масс-спектрометре Agilent ESI-Q-TOF 6538 UHD (Agilent Technologies, США), совмещенным с высокоэффективным жидкостным хроматографом Agilent 1260. Анализ масс-спектрометрических данных проводился в программе Spectrum Mill MS Proteomic Workbench с поиском по базе данных UniProt. После идентификации пептидов проверялось соответствие идентифицированного белка его реальному положению на геле.
Результаты исследования
Полученные после разрушения клеток с помощью лизирующего буфера RIPA элек-трофореграммы оказались недостаточно информативными по сравнению с разрушением клеток с помощью замораживания-оттаивания. Использование лизирующего буфера RIPA затрудняет прохождение изоэлектрофо-кусирования, особенно в диапазоне pH 8-10, где наблюдалось размывание белковых полос, что указывает на отсутствие нормального прохождения изоэлектрофокусирования в щелочной области. Отсутствие достаточного разделения белков в данном диапазоне pH, в котором, в частности, находятся изо-электрические точки гранзимов, одних из ос-
новных цитотоксических белков ЫК-клеток, указывает на трудности, с которыми можно будет столкнуться при проведении исследований по изменению цитотоксичности ЫК-клеток в присутствии трофобласта. При этом метод замораживания-оттаивания позволил получить адекватную 2Б-электрофореграмму протеома ЫК-клеток с возможностью идентификации и последующего анализа пятен методом масс-спектрометрии.
С помощью метода тандемной квадруполь-времяпролетной масс-спектрометрии были идентифицированы белки цитоскелета, ферменты гликолиза и другие белки — участники различных метаболических путей клетки.
Выводы
Метод масс-спектрометрического анализа позволил определить белковый профиль клеток линии ЫК-92 после их замораживания-оттаивания и дальнейшего разделения белков методом 2Б-электрофореза.
Исследование выполнено с использованием оборудования РЦ РМиКТ СПбГУ.
Работа поддержана грантами
РНФ № 17-15-01230 и РФФИ № 17-04-00679
уровень серотонина в тромбоцитах как показатель морфофункциональной зрелости мозга и готовности к рождению доношенного ребенка
© Н.А. Зверева
ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург
Актуальность проблемы
В последние десятилетия наблюдается рост у детей частоты когнитивных, эмоциональных расстройств, нарушений поведения и сна, истоки которых кроются в патологии перинатального периода жизни ребенка и широкого использования оперативного родоразрешения. Ведущую роль в механизмах программирования нервно-психических заболеваний играет серото-нинергическая система мозга, нормальное развитие которой определяет процессы дифференцировки нейронов, формирования межнейронных связей и становления циркадных ритмов, то есть готовность ребенка к рождению и адаптации в но-
вых условиях среды. Наиболее доступной и адекватной для оценки состояния серото-нинергической системы мозга является модель серотониновой системы тромбоцитов периферической крови, что определяет необходимость изучения содержания серото-нина в тромбоцитах новорожденных детей для разработки диагностических критериев патологии.
Цель исследования
Изучить содержание серотонина в богатой тромбоцитами плазме пуповинной крови и тромбоцитах венозной крови доношенных новорожденных детей различного гестацион-ного возраста.
■ ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА » ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ
ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017
ISSN 1684-0461
Материалы и методы исследования
Обследовано 88 здоровых новорожденных, масса тела — 3272,00 ± 45,85 г, рост — 51,00 ± 0,23 см, оценка по шкале Апгар — 8-9 баллов. 47 детей родились путем операции планового кесарева сечения (проведенной по показаниям: рубец на матке, заболевания глаз и позвоночника матери). В зависимости от ге-стационного возраста дети разделены на три группы: I — 37 недель (n = 20), II — 38 недель (n = 28), III — 39-40 недель (n = 40). Также изучено содержание серотонина в тромбоцитах венозной крови 38 здоровых взрослых добровольцев.
Уровень серотонина в богатой тромбоцитами плазме (БТП) определяли в крови из вены пуповины, взятой при рождении ребенка. Содержание серотонина в тромбоцитах вычисляли в результате деления количества серотонина в тромбоцитарной взвеси на число тромбоцитов в БТП, приготовленной из периферической венозной крови. Количество серотонина определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием. Хроматографический анализ проводили на колонке Reprosil 80 ODS-2 (100 х 4 мм, 3 мкм, Dr. Maisch GmbH, Германия), а детектирование — на аналитической ячейке модели 5100А
Coulochem II (ESA, США) при потенциале +0,65АВ. Статистический анализ выполняли с использованием программы Statistica 6 (Statsoft Inc., США).
Результаты исследования
Уровень серотонина в БТП достигает максимальных значений к 39-й неделе внутриутробного развития: в I группе — 0,306 ± А0,048 мкМ/л; во II — 0,426 ± 0,071 мкМ/л; в III — 0,516 ± 0,076 мкМ/л. В тромбоцитах (Tr) он возрастает более значительно, достигая максимума в 39 недель: 0,923 ± 0,113 нМ/109 Tr против 0,464 ± 0,127 нМ/109 Tr (p < 0,01) в I группе и 0,740 ± 0,191 нМ/109 Tr (p < 0,05) — во II группе. Только при достижении гестацион-ного возраста 39 недель уровень серотонина у ребенка сопоставим с таковым у взрослых (1,370 ± 0,102 нМ/10).
Вывод
В целях профилактики нарушений пост-натальной адаптации и неблагоприятных последствий для функционального развития центральной нервной системы ребенка оперативное родоразрешение необходимо планировать при достижении 39 недель беременности.
осоБЕнности системной организации физиологических функций при беременности
© К.В. Зубавина
ФГБУ «Ивановская медицинская академия» Минздрава России$
ФГБУ «ИвНИИ МиД им. В.Н. Городкова» Минздрава России, Иваново, Россия
Актуальность проблемы
Изменения в организме женщины во время беременности отмечаются во всех органах и системах, они носят приспособительный характер и обусловлены повышенной нагрузкой на все системы организма. Знание показателей гомеостаза и функций всех систем организма женщины необходимо для проведения оптимальной диспансеризации беременных и профилактики различных осложнений у матери и плода. Традиционно, понятие «биологический возраст» (БВ) широко применяется в геронтологии как показатель уровня развития
и старения организма. Мы используем БВ как показатель оценки здоровья и развития адаптационных возможностей организма. Ярким примером несоответствия календарного и БВ может служить корригированный возраст у недоношенных детей в неонатало-гии и педиатрии.
Цель исследования
Выявить динамику внутри- и межсистемной интеграции физиологических показателей, характеризующих биологический возраст, у беременных женщин в возрасте 20-34 лет.
ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ
ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017
ISSN 1684-0461 ■