CC BY
24
УДК 616-053.31-085.357
ВЛИЯНИЕ ЭРИТРОПОЭТИНА
НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ В КРОВИ У НЕДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ С ОЧЕНЬ НИЗКОЙ МАССОЙ ТЕЛА
М.В. Осиков, О.Н. Альмухаметова, И.А. Федоров, Е.Ю. Ванин
ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России Челябинск, Россия
Аннотация. Цель работы — исследовать влияние эритропоэтина на функциональную активность нейтрофилов в крови в динамике первой недели жизни у недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела. Исследование выполнено на 30 новорожденных: доношенные (гестационный возраст 37 недель и старше) (п = 10), недоношенные (гестационный возраст от 27 недель до 30 недель и 6 дней включительно, масса при рождении менее 1500 г) (п = 10), недоношенные, которым вводили эритропоэтин в дозе 2000 МЕ (п = 10). Исследовали поглотительную и НСТ-редуцирующую способности нейтрофилов периферической крови. Установлено, что у недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела на 3 сутки жизни снижаются поглотительная способность, спонтанная НСТ-редуцирующая способность, увеличивается функциональный резерв нейтрофилов периферической крови, на 8-е сутки снижается спонтанная и индуцированная НСТ-редуцирующая способность клеток. Применение эритропоэтина приводит на 3 сутки жизни к увеличению поглотительной способности, спонтанной НСТ-ре-дуцирующей способности нейтрофилов периферической крови.
Ключевые слова: эритропоэтин, нейтрофилы, недоношенные дети, очень низкая масса тела.
Актуальность. Недоношенные дети представляют новую категория новорожденных, число которых увеличивается: ежегодно в мире 15 млн новорожденных рождаются недоношенными, что составляет около 11% от всех родов [7]. Смертность и развитие угрожающих жизни осложнений во многом связаны с инфекционными заболеваниями [4—6]. Очевидно, что высокий риск инфекционных осложнений обусловлен иммунным статусом. В то же время особенности и механизм формирования иммунного статуса в новых условиях у недоношенных новорожденных до конца не ясны. В этой связи принципиальным является изучение иммунологических показателей у недоношенных новорожденных, в том числе функциональной активности нейтрофилы периферической крови — ключевых клеток врожденного иммунитета, составляющих первую линию обороны при поддержании генетического гомеостаза. Не менее важным
является вопрос о необходимости коррекции возможной дисфункции нейтрофилов. В этом отношении интерес привлекают эндогенные биологически активные вещества с полифункциональным потенциалом [1]. В частности, эритропоэтин (ЭПО) как мультитропный фактор регуляции гомеостаза, в том числе с обнаруженными нами ранее иммуно-тропными эффектами в клинических и в экспериментальных условиях [2; 3].
Цель работы: исследовать влияние эритропоэтина на функциональную активность нейтро-филов в крови в динамике первой недели жизни у недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела.
Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на 30 новорожденных, находящихся в отделении реанимации и интенсивной терапии новорожденных Клиники ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России. Группа 1 — доно-
—--
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
ОсиковМ.В. и др. Влияние эритропоэтина на функциональную активность нейтрофилов в крови...
—--—
шенные новорожденные (гестационный возраст 37 недель и старше) (n = 10), группа 2а — недоношенные новорожденные, масса при рождении менее 1500 г (n = 10), группа 2б — недоношенные новорожденные (гестационный возраст от 27 недель до 30 недель и 6 дней включительно), масса при рождении менее 1500 г, которым вводили эрит-ропоэтин (n = 10). Эритропоэтин в составе препарата «Эпокрин» (международное непатентованное название: эпоэтин альфа, ГНИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург) согласно инструкции по применению у новорожденных вводили в дозе 2000 МЕ в сутки в течение 8 суток. Исследования проводили на 3-и и 8-е сутки жизни. Поглотительную способность нейтрофилов исследовали с частицами монодисперсного полистироль-ного латекса, учитывали активность фагоцитоза (АФ) и фагоцитарное число (ФЧ). Кислород-зависимый метаболизм нейтрофилов исследовали, учитывая интенсивность восстановления нитро-синего тетразолия (НСТ) в диформазан в спонтанном и индуцированном НСТ-тесте и расчетом функционального резерва клеток. Статистический анализ проведен с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows v.10.0. Проверку статистических гипотез проводили с использованием критериев Краскела-Уоллиса, Манна-Уитни, Вальда-Вольфовитца. Отличия считали значимыми при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. У недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела показатели функциональной активности нейтрофилов в крови представлены в табл. 1. Наблюдается снижение активности фагоцитоза (на 12,2% по медиане), интенсивности фагоцитоза (на 3% по медиане) нейтрофилов периферической
крови, а также снижение активности спонтанного НСТ-теста (на 65% по медиане), на правах тенденции снижается и активность индуцированного НСТ-теста, а также увеличивается функциональный резерв нейтрофилов. На 8-е сутки жизни активность и интенсивность фагоцитоза значимо не отличается от соответствующих показателей у доношенных. Зафиксировано снижение активности спонтанного (на 39,9% по медиане) и индуцированного (на 20,7% по медиане) НСТ-теста нейтрофилов в крови. Таким образом, можно говорить о депрессии поглотительной активности нейтро-филов на 3 сутки жизни и НСТ-редуцирующей способности нейтрофилов на 3 и 8 сутки жизни. Данный факт может иметь значение в формировании иммуносупрессии у недонощенных новорожденных.
Результаты оценки функциональной активности нейтрофилов в крови в условиях применения ЭПО представлены в табл. 2. Применение ЭПО приводит на 3 сутки жизни к увеличению активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов периферической крови, активности спонтанного НСТ-теста, функциональный резерв клеток не изменяется. На 8-е сутки жизни ЭПО не оказывал статистически значимого влияния на показатели функциональной активности нейтрофилов. Итак, на 3 сутки жизни влияние ЭПО на поглотительную и НСТ-редуцирующую способность нейтрофилов носит регуляторный характер и направлено на восстановление показателей. Отсутствие значимых эффектов ЭПО на функциональную активность нейтрофилов на 8 сутки жизни может быть связано с менее существенными отклонениями показателей по сравнению с 3-ми сутками.
Таблица 1
Показатели функциональной активности нейтрофилов (Me (Q25—Q75))
Показатели 3-и сутки 8-е сутки
Группа 1 Группа 2а Группа 1 Группа 2а
(n = 10) (n = 10) (n = 10) (n = 10)
АФ, % 90,20 (86,30—94,32) 79,23 (45,64—86,30)* 89,64 (84,36—93,90) 91,40 (90,60—91,40)
ФЧ, у.е. 4,30 (4,10—4,50) 4,15 (3,70—4,20)* 4,50 (4,50—4,50) 4,55 (4,50—4,60)
НСТ спонт., % 24,80 (12,36—32,54) 8,65 (6,29—21,09)* 19,62 (10,60—25,66) 11,78 (8,62—14,94)*
НСТ инд., % 46,80 (42,00—49,80) 31,20 (26,72—46,26) 51,55 (26,70—57,01) 40,86 (40,86—45,40)*
Функц. резерв 3,34 (1,28—4,60) 6,84 (3,53—11,54)* 1,85 (1,17—7,97) 2,74 (2,74—5,26)
Примечание. Здесь и в табл. 2: АФ — активность фагоцитоза, ФЧ — фагоцитарное число, * статистически значимые различия между группами (р < 0,05)
—--—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016. Vol. 18. No 10
—--—
Таблица 2
Влияние ЭПО на показатели функциональной активности нейтрофилов (Me (Q25—Q75))
Показатели 3-и сутки 8-е сутки
Группа 2а (n = 10) Группа 2б (n = 10) Группа 2а (n = 10) Группа 2б (n = 10)
АФ, % 79,23 (45,64—86,30) 88,20 (82,75—91,29)* 91,40 (90,60—91,40) 87,03 (85,10—91,10)
ФЧ, у.е. 4,15 (3,70—4,20) 4,40 (4,20—4,60) * 4,55 (4,50—4,60) 4,50 (4,40—4,60)
НСТ спонт., % 8,65 (6,29—21,09) 18,28 (12,36—32,54)* 11,78 (8,62—14,94) 14,70 (9,13—17,84)
НСТ инд., % 31,20 (26,72—46,26) 42,54 (39,00—46,90) 40,86 (40,86—45,40) 26,30 (21,00—56,90)
Функц. резерв 6,84 (3,53—11,54) 4,94 (2,82—7,50) 2,74 (2,74—5,26) 4,36 (3,50—5,43)
Выводы
1. У недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела на 3-и сутки жизни снижаются поглотительная способность, спонтанная НСТ-ре-дуцирующая способность, увеличивается функциональный резерв нейтрофилов периферической крови, на 8-е сутки снижается спонтанная и индуцированная НСТ-редуцирующая способность клеток.
2. Применение эритропоэтина в суточной дозе 2000 МЕ приводит на 3-и сутки жизни к увеличению поглотительной способности, спонтанной НСТ-редуцирующей способности нейтрофилов периферической крови.
ЛИТЕРАТУРА
1. Осиков М.В., Макаров Е.В., Кривохижина Л .В. Гемостазиологические эффекты а1-кислого гликопро-теина при экспериментальном септическом перитоните // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. Т. 144, № 8. С. 143—145.
2. Анализ гематологических эффектов эритропоэтина у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на диализе / М.В. Осиков, К.В. Ах-матов, Л.В. Кривохижина, В.Ю. Ахматов // Человек. Спорт. Медицина. 2009. № 20 (153). С. 79—82.
3. Патофизиологические аспекты изменения и коррекции врожденного иммунитета при хронической почечной недостаточности / М.В. Осиков, Л.Ф. Теле-шева, Ю.И. Агеев и др. // Современные проблемы науки и образования. 2013. №. 5. URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=7450 (дата обращения: 08.08.2016).
4. Cellular and humoral immunity in preterm infants of different gestational ages / Li Y., Wei Q.F., Pan X.N. [et al.] // Zhongguo. Dang. Dai. Er. Ke. Za. Zhi. 2014. Vol. 16, № 11. P. 1118—1121.
5. Neonatal cause-of-death estimates for the early and late neonatal periods for 194 countries: 2000—2013 / S. Oza, J.E. Lawn, D.R. Hogan et al. // Bull. World Health Organ. 2015. Vol. 93(1). P. 19—28.
6. Shane A.L., Stoll B.J. Neonatal sepsis: progress towards improved outcomes // J. Infect. 2014. Vol. 68. Suppl. 1. P. 24—32.
EFFECT OF ERYTHROPOIETIN ON FUNCTIONAL ACTIVITY OF NEUTROPHILS IN THE BLOOD OF PREMATURE NEWBORNS WITH VERY LOW BODY WEIGHT
M.V. Osikov, O.N. Almukhametovа, I.A. Fedorov, E. Yu. Vanin
South Ural State Medical University, Ministry of Health of Russia Chelyabinsk, Russia
Anotation. The aim of this work is to investigate the effect of erythropoietin on functional activity of blood neutrophils in the dynamics of the first week of life in preterm neonates with very low birthweight. The study was performed on 30 neonates: full-term (gestational age 37 weeks and older) (n = 10), preterm (gestational age from 27 weeks to 30 weeks and 6 days, birth weight less than 1500 g) (n = 10), premature, administered erythropoietin at a dose of 2000 IU (n = 10). Investigated the absorption and NBT-reducing ability of neutrophils peripheral blood. It is established that in premature newborns with very low body weight at 3 days of life reduced the absorption capacity of the spontaneous NBT-reducing
capacity, increasing the functional reserve of neutrophils of peripheral blood at 8 days — reduced spontaneous and induced
—--
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
ОсиковМ.В. и др. Влияние эритропоэтина на функциональную активность нейтрофилов в крови...
—--—
NBT-reducing capacity of the cells. The use of erythropoietin leads to 3 days of life to increase the absorptive capacity, spontaneous NBT-reducing ability of neutrophils peripheral blood.
Key words: erythropoietin, neutrophils, premature infants, very low body weight.
REFERENCES
1. Osikov M.V., Makarov E.V., Krivokhizhina L.V. Gemostaziologicheskie effekty al-kislogo glikoproteina pri eksperimental'nom septicheskom peritonite. Byulleten' eks-perimental'noi biologii i meditsiny, 2007, vol. 144, no. 8. pp. 143—145.
2. Osikov M.V., Akhmatov K.V., Krivokhizhina L.V., Akhmatov V.Yu. Analiz gematologicheskikh effektov eritropoetina u bol'nykh khronicheskoi pochechnoi nedosta-tochnost'yu, nakhodyashchikhsya na dialize. Chelovek. Sport. Meditsina, 2009, no. 20 (153), pp. 79—82.
3. Osikov M.V., Telesheva L.F., Ageev Yu.I. et al. Patofiziologicheskie aspekty izmeneniya i korrektsii vrozh-dennogo immuniteta pri khronicheskoi pochechnoi nedo-
statochnosti. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya, 2013, no. 5. Available at: http://www.science-education.ru/ ru/article/view?id=7450 (data obrashcheniya: 08.08.2016).
4. Li Y., Wei Q.F., Pan X.N. [et al.] Cellular and humoral immunity in preterm infants of different gestational ages. Zhongguo. Dang. Dai. Er. Ke. Za. Zhi, 2014, Vol. 16, no. 11, pp. 1118—1121.
5. Oza S., Lawn J.E., Hogan D.R. et al. Neonatal cause-of-death estimates for the early and late neonatal periods for 194 countries: 2000—2013. Bull. World Health Organ, 2015, vol. 93(1), P. 19—28.
6. Shane A.L., Stoll B.J. Neonatal sepsis: progress towards improved outcomes. J. Infect., 2014, vol. 68, suppl. 1, pp. 24—32.
