотипами, то уровни ИФН-альфа также были снижены достоверно в сравнении со значением контрольной группы, и при этом достоверно отличались между собой. Так, сывороточная
5
Jinimtuiz ЭСа^ЖМЩ QV? 3-2018 !
концентрация ИФН-альфа в среднем в группе больных ХВГС ТТ генотипом гена ИЛ-28В составила 13,9±1,4пг/мл, тогда как в группе больных ХВГС не-ТТ генотипами -9,82±0,7пг/мл, различия в 1,43 раза. Как видно, тенденция к снижению сывороточных концентраций ИФН-альфа в исследуемых группах достаточно ясно наблюдалась, причем, как в группе больных ХВГС СС и не-СС, так и в группах больных ТТ и не-ТТ. Как было сказано выше, в группах больных не-СС и не-ТТ сывороточная концентрации ИФН-альфа были наименьшими. К сожалению, мы не нашли таких данных в литературе, но имеются данные о том, что в группах больных гомозиготными аллелями наблюдается более благоприятная картина в изучении гематологических и иммунологических параметра.
Далее мы рассмотрели уровни антител к ИФН-альфа. Анализ показал, что в группе больных генотипами СС и не-СС было выявлено, что наибольшее значение антител к ИФН-альфа наблюдалось в в группе больных не-СС генотипами гена ИЛ-28В, тогда как анализ антител к ИФН-альфа при изучении в группах больных ТТ и не-ТТ показал наибольшее значение наблюдалось в группе больных не-ТТ. Так, в группах больных СС и не-СС значения были таковы: 3,8±0,2пг/мл и 4,4±0,9пг/мл соответственно, при норме 3,4±0,7пг/мл. в группах больных ТТ и не-ТТ: 2,8±0,8пг/мл и 3,9±1,3пг\мл, соответственно при контрольном значении 3,4±0,7пг/мл. Достоверные различия были выявлены между группами больных генотипами ТТ и не-ТТ, следовательно, анализ показал, что наибольшие значения антител к ИФН-альфа были вывлены в группе больных не-СС и не-ТТ. Анализ ИФН-гамма в группах больных ХВГС в зависимости от различных генотипов гена ИЛ-28В позволил выявить, что
в группах больных СС и ТТ уровень сывороточного ИФН-гамма был повышен по сравнению со значением контрольной группы и со значениями групп больных не-СС и не-ТТ. Нами выявлено, что в группе больных генотипами СС и не-СС значения ИФН-гамма были следующими: 14,2±0,9пг/мл и 8,82±1,4пг/мл, соответственно. А в группах больных ТТ и не-ТТ: 10,6±1,1пг/мл и 9,2±1,2пг/мл, соответственно при норме 8,4±0,6пг/мл. Следовательно, анализ ИФН-гамма в группах больных ХВГС в зависимости от различных генотипов гена ИЛ-28В выявил, что в группах больных СС и ТТ уровень сывороточного ИФН-гамма был повышен по сравнению со значением контрольной группы и со значениями групп больных не-СС и не-ТТ. Выявлено, что в группе больных генотипами СС и не-СС разница в 1,6 раз, а в группах больных ТТ и не-ТТ в 1,3 раза.
Выводы: Таким образом, при генотипе СС гена ИЛ-28В по локусу ге12979860, при котором чаще выявлялся не1 генотип вируса гепатита С, наиболее часто отмечается самоизлечиваемость и высокая эффективность ПВТ. Со стороны противовирусной активности организма это сопровождалось тем, что интерфероновый статус при «благоприятных» генотипах (СС или ТТ) гена ^-28В характеризовался более высоким уровнем ИФН-альфа и ИФН-гамма при сравнительно более низком уровне анти-ИФН-альфа в отличии от состояния этого статуса при «неблагоприятных» генотипах (неСС и не ТТ), что вероятно и обуславливает эффективность или неэффективность проводимой противовирусной терапии.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Ивашкин В.Т., Мамаев С.Н., Лукина Е.А. Особенности иммунного статуса у больных хроническим вирусным гепатитом С // Рос.журнал гастроэн., гепатол., колопроктол. - 2001. - №3. - С. 24-29.
2 Мицура В.М., Воропаев Е.В., Осипкина О.В., Жаворонок С.В. Полиморфизм генов интерлейкина-28В и клиническое значение его выявления у пациентов с хроническим вирусным гепатитов С // Лабораторная диагностика. - 2012.-№2.- С.86-97.
3 Davis G.L. Early virologic response to treatment with peginterferon alfa-2b plus ribavirin in patients with chronic hepatitis С // Hepatology. - 2003. - № 38. - P. 645-652.
4 Fellay D. Ge, J. et al. Genetic variation in IL28B predicts hepatitis С treatment-induced viral clearance // J. Nature. - 2009. - Vol. 461. - P. 399-401.
5 Fried M.W. et al. Peginterferon alfa-2a plus ribavirin for chronic hepatitis С virus infection // N Engl J Med. - 2002. - Vol. 347. - P. 975982.
6 Ge D., Fellay J., Thompson AJ. et al. Genetic variation in IL28B predicts hepatitis C treatment-induced viral clearance // Nature. - 2009. -№461(7262). - Р. 399-401.
7 Grebely J. et al. Potential role for lnterleukin-28B genotype in treatment decision-making in recent hepatitis С virus infection // Hepatology - 2010. - Vol. 52. - P. 1216-1224.
8 Lotrich F.E. et al. IL28B polymorphism is associated with both side effects and clearance of hepatitis С during interferon- alpha therapy // Journal of Interferon & Cytokine Research. - 2011. - Vol. 31., №3.- P. 331-336.
9 Marc G.G. Diagnosis, management and treatment of hepatitis C // Hepatology. - 2009. - Vol. 49. - P. 1335-1374.
10 Pestka JM, Zeisel MB, Blaser E, Schurmann P, Bartosch B, Cosset FL, et al. Rapid induction of virus-neutralizing antibodies and viral clearance in a single-source outbreak of hepatitis C // Proc Natl Acad Sci USA. - 2007. - №104. - Р. 6025-6030.
11 Rauch A. Genetic Variation in IL28B Is Associated With Chronic Hepatitis С and Treatment Failure: A Genome-Wide Association Study // Gastroenterology. - 2010. - Vol. 138. - P. 1338-1345.
12 Tanaka Y. et al. Genome-wide association of IL28B with response to pegylated interferon-alpha and ribavirin therapy for chronic hepatitis С // Nat Genet. - 2009. - Vol. 41. - P. 1105-1109.
13 Thompson AJ. et al. Interleukin-28B polymorphism improves viral kinetics and is the strongest pretreatment predictor of sustained virologic response in genotype 1 hepatitis С virus // Gastroenterology. - 2010. - Vol. 139. - P. 120-129.
У.П. Набиева1, Т.А. Агзамова2, А.А. Исмаилова1, Д.Г. Адылов1
1взбекстан Республикасыныц гылым Академиясыныц адам иммунологиясы мен геномика Институты 2Ташкент педиатриялыцмедицина институты
СОЗЫЛМАЛЫ НСТ-Ж¥ЦПАСЫ КЕЗ1НДЕ ИММУНДЫ ЖУЙЕСГНЩ ВИРУСЦА ЦАРСЫ БЕЛСЕНД1Л1Г1НЕ
ТЕКТ1К ФАКТОРЛАРДЬЩ ЭСЕР1
ty^h: Ма;алада ИЛ-28В тепнщ генотишнщ созылмалы вирусты гепатитше шалдыадан нау;астырда пегилденген интерферон а мен рибавиринмен вирцс;а ;арсы ем барысында аньщталган вирус;а ;арсы белсендыжтщ керсеткштерше сэйкеслпн зерттеу нэтижелерi баяндалады. Интерферонды статус IL-28B тепнщ «;олайлы» генотиптер (СС немесе ТТ) кезшде ИФН-альфа мен ИФН-гамма децгейлершщ жогарылыгын, ал анти-ИФН-альфа децгешнщ темендИ зерттеу нэтижесшде «;олайсыз» генотиптермен (ССемес жэне ТТемес) салыстыру барысында аны;талды. Бул жагдай етизшш жат;ан вирус;а ;арсы терапияныц тиiмдi не тиiмдi емес болуын непздейтш сынды.
TY^H4i сездер: созылмалы вирусты гепатит С, генетикалы; предикторлар, интерлейкин-28, вирус;а ;арсы белсендшж, интерферондар
Vestnik KazNMU №3-2018
U.P. Nabieva1, T.A. Agzamova2, A.A. Ismailova1, D.G. Adylov1
1Institute of Immunology and Human Genomics of the Academy of Sciences of the Republic of Uzbekistan
2Tashkent Pediatric Medical Institute
EFFECT OF GENETIC FACTORS ON THE ANTIVIRAL ACTIVITY OF THE IMMUNE SYSTEM IN CHRONIC HCV INFECTION
Resume: The article is devoted to the study of the compliance of the genotype of the IL-28B gene with the antiviral activity of patients with chronic viral hepatitis C in the course of receiving antiviral therapy with pegylated interferon a and ribavirin. It was found that interferon status with "favorable" genotypes (CC or TT) of the IL-28B gene was characterized by a higher level of IFN-alpha and IFN-gamma at a relatively lower level of anti-IFN-alpha, unlike the state of this status with "unfavorable" genotypes (nonCC and non-TT), which probably determines the effectiveness or ineffectiveness of antiviral therapy
Keywords: chronic viral hepatitis C, interleukin-28, genetic predictors, antiviral activity, interferons
УДК 616.514
А.А. Нурмуханбетова, Д.Ж. Талгатбекова
Казахский Национальный медицинский университет им. С.Д.Асфендиярова, Алматы, РК Республиканский аллергологический центр НИИ КВБ, Алматы
ПРИМЕНЕНИЕ БИЛАСТИНА В ЛЕЧЕНИИ КРАПИВНИЦЫ
В структуре аллергической патологии основную часть составляют аллергические риниты (60-70%) и крапивница (15-18,5%). Целью исследования являлось изучение эффективности препарата Биластин (Никсар) при лечении крапивницы. Ключевые слова: аллергический ринит,крапивница, антигистаминные препараты
Введение. Аллергические заболевания являются одной из причин снижения качества жизни пациентов.Немаловажно, что различные аллергические заболевания сопутствуют друг другу, тем самым утяжеляя состояние больного. К примеру, аллергический ринит часто сопутствует бронхиальной астме иведет к развитию отитов, синуситов[1-2].В структуре аллергопатологии основную часть по-прежнему составляют аллергические риниты (6070%) и крапивница (15-18,5%)[3]. По данным литературы, распространенность хронической крапивницы варьирует от 0,5 до5%; более 40% пациентовстрадают в дальнейшем от высыпанийдо 10 лет [4]. Надо учитывать в данном случае популярность самолечения пациентов по интернету, советам в социальных сетях, низкую обращаемость к специалистам, а также безрецептурную продажу и доступность антигистаминных препаратов.В патогенезе этих заболеваний лежит гиперчувствительность немедленного типа, при которой происходит повышенная продукция специфического ^Е, с гипердегрануляцией тучных клеток и участием эозинофилов в аллергическом воспалении. К основным медиаторам, вызывающим повышение проницаемости сосудов и приводят к отеку прилежащих тканей, относятся биогенные амины (гистамин, серотонин), лейкотриены, простагландины, катионные белки, хемотаксические факторы [1,2,5]. Хемотаксисэозинофилов и базофилов в ткани ведет к развитию поздней стадии аллергии немедленного типа и усилению степени повреждения. При развитии кожных реакций при крапивнице имеют место аутоиммунные механизмы: наличие антител к IgG (35-40% пациентов) и к ^Е(5-10% пациентов) [4].Основные симптомы крапивницы - гиперемия (эритема), отек с образованием волдырей, кожный зудотносятся к проявлениям патофизиологической фазы воспаления.
В связи с этим возникает потребность в применении новых эффективных методов лечения.Биластин (Никсар) — новый селективный Н1-антигистаминный препарат, производный пиперидина. В исследованиях ^кго была показана высокая специфическая аффинностьбиластина к Н1-рецепторам при очень низкой аффинности к другим
рецепторам. По данному показателю биластин в 3 раза превосходит цетиризин и в 5 раз — фексофенадин[6,7]. Кроме того, биластин ингибирует спонтанное и гистамининдуцированное высвобождение
провоспалительных цитокинов (ИЛ-4 и ФНО) [6].Более избирательный в отношении Н1-рецепторов и более липофобный, что снижает способность проникновения в ЦНС и минимально воздествует на центральную нервную систему.
Цель проведенного исследования:
Изучить эффективность препарата Биластин (Никсар) при лечении крапивницы. Материалы и методы:
В Республиканском аллергологическомцентре
обследовано и пролечено 62 больных аллергической крапивницей в фазе обострения, в возрасте от 20 до 50 лет. Мужчин - 30, женщин - 32. Длительность заболевания составляла от 2 до 8 недель. Все больные были разделены на 2 группы. Две группы были сопоставимы по возрасту, полу, продолжительности заболевания. В 1 группу вошли 32 больных, которым в качестве базисного препарата назначали биластин в дозе 20мг в день (группа исследования).
Продолжительность лечения составляла 10 дней. Во 2 группу вошли 30 больных, которым базисная терапия проводилась цетиризином в дозе 5 мг в день (контрольная группа). Всем больным до и после лечения проводились следующие исследования: ОАК с лейкоформулой, определение концентрации общего ^Е, IgG в сыворотке крови.
Проводилось анкетирование больных с указанием клинических проявлений на фоне приема препаратов, а также имеющееся побочное действие (таблица 1). Отмечалось его действие в течение первого часа и улучшение симптоматики на 3-4 день приема, с уменьшением зуда, покраснения, динамики уменьшения высыпаний. Стойкое улучшение в виде улучшения сна, повышения качества жизни пациенты отмечали к 12-14 дням лечения.
