ВЕРИФИКАЦИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО НАБОРА «ВЕТСКРИН.СТАФИПОЛ» ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК STAPHYLOCOCCUS AUREUS У СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР) С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ В ВЕТЕРИНАРНОЙ ЛАБОРАТОРИИ Текст научной статьи по специальности «Сельскохозяйственные науки»

гЩ1

DOI 10.24412/37120-

ВЕРИФИКАЦИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО НАБОРА «ВЕТСКРИН.СТАФИПОЛ» ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК STAPHYLOCOCCUS

AUREUS У СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР) С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ В ВЕТЕРИНАРНОЙ ЛАБОРАТОРИИ

Е.А. Толстова, аспирант, AuthorID:1164113 В.А. Агольцов, профессор, доктор ветеринарных наук, AuthorID:722672

ФГБОУВО Саратовский государственный иверситет генетики, биотехнологии и нерии им. Н.И. Вавилова, Саратов, пр-т. Столыпина, зд.4, стр.3

уни

О.Ю. Черных, профессор, доктор ветеринарных наук, директор, AuthorID:473119

ГБУ КК «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория», г. Кропоткин, ул.

Красноармейская 303

Аннотация. Полимеразная цепная реакция с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени является чрезвычайно распространенным лабораторным методом обнаружения бактериальных патогенов. В настоящее время доступно несколько коммерческих ПЦР-наборов для обнаружения ДНК Staphylococcus aureus. В этом исследовании рассматривается эффективность одного диагностического набора «ВЕТСКРИН.СТАФИПОЛ» ООО НПФ «Литех» на приборе Real-Time CFX 96 Touch (Bio-Rad, Франция/США) амплификаторе для проведения ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реальном времени в образцах биологического материала, полученного от свиней.

Для реализации процедуры, готовились из заранее происследованных холостых проб две

холостые и две с добавлением синтетического положительного контроля ДНК Staphylococcus входящего в состав диагностический набора. Пробы готовились путем деления их на серии [8,9].

Для выбранного значен определения проводилась параллельных исследован исследования проводились двумя оператора с минимальной разницей во времени для обеспечения сходимости результатов) Ключевые слова: Staphylococcus диагностика, ПЦР, верификация, свиньи, биологический материал

VERIFICATION OF THE DIAGNOSTIC KIT «ВЕТСКРИН.СТАФИПОЛ»FOR THE DETECTION OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS DNA IN PIGS BY POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) WITH HYBRIDIZATION-FLUORESCENCE ETECTION IN REAL TIME IN A ETERINARY LABORATORY

aure

E.A. Tolstova, PhD student, AuthorID:1164113 V.A. Agaltsov, Professor, Doctor of Veterinary Sciences, AuthorID:722672 Saratov State University of Genetics, Biotechnology and Engineering named after N.I.

Vavilov, Saratov, ave. Stolypin, zd.4, p.3

O.Yur. Chernykh, Professor, Doctor of Veterinary Sciences, Director, AuthorID:473119

GBUKK "Kropotkin regional Veterinary Laboratory", Kropotkin, Krasnoarmeyskaya str.

303

Abstract. Polymerase chain reaction with real-time hybridization-fluorescence detection is an extremely common laboratory method for detecting bacterial pathogens. Currently, several commercial PCR kits are available for the detection of Staphylococcus aureus DNA. This study examines the effectiveness of a single diagnostic kit «BETCKPHHCTAOHnOH»on the Real-Time CFX 96 Touch device (Bio-Rad, France/USA) amplifier for conducting PCR with fluorescence detection in real time in samples of biological material obtained from pigs.

Ветеринария Северного Кавказа №1/9 2024 г.

To implement the procedure, two bla and two with the addition of syntheti DNA control of Staphyl ococcus aureus, part of the diagnostic kit, were prepared from pre-examined blank samples. The samples were prepared by dividing them into series. For the selected value of the determination range, a series of two parallel studies were conducted (parallel studies were conducted by two operators with a minimum time difference to ensure convergence of the results)

Keywords: Staphylococcus aureus, diagnostics, PCR, verification, pigs, biological material

Введение Staphylococcus aureus - золотистый стафилококк. Он встречается в носовых ходах здоровых животных. S. aureus наиболее часто выделяется при гнойной патологии, вызывает целый ряд заболеваний: фурункулы и карбункулы, мастит, раневые инфекции, менингиты, перекардиты, легочные инфекции и ' Гы [1,2,3,4].

Таблица 1 - Анализ и

Ct

Green (FAM)

режиме реального времени является чрезвычайно распространенным лабораторным методом обнаружения бактериальных патогенов. В настоящее время доступно несколько коммерческих ПЦР-наборов для обнаружения ДНК Staphylococcus aureus. В этом исследовании рассматривается эффективность одного диагностического набора «ВЕТСКРИНСТАФИПОЛ» ООО НПФ «Литех» на приборе Real-Time CFX 96 Touch (Bio-Rad, Франция/США) амплификаторе для проведения ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реальном времени в образцах биологического материала, полученного от свиней [5,6,7].

Для реализации процедуры, готовились из заранее происследованных холостых проб две холостые и две с добавлением синтетического положительного контроля ДНК Staphylococcus aureus входящего в состав диагностический набора. Пробы готовились путем деления их на

интец^Ириция результата

Ct Yellow (HEX)

<кц

N/A или > КЦ

N/A или > КЦ

N/A или > КЦ

любой

Результат

Специфическая реакция прошла

Специфическая реакция не прошла. ТРЕБУЕТСЯ повтор постановки. Специфическая контаминация отсутствует

Специфическая контаминация ДНК Staphylococcus aureus . ТРЕБУЕТСЯ

повтор

постановки.

N/A или > КЦ < КЦ

А >КЦ

>кц

ПРИСУТСТВИЕ ДНК Staphylococcus aureus.

ОТСУТСТВИЕ ДНК Staphylococcus aureus.

Ингибирование. ТРЕБУЕТСЯ повтор анализа

данного образца с этапа выделения. В случае

неудовлетворительного результата рекомендуется

сделать повторный пробозабор материала.

ТУ/А - пересечение кривой накопления флуоресцентного сигнала с пороговой линией не зарегистрировано. КЦ - конечный цикл Полимеразная цепная реакция с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в

Для выбранного значения диапазона определения проводилась серия по два

параллельных исследования (паралл исследования проводились двумя оператор с минимальной разницей во времени обеспечения сходимости результатов) [10,11,12] Цели и задачи. Установление пригодности инструкции и набора реагентов «ВЕТСКРИН.СТАФИПОЛ» для выявлен

1гет ■ методом

Staphylococcus аиге ой цепн

зационно-флуоресцентной детекцией в

режиме реального времени в биологическом материале полученного от свиней.

атериалы и методы. Исследования проводились на базе Кропоткинской краевой ветеринарной лаборатории. Была применена тов методика полимеразной цепной реакции с

ия гибридизационно-флуоресцентной детекцией в

уюсв

азной цепной реакции (ПЦР) с

ежиме реального времени (

режи режи

Л

Таблица 2 - Результаты исследования в условия^йовторяемости серия «А»

• *

Номер серии, Ь Дата Испытатель Результаты параллельных исследований проб

X! х2

БАМ НЕХ БАМ НЕХ

1 17.07.2023 Оператор №1 27,5 23,1 27,4 23,9 -

2 17.07.2023 Оператор №1 26,4 24,5 26,8 23,8

3 17.07.2023 Оператор №1 23,2 25,6 22,2 24,3

4 17.07.2023 Оператор №1 20,9 24,7 21,0 23,7

5 17.07.2023 Оператор №1 20,4 25,8 20,9 24,6

6 17.07.2023 Оператор №1 25,7 - 24,9 -

7 17.07.2023 Оператор №1 25,9 - 23,9 -

8 17.07.2023 Оператор №1 23,4 - 23,9 -

9 17.07.2023 Оператор №1 24,8 - 24,3 -

17.07.2023 Оператор №1 25,2 - 25,8 -

1 17.07.2023 Оператор №2 24,3 22,9 24,7 21,5

2 17.07.2023 Оператор№2 26,4 23,5 23,5 20,6

3 17.07.2023 Оператор№2 25,1 20,1 24,9 22,3

4 17.07.2023 Оператор№2 21,0 19,9 22,5 24,2

5 17.07.2023 Оператор№2 20,8 23,5 21,4 23,7

6 17.07.2023 Оператор№2 23,9 - 20,2 -

7 17.07.2023 Оператор№2 24,6 - 22,3 -

8 17.07.2023 Оператор№2 22,2 - 21,6 -

9 17.07.2023 Оператор№2 25,0 - 24,1 -

17.07.2023 Оператор№2 24,9 - 22,8 -

Номер Дата серии, L

ия, проведенные в у

■рТй «В » w 1 л % ^ 1

Испытатель Результаты параллельных исследований проб

Xi

х2

FAM

HEX

FAM

17.07.2023

Оператор №1

25,6

23,8

24,7

17.07.2023 Оператор №1 24,3

21,5

22,1

HEX

20,6

19,6

3 17.07.2023 Оператор №1 23,8 19,9 25,3 20.2

4 17.07.2023 Оператор №1 25,0 24,1 20,0 18,7

5 17.07.2023 Оператор №1 26,3 20,7 19,9 17,3

6 17.07.2023 Оператор №1 21,4 - 17,3 -

7 17.07.2023 Оператор №1 22,2 - 21,6 -

8 17.07.2023 Оператор №1 23,3 - 18,4 -

9 17.07.2023 Оператор №1 19,5 - 21,5 -

10 17.07.2023 Оператор №1 17,2 - 22,2 -

1 17.07.2023 Оператор №2 26,5 21,9 25,8 20,6

2 17.07.2023 Оператор№2 24,0 20,4 23,7 18,0

3 17.07.2023 Оператор№2 21,8 23,6 22,3 17,5

4 17.07.2023 Оператор№2 22,5 25,0 21,8 21,0

5 17.07.2023 Оператор№2 20,9 24,5 19,7 19,1

6 17.07.2023 Оператор№2 21,7 - 23,5 -

7 17.07.2023 Оператор№2 23,4 - 24,4 -

8 17.07.2023 Оператор№2 19,9 - 20,1 -

9 17.07.2023 Оператор№2 20,2 - 18,8 -

10 17.07.2023 Оператор№2 18,6 - 20,9 -

C использованием ПЦР-набора

«ВЕТСКРИНСТАФИПОЛ» V ООО НПФ «Литех» (Россия). **

Материалом для лабораторных исследований служили: соскобы эпителиальных клеток задней стенки глотки, смывы из бронхов, цельная кровь от свиноматок и трупов поросят возрастом от одного до четырёх месяцев. Для постановки реакций было задействовано следующее оборудование: Амплификатор

«Real-time CFX Connect» (Bio-Rad Laboratories, США) с принадлежностями, твердотельный термостат для пробирок типа «Эппендорф» на 1,5мл с диапазоном температур от 25 до 99 °C (ТТ-2-«Термит», Россия), микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» до 12 тыс. об/мин («MiniSpin», Германия), вортекс («ТЭТА-2», Россия) вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидкости («ОМ-1», Россия), настольный бокс с

л

Номер серии

Результаты анализа проб,

полученные в условиях

повторяемости и

внутрилабораторной

воспроизводимости

олируемых показателе!

Результаты анализа рабочих проб

согласно инструкции

XI

Оператор №1

Х2

Оператор №2

Положительный Положительный Положительный Положительный

Положительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный бактерицидной лампой («БАВп-«Ламинар-С» -1,2», Россия).

1ьтаты проведенных исследований. ы проводили в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, ПЦР проводили с использованием реагентов набора, с приготовленной реакционной смесью из расчета на одну пробу затрачивалось: 21 мкл разбавителя, 7 мкл реакционной смеси и 0,3 мкл Taq-полимеразы со следующими условиями ПЦР: 95°С в течение 1мин 30 секунд, затем 40 циклов при 95°С 15 секунд, 60°С 30 секунд

Положительный Положительный Положительный Положительный

Положительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный

(считывание)

-ГТ '

Результ

Образцы

Положительный Положительный Положительный Положительный

Положительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный

, 72°С 40 секунд , используя каналы FAM/Green и HEX/Yellow Результат считался достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции ДНК в соответствии с таблицей 1.

Для реализации процедуры, готовились из заранее происследованных холостых проб две холостые и две с добавлением синтетического положительного контроля ДНК Staphylococcus aureus входящего в состав диагностический

Рисунок 1. Кинетическая кривая положительного Рисунок 2. Кинетическая кривая положительного результата Оператор Nj^Linj) ни «А» результата Оператор серия «А»

Рисунок 3. Кинетическая кривая положительного Рисунок 4. Кинетическая кривая положительного результата Оператор №1 серия <в» результата Оператор №2 серия «В»

Таблица 5 - Резул:

Результаты анализа проо

полученные в условиях

повторяемости и

внутрилаоораторной

воспроизводимости

XI

Оператор №1

П оложительный П оложительный

П оложительный П оложительный П оложительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный

Х2

Оператор №2

П ол ожитель ный П ол ожитель ный

П ол ожитель ный П ол ожитель ный П ол ожитель ный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный

Ефуемых показателен

Результаты анализа раоочих проо

согласно инструкции

Положительный Положительный

Положительный Положительный Положительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Отрицатель ный

Результат представляется в форме:

- «не обнаружена» - образец не содержит

- «обнаружена» - образец содержит ДНа

'taphylococcus aureus iphylococcus aureus

набора. Пробы готовились путем деления их на серии «А» и «В».

Для выбранного значения диапазона определения проводилась серия по два параллельных исследования (параллельные исследования проводились двумя операторами с минимальной разницей во времени для обеспечения сходимости результатов). Результаты представлены в (таблице 2-3). Проведённые параллельные исследования двумя операторами в сериях «А» и «В» совпали (таблица 4-5). Образцы № 1 - 5 положительные (рисунок 1-4), № 6-10 отрицательные, согласно инструкции. На рисунках представлены

а

-Rad, Франция/США) Режим анализа: Флуорофор Определение Cq: Регрессия V Метод базовой линии для флуорофора: HEX: рассчитать автоматически FAM: рассчитать автоматически Внутрилабораторный контроль выявления ДНК Staphylococcus aureus проводить один раз в год. Поступившая проба исследуется, далее приобретает статус «шифрованная» и поступает на хранение при соответствующей

графики полученные на амплификаторе RealTime CFX 96 Touch (Bio-Rad,

температуре: 2 - 8 °С - в течение суток с момента взятия материала, при температуре не выше минус 20°С - в течение месяца; при температуре не выше минус 68°С - длительно, согласно инструкции по применению набора реагентов Шифрованные пробы во время хранения стабильны и сохраняют свои свойства. Когда поступает новая проба, оператор исследует сначала шифрованную пробу, а после - поступившую. Когда результаты признаются удовлетворительными, оператор приступает к исследованию новой пробы.

Заключение. Результаты контрольной процедуры признаны удовлетворительными, методика пригодна для применения в ветеринарной лаборатории для выявления ДНК Staphylococcus aureus у свиней

Литература

1 .Бирюченкова М.В., Разработка методов обнаружения генома Streptococcus suis на основе полимеразной цепной реакции//Труды Федерального центра охраны здоровья

Ш „1

животных - Владимир - 2017. 81

2.Лигидова М.М., Агольцов В.А., Пад

Г

А.А.

Терапевтическая эффективность энтрикима при энзоотической пневмонии свиней// Научная жизнь - 2020. - Выпуск 9 -С.1260-1269.

Толстова Е.А., Семиволос В.А., Мариничева М.П.

£11

3.Л

дова М. Агольцо

2НИГ '

М., ов

A.М.,

Изучение ' фармакокинетики действующих веществ препарата «Энтриким» при применении его животным // Аграрный научный журнал- 2022. - №8 - С.47-49.

4.Толстова Е.А., Агольцов В.А., Падило Л.П. Особенности диагностики и терапии стрептококкоза свиней, осложненного РРСС на племенной ферме// Научная жизнь - 2022. -Том 17. - Выпуск 1 - С.157-166.

5.Толстова Е.А., Лигидова М.М., Падило Л.П., Семиволос А.М., Агольцов В.А. Диагностика, терапия и специфическая профилактика

тококкоза свиней, осложненного еллезом и микоплазмом// Аграрный 1ый журнал - 2022. - №1 - С.71-75.

6.Толстова Е.А., Лигидова М.М., Агольцов

B.А., Черных О.Ю., Падило Л.П., Попова О.М. ПЦР-диагностика с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени для быстрого обнаружения Mycoplama hyopneumoniae в ассоциации с Streptococcus pneumoniae у свиней// Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана - 2023 - Том 254 -№2 - С.264-272.

7.Толстова Е.А., Агольцов В.А., Черных О.Ю., Падило Л.П., Попова О.М. Сравнение методов изотермической петлевой амплификациив режиме реального времени (LAMP) и полимеразной петлевой реакциис флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (ПЦР) для диагностики Streptococcus pneumoniae у свиней//Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицин^им^нЭ. Баумана -2023 - Том255 - №3. - С.336-343

8.Толстова Е.А., Агольцов В.А., Черных О.Ю.,Семиволос А.М., Падило Л.П., Попова О.М. Видовая принадлежность и серогрупповая вариабельность стрептококков выделяемых от свиней в Краснодарском крае//Ученые записки Казанской государственной академии

ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана -2023 - Том 255 - №3 - С.329-335

9. Толстова Е.А., Агольцов В.А., Ч Калабеков М.И.,Падило Л.П., Б Диагностика бактери инфекций у свиней с по цепной реакцией флуоресцентной детекци времени// Научная ж Выпуск 4 - С.626-638.

10.Мюллер С. Нуклеиновые кислоты «от А до Я» У/учебмре *^о|обие/С. Мюлл£р,-Москв БИНОМ. - 2013.

11. Эффективные методы выделения нуклеиновых кислот для проведения анализов в молекулярной биологии (обзор) / О. С. Антонова, Н. А. Корнева, Ю. В. Белов, В. Е. Курочкин // Научное приборостроение. - 2010.

- Т. 20. - № 1. - С. 3-9

12.Лубенникова, М. В. Выделение ДНК -важный этап молекулярно-генетического исследования / М. В. Лубенникова, В. А. Афанасьев, К. А. Афанасьев // Электронный даучно-методический журнал Омского ГАУ. -2020. - № 2(21). - С. 4

References

1.Biryuchenkova M.V., Development of methods for detecting the genome of Streptococcus suis based on polymerase chain reaction//Proceedings of the Federal Center for Animal Health Protection

- Vladimir - 2017. - Volume 15 - pp.70-81

2.Ligidova M.M., Agoltsov V.A., Padilo L.P., Gusev A.A. Therapeutic efficacy of entericim in swine enzootic pneumonia// Scientific life - 2020.

- Issue 9 - pp.1260-1269.

3.Ligidova M.M., Tolstova E.A., Semivolos A.M., Agoltsov V.A., Marinicheva M.P. Studying the pharmacokinetics of the active substances of the drug "Entrikim" when applied to animals // Agrarian Scientific journal- 2022. - No.8 - pp.4749.

4.Tolstova E.A., Agoltsov V.A., Padilo LP. Features of diagnosis and therapy of pig streptococcosis complicated by RRSS on a breeding farm// Scientific life - 2022. - Volume 17.

- Issue 1 - pp.157-166.

5.Tolstova E.A., Ligidova M.M., Padilo L.P., Semivolos A.M., Agoltsov V.A. Diagnosis, therapy and specific prevention of pig streptococcosis complicated by pasteurellosis and

mycoplasma// Agrarian Scientific No.1 - pp.71-75.

6.Tolstova E.A., Ligidova M.M., Agolts Chernykh O.Yu., Padilo L.P., Popova O. ^diagnostics with fluorescence detection in rea for rapid detection of Mycoplama hyopneumoniae

in association with Streptoco<

3tes of the

eumoniae in te Academy

igs// Scientific not of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman

- 2023 - Volume 254 - No.2 - Pp.264-272.

7.Tolstova E.A., Agoltsov V.A., Chernykh O.Yu., Padilo L.P., Popova O.M. Comparison of real-time isothermal loop amplification (LAMP) and polymerase loop reaction with real-time fluorescence detection (PCR) for the diagnosis of Streptococcus pneumoniae in pigs//Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman - 2023 -Volume 255 - No. 3. - pp.336-343

8.Tolstova E.A., Agoltsov V.A., Chernykh O.Yu.,Semivolos A.M., Padilo L.P., Popova O.M. Species and serogroup variability of streptococci isolated from pigs in the Krasnodar Territory//Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman - 2023 - Volume 255 - No. 3 - pp.329335

9. Tolstova E.A., Agoltsov V.A., Chernykh O.Yu., Kalabekov M.I.,Padilo L.P., Biryukova O.P. Diagnosis of bacterial respiratory infections in pigs using polymerase chain reaction hybridization-fluorescence detection in real time// Scientific life

- 2023. - Volume 18. - Issue 4 - pp.626-638.

10.Muller S. Nucleic acids "from A to Z" //textbook/S. Muller, Moscow: BINOM. - 2013.

11. Effective methods of nucleic acid isolation for analysis in molecular biology (review) / O. S. Antonova, N. A. Korneva, Yu. V. Belov, V. E. Kurochkin // Scientific instrumentation. - 2010. -Vol. 20. - No. 1. - pp. 3-9

12.Lubennikova, M. V. DNA isolation is an important stage of molecular genetic research / M. V. Lubennikova, V. A& ^f||iasyev, K. A. Afanasyev // Electronic scientific and methodological Journal of Omsk State Agrarian University. - 2020. - № 2(21). - p . 4

УДК 663.253 DOI 10.24412/37120-2024-9-182-187

ИССЛЕДОВАНИЕ СОСТ ОРГАНИЧЕСКИХ К БЕЛЫХ СОРТС СЕЛЕКЦИИ ВНИИВ ФРАНЦ, ПРОИЗР РОСТОВСКОЙ

Н.Н. Калмыкова, научный сотрудник лаборатории контроля качества виноградовинодельческой продукции, е-шаг [email protected], , тел:

Всероссийский научно-исследовательский институт виноградарства и виноделия имени Я.И. Потапенко - филиал ФедералъпЪг^Л государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр». Россия, г.

Новочеркасск, проспект Баклановский, 166

Аннотация. Проведен сравнительный анализ качественного и количественного состава органических кислот сусел и вин из белых сортов винограда межвидового происхождения. Объектами исследований являлись сусло и вина из белых технических сортов винограда селекции ВНИИВиВ -Платовский, Станичный, Донус, Цветочный, контроль - Алиготе (Vitis vinifera L.). Выявлено, что во всех исследуемых образцах сусла винная кислота преобладала над яблочной в несколько раз. Сорт Цветочный отличался наибольшим содержанием винной кислоты. В сусле из сорта Донус обнаружено небольшое содержание янтарной кислоты. Наибольшее значение общей доли винной и яблочной кислот от всех кислот в вине отмечено в опыте из сорта Донус (71,4 %), наименьшее в опыте из сорта Станичный. Опытный образец вина из сорта Донус также отличился наибольшим накоплением янтарной кислоты. Органолептический анализ исследуемых вин показал, что наиболее высокий балл на уровне контрольного Алиготе (8,7 балла) получил образец вина из сорта винограда Станичный, он обладал ярким сортовым ароматом.