Влияние дармонала на функциональное состояние печени при токсическом гепатите Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

М.: БИНОМ, 2003. - С.10-53.

11. Михайлов Е.Е., Меньшикова Л.В., Ершова О.Б. Эпидемиология остеопороза и переломов в России // Остеопороз и остеопатии. - 2003. - Прил. - С.44.

12. Brown J.P., Josse R.G. 2002 clinical practice guidelines for the diagnosis and management of osteoporosis in Canada // CMAJ. - 2002. - 167 (10 suppl). - P.S1-S34.

13. Kanis J.A., Oden A., Johnell O., et al. The use of clinical risk factors 2007 enhances the performance of BMD in the prediction of hip and osteoporotic fractures in men and women // Osteoporos Int. - 2007. - Vol. 8. № 18. - P.1033-1046.

14. Van Staa T.P., et al. Inflammatory bowel disease and the risk of fracture // Gastroenterology. - 2003. - Vol.125. №6. -P.1591-1597.

Информация об авторах: 650000, г. Кемерово, ул. Ворошилова, 22 а, Кемеровская государственная медицинская академия, кафедра пропедевтики внутренних болезней, тел. (384 2) 58-68-41; e-mail: doctorjulia@rambler.ru,

Раскина Татьяна Алексеевна - д.м.н., проф., заведующая кафедрой; Аверкиева Юлия Валерьевна - аспирант.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ

© АЗИЗОВА С.С., КАРИМОВА Г.А ., АБДУСАМАТОВ А.А., НАБИЕВ А.Н. - 2011

ВЛИЯНИЕ ДАРМОНАЛА НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

Санат Собировна Азизова1, Г.А Каримова1, Абдулазиз Абдулатипович Абдусаматов1, Абдували Набиевич Набиев2 ('Ташкентский педиатрический медицинский институт, и.о. ректора - д.м.н., проф. А.И. Искандаров, кафедра фармакологии, зав. - д.м.н., проф. А.А. Абдусаматов; Государственный центр экспертизы и стандартизации лекарственных средств Министерства Здравоохранения Республики Узбекистан, директор -

д.ф.н., проф. Х.К. Жалилов)

Резюме. Изучено влияние дармонала на функциональное состояние печени при токсическом гепатите. Установлено, что дармонал при токсическом гепатите снижая активность цитолитических ферментов АлАТ и АсАТ, маркеров холестаза ЩФ и ГГТ, увеличивал содержание белка и детоксикационную функцию печени. Дармонал, оказывая гепатозащитное действие, улучшал функции печени и не уступал гепатопротектору - силибор.

Ключевые слова: дармонал, дармонал А, силибор, токсический гепатит, АлАТ, АсАТ, ЩФ, ГГТ, общий белок, гликоген, молочная кислота, гексеналовый сон.

THE EFFECT OF DARMONAL ON THE FUNCTIONAL STATE OF LIVER IN TOXIC HEPATITIS

S.S. Azizova1, G.A. Karimova1, A.A. Abdusamatov1, A.N. Nabiev2 (‘Tashkent Pediatric Medical Institute of Health Ministry of the Republic Uzbekistan)

Summary. The influence of darmonal on the functional condition of liver has been studied in toxic hepatitis. It was determined, that darmonal increased content of proteins and improved detoxication function of liver by decreasing activity of cytolytic enzymes ALT and AST, decreasing cholestatic markers - APh and GGT. Darmonal showing hepatoprotective action, improves function of liver and do not resign to other hepatoprotector-silibor.

Key words: darmonal, darmonal A, silibor, toxic hepatitis, ALT, AST, Aph, GGT, total protein, glycogen, lactic acid, gexenal sleep.

Исследованиями последних лет подтверждена целесообразность применений фитопрепаратов, обладающих гепатопротекторным свойствами, использование которых способствует уменьшению синдрома цитолиза гепатоцитов, нормализации или существенному улучшению гликогено-бразующей способности печени, усилению дезинтоксикаци-онной, пигментообразующей, экскреторной функции [2,11].

В связи с этим, изыскание и изучение новых биологически активных веществ, полученных на основе лекарственных растений, имеет весьма большое значение для повышения трудоспособности населения и для профилактики функциональных и патологических нарушений состояния печени. В этом аспекте большой интерес представляют биологически активные вещества, получаемые из новых приростков пшеницы и ячменя. В Ташкентском фармацевтическом институте получено новое биологическое активное вещество на основе пшеницы, это субстанция в виде мелкого порошка была условно названа - дармонал и субстанция из пшеницы и ячменя - дармонал-А.

Биологическая активность дармонала обусловлена содержанием в составе их биоактивных микро- и макроэлементов, аминокислот, белков, жиров и углеводов. Исходя из этого, целью данного исследования явилось изучение влияния дар-монала на функциональное состояние печени при отравлении тетрахлорметаном.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на 60 белоголовых крысах -самцах массой тела 120-140 г. Токсический гепатит у животных воспроизводился подкожным введением 50% масляного раствора (подсолнечное масло) четыреххлористого углерода (СС14) в объеме 0,8 мл на 100 г массы животного один раз в сутки в течение четырёх дней [4].

Поставлено 5 групп опытов: 1) интактные, здоровым крысам 4 дня подкожно вводили подсолнечное масло в объеме

0,4 мл/100г; 2) контрольные, животным подкожно вводили 50% масляной раствор СС14; 3) опытные, перорально через зонд вводили дармонал в дозе 100 мг/кг + СС14; 4) опытные, перорально через зонд вводили дармонал-А в дозе 100 мг/кг + СС14; 5) группа сравнения, перорально через зонд вводили силибор в дозе 100 мг/кг + СС14.

Изучаемые препараты для профилактических целей вводились в течение 10 дней. После последнего введения изучаемых препаратов через 2 ч у 30 крыс был поставлен «гексеналовый тест» для оценки детоксицирующей функции печени [1]. Остальных животных декапитировали, соблюдая условия эвтаназии, извлекали печень общепринятыми методами. В сыворотке крови определяли активность органоспецифических ферментов: аланинаминотранферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), щелочная фос-

фатазы (ЩФ), гаммаглутамилтрансферазы (ГГТ) с помощью наборов Вю-1а-1е81 фирмы Pliva-Lachema Diagnostika S.R.O. (Чехия) и содержание общего белка [8]. В гомогенате ткани печени определяли содержание гликогена [12] и молочной кислоты [3]. Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики с использованием программного пакета Statistica V. 6.0 (StatSoft, ША, 1999). Статистически значимыми считались различия при р<0,05 [5,9].

Результаты и обсуждение

В сыворотке крови у животных контрольной группы отмечалось увеличение активности маркеров цитолиза АлАТ и АсАТ соответственно на 109,8% и 94,7% (р < 0,05), аналогичное изменение наблюдалось со стороны маркеров холестаза ЩФ и ГГТ рост активности этих ферментов повышался в 2 и 3,3 раза при р < 0,05 по отношению к показателям животных интактной группы. Уменьшалось содержание общего белка на 26%.

В гомогенате печени снижался уровень гликогена на 43,7% и повышалось образование молочной кислоты на 23,3% (табл. 1). Гепатотоксин приводил к угнетению детоксицирующей функции печени, который характеризуется увеличением продолжительности гексеналового сна на 81% (р<0,05).

Полученные результаты животных с токсическим гепатитом, указывают на то что, тетрахлорметан и продукты его распада приводят к достоверному повреждению липидного бислоя мембран гепатоцитов, активацию синдромов цитолиза и холестаза, нарушению метаболизма белков, углеводов, биоэнергетики и угнетению ферментных систем детоксикации ксенобиотиков.

Введение изучаемых веществ с профилактической целью одновременно с гепатотоксином, проявляли гепатозащитное действие и препятствовали к резким нарушениям биохимических показателей и угнетению детоксицирующей функции печени, при 10 дневном введении дармонала и дармонал-А отмечалось снижение активности органоспецифических ферментов в сыворотке крови АлАТ и АсАТ соответственно на 46,9, 42,9 и 41,4, 40,5% по отношению к показателям контрольной

ЛИТЕРАТУРА

1. Гижларян М.С. Новые данные к применению гексена-ловой пробы в токсикологическом эксперименте // Гигиена труда. - 1976. - №10. - С.49-50.

2. Крылова С.Г., Ефимова Л.А., Вымятнина З.К., Зуева Е.П. Влияние экстракта корня цикория на морфофункциональное состояние печени у крыс с токсическим гепатитом // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2006.

- №6. - С.34-36.

3. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник - М.: Медицина, 1987. - 368 с.

4. Левшин Б.И. Экспериментальная фармакотерапия препаратами селена и тиазолидина токсического повреждения

группы опытов (табл. 1). Уменьшалась активность маркеров холестаза ЩФ и ГГТ на 35,6, 23,47 и 46,9, 39,35%. Назначение гепатопротектора - силибор снижало активность этих энзимов соответственно на 53, 45,9, 36,5, 46,9%. Изучаемые вещества оказывали гепатозащитное действие на белок синтезирующую функцию печени, свидетельством этого является повышение содержания общего белка под влиянием дармонала на 25%, дармонал-А - на 14,4 и силибора - на 24%.

В гомогенате печени дармонал увеличивал содержание гликогена на 56,7%, дармонал-А - 29,6% и силибор - 46,6%. Эти вещества, уменьшая явление гипоксии в гепатоцитах, снижали содержание молочной кислоты на 65,4, 41,4 и 56% (р<0,001).

Дармонал, дармонал-А аналогично силибору повышали антитоксическую функцию печени, которую определяли по изменению длительности гексеналового сна. Известно, что биотрансформация гексенала происходит только в печени, и поэтому продолжительность сна главным образом зависит от скорости превращения гексенала. Под влиянием дармо-нала продолжительность гексе-налового сна сократилась на 32%, дармонал-А - на 23% и силибора - на 29% по сравнению с показателями контрольной группы опытов (табл. 1).

Полученные результаты свидетельствуют о том что, экстракт, полученный из молодых приростков пшеницы, - дармонал и вместе с экстрактом из приростков ячменя - дармонал-А оказывали однонаправленное гепатозащит-ное действие при отравлении те-трахлорметаном. По-видимому, гепатопротекторное действие дармонала связано с уникальным составом экстракта, так как в нем содержится 15 аминокислот, 3 ми-кро- и 6 макроэлементных соединений, ферменты, белок, а также, карбоновые воды и эфирные масла, которые активно участвуют в метаболических процессах [6]. Если учесть тот факт, что в экстракте дармонала больше содержится аминокислот, обладающих непрямым антиокси-дантным действием, как глутаминовая кислота и его синер-гист аргинин, можно предположить о гепатопротекторной активности этого ценного вещества. Доказано, что глутаминовая кислота и некоторые его метаболиты, способствуют удалению токсичных продуктов переокисленных жирнокислотных остатков фосфолипидов [10], аргинин в свою очередь обладает определенной антиоксидантной активностью, ингибируя начальные и конечные стадии перекисного окисления липидов, а также оказывает мембраностабилизирующее действие [7].

Таким образом, новые соединения растительного происхождения дармонал и дармонал-А при токсическом гепатите, вызванном введением четыреххлористого углерода, снижая уровень маркеров цитолиза, холестаза, накопление молочной кислоты и увеличивая уровень гликогена, повышая бе-локсинтезирующую, детоксицирующую функции печени, оказывают гепатопротекторное действие, по этому эффекту не уступают силибору.

печени: Автореф. дисс. ... д-ра мед наук. - Харьков, 1973. - с.

5. Майборода А.А., Калягин А.Н., Зобнин Ю.В., Щербатых А.В. Современные подходы к подготовке оригинальной статьи в журнал медико-биологической направленности в свете концепции «доказательной медицины» // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2008. - Т. 76. №1. - С.5-8.

6. Махмуджанова К.С., Каримова С.А. Создание тонизирующего средства дармонал (сообщение 5 Динамика ферментов и количество аминокислот в дармонал) //Химия и фармация (chemistry and pharmacy ). - Ташкент, 2003. - №1.

- С.27-30.

7. Милютина Н.П., Ананян А.А., Шугалей В.С. Антирадикальный и антиоксидантный эффект аргинина и его влияние на активность перекисного окисления липидов

Таблица 1

Влияние дармонала на биохимические показатели и функциональное состояние печени при токсическом гепатите (М±т)

Показатель Интактные (подсолнечное масло) (n=6) Контроль (CCl4) (n=6) Дармонал + СС!4 (n=6) Дармонал-А + ССІ4 (n=6) Силибор + ССІ4 (n=6)

АлАТ, мккат/л 0,71± 0,1 1,49± 0,3* 0,79± 0,06х 0,85± 0,1х 0,70± 0,12х

АсАТ, мккат/л 0,57± 0,04 1,11± 0,24* 0,65± 0,08х 0,66± 0,07х 0,60± 0,03х

ЩФ, мккат/л 1,19± 0,25 2,3± 0,6* 1,48± 0,53х 1,76± 0,36 1,46± 0,45х

ГГТ, мккат/л 0,20± 0,08 0,66± 0,37* 0,35± 0,18х 0,40± 0,27 0,35± 0,14х

Общий белок, г/л 59,2± 0,8 43,7± 1,9* 54,5± 1,3х 50± 1,0х 54,0± 1,2х

Гликоген, г/л 49,2± 0,92 27,7± 1,1* 43,4± 1,0х 35,9± 1,2х 40,6± 0,77х

Молочная кислота, ммоль/л 1,5± 0,2 5,0± 0,76* 1,73± 0,17х 2,93± 0,47х 2,2± 0,09х

Гексеналовый сон, мин. 52,8± 4,2 95,8± 2,6* 65,1± 2,4х 73,8± 2,7х 67,8± 4,3х

Примечание: *- значимость различий при р<0,05 в сравнении с интактными; х - значимость различий при р<0,001 в сравнении с контролем.

при гипоксии // Бюлл. экс. биол. и мед. - 1990. - Т. 60. №3. -С.263-265.

8. Ронин В.С., Старобинец Г.М. Руководство к практическим занятиям по методом клинических лабораторных исследовании. - М.: Медицина, 1989. - 320 с.

9. Стрелков Р.Б. Статистические таблицы для ускоренной количественной оценки фармакологического эффекта // Фармакология и токсикология. - 1986. - №4. - С.100-104.

10. Удинцев Н.А., Иванов В.В. Антиоксидантное действие

глутаминовой кислоты // Патол.физиол. и эксп. терапия. -1984. - №4. - С.60-62.

11. Чучалин В.С., Теплякова Е.М. Коррекция патологий гепатобилиарной системы комплексным растительным средством // Бюллетень сибирской медицины. - 2007. - №4. -С.52-57.

12. Seifter S., Danton S., Hovia B., et al. Estimation et glycogen with antrone reagent // Aroh. Biochem. - 1950. - Vol. 25. - P.191-200.

Информация об авторах: Республика Узбекистан, г.Ташкент, 100002, ул. Усманходжаева, пр. К. Умарова, д. 16; Государственный центр экспертизы и стандартизации лекарственных средств МЗ РУз; тел. (998712) 49 47 93, 244 48 23, e-mail: farmaco_toxik@mail.ru, tashpmi@rambler.ru, факс: (99871) 244 48 23, Азизова Санат Собировна - д.м.н., профессор; Набиев Абдували Набиевич - старший научный сотрудник, к.м.н.; Абдусаматов Абдулазиз Абдулатипович - д.м.н.,

профессор; Каримова Г. - ассистент.

© ЛУБСАНДОРЖИЕВА П.Б., ДАШИНАМЖИЛОВ Ж.Б., ГАРМАЕВА Е.Д., АЖУНОВА Т.А. - 2011

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЛАВОНОИДОВ В РАСТИТЕЛЬНОМ СРЕДСТВЕ «ЭРИТРОФИТ»

Пунцык-Нима Базыровна Лубсандоржиева, Жаргал Балдуевич Дашинамжилов, Евгения Дандаржаповна Гармаева,

Татьяна Александровна Ажунова (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ, директор - д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)

Резюме. Разработана спектрофотометрическая методика определения содержания флавоноидов в растительном средстве «Эритрофит». Валидационная оценка методики показала, что методика определения флавоноидов в эритрофите воспроизводима, линейна в области концентрации флавоноидов в аликвоте - 0,086-0,648 мг/мл, и относительная ошибка среднего результата cоставляет 1,86%.

Ключевые слова: эритрофит, флавоноиды.

QUANTITATIVE DETERMINATION OF FLAVONOIDS IN VEGETABLE REMEDY «ERITHROPHYTE»

P.B. Lubsandorzhieva, Zh.B. Dazhinamzhilov, E.G. Garmaeva, T.A. Azhunova (Institute of General and Experimental Biology SD RAS, Ulan-Ude)

Summary. The spectrophotometric methods of the quantitave determination of flavonoids in vegetable remedy “Erythrophyte” have been developed. The validative evaluation of the proposed method showed that method of quantitave determination of flavonoids in vegetable remedy “Erythrophyte” is precise, linear in the field of flavonoids concentration 0,086-0,648 mg/ml in aliquot and relative standard deviation is 1,86%.

Key words: erythrophyte, flavonoids.

Растительное средство (условное название «Эритрофит»), состоящее из экстрактов сухих листьев Urtica dioica L., травы Polygonum aviculare L., Achillea millefolium L., мелкоизмель-ченных порошков Zingiber officinalis L., и Cinnamomum cassia проявляло в эксперименте антианемическое, гепатопротек-торное и противовоспалительное действия [1,11]. Три вида сырья компонентов эритрофита стандартизируются по содержанию эфирных масел: Z. officinalis, C. cassia - по методу Гинзбурга, А. millefolium - по методу 3 с использованием декалина [3,4,5], и при содержании эфирных масел в траве А. millefolium не менее 0,1%, объем раствора эфирного масла в декалине получается на практике меньше объема самого декалина [6]. Также, при получении сухого экстракта из травы A. millefolium более летучая часть эфирных масел остается в растворителе, теряется при вакуумной сушке. Основными действующими веществами Z. officinalis L. и C. cassia являются эфирные масла [12,16], содержание которых должно составлять в Z. officinalis - не более 1,4%, C. cassia - не менее 0,5% [3,4]. В составе эритрофита используются сухие порошки этих пряностей с низким содержанием эфирных масел, что затрудняет определение их содержания в антианемиче-ском средстве методом Гинзбурга.

Для стандартизации листьев крапивы предусмотрена качественная реакция на витамин К, травы горца птичьего

- методика определения суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин [5]. Листья U. dioica признаны источником витамина К (2-метил-3-фитил-1,4-нафтохинон), который осуществляет коферментные функции при биосинтезе ряда белков, связывающих кальций (в частности, протромбина), участвующих в процессе свертывания крови. В эксперименте наиболее высокий антитромботический эффект показывали липофильные вещества из U. dioica, в том числе и флавонои-ды [14]. В клинических условиях в качестве кровоостанавливающих средств применяют отвары и настои из A. millefolium,

P aviculare, U. dioica [7,8], в которых витамин К и другие гидрофобные вещества не извлекаются водой. Возможно, что наблюдаемые положительные эффекты от применения этих растений при анемии связаны с их этиотропным действием [8]. Кроме эфирных масел, широкий спектр фармакологических свойств A. millefolia во многом обусловливают фенольные соединения: флавоноиды - кровоостанавливающее, противовоспалительное [6,13], дикофеоилхинные кислоты

- спазмолитическое, желчегонное [13].

Таким образом, благоприятное влияние изучаемого средства на моделях анемии обусловлено содержанием не только витамина К, но и поливалентностью действия комплекса БАВ, в частности, флавоноидов. Антианемическое действие последних подтверждено исследованием флавоно-идных соединений (кверцетин, рутин, гесперидин и др.) на течение анемии в постинфекционный период, где наиболее активным антианемическим средством был кверцетин [15]. Представляется целесообразным проводить оценку качества «Эритрофита» по содержанию флавоноидов, как основных действующих веществ P. aviculare, A. millefolium, U. dioica.

Цель данной работы - разработка методики количественного определения флавоноидов в растительном средстве эритрофит.

Материалы и методы

Получены сухие экстракты из U. dioica, P. aviculare, A. millefolium, вышеназванных видов сырья последовательной экстракцией спиртом высокой и средней концентрации (80% и 40% этанол), и горячей водой. По описанным в литературе методикам определено содержание биологически активных веществ (БАВ) (табл. 1). Для определения фенолокислот извлечения предварительно очищали на колонке с окисью алюминия. Количественное содержание витамина К [10] и каро-