гическая реваскуляризация при критической ишемии. Ангиоло- 12. Рекомендации Российского общества ангиологов и со-
гия и сосудистая хирургия. 2000; 3: 32-5. судистых хирургов. Диагностика и лечение больных с заболе-
7. КолесникИ.М. Дистантное и фармакологическое прекон- ваниями периферических артерий. - М.: 2007; 8. диционирование. Новые возможности применения в хирургии. - 13. American Heart Association. Heart Disease and Stroke Sta-Saarbrucken: LAP LAMBERT Acfdemic Publishing, 2012. - 123 c. tistics - 2004. Dallas; 2004.
8. КолесникИ.М., Лазаренко В.А., Покровский М.В. Влияние 14. Beyer S, Speich R, Fischler M. et al. Long-term experi-фармакологического прекондиционирования силденафилом ence with oral or inhaled vasodilator combination therapy in pa-и варденафилом на состояние микроциркуляторного русла в tients with pulmonary hypertension // Swiss. Med. Wkly. - 2005. -ишемизированной скелетной мышце // Курский научно-практи- V. 135. - P. 114-118.
ческий вестник «Человек и здоровье». - 2015. - № 1. - С. 83-86. 15. Das S, Maulik N, Das D. K. et al. Cardioprotection with
9. Кузнецов М.Р., Кошкин В.М., Каралкин А.В. Ранние реок- sildenafi l, a selective inhibitor of cyclic 3',5'-monophosphate-speci-клюзии у больных облитерирующим атеросклерозом // Ярос- fi c phosphodiesterase 5 // Drugs Exp. Clin. Res. - 2002. - V. 28. -лавль. - 2007. - С. 175. P. 213-219.
10. Петухов А.В. Сравнительный анализ результатов кон- 16. EhrlyA.M. Improvements in the flow properties of new ther-сервативного и оперативного лечения пациентов с хронически- apeutical approach in occlusive arterial disease. Angiology, 1976, ми облитерирующими заболеваниями артерий нижних конеч- 227, 188-192.
ностей // Новости хирургии. - 2011. - Т. 19. № 2. - С. 54-59. 17. Leng C, Lee A.J., Fowkers F.G. et al. Incidence, natural
11. Реваскуляризирующая остеотрепанация в комплексном history and cardiovascular events in symptomatic and asymptom-хирургическом лечении хронической критической ишемии ниж- atic peripheral arterial disease in the general population. Int. J. Ep-них конечностей / Ю. А. Бельков [и др.] // Хирургия. - 2004. - idemiol. 1996; 25: 1172-8.
№ 9. - С. 14-16. Поступила 27.04.2016
Г.А. ПЕНЖОЯН13, Н.В. МИНГАЛЕВА13, В.А. НОВИКОВА13, В.А. КРУТОВА3, Н.В. ПОРХАНОВА23, В.Г. АБУШКЕВИЧ3, Е.Г. ПОТЯГАЙЛО3, М.С. КАРПОВ1, А.В. МАКСЕМЮК1, А.К. ПЯТЧЕНКО1, О.М. ШИРЯЕВА1
ВИЗУАЛИЗАЦИЯ БИОПТАТОВ МАТКИ В ВЫСОКОЧАСТОТНОМ
ЭЛЕКТРИЧЕСКОМ ПОЛЕ
1Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Краевая клиническая больница № 2» министерства здравоохранения Краснодарского края Россия, 350000, г. Краснодар, ул. Красных Партизан, 6/2. Тел. (861) 222-01-63. E-mail: [email protected] 2Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Клинический онкологический диспансер № 1» министерства здравоохранения Краснодарского края. Россия, 350051, г. Краснодар, ул. Димитрова, 146.
Тел. 8 (918) 325-80-92. E-mail: [email protected] 3Кафедра нормальной физиологии, федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. Тел. 8 (988) 245-56-55.
E-mail: [email protected]
Цель работы: установить возможность выявления у больных раковой опухоли и дифференциальной диагностики её с иными опухолевидными образованиями в биоптатах матки по визуализации свечения в высокочастотном электрическом поле. Материал и методы. В высокочастотном электрическом поле осуществляли визуализацию свечения 124 биоптатов матки, взятых на гистоанализ при подозрении на злокачественное новообразование для решения вопроса об объёме оперативного вмешательства. Результаты. По данным гистологического анализа, из 124 биоптатов матки в 25 аденомиоз, в 24 аденоматоз, в 48 миома и в 27 рак матки. В высокочастотном электрическом поле во всех биоптатах было краевое свечение. В биоптате раковой опухоли - внутреннее свечение. Свечение охватывало всю раковую опухоль. Заключение. Приведённые данные визуализации свечения биоптатов могут явиться основой создания эндоскопического экспресс-метода диагностики раковой опухоли матки.
Ключевые слова: визуализация свечения раковой опухоли матки.
G.A. PENZHOIAN13, N.V. MINGALEVA13, V.A. NOVIKOVA13, М.А. KRUTOVA3, N.V. PORHANOVA23, V.G. ABUSHKEVICH3, E.G. POTYAGAILO3, M.S. KARPOV', A.V. MAKSEMUK1, A.K. PYATCHENKO1,
O.M. SHIRYEVA1
VISUALIZATION OF UTERINE BIOPSIES IN THE HIGH-FREQUENCY ELECTRIC FIELD
1The state budgetary health care institution «Regional clinical hospital № 2» of the Ministry of Health in the Krasnodar region (Krasnih Partizan, 6/2, Krasnodar, 350000, Russia).
Tel. (861) 222-01-63. E-mail: [email protected] 2The state budgetary health care institution «Clinical oncologic dispensary № 1» of the Ministry of Health in the Krasnodar region (Dimitrova, 146, Krasnodar, 350051, Russia).
Tel. 8 (918) 325-80-92. E-mail: [email protected]
3The state budgetary educational institution of higher professional education «The Kuban state medical University» of Russian Federation Ministry of Health (Sedin 4, Krasnodar, 350063, Russia).
Tel. 8 (988) 245-56-55. E-mail: [email protected]
The objective of study: to establish the possibility to identify the patients with cancer and its differential diagnosis with other tumor formation in the biopsies of uterus through visualizing glow in a high-frequency electric field.The Material and methods. There were 124 biopsies of uterus taken for histological analysis to observe malignant neoplasms and decide on the volume of surgical intervention. Visualization the glow of the biopsies of uterus was carried out in a high-frequency electric field. The results. According to histological analysis of 124 uterine biopsy samples 25 adenomyosis, 24 aden omatosis, 48 myomas and 27 uterine cancers were detected. Glow around the edges has been in high-frequency electric field in all studied biopsies. Inner glow was observed on the biopsy material, which there was a cancer tumor. The glow covered the entire area of cancer.The conclusion. These data about the luminous biopsies of the uterus in a high electric field can be the basis for creating endoscopic rapid method of uterine cancer of diagnosis.
Key words: the glow of cancer of the uterus visualization.
Актуальным является разработка высокоинформативных и доступных к широкому применению методов скрининга предрака и рака матки [1, 5, 11] дифференциальной диагностики с адено-миозом [12, 15], гиперплазией эндометрия [3, 14], миомами [13].
Среди новых и перспективных методов эндоскопической диагностики рака эндометрия всё большее распространение приобретает флюоресцентное исследование с опухолевотропными фотосенсибилизаторами и их метаболитами. По интенсивности излучения можно оценить степень накопления препарата в злокачественной опухоли, позволяющую визуализировать невидимые глазом микроскопические опухолевые очаги на, казалось бы, неизменённой слизистой, уточнять их топографию и выполнять прицельную биопсию. Чувствительность метода существенно выше других современных методов, информативность при начальном раке эндометрия достигает 80 % [9].
Наряду с преимуществами флуоресцентных методов, следует отметить, что фотосенсибилизаторы оказывают влияние на ткани, требуется время от момента введения препарата до начала флуоресценции, кроме того, метод дорогостоящий [4].
В основе всех излучений тканей организма в ви-
димой и ультрафиолетовой областях спектра лежит та или иная разновидность люминисценции [6, 8].
Одним из способов вызывания люминисценции является газоразрядная визуализация. Этот метод прост, доступен. На его проведение требуется несколько секунд.
Для разработки такого метода применительно к диагностике предрака и рака матки у женщин необходимо исследование визуализации данным методом раковой опухоли и проведение дифференциальной диагностики с иными опухолевидными образованиями в только что взятых на гистоа-нализ биоптатах матки.
Цель работы - установить возможность выявления у больных раковой опухоли и дифференциальной диагностики её с иными опухолевидными образованиями в биоптатах матки по данным визуализации свечения в высокочастотном электрическом поле.
Материал и методы исследования
Наблюдения были выполнены на базе государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Краевая клиническая больница № 2» министерства здравоохранения Краснодарского края и государственного бюджетного учреждения здравоохранения
«Клинический онкологический диспансер № 1» министерства здравоохранения Краснодарского края.
Объектом наблюдения явились 124 биоптата матки, взятые на гистологический анализ при подозрении на злокачественное новообразование для решения вопроса об объёме оперативного вмешательства.
Визуализацию участков биоптатов осуществляли сразу после взятия биоптата сканером КЭЛСИ, созданным многопрофильным предприятием «ЭЛСИС» (г. Санкт-Петербург), в высокочастотном электрическом поле в течение 2 секунд. Свечение сканировалось, увеличивалось встроенным в сканер микроскопом, регистрировалось фототелекамерой (до 1000 кадров/сек; разрешающая способность 2048x1536) и через устройство оцифровки видеосигнала поступало в слот компьютера. Компьютерная программа воспроизводила изображение на экране монитора в виде снимков и видеоролика, строила гистограммы яркостей свечения и гистограммы длин волн. Анализировали гистограммы яркостей краевого свечения участков
биоптатов, гистограммы длин волн краевого свечения (границы диапазона, диапазон).
Статистическая обработка результатов исследования была проведена с использованием пакета программ «STATISTIKA 6,0». Вначале определяли нормальность распределения, а затем использовали параметрические параметры. Вычисляли М -среднюю арифметическую, SD - среднеквадра-тическое отклонение, ±m - стандартную ошибку средней арифметической, P - показатель достоверности различий. Проводили корреляционный анализ. За достоверные различия в сравнении средних величин в парных сравнениях брали t-критерий Стьюдента при р<0,05.
Результаты исследования и обсуждение
По данным гистологического анализа, из 124 биоптатов матки в 25 имел место аденомиоз, в 24 аденоматоз, в 48 миома и в 27 рак тела матки.
В высокочастотном электрическом поле (частота 1024 Гц) во всех биоптатах имело место краевое свечение (рис. 1).
Рис. 1.
Рис. 2. Краевое и внутреннее свечение биоптатов матки с раковой опухолью в высокочастотном поле (рисунок рака матки взят с сайта Интернета http://rakustop.ru)
В биоптате раковой опухоли имело место внутреннее свечение (рис. 2). Свечение охватывало всю зону раковой опухоли.
Наибольшая яркость свечения в высокочастотном электрическом поле выявлялась в биоптатах с раковой опухолью матки. Она превышала яркость свечения в здоровых участках биоптатов на 95,1 %. По отношению к яркости свечения в здоровых участках биоптатов яркость свечения была больше в биоптатах с аденомиозом на 41,4 %, аденоматозом на 24,4 %, миомой на 14,8 %. С другой стороны, яркость свечения была меньше в биоптатах с аденомиозом на 27,5 %, аденоматозом на 36,2 %, миомой на 41,1 % яркости свечения в биоптатах с раковой опухолью матки.
Минимальная граница диапазона длин волн свечения в биоптатах с раковой опухолью матки была меньше таковой в здоровых участках биоптатов на 7,3 %. В биоптатах с аденомиозом, аденоматозом, миомой матки она достоверно не отличалась от минимальной границы диапазона длин волн свечения в здоровых участках биоптатов (таблица 1).
Максимальная граница диапазона длин волн свечения в биоптатах с раковой опухолью матки была больше максимальной границы диапазона длин волн свечения в здоровых участках биоптатов на 7,4 %. В биоптатах с аденомиозом, аденоматозом, миомой матки она достоверно не отличалась от максимальной границы диапазона длин волн свечения в здоровых участках биоптатов.
Диапазон длин волн свечения в биоптатах с раком матки был больше такового в здоровых участках биоптатов на 144,5 %. Диапазон длин волн свечения в биоптатах с аденомиозом был больше, чем в здоровых участках биоптатов, на 52,1 %, в биоптатах с
аденоматозом на 30,1 %, в биоптатах с миомой матки на 21,8 %. В то же время диапазон длин волн свечения в биоптатах с раком матки был больше такового в биоптатах с аденомиозом на 60,7 %, в биоптатах с аденоматозом на 87,9 %, в биоптатах с миомой матки на 100,8 %.
В литературе имеются данные, посвященные газоразрядной визуализации краевого свечения пальцев рук для оценки психоэмоционального состояния человека и для диагностики различных заболеваний, в том числе женской половой сферы, включая рак матки [7], имеющие, по нашему мнению, недостаточную убедительность.
В то же время краевое свечение свежих биоптатов матки несёт определённую диагностическую информацию. Гипотез, объясняющих краевое свечение внутренних органов вообще и матки, в частности, нет.
При создании вокруг участков базально-клеточно-го рака кожи у больных было получено внутреннее свечение [10]. Аналогичное свечение было получено нами на биоптатах раковой опухоли матки.
Относительно внутреннего свечения можно исходить из того, что открытое А.Г. Гурвичем спонтанное сверхслабое свечение в видимой области спектра раковых опухолей отличается от свечения окружающих тканей. Связывают это с особенностью метаболизма раковых клеток [2]. В нашем исследовании в высокочастотном электрическом поле, по-видимому, произошло усиление сверхслабого свечения раковой опухоли.
Вывод: приведённые данные свечения биоптатов матки в высокочастотном электрическом поле могут явиться основой для создания эндоскопического экспресс-метода диагностики раковой опухоли матки.
Таблица 1
Данные о свечении биоптатов матки в высокочастотном
электрическом поле
Здоровый участок, п=80 Аденомиоз, Аденоматоз, Миома, Рак матки,
Параметры п=25 n=24 п=48 п=27
1 2 3 4 6
Форма свечения Равномерно светящееся краевое свечение Краевое свечение и краевые светящиеся узлы Утолщение краевой светящейся зоны Краевое свечение, огибающее миому Наряду с краевым свечением имеется внутреннее свечение
Краевое свечение есть есть есть есть есть
Внутреннее свечение нет нет нет нет есть
Яркость свечения в битах М 32,4 ЭО 6,3 т ±0,7 М 45,8 ЭО 5,5 т ±1,0 Р1<0,001 M 40,3 SD 2,0 m ±0,4 P2<0,001 P2<0,001 М 37,2 ЭО 4,2 т ±0,6 Р4<0,001 Р4<0,001 Р6<0,001 М 63,2 ЭО 4,2 т ±0,8 Р7<0,001 Р8<0,001 Р9<0,001 Р10<0,001
Минимальная граница диапазона длин волн свечения в нм М 462,4 ЭО 65,3 т ±7,3 М 445,0 ЭО 46,0 т ±9,2 Р1>0,05 M 453,4 SD 51,4 m ±10,5 P2>0,05 М 454,3 ЭО 81,1 т ±11,7 Р4>0,05 Р6>0,05 Р6>0,05 М 427,0 ЭО 40,5 т ±7,8 Р7<0,001 Р7<0,001
P3>0,05 Р"<0,001 Р10<0,001
Максимальная граница диапазона длин волн свечения в нм М 512,5 ЭО 68,0 т ±7,6 М 521,2 ЭО 43,5 т ±8,7 Р1>0,05 M 518,6 SD 47,5 m ±9,7 P2>0,05 P3>0,05 М 515,3 ЭО 37,7 т ±7,7 Р4>0,05 Р6>0,05 Р6>0,05 М 550,4 ЭО 32,7 т ± 6,3 Р7<0,001 Р7<0,001 Р"<0,001 Р10<0,001
Диапазон длин волн свечения в нм М 50,1 ЭО 8,0 т ±0,9 М 76,2 ЭО 3,5 т ±0,7 Р1<0,001 M 65,2 SD 5,4 m ±1,1 P2<0,001 P2<0,001 М 61,0 ЭО 4,4 т ±0,9 Р4<0,001 Р4<0,001 Р6<0,001 М 122,5 ЭО 6,2 т ± 1,2 Р7<0,001 Р7<0,001 Р"<0,001 Р10<0,001
о\ 0)
о
0) сг
CD
д
i
о
ш
CD О
СО О
К) о
Примечание: P1 между столбцами 1 и 2; P2 - 1 и 3; P3 - 2 и 3; P4 - 1 и 4; P5 - 2 и 4; P6 - 3 и 4; P7 - 1 и 5; P8 - 2 и 5;
P- 3 и 5; P„- 4 и 5.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бебнева Т.Н., Прилепская В.Н., Тагиева А.В. Эффективность оптико-электронной методики TruScreen в диагностике предраковых процессов шейки матки // Акушерство и гинекология. - 2012. - № 5. - С. 58-62.
2. Владимиров Ю.Ф., Проскурина Е.В. Свободные радикалы и клеточная хемилюминисценция // Успехи биологической химии. - 2009. - Т. 49. - С. 341-388.
3. Занько С.Н., Лысенко О.В. Гиперплазия эндометрия: возможности ультразвуковой и морфологической диагностики // Акушерство и гинекология. - 2013. - № 11. - С. 41-47.
4. Иванова С.В., КирпиченокЛ.Н. Использование флуоресцентных методов в медицине // Медицинские новости. - 2008. -№ 12. - С. 56-61.
5. Коган Е.А., Файзуллина Н.М., Ли Ц, Демура Т.А., Коза-ченко А.В. Эффективность диагностики цервикальной ин-траэпителиальной неоплазии шейки матки с использованием
комплекса методов: жидкостнои цитологии, двойного иммуно-окрашивания p16/Ki67 и ВПЧ тестирования // Акушерство и гинекология. - 2014. - № 7. - С. 43-47.
6. Кононов В.И., Осико В.В., Щербаков И.А. Фундаментальные достижения оптики и лазерной физики для медицины // Вестник Российской академии наук. - 2004. - Т. 74. - № 2. -С. 99-124.
7. Короткое К.Г. Основы ГРВ биоэлектрографии. - СПб.: СПбГИТМО (ТУ), 2001 - 360 с.
8. Кучмий А.А., Ефимов Г.А., Недоспасов С.А. Методы молекулярной визуализации in vivo // Биохимия. - 2012. - Т. 77. -Вып. 12. - С. 1603-1620.
9. Новикова Е.Г. Флюоресцентная диагностика предрака и начального рака эндометрия / Е. Г. Новикова // Российский онкологический журнал. - 2010. - № 2. - С. 25-28.
10. Порханова Н.В. Визуализация базально-клеточного рака кожи в высокочастотном электрическом поле / Н.В. Порха-
нова, А.Д. Гащенко, Г.А. Забунян, П.Г. Овсиенко, Ю.Ю. Стфано-ва, В.Г. Абушкевич // Кубанский научный медицинский вестник. - 2013. - № 5 (140). - С. 152-155.
12. Трофимов А.Е., Думановская М.Р., Чернуха Г.Е., Бур-менская О.В., Донников Д.Ю. Вероятность неопластической трансформации при различных типах гиперплазии эндометрия. // Акушерство и гинекология. - 2013. - № 8. - С. 56-62.
13. Унанян А.Л., Сидорова И.С., Коган Е.А., Демура Т.А., Демура С.А. Активный и неактивный аденомиоз: вопросы патогенеза и патогенетической терапии // Акушерство и гинекология. - 2013. - № 4. - С. 10-13.
14. Файззулина Т.А., Коган Н.М., Аскольская Е.А., Бурыки-на С.И., Демура П.Н., Караваев Т.В. Попов Ю.Е., Булынина Ю.В. Морфофункциональное состояние эндометрия у больных миомой матки репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология 2013. - № 8 - С. 46-51.
15. Чернуха Г.Е., Думановская М.Р. Современные представления о гиперплазии эндометрия // Акушерство и гинекология. - 2013. - № 3. - С. 26-32.
16. Шкляр А.А., Адамян Л.В., Коган Е.А., Парамонова Н.Б., Козаченко И.Ф., Гаврилова Т.Ю., Кононов С.Н. Трудности диагностики узловой и диффузной форм аденомиоза // Акушерство и гинекология. - 2015. - № 3. - С. 67-72.
Поступила 23.07.2016
Т.В. РУСИНОВА, Г.А. ЧУДИЛОВА, Н.В. КОЛЕСНИКОВА
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ИММУНОТРОПНЫХ ЭФФЕКТОВ IN VITRO ДЕРИНАТА И СИНТЕТИЧЕСКОГО АГОНИСТА TLR9 НА РЕЦЕПТОРНУЮ ФУНКЦИЮ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ И МОНОЦИТОВ В НОРМЕ И ПРИ ИНФЕКЦИОННОМ ПРОЦЕССЕ
Центральная научно-исследовательская лаборатория, ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» МЗ РФ Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. Тел. 8 (961) 52-83-446. E-mail: [email protected]
Проведена сравнительная оценка характера экспрессии рецепторов TLR9 и CD11b нейтрофильными грану-лоцитами и моноцитами цельной крови под действием дерината и синтетического лиганда TLR9 у здоровых лиц и при острых инфекционных заболеваниях вирусной и бактериальной природы. Показано, что однонаправленные эффекты исследуемых препаратов касаются изменения количества нейтрофильных гранулоцитов, несущих TLR9, и величины MFI CD289 во всех исследуемых группах, а для моноцитов только при инфекционном процессе. Разнонаправленные эффекты выявлены в отношении характера экспрессии молекул CD11b моноцитами во всех группах, а также нейтрофилами в группе здорового контроля.
Ключевые слова: деринат, агонист TLR-9, нейтрофильные гранулоциты, моноциты.
T.V. RUSINOVA, G.A. CHUDILOVA, N.V. KOLESNIKOVA
COMPARATIVE ANALYSIS IMMUNOTROPIC EFFECTS IN VITRO DERINAT AND SYNTHETIC TLR9
AGONIST ON RECEPTOR FUNCTION OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTES AND MONOCYTES IN
NORMAL AND INFECTIOUS PROCESS
Central Research Laboratory, Kuban state medical university, Russia, 350063, Krasnodar, Sedina str., 4. Tel. 8 (961) 52-83-446. E-mail: [email protected]
Comparative evaluation of character of the expression of TLR9 and CD11b receptors by neutrophilic granulocytes and monocytes whole blood under the influence of Derinat and synthetic TLR9 ligand in healthy individuals and in acute infectious diseases of viral and bacterial origin has been studied. It has been shown that the unidirectional effects of study drugs relate changes in the number of neutrophils, carrying TLR9, and MFI CD289 in all groups, and monocytes only in groups with infectious process. Differently directed effects identified in relation to expression of molecules CD11b monocytes in all groups, and neutrophils in a group of healthy controls.
Key words: derinat, agonist TLR9, neutrophilic granulocytes, monocytes.
Введение лей во всем мире. Особый интерес представляют
Механизмы взаимодействия патоген-ассоци- Toll-подобные рецепторы, данные белки способны ированных молекул (PAMP) с паттерн-распозна- распознавать консервативные структуры микроор-
ющими рецепторами (PRR) в последнее время ганизмов и в дальнейшем активируют клеточный привлекают пристальное внимание исследовате- иммунный ответ. При инвазии бактериальной или