CC BY
6
134
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
как нативной, так и активированной. При этом квантовый выход активированной хемилюминесценции, на несколько порядков выше, чем в случае не активированной.
Литература:
1. Владимиров Ю.А., Демин Е.М., Проскурнина Е.В., Осипов А.Н. Биологические Мембраны. — 2009. — Т. 26. — № 6. — C. 493-504.
2. Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В., Измайлов Д.Ю., Новиков А.А., Брусничкин А.В., Осипов А.Н., Каган В.Е. Биохимия. — 2006. — Т. 71. — № 9. — C. 1225-1233
3. Belikova N.A., Vladimirov Y.A., Osipov A.N., Kapralov A.A., Tyurin V.A., Potapovich M.V., Basova L.V., Peterson J., Kurnikov I.V., Kagan V.E. Biochemistry. — 2006. — V. 45. — № 15. — P. 4998-5009.
4. Kagan V.E., Tyurin V.A., Jiang J. et al. Nature chemical Biology. — 2005. — V.1. — № 1 — P. 223-232.
ВЛИЯНИЕ АЛЛОГЕННОГО БИОМАТЕРИАЛА
НА КРИОГЕННЫЙ РУБЕЦ МИОКАРДА
А.И. Лебедева1, С.А. Афанасьев2, Е.М. Гареев1,
Д.С. Кондратьева2, С.А. Муслимов1, С.В. Попов2
1 ФГБОУ ВО Башкирский государственный медицинский университет МЗ РФ, Уфа, Россия
2 НИИ кардиологии, Томский НИМЦ РАН, Томск, Россия
e-mail: e-mail: [email protected]
Ключевые слова: аллогенный биоматериал, криоповрежде-
ние, миокард, кардиосклероз, макрофаги, регенерация.
Проблема регенерации поврежденного миокарда является одной из важнейших задач тканевой восстановительной терапии сердца. Наиболее перспективным подходом является использование производных децел-люляризированного внеклеточного матрикса — аллоген-ного биоматериала (АБ) Целью исследования явилось оценка морфофункциональных свойств сердца в условиях применения АБ.
Хронический инфаркт миокарда моделировали на 80 крысах—самцах с использованием метода криоде-струкции. Через 45 суток после воздействия жидким азотом при повторной торакотомии в основной группе в область криогенного некроза миокарда вводили суспензию АБ (3 мг, 60 мкл физ. раствора). В контрольной группе вводили физиологический раствор в аналогичном объеме. После 45 суток после введения АБ животных оценивали на толерантность к физической нагрузке и выводили из эксперимента. Проводили гистологические, иммуногистохимические исследования. Определяли толщину мышечной части стенки поврежденого желудочка сердца, рубца и диаметр реактивной зоны. В результате исследования, толщина мышечной части стенки левого желудочка, в осночной группе увеличивалась на 3 порядка (p<0,008), что повышало толерантность к физической нагрузке крыс в 2 раза (р=0,03). Изменения параметров толщины рубца и диаметр поврежденной зоны были статистически не значимы. Аллогенный биоматериал подвергался постепенной резорбции макрофагами и замещался волокнисто-соединительнот-канно-мышечным регенератом, представленным васку-ляризированной рыхлой волокнистой соединительной тканью. Меченые сердечным тропонин I+ клетки проникали в межволоконные пространства, подвергались гипертрофии. Кардиомиоциты группировались в зоне имплантации АБ как в виде отдельных кластеров, так
и функционального синцития. Масса сердца при этом не менялась в обеих экспериментальных группах.
Так, применение АБ в зоне сформированного криогенного рубца миокарда способствовало трансформации плотной в рыхлую волокнистую соединительную ткань и замещению сердечной мышечной тканью.
IN VITRO МОДЕЛИРОВАНИЕ МЕХАНИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ МОЗГА НА ПЕРВИЧНЫХ НЕЙРО-ГЛИАЛЬНЫХ И АСТРОЦИТАРНЫХ КУЛЬТУРАХ ИЗ МОЗГА КРЫСЫ
О.Ю. Лисина1, И.А. Красильникова2,
Р.Р. Шарипов1, М.В. Балясин3, В.Г. Пинелис2,
З.В. Бакаева2, А.М. Сурин1, 2
1 ФГБНУНИИ общей патологии и патофизиологии, Москва, Россия
2 ФГАУ НМИЦ здоровья детей Минздрава России, Москва, Россия
3 ФГАОУ ВО Российский университет дружбы народов (РУДН), Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: нейрональная сеть, ионный гомеостаз, митохондриальный потенциал, кальций, нейроглиальная культура, астроцит, кортекс, нейрит.
Моделирование in vitro повреждения мозга (царапина) применяется для выяснения молекулярно-клеточных механизмов, происходящих в мозге в ответ на травму. В настоящей работе исследованы: (1) регенерация ней-рональной сети в зоне царапины; (2) изменения ионного гомеостаза и функций митохондрий в ответ на царапину монослоев первичных нейроглиальных культур и культур астроцитов из коры головного мозга крысы. Изменения указанных параметров определяли методом флуоресцентной микроскопии, используя специфичные зонды и микроманипулятор для нанесения царапины. В нейроглиаль-ных культурах царапины шириной « 0,1 и 1 мм наносили спустя 3 и 18 дней после посадки культуры (3 и 18 ДВК). Для количественной оценки регенерации культур подсчитывали среднюю длину нейритов, количество ветвлений и окончаний нейритов на единицу поверхности в зоне повреждения. При травмировании «молодой» культуры (3 ДВК) формирование нейрональной сети начиналось через сутки, достигая наибольшей скорости на 2-3 день после нанесения царапины. Затем развитие нейрональ-ной сети в зоне повреждения замедлялось. Помимо роста нейритов, наблюдалась диффузия в повреждённую зону клеток из неповрежденной части культуры. В «зрелых» культурах (травма на 18 ДВК) нейритов, прорастающих в царапину из неповрежденной зоны, было на ~40% меньше и они имели в 2-3 раза меньший диаметр.
В нейро-глиальной культуре в первые минуты после нанесения царапины происходит скачкообразный рост внутриклеточной концентрации Са2+ ([Ca2+]i) и митохон-дриального потенциала (ATm) в нейронах. В 22,3 ± 5,1% нейронов (n=264) развивался вторичный подъем [Ca2+] i (отсроченная кальциевая дизрегуляция, ОКД) и синхронное падение ATm. Около 85% таких нейронов находилось на расстоянии <100 мкм от границы повреждения. Доля нейронов, развивших ОКД, увеличивалась с увеличением возраста культуры. Удаление Са2+ из буферного раствора подавляло посттравматическое увеличение [Ca2+] i и падение ATm, указывая на вход Ca2+ из буфера, как на причину роста [Ca2+]i.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
