CC BY
40
УДК 619:579.842.11-612.112.7
Ключевые слова: колибактериоз, Escherichia coli, энтеротоксины, лейкоформула, картина крови
Key words: colibacillosis, Escherichia coli, enterotoxins, differential blood cell count, blood picture
Терехов В. И.
ВЛИЯНИЕ ЭНТЕРОТОКСИНОВ ESCHERICHIA COLI НА КАРТИНУ КРОВИ ЖИВОТНЫХ
the influence of escerichia coli enterotoxins on the animal blood picture
Государственное казенное учреждение краевая станция по борьбе с болезнями животных «Краснодарская» Адрес: 350004, Россия, г. Краснодар, ул. Калинина, 15/1. Тел. +7 (861) 221-61-57
krasnodarskaya Regional Station for control of Animal Diseases, State Public Institution Address: 350004, russia, krasnodar, kalinin street, 15/1. Tel. +7 (861) 221-61-57
Терехов Владимир Иванович, д. б. н., проф., начальник отдела. E-mail: [email protected]
terekhov Vladimir i., doctor of Biological Sciences, Professor, Head of the dept. e-mail: [email protected]
Аннотация. Целью работы было изучение характера изменения гематологических показателей в ответ на введение животным экзотоксинов эшерихий. В опыте использовались молодые белые крысы, которым однократно в брюшную полость были введены сублетальные дозы безмикробной культуральной среды, содержащей термостабильный, термолабильный, шигаподобный токсины и смесь этих токсинов. Исследования крови осуществляли через 3, 6, 12 и 24 ч. Было установлено, что под действием экзотоксинов у животных развивается выраженная лимфопения и значительный нейтрофильный сдвиг влево вследствие появления в кровотоке незрелых форм клеток. Наиболее сложные процессы происходят под действием шигаподобного токсина и смеси токсинов, при этом животные испытывают существенную антигенную нагрузку, приводящую к массированному выбросу в кровяное русло базофилов и эозинофилов. Токсическое действие термостабильного и термолабильного токсинов е. coli при однократном поступлении в организм проявляется на протяжении 6-12 ч., тогда как шигаподобного токсина и смеси токсинов - до 24 ч.
Summary. Purpose of the study was to investigate the nature of changes of hematological indices in response to the injection of Escherichia exotoxins to the animals. authors used young albino rats for the test. the rats were once injected with sublethal doses of amicrobic cultural medium containing thermostable, thermolabile, Shiga-like toxins and the mixture of these toxins. the injection was made into the peritoneal cavity. Blood tests were carried out 3, 6, 12 and 24 hours after the injection. it was found that exotoxins caused severe lymphopenia and substantial neutrophil left shift due to the appearance of immature forms of cells in the bloodstream. the most complicated processes take place under the influence of the Shiga-like toxin and the mixture of toxins, while the animals are experiencing significant antigenic load, resulting in a massive release of basophils and eosinophils into the bloodstream. toxic effect of thermostable and thermolabile E. coli toxins at single receipt in the organism can be observed within 6-12 hours, whereas that of Shiga-like toxin and the mixture of toxins can be evident up to 24 hours.
Введение
В этиологии эшерихиоза и смешанных кишечных инфекций у животных чаще всего участвуют различные варианты токсигенных Escherichia (Е.) coli, факторами патогенно-сти которых являются термолабильный (TL), термостабильный (TS) и шигаподобный токсины (STX) [2-4, 6, 8].
Основной мишенью TL и TS являются эпи-телиоциты тонкого и толстого кишечника, у которых под действием данных токсинов нарушается аденилат- и/или гуниалат-циклазный комплекс, находящийся внутри клетки. Активация аденилат- и/или гуанилат-циклазы приводит к синтезу и накоплению
циклических аденил- и/или гуанилмонофос-фата, под влиянием которых эпителиальные клетки осуществляют избыточную секрецию воды и электролитов в просвет кишки, что проявляется развитием водянистой диареи [1, 5, 7, 9].
Основной мишенью STX являются не только энтероциты, но и эндотелиоциты. Под действием этого токсина происходит ингибирование синтеза рибосомами белка, что приводит к необратимым процессам, заканчивающимися гибелью клетки [10].
Между тем, следует полагать, что патологическое действие энтеротоксинов эшерихий не ограничивается только пищеварительным
трактом, поскольку без взаимосвязи между органами и системами организма невозможно поддержание гомеостаза и протекание адаптационных процессов. Универсальным критерием оценки состояния внутренней среды организма является картина крови, которая начинает меняться еще до развития клинического проявления болезни. Поэтому изучение гематологических показателей является не только диагностическим, но и прогностическим приемом, позволяющим увидеть сценарий развивающихся патологических процессов.
В связи с этим целью работы было изучение характера изменений гематологических показателей животных в ответ на введение энтеротоксинов эшерихий.
Материалы и методы
В опытах использовали 45 молодых белых крыс массой 175±10 г, которых разделили на 5 групп по 9 голов в каждой. Животным опытных групп однократно внутрибрюшин-но вводили заранее установленную сублетальную дозу безмикробной культураль-ной среды, содержащей тот или иной вид токсинов. Животным контрольной группы вводили аналогичный объем стерильной питательной среды. В качестве продуцентов использовали клинические штаммы Е. coli, которые длительно сохраняли гены и способность продуцировать термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, что было подтверждено с помощью ПЦР и тестирования на инфузориях, в тесте отека лапки у белых мышей и в тесте на мышах-сосунах. Характеристика данных штаммов отражена в таблице 1.
Эшерихии выращивали в бульоне Хоттин-гера в течение 24 ч, после чего культураль-ную среду центрифугировали 60 мин. при
10 000 об./мин. и надосадок использовали для заражения животных. Смесь токсинов получали путем объединения равных объемов монокультур соответствующих штаммов Е. coli. Животным 1 опытной группы вводили культуральную среду с TS, животным 2 опытной группы - с TL, животным 3 опытной группы - STX, животным 4 опытной группы - смесь токсинов.
Отбор крови проводили из хвостовой вены через 3, 6, 12 и 24 ч.
Абсолютное количество эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина крови определяли на автоматическом гематологическом анализаторе MEDONIC CA-400, а лейкоформулу устанавливали по мазкам крови окрашенных по Романовскому - Гимза в иммерсионной системе при увеличении 100*10. Индекс сдвига (ИС) рассчитывали как отношение суммы количества незрелых форм нейтро-филов к количеству сегментоядерных ней-трофилов.
Результаты исследований
Результаты опыта показали, что через 3 ч. после введения токсинов у подопытных животных наблюдались определенные изменения в клеточном составе крови (табл. 2). У крыс 1 группы абсолютное количество форменных элементов достоверно не изменилось, однако по сравнению с контролем на 26,0 % увеличилась концентрация в крови гемоглобина, а в составе лейкоцитов появились базофильные клетки, почти вдвое увеличилось количество палочкоядерных нейтрофилов, тогда как настолько же уменьшилось количество зрелых форм этих клеток, количество лимфоцитов уменьшилось в 1,3 раза (38,0±4,1 %).
Картина крови у животных 2 опытной группы характеризовалась умеренными эри-
Таблица 1.
Характеристика штаммов Е. coli
Номер Соматический Тип Наличие Тип
штамма антиген адгезина гена токсина гемолиза
№ 44 О157 - STX1, 2 а
№ 533 О141 К99 ST ß
№ 546 О111 F41 LT ß
Таблица 2.
Морфологический состав крови крыс через 3 часа после введения токсинов Е. coli
Показатели Группы животных (n = 9)
1 2 3 4 контроль
Эритроциты,1012/л 4,4±0,3 3,6±0,3 6,4±0,6* 3,8±0,1 4,1±0,4
Лейкоциты, 109/л 4,6±0,4 4,9±0,1 5,3±0,2* 1,12±0,1* 3,8±0,4
Гемоглобин, г/л 137,0±6,0* 97,0±5,0 119,0±12,0 88,0±6,0 111,0±10,0
Лейкоформула, %: Эозинофилы - 0,3±0,01 - 3,7±0,2* 0,7±0,05
Базофилы 1,0±0,1 1,0±0,05 0,7±0,01 1,3±0,1 -
Моноциты 0,7±0,05* 0,3±0,01 0,7±0,05* 1,7±0,15* 0,3±0,01
нейтро-филы Миелоциты - - - 1,0±0,1 -
Юные 2,0±0,2 1,7±0,1 1,0±0,05 11,0±0,5* 1,0±0,1
Палочкоядерные 47,0±1,0* 55,7±2,5* 54,0±5,5* 33,0±3,4 24,1±2,1
Сегментоядерные 11,3±1,1* 3,0±0,2* 5,0±0,4* 4,7±0,2* 23,7±2,1
Лимфоциты 38,0±4,1 38,0±3,6 38,5±3,6 43,6±4,3 50,2±5,0
ИС 4,3±0,05* 19,1±2,1* 11,0±1,2* 11,7±1,0* 1,1±0,1
Примечание: * - Р < 0,05 по отношению к контролю.
Таблица 3.
Морфологический состав крови крыс через 6 часов после введения токсинов Е. coli
Показатели Группы животных (n = 9)
1 2 3 4 контроль
Эритроциты,1012/л 4,2±0,4 4,1±0,3 5,2±0,5* 4,5±0,5 4,1±0,3
Лейкоциты, 109/л 3,1±0,2 4,3±0,3 3,4±0,1 2,3±0,2* 3,9±0,3
Гемоглобин, г/л 106,0±1,0 99,0±10,0 104,0±1,0 86,0±6,0 114,0±2,0
Лейкоформула, %: Эозинофилы - - - 4,0±0,4* 0,7±0,05
Базофилы 1,0±0,1 0,7±0,0 0,7±0,05 1,7±0,15 -
Моноциты 0,3±0,01 0,3±0,02 0,7±0,01 1,7±0,1* 0,3±0,01
нейтро-филы Миелоциты 1,0±0,03 0,3±0,01 0,3±0,01 0,7±0,03 -
Юные 2,0±0,2* 2,0±0,1* 2,0±0,2* 6,7±0,5* 1,0±0,1
Палочкоядерные 54,7±3,6* 65,0±5,9* 64,3±6,1* 43,9±4,3* 22,3±2,1
Сегментоядерные 8,5±0,7* 7,7±0,05 1,7±0,1* 7,3±0,3* 20,7±2,1
Лимфоциты 32,5±3,5* 24,0±2,6* 30,3±1,5* 34,0±3,0* 55,0±5,0
ИС 6,8±0,1* 8,7±0,2* 39,2±2,4* 7,0±0,6* 1,1±0,1
Примечание: * - Р < 0,05 по отношению к контролю.
троцитопенией и лейкоцитозом, снижением концентрации гемоглобина. В структуре клеток белой крови наблюдали еще более выраженный, чем в первой группе, сдвиг влево, а также появление базофильных клеток.
У животных 3 опытной группы, которым вводили шигаподобный токсин, в крови достоверно в 1,6 раза по отношению к животным контрольной группы увеличилось количество эритроцитов и в 1,4 раза - коли-
чество лейкоцитов. В популяции лейкоцитов в 2 раза увеличилась доля палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов, но одновременно в 1,3 раза уменьшилась доля лимфоцитов, появились базофилы.
На введение смеси токсинов Е. coli в крови у подопытных животных наблюдали развитие ярко выраженной лейкопении (1,12±0,1*109/л) и появление большого количества миелоцитов, метамиелоцитов
Таблица 4.
Морфологический состав крови крыс через 12 часов после введения токсинов Е. coli
Показатели Группы животных (n = 9)
1 2 3 4 контроль
Эритроциты,1012/л 6,2±0,6 4,8±0,4 5,1±0,4 4,6±0,3 4,3±0,2
Лейкоциты, 109/л 6,7±0,4* 8,2±0,9* 7,9±0,6* 3,9±0,1 3,8±0,1
Гемоглобин, г/л 125,0±12,0 112,0±10,0 107,0±10,0 96,0±3,0 116,0±3,0
Лейкоформула, %: Эозинофилы - - - - 0,7±0,01
Базофилы 1,0±0,01 0,3±0,05 1,0±0,05 2,3±0,05 -
Моноциты 1,0±0,01* 0,7±0,02* 0,3±0,02 0,3±0,01 0,3±0,01
нейтро-филы Миелоциты - - - 1,0±0,1 -
Юные 1,3±0,1 2,0±0,0 2,4±0,2 2,7±0,3 -
Палочкоядерные 58,7±6,5* 64,0±3,0* 64,3±4,5* 46,7±3,7* 25,0±2,1
Сегментоядерные 11,4±1,1* 10,7±1,0* 7,3±0,3* 22,0±2,4 20,7±2,1
Лимфоциты 26,6±2,4* 22,5±1,5* 25,7±2,7* 27,7±1,9* 53,3±2,5
ИС 5,3±0,1* 6,2±0,5* 9,6±0,8* 2,3±0,2* 1,2±0,1
Примечание: * - Р < 0,05 по отношению к контролю.
Таблица 5.
Морфологический состав крови крыс через 24 часа после введения токсинов Е. coli
Показатели Группы животных (n = 9)
1 2 3 4 контроль
Эритроциты,1012/л 5,3±0,4 4,2±0,2 5,2±0,5 5,1±0,4 4,1±0,1
Лейкоциты, 109/л 7,8±0,3* 8,5±0,7* 6,0±0,5* 6,5±0,2* 4,0±0,2
Гемоглобин, г/л 111,0±3,0 113,0±7,0 121,0±9,0 86,0±6,0* 118,0±2,0
Лейкоформула, %: Эозинофилы - - - - 0,7±0,05
Базофилы - - - - -
Моноциты 0,5±0,05 0,3±0,01 0,3±0,03 - 0,3±0,01
нейтро-филы Миелоциты - - - 2,7±0,3 -
Юные 1,7±0,1 1,0±0,03 1,3±0,01 5,7±0,6* 1,0±0,01
Палочкоядерные 27,0±3,5 24,0±2,6 39,0±4,2 26,7±1,5 22,6±2,1
Сегментоядерные 25,0±3,0* 23,7±0,6 29,3±3,1 24,7±2,2 21,7±2,1
Лимфоциты 45,8±2,1 50,7±3,2 29,7±2,5* 40,2±2,0* 53,7±2,1
ИС 1,1±0,1 1,1±0,1 1,4±0,15 1,4±0,1 1,1±0,1
Примечание: * - Р < 0,05 по отношению к контролю.
(до 11,0±0,5 %) и палочкоядерных нейтро-филов с одновременным снижением относительного количества зрелых сегмен-тоядерных нейтрофильных гранулоцитов. Кроме того, картина крови у этих животных характеризовалась эозинофилией (3,7± 0,2 %), базофилией (1,3±0,1 %) и моноцито-зом (1,7±0,15 %).
Через 6 часов после введения токсина (табл. 3) у животных 1 опытной группы
со стороны абсолютных значений количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина достоверных изменений не произошло. Однако в лейкоформуле зафиксировали появление миелоцитов и увеличение доли палочкоядер-ных нейтрофилов, что привело в результате к увеличению более чем в 5 раз ИС. Количество лимфоцитов снизилось до 32,5±3,5 %, что в 1,6 раза меньше, чем у животных контрольной группы.
У животных 2 группы картина крови характеризовалась лимфопенией (24,0±2,6 %) и выраженным нейтрофильным сдвигом влево за счет значительного увеличения (до 65,0±5,9 %) палочкоядерных клеток и появлением миелоцитов. В тоже время абсолютное количество эритроцитов и насыщенность их гемоглобином, а также количество лейкоцитов достоверно не различалось с таковым у животных контрольной группы.
У животных 3 группы отметили наличие эритроцитоза (5,2±0,5х1012/л), нейтрофилии с резко обозначенным смещением нейтро-фильного ядра влево, при этом ИС составил 39,2±2,4 ед.
Спустя 6 ч. после введения смеси токсинов у животных 4 группы сохранялась лейкопения с высоким содержанием в пуле этих клеток незрелых форм нейтрофилов, кроме того имела место эозинофилия (4,0±0,4 %), базо-филия (1,7±0,15 %), моноцитоз (1,7±0,1 %) и лимфопения (34,0±3,0 %).
Через 12 ч. после введения ST у животных отметили (табл. 4) умеренный эритроцитоз (6,2±0,6х1012/л) и лейкоцитоз (6,7±0,4х109/л). При этом увеличение абсолютного количества клеток белой крови сопровождалось снижением в их популяции количества лимфоцитов при одновременном увеличении количества базофилов, моноцитов и незрелых форм нейтрофилов. Ядерный сдвиг влево увеличился более чем в 4 раза по сравнению с контрольным значением.
У животных 2 опытной группы к этому же времени также имел место выраженный лейкоцитоз на фоне не менее выраженной лим-фопении. При этом количество лейкоцитов превышало контрольные значения более чем в 2 раза (8,2±0,9х109/л в опыте и 3,8±0,1х109/л в контроле). Нейтрофильная фракция клеток белой крови была представлена в основном незрелыми формами, что привело к увеличению индекса сдвига до 6,2±0,5 ед.
В 3 опытной группе у крыс под действием шигаподобного токсина по сравнению с контролем произошло увеличение количества лейкоцитов 2 раза (7,9±0,6 в опытной группе и 3,8±0,1х109/л в контроле). ИС, хотя уменьшился в 4 раза по сравнению с аналогичным показателем через 6 часов тем не менее был
в 8 раз большим по сравнению с контролем. Кроме того, у животных данной группы была выраженная лимфопения.
У животных 4 группы под влиянием комплекса токсинов через 12 ч. развилась лим-фопения и сохранялся выраженный лейкоцитарный сдвиг влево с появлением в пуле этих клеток миелоцитов.
По прошествии 24 ч. после введения токсинов крысам в их картине крови наблюдали следующие изменения (табл. 5).
У животных 1 группы, которым была введена культуральная среда с содержанием в ней термостабильного экзотоксина, наблюдали выраженный лейкоцитоз на фоне выравнивания соотношения клеточного состава внутри данной популяции клеток крови.
У животных 2 группы, которым была введена культуральная среда с содержанием в ней термолабильного экзотоксина, также как и в 1 группе, имел место выраженный лейкоцитоз (8,5±0,7х109/л), при этом качественный состав клеток белой крови достоверно не различался от такового у животных контрольной группы.
У крыс 3 группы, которым была введена культуральная среда с содержанием в ней шигаподобного экзотоксина, наблюдали умеренный лейкоцитоз, однако субпопуля-ционный состав этих клеток существенно отличался от такового у животных контрольной группы. Это проявлялось, прежде всего, измененным балансом нейтрофильных гра-нулоцитов с преобладанием среди них палочкоядерных форм и лимфопенией.
У крыс 4 группы, которым была введена смесь токсинов, наблюдали достоверное снижение в крови гемоглобина при некотором увеличении количества эритроцитов, кроме того был установлен умеренный лейкоцитоз. Однако в составе клеток белой крови отсутствовали моноциты, среди нейтрофильных гранулоцитов было повышенное содержание незрелых клеток, а количество лимфоцитов -достоверно пониженным.
Обсуждение
При анализе результатов гематологических исследований было установлено, что через 3 ч. после введения токсинов у крыс
во всех опытных группах наблюдали появление трех закономерностей: выраженного нейтрофильного сдвига влево, лимфопении и появление в кровотоке базофильных клеток. У животных первых трех опытных групп данные изменения происходили на фоне лейкоцитоза, а четвертой опытной группы, которым ввели смесь токсинов, напротив, резко выраженной лейкопении. Следовательно, каждый из токсинов в отдельности на начальном этапе взаимодействия с организмом животных оказывает стимулирующее влияние на лейкопоэз, однако эта стимуляция заключается в выбросе в кровяное русло в основном гранулоцитарных клеток и их предшественников. Появление базофилов, по всей видимости, указывает на то, что эта стимуляция не что иное, как мощное антигенное раздражение и реализация резервных возможностей системы гемопоэза. У животных четвертой группы действие смеси токсинов, напротив, привело к резкому угнетению лейкопоэза, ярко выраженной эозинофилии (как реакция на увеличение количества базофилов), появлению в крови миелоцитов и метамиелоци-тов, свидетельствующих о сильных деструктивных процессах в кроветворном органе.
Схожие изменения в картине крови были получены при экспериментальном эшерихио-зе у новорожденных телят, которых заражали пероральным введением бульонной культуры Е. coli O78:K80. У подопытных животных спустя 3 ч. после заражения отмечали резкое снижение количества лейкоцитов, а в их составе - зрелых форм нейтрофилов [4]. Сопоставляя эти данные с результатами собственных исследований можно предположить, что отобранный для опыта на телятах штамм кишечной палочки мог продуцировать сразу несколько токсинов.
Через 6 ч. после введения токсинов ге-матограмма подопытных животных характеризовалась еще более существенным ней-трофильным сдвигом, особенно у крыс из 3 опытной группы, у которых под действием шигаподобного токсина из периферической крови практически полностью исчезли сегментоядерные нейтрофилы. Учитывая функциональную характеристику данных клеток, а именно скопление их в очаге воспаления,
следует предположить, что уменьшение их количества в периферической крови произошло за счет миграции в брюшную полость, куда была введена культуральная среда, содержащая токсин. Однако наиболее значительные изменения в картине крови были установлены у животных из 4 группы, которым ввели смесь токсинов: у них сохранялся высокий уровень эозинофилов и базофилов, что свидетельствует о наличии у них выраженных сосудисто-инфильтрационных процессов, сопровождающихся интенсивным выбросом в кровяное русло медиаторов воспаления и апоптоза. Кроме того, у данных животных под действием энтеротоксинов эшерихий сохранялась достоверная лейкопения, свидетельствующая о дегенеративных изменениях в органах иммунной системы, и прежде всего в костном мозге.
Характер изменений в картине крови крыс в последующие часы свидетельствовал об адаптивных процессах у подопытных животных, о чем свидетельствовало повышение в 1,5-2 раза относительно животных контрольной группы содержания лейкоцитов и увеличение в их составе количества лимфоцитов при одновременном уменьшении индекса сдвига, количества базофилов и исчезновении эозинофилов. Между тем, у животных из 4 группы даже через 24 ч. после введения смеси токсинов сохранялась напряженность внутренней среды, которая проявлялась наличием высокого содержания мие-лоцитов, метамиелоцитов и исчезновением из кровотока моноцитов.
Заключение
Таким образом, анализ результатов гематологических исследований показал, что действие энтетоксинов Е. coli на организм животных приводит к развитию лим-фопении и значительному нейтрофильному сдвигу влево вследствие появления в кровотоке незрелых форм клеток. Наиболее сложные процессы происходят под действием ши-гаподобного токсина и смеси токсинов, при этом животные испытывают существенную антигенную нагрузку, приводящую к массированному выбросу в кровяное русло базо-филов и эозинофилов. Токсическое действие
TS и TL E.coli при однократном поступлении в организм проявляется на протяжении 6-12 ч., тогда как STX и смеси данных токсинов - до 24 ч.
Список литературы
1. Воротынцева, Н. В. Острые кишечные инфекции у детей [Текст] / Н. В. Воротынцева, Л. Н. Мазан-кова. - М. : Медицина, 2001. - 480 с.
2. Гаффаров, Х. З. Моно- и смешанные инфекционные болезни телят и поросят [Текст] / Х. З. Гаффаров, А. В. Иванов, Е. А. Непоклонов, А. З. Равилов. -Казань : Фэн, 2002. - 592 с.
3. Емельяненко, П. А. Энтеротоксины кишечных бактерий [Текст] / П. А. Емельяненко // Ветеринария, 2000. - № 2. - С. 25-27.
4. Зароза, В. Г. Эшерихиоз телят / В. Г. Зароза. -М. : Агропромиздат, 1991. - 239 с.
5. Петровская, В. Г. Энтеротоксины энтеротокси-генных Escherichia coli: характеристика, механизм действия и генетический контроль [Текст] / В. Г. Петровская, В. М. Бондаренко // Микробиол., эпидеми-ол. и иммунол. - 1990. - № 7. - С. 92-97.
6. Терехов, В. И. Антигенный состав и патогенные свойства штаммов E. coli, изолированных от телят и поросят в Краснодарском крае [Текст] / В. И. Терехов, Я. М. Караев, Н. В. Когденко, Н. В. Коткова // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2008. - № 4. - С. 6-8.
7. Шмитт, К. К. Бактериальные токсины: друзья или враги? [Текст] / Клер К. Шмитт, Карен С. Мей-сик, Алисон Д. О'Браэн // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2000. - Том 2. -№ 1. - С. 4-14.
8. Acres, S. D. Enterotoxigenec Escherichia coli infections in newborn calves [Текст] / S. D. Acres // J. Dairy Sc. - 1985. - Vol. 68. - № 1. - P. 229-256.
9. Almenoff, J. S. Induction of heat stable enterotoxin receptor activity by a human Alu repeat [Текст] / J. S. Almenoff, J. Surka and G. K. Schoolnik // J. Mol. Biol. - 1989. - № 210. - P. 265-280.
10. Jackson, M. P. Nucleotide sequence analysis and comparison of the structural genes for Shiga-like toxin 1 and Shiga-like toxin 2 encoded by bacteriophages from E. coli 933 [Текст] / M. P. Jackson, R. J. Neill, A. D. O'Brien, R. K. Holmes and J. W. Newland // FEMS Microbiol. Lett. - 1987. - № 44. - P. 109-114.
