CC BY
136
а
Экология
УДК 574.24
ВИДОВЫЕ И ФИТОЦЕНОТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПИГМЕНТНОГО СОСТАВА РАСТЕНИЙ СЕВЕРА
Б01: 10.24411/1728-323Х-2019-11006
Е. И. Голубева, доктор биологических наук, профессор, Московский Государственный университет имени М. В. Ломоносова, egolubeva@gmail.com, Москва, Россия; А. А. Червякова, инженер, конструкторское бюро «Аметист», venena_91@mail.ru, Москва, Россия;
Н. Ю. Шмакова, доктор биологических наук, главный научный сотрудник сектора физиологии растений Полярно-альпийский ботанический сад-институт имени Н. А. Аврорина, Кольский научный центр Российской академии наук, shmanatalya@yandex.ru; М. В. Зимин, кандидат географических наук, старший научный сотрудник, Лаборатория аэрокосмических методов, Московский Государственный университет имени М. В. Ломоносова, ziminmv@mail.ru, Москва, Россия; Ю. И. Тимохина, аспирант, Московский Государственный университет имени М. В. Ломоносова, timokhina2701@gmail.com, Москва, Россия
Статья посвящена подходам к выявлению и оценке воздействия природных и антропогенных факторов на изменения пигментного состава листьев растений, который отражает биохимические процессы. У различных видов растений наблюдается определенное количество хлорофилла а и b, каротиноидов и их соотношение, меняющееся как в процессе роста и фенологического состояния, так и в зависимости от условий произрастания. В результате исследований выявлены видовые особенности пигментного состава наиболее распространенных растений Севера и их реакция на условия произрастания. Для исследования выбраны береза извилистая (Betula tortuasa), береза пушистая (Betula pubescens Ehrh S. L.), ель сибирская (Picea obovata), багульник болотный (Ledum palustre), брусника (Vaccinium vitis-idaea), береза карликовая (Betula nana), черника (Vaccinium myrtillus) и др., произрастающие в центральной части Кольского полуострова. Для перечисленных видов определено содержание и соотношение пигментов и показано влияние условий местообитания растений, фенологического состояния, возраста, условий затененности и расположения листьев (хвои) в кроне дерева. Пигментный состав служит индикатором условий мест обитания и адаптивности растения к условиям изменения гидротермических условий.
Введение. Для выявления и оценки воздействия как природных, так и антропогенных факторов изменений в компонентах экосистем, необходимо выбрать надежные индикаторы воздействия, которыми часто выступают растения. Морфологические изменения растений (различная окраска листьев, их размеры, продолжительность роста и т.п.) отражают биохимические процессы.
Различные виды растений имеют определенное их количество и соотношения, меняющиеся как в процессе роста и фенологического состояния, так и в зависимости от условий произрастания (преимущественно климатических).
Цель настоящего исследования — выявление видовых особенностей пигментного состава наиболее распространенных растений Севера и их реакции на условия произрастания.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
• Определить содержание и соотношение пигментов (хлорофилла а и Ь и каротиноидов) в различных видах растений.
• Проанализировать характер влияния условий местообитания растений на содержание и соотношение пигментов.
• Выявить особенности содержания пигментов в растениях в зависимости от изменений возраста, условий затененности и расположения листьев (хвои) в кроне дерева.
The article is devoted to the approaches for the identification and assessment of the natural and anthropogenic factors impact on the changes in the pigment composition of the plants leaves, which reflects biochemical processes. In various plant species, a certain amount of chlorophyll a and b and carotenoids is observed and their ratio varies both in the process of growth and phe-nological state, and depending on the growing conditions. As a result of the research, specific features of the pigment composition of the North most common plants and their response to the growing conditions were identified. For the study, we selected winding birch (Betula tor-tuasa), fluffy birch (Betula pubescens Ehrh S. L.), Siberian spruce (Picea obovata), wild rosemary (Ledum palustre), lingonberry (Vaccinium vitis-idaea), dwarf birch (Betula nana), bilberry (Vaccinium myrtillus) and others, growing in the central part of the Kola Peninsula. For the listed species, the content and ratio of pigments were identified and the effect of plant habitat conditions, phenolog-ical condition, age, shade conditions and location of tree crown leaves (needles) was shown. The pigment composition serves as an indicator of habitat and plant adaptability of changing hydrothermal conditions.
Ключевые слова: пигменты, хлорофилл, каро-тиноиды, северные экосистемы, природные и антропогенные факторы, фотосинтетический аппарат растений.
Keywords: pigments, chlorophyll, carotenoids, northern ecosystems, natural and anthropogenic factors, plant photosynthetic apparatus.
Изучение фотосинтетического аппарата растений (ФА) в контексте логики нашей работы оправдано несколькими причинами, хотя очевидно, что любые факторы, как природные, так и антропогенные, затрагивают так или иначе работу всех систем и физиологических процессов растений. Первая причина состоит в том, что фотосинтез — трансформация солнечной энергии и ее запасание — является все же основной функциональной особенностью растений. Во-вторых, исследования последних десятилетий показывают ведущую роль модификаций ФА растений в реакциях на неблагоприятные факторы внешней среды (Гудвин, Мерсер, 1986; Горышина, 1989; Алексеев, 1994; Костюк, Мельник, Вихман, 2011). Причем такие модификации могут происходить на разных уровнях организации ФА. В нашей работе мы рассматривали два уровня — молекулярный (суммарное содержание хлорофил-лов а и б и каротиноидов) и ультраструктурный. Эти показатели отражают особенности работы фотосинтеза, эффективность усвоения световой энергии, то есть то, насколько успешно растительный организм смог адаптироваться к неблагоприятным факторам.
Так, содержание в листьях пигментов пластид — хлорофил-лов (а и б) и каротиноидов часто связывают с величиной эффективности фотосинтеза. Как правило, при увеличении суммы хлорофилла а и б, возрастает эффективность фотосинтеза, и наоборот, при снижении этого показателя, эффективность снижается.
Считается, что каротиноиды при действии неблагоприятных факторов внешней среды играют роль защиты хлорофилла от процессов фотодеструкции и образования активных форм кислорода. Такая реакция также направлена на поддержание эффективной работы фотосинтеза.
Еще одним показателем ФА, который часто рассматривается при изучении стрессовых воздействий на растения, является соотношение содержания хлорофилла а и б и соотношение содержания ксантофиллов и бета-каротинов (ЫсЫепШа-1ег, 1987; Сариева, Кенжебаева, Лихтенталер, 2010; Лысенко и др., 2013). Формально этот показатель является характеристикой биохимического уровня. Однако, как показали некоторые исследования, это соотношение отражает особенности более высокого уровня ультраструктуры хлоропластов. Согласно результатам исследования Х. К. Лихтентайлера с соавторами (ЫсМепШакг, 1983, 2005, 2007), изменения этих соотношений свидетельствуют о перестройке ультраструктуры хлоропластов, которая направлена на изменение доли ти-лакоидов стромы или гран и в конечном счете на защиту фотосинтеза и поддержание эффективной его работы.
При преобладании тилакоидов стромы хлоропласты относят к так называемому световому типу, поскольку в этом случае происходит более эффективное светоусвоение. Такое строение также способствует более высокой степени защиты мембран хлоропластов от фотоповреждений, по сравнению с хлоропластами теневого типа, где преобладают тилакоиды гран. По данным различных исследований у хлоропластов светового типа более высокое соотношение хлорофилла а к хлорофиллу б и пониженное соотношение ксантофиллов к бета-каротинам.
Объекты и методы исследования. Географическое положение региона и, прежде всего, более мягкий климат по сравнению с районами Крайнего Севера, определили развитие на Кольском полуострове преимущественно бореальных хвойных лесов и болот, сменяющихся при продвижении на север и с увеличением абсолютной высоты, березовыми редколесьями, ксерофильными кустарничковыми и л ишайниковыми тундрами, а в горных массивах, расположенных в центральной части полуострова, горными арктическими пустынями. Полевые исследования проводились на территории Мурманской области в условно фоновых экосистемах.
В ходе проведения полевых работ были собраны образцы 14 видов растений, для которых был проведен пигментный анализ (122 образца растений). Были изучены виды, произрастаю-
щие в различных ярусах (названия растений даны по (ссылка). В древесном ярусе исследована береза извилистая (Betula tortuasa), береза пушистая (Betula pubescens Ehrh S. L.), ель сибирская (Picea obovata), в кустарниковом — ива козья (Salix caprea L.), ива филиколистная (Salix phyli-cifolia L.), багульник болотный (Ledum palustre), в кустарничковом — брусника (Vaccinium vitis-idaea), береза карликовая (Betula nana), вороника обоеполая (Empetrum hermaphroditum Hager), голубика (Vaccinium uligimosum), можжевельник сибирский (Juniperus sibirica L.), черника (Vaccinium myrtillus). В травянистом ярусе изучались луговик извилистый (Avinella flexuosa) и ситник трехраз-дельный (Juncus trifidus) (табл. 1).
Для выявления особенностей содержания пигментов в растениях различных высотных поясов в зависимости от изменения абсолютной высоты
Таблица 1
Биологические и экологические особенности растений и их пигментный состав
Ярус Растение Отношение к свету/ влаге/субстрату Время цветения/ плодоношения a + b* a/b** (a + Ь)/к***
Древесный Береза извилистая (Betula tortuosa Ledeb.) Светолюб/Мезофит/ Олиготроф Июнь/ август-сентябрь 4,61 3,30 4,50
Береза пушистая (Betula pubescens Ehrh S. L.) Светолюб-теневынослив/ Мезофит/Мезотроф май-июнь/ август-сентябрь 5,36 3,57 4,34
Ель сибирская (Picea obovata) Тенелюб/Мезофит/ Мезотроф май-июнь/ конец сентября 3,36 1,24 4,61
Кустарниковый Ива козья (Salix caprea L.) Светолюб/Гигрофит/ Мезотроф март-апрель/ май 3,83 6,41 4,77
Ива филиколистная (Salix phylicifolia L.) Теневынослив/ Гигрофит/Мезотроф апрель-май/ июнь 3,55 4,43 4,99
Береза карликовая (Betula nana) Светолюб/Мезофит/ Мезотроф апрель-май/ июнь 5,00 5,05 4,03
Кустар-ничковый Брусника (Vaccinium vitis-idaea) Светолюб/Мезофит/ Олиготроф май-июнь/ август-сентябрь 5,84 2,29 4,10
Багульник (Ledum palustre) Светолюб/Гигрофит/ Олиготроф май-июнь/ июль-август 2,95 3,20 4,62
Вороника обоеполая (Empetrum hermaphroditum Hager.) Светолюб/Мезофит/ Олиготроф апрель-май/ июль-сентябрь 2,86 2,26 3,85
Голубика (Vaccinium uliginosum) Светолюб/Мезофит/ Мезотроф май-июль/ июль-август 3,38 4,02 5,05
Можжевельник обыкновенный (Juniperus communis L.) Светолюб/Мезофит/ Мезотроф май-июль/ июль-август 3,31 0,18 4,11
Черника (Vaccinium myrtillus) Светолюб/Мезофит/ Мезотроф май-июнь/ июль-август 3,68 4,92 5,07
Травянистый Луговик извилистый (Deschampsia flexuosa) Светолюб/Ксерофит/ Олиготроф июнь-август/ август 3,29 3,39 3,96
Ситник трехраздельный (Juncus trifidus) Светолюб/Ксерофит/ Олиготроф июнь-август/ июль-сентябрь 4,04 3,65 3,59
* — сумма хлорофиллов a и Ь; ** — соотношение хлорофиллов a / Ь; *** — отношение суммы хлорофиллов a и Ь к содержанию каротиноидов — к. Единицы измерения пигментов мг/г абс. сух. в-ва.
был проведен анализ их пигментного состава на склоне г. Юкспор Хибинского горного массива (западная экспозиция, крутизна 17—22 °С). Для анализа выбраны три вида березы, характеризующие пояса северотаежного березового криволесья и кустарничковых тундр (береза пушистая (Betula pubescens Ehrh S. L.), береза извилистая (Betula tortuasa), береза карликовая (Betula nana).
В каждой пробе определяли содержание воды высушиванием до абсолютно сухого веса при 105 °С. Содержание пигментов пластид в спиртовых вытяжках определяли (ЫсЫепШакг, ^ЪПЬит, 1983) с помощью спектрофотометра иУ-1800 (фирма «ЗЫша^и», Япония) по оптической плотности в максимумах поглощения хлорофиллов a и Ь, каротиноидов. Ошибка определений не превышала 10 %. (ПсМепШа1ег., Wellburn., 1983).
Обсуждение результатов. Особенности пигментного состава растений разных видов. Пигментный состав каждого вида растения зависит от его биологических и экологических особенностей, а также от условий произрастания — степени сомкнутости крон, положения в растительном сообществе (нижний/верхний ярус, положение в межкронном пространстве или под кронами деревьев) и т.п. Поэтому в одинаковых природных условиях пигментный состав (сумма хлорофиллов а и Ь, соотношение хлорофиллов а и Ь и соотношение суммы хлорофиллов и каротиноидов) различных видов растений может различаться, иногда существенно (табл. 1).
Важно отметить, что показатели пигментного состава зависят не только от видовых особенностей, но и от условий произрастания, так, например, для одного и того же вида в различных условиях освещения содержание и состав пигментов в разных образцах будет отличаться.
Также разновозрастные части растений обладают различными способностями к фотосинтезу, а значит содержание хлорофилла в зависимости от возраста листа (или хвои) будет варьировать. Еще одной отличительной особенностью некоторых растений является наличие разницы в содержании хлорофилла у листьев (хвои), расположенных на верхних или нижних ветвях растения. Рассмотрим все вышеперечисленные особенности более подробно.
Было изучено влияние пигментного состава растений в различных условиях освещенности. Так, были исследованы образцы черники и багульника болотного, произрастающих в фоновых условиях исследуемой территории. Различия в условиях произрастания были только в соседстве других видов, а следовательно, в условиях освещенности.
Рис. 1. Пигментный состав а) багульника болотного б) черники, в зависимости от условий произрастания (1 — между крон, 2 — под березой, 3 — под елью)
6 5 4 г ^ 3 м 2 1 0 6 5 4 г 3 м 2 1 0 6 5 4 г ^ 3 м 2 1 0 1 2
A/B A + B (Л + B)K а)
1
2
A/B A + B (Л + В б) щ
1 2
...
A/B Л + в) В (Л + В)К
Рис. 2. Пигментный состав многолетней хвои ели сибирской: а) молодая хвоя; б) однолетняя хвоя; в) многолетняя хвоя, собранная с верхних (1) и нижних (2) ветвей
Betula tortuasa г. Юкспор
Рис. 3. Пигментный состав листьев разных видов берез в различных высотных поясах г. Юкспор
На рисунке 1 (а, б) наглядно показаны различия в условиях произрастания.
Надо отметить, что наблюдаемые различия в содержании пигментов и их соотношении у этих двух видов связаны не только отношением к свету и трофности местообитания, но и с особенностями биологии — багульник болотный вечнозеленый, а черника — листопадный кустарничек.
У ели сибирской при определении пигментного состава были учтены особенности содержания пигментов в хвое разного возраста, а также в высоте ветвей, на которых были отобраны образцы. Исследования показали, что показатели различаются как по возрасту хвои, так и по расположению ветвей (рис. 2).
Рисунки 2 (а—в) наглядно иллюстрируют различие в содержании пигментов в хвое одного растения. Для молодых хвоинок, а также для хвои, возраст которой всего один год, соотношение пигментов а и Ь в верхних ветвях больше, чем в нижних. Для многолетних же хвоинок, возраст которых больше 1 года, в нижних и верхних ветвях разница очень невелика. Это объясняется возрастом хвои, так как даже невооруженным глазом можно отметить, что молодые хвоинки имеют более насыщенный, яркий, зеленый цвет, чему способствует повышенное содержание хлорофилла Ь. Каротиноидов же, наоборот, больше в хвое ниж-
них ветвей, так как они расположены в худших условиях освещения, и растению важно не упустить каждый квант света, попадающего на хло-ропласты.
Если сравнивать разновозрастную хвою по наличию хлорофилла, то можно отметить, что наибольшее его содержание приходится на однолетнюю хвою, так как в молодой хвое хлоропласты еще в процессе образования, а в многолетней хвое происходит их постепенное разрушение. Полученные результаты подтверждаются также двумя другими образцами ели сибирской, произрастающих в тех же природных условиях среды обитания.
Были изучены показатели содержания пигментов в листьях разных видов березы, сменяющих друг друга с повышением высоты — в нижнем поясе доминирует Betula pubescens, в среднем — Betula tortuasa, а в верхнем — Betula nana на западном склоне крутизной 17—22° горы Юкспор (рис. 3).
Как видно, с увеличением абсолютной высоты по склону западной экспозиции меняется содержание и состав пигментов: с высотой повышается количество каротиноидов по отношению к зеленым пигментам. Кроме видовых различий, это может быть связано с тем, что в верхней части склона вегетация началась несколько позже, чем
в нижних, поэтому пигменты не до конца сформировались.
Заключение. Проведенные исследования позволили сделать следующие выводы:
1. В содержании пигментов и их соотношении наблюдается видоспецифичность, обусловленная биологическими и экологическими особенностями растения. Различия между видами могут составлять по сумме хлорофиллов а + Ь более, чем в 2 раза — от 5,84 до 2,26 мг/г абсолютно сухого вещества, по соотношению хлорофиллов а/Ь различия составляют 5 раз — от 6,0 до 1, 24, а по соотношению суммы хлорофиллов к содержанию каротиноидов (а + Ь)/к — не более, чем в 1,5 раза, от 5,07 до 3,59.
2. Положение в сообществе существенно влияет на содержание пигментов в растениях. Так, по всем показателям различия у одного и того же вида могут различаться почти в два раза. Возраст хвои также отражается на ее пигментном составе.
3. У рассмотренных видов березы, сменяющих друг друга по градиенту высоты, пигментный состав также различается, особенно в верхних час-
тях склоны, что связано, в первую очередь, с видовыми особенностям растений, а также с их фенологическим состоянием и эдафическими условиями.
Таким образом, можно констатировать, что пигментный состав служит дополнительным индикатором условий мест обитания и адаптивности растения к условиям изменения гидротермических условий.
Благодарности. Работа выполнена при поддержке проектов РФФИ 18-05-60221 Арктика «Методология оценки состояния и динамики наземных экосистем Арктики в условиях антропогенного воздействия по данным ДЗЗ» и № 17-05-41173 РГО а «Разработка многомерной пространственно-временной модели Арктического региона сверхвысокого разрешения».
Авторы благодарны О. В. Ермолаевой за помощь в проведении анализов по определению пигментного состава растений и обсуждение результатов, к. г. н. Говоровой А. Ф. за ценные замечания при чтении рукописи статьи.
Библиографический список
1. Алексеев В. Г. Устойчивость растений в условиях Севера: Эколого-биохимические аспекты, Новосибирск, Наука, 1994, 152 с.
2. Горышина Т. К. Фотосинтетический аппарат растений и условия среды. Л.: Изд-во ЛГУ, 1989. 208 с.
3. Гудвин Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений. М.: Наука, 1986, 312 с.
4. Костюк В. И., Мельник Н. А., Вихман М. И. Состояние ассимилирующих органов березы в окрестности Апатитской ТЭЦ. — Апатиты: Изд. Кольского научного центра РАН, 2011. — 86 с.
5. Лысенко В. С., Вардуни Т. В., Сойер В. Г., Краснов В. П. Флуоресценция хлорофилла растений как показатель экологического стресса: теоретические основы применения метода // Фундаментальные исследования. — 2013. — № 4-1. — С. 112—120.
6. Сариева Г. Е., Кенжебаева С. С., Лихтенталер Х. К. Адаптационный потенциал фотосинтеза у сортов пшеницы с признаком «свернутый лист» при действии высокой температуры // Физиология растений. — 2010. — Т. 57. — № 1. — С. 32—41.
7. Якушкина Н. И., Бахтенко Е. Ю. Физиология растений. М.: Издательство «Владос», 2004, 464 с.
8. Lichtenthaler H. K. Chlorophylls and Carotenoids, the Pigments of Photosynthetic Biomembranes // Methods Enzymology / Eds. Douce R., Packer L. New York: Academic, 1987. P. 350—382.
9. Lichtenthaler H. K., Wellburn A. R. Determination of total carotenoids and chlorophylls a and b of leaf extracts in different solvents // Biochem. Soc. Trans. 1983. V. 11. N 5. P. 591—592.
10. Lichtenthaler H. K. Biosynthesis, Accumulation and Emission of Carotenoids, Tocopherol, Plastoquinone and Isoprene in Leaves under High Photosynthetic Irradiance // Photosynth. Res. 2007. V. 92. P. 163—179.
11. Lichtenthaler H. K., Buschmann C., Knapp M. How to Correctly Determine the Different Chlorophyll Fluorescence Parameters and the Chlorophyll Fluorescence Decrease ratio RFd of Leaves with the PAM Fluorometer // Photosynthetica. 2005. V. 43. P. 379—393.
SPECIFIC AND PHYTOCENOTIC PECULIARITIES OF THE PIGMENT STRUCTURE OF THE PLANTS OF THE NORTH
E. I. Golubeva, Ph. D. (Biology), Dr. Habil., Professor, Lomonosov Moscow State University, egolubeva@gmail.com, Moscow, Russia,
A. A. Chervyakova, engineer, Ametist Design Bureau, venena_91@mail.ru, Moscow, Russia,
N. Y. Shmakova, Ph. D. (Biology), Dr. Habil., Chief Research Officer of the Plant Physiology Sector of the Polar-Alpine Botanical Garden-Institute named after N. A. Avrorina, Kola Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, shmanatalya@yandex.ru, M. V. Zimin, Ph. D. (Geography), Senior Research Officer, Laboratory of Aerospace Methods, Lomonosov Moscow State University, ziminmv@mail.ru, Moscow, Russia,
Y. I. Timokhina, Ph. D. student, Lomonosov Moscow State University, timokhina2701@gmail.com, Moscow, Russia
References
1. Alekseev V. G. Ustojchivost' rastenij v usloviyah Severa: EHkologo-biohimicheskie aspekty. [Plant resistance in the North: Ecological and biochemical aspects]. Novosibirsk, Nauka. 1994, 152 p. [in Russian]
2. Goryshina T. K. Fotosinteticheskij apparat rastenij i usloviya sredy. [Photosynthetic apparatus of plants and environmental conditions]. Leningrad, Izd-vo LGU. 1989. 208 p. [in Russian]
3. Gudvin T., Merser E. H. Vvedenie v biohimiyu rastenij. [Introduction to Plant Biochemistry]. Moscow, Nauka. 1986, 312 p. [in Russian]
4. Kostyuk V. I., Mel'nik N. A., Vihman M. I. Sostoyanie assimiliruyushchih organov berezy v okrestnosti Apatitskoj TEHC. [The state of assimilating organs of the birch in the vicinity of the Apatitskaya CHPP]. Apatity: Izd. Kol'skogo nauchnogo centra RAN, 2011. 86 p. [in Russian]
5. Lysenko V. S., Varduni T. V., Sojer V. G., Krasnov V. P. Fluorescenciya hlorofilla rastenij kak pokazatel' ehkologicheskogo stressa: teoreticheskie osnovy primeneniya metoda. Fundamental'nye issledovaniya. [Chlorophyll fluorescence of plants as an indicator of environmental stress: a theoretical basis for applying the method. Fundamental Research]. 2013. No. 4-1. P. 112—120 [in Russian]
6. Sarieva G. E., Kenzhebaeva S. S., Lihtentaler H. K. Adaptacionnyj potencial fotosinteza u sortov pshenicy s priznakom "sver-nutyj list" pri dejstvii vysokoj temperatury. [Adaptation potential of photosynthesis in wheat varieties with the sign of "folded leaf" under the impact of high temperature]. Fiziologiya rastenij. 2010. Vol. 57. No. 1. P. 32—41. [in Russian]
7. Yakushkina N. I., Bakhtenko E. Yu. Fiziologiya rastenij. [Plant physiology]. Moscow, Vlados. 2004. 464 p. [in Russian]
8. Lichtenthaler H. K. Chlorophylls and Carotenoids, the Pigments of Photosynthetic Biomembranes, Methods Enzymology / Eds. Douce R., Packer L. New York: Academic, 1987. P. 350—382.
9. Lichtenthaler H. K., Wellburn A. R. Determination of total carotenoids and chlorophylls a and b of leaf extracts in different solvents, Biochem. Soc. Trans. 1983. Vol. 11. No 5. P. 591—592.
10. Lichtenthaler H. K. Biosynthesis, Accumulation and Emission of Carotenoids, Tocopherol, Plastoquinone and Isoprene in Leaves under High Photosynthetic Irradiance, Photosynth. Res. 2007. Vol. 92. P. 163—179.
11. Lichtenthaler H. K., Buschmann C., Knapp M. How to Correctly Determine the Different Chlorophyll Fluorescence Parameters and the Chlorophyll Fluorescence Decrease ratio RFd of Leaves with the PAM Fluorometer, Photosynthetica. 2005. Vol. 43. P. 379—393.
