Цитологические возможности постмортальной экспертизы прижизненного внутривенного или инстилляционного применения некоторых лекарственных средств Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

4. Сахаров Р.С., ФедуловаМ.В. Применение протеаз для повышения чувствительности выявления антигенов системы АВОреакцией абсорбции-элюции при исследовании следов выделений человека. //Суд.-мед. экспертиза, 1999, №6, с. 29-32

5. Сахаров Р. С., Федулова М.В., Гуреева Н.Б. и соавторы. Применение протеаз для повышения чувствительности выявления антигенов системы АВО реакцией абсорбции-элюции в следах крови. //Суд.-мед. экспертиза, 1998, №5, с. 73-74

6. Bargagna M.,Sabelli M.,Giacomelli C. The detection of Rh antigens (D,C,c,E,e) on bloodstains by a microelution technique using low ionic strength solution (LISS) and papain-treated red cells. //Forensic SciInt, 1982, vol 19, N2, p. 197-203

7. Gaensslen R.E.,Lee G.C.,Pagliaro E.M.,Bremser I.K. Evaluation of antisera for bloodstain grouping I. ABH,MN,and Rh. //J. Forensic Sci, 1985, vol. 30, N3,p. 632-654

© А.Л. Ураков, Н.С.Стрелков, П.Ю.Садилова, С.В.Иванов, Р.Т. Алхазова, Н.А. Уракова, М.Ю. Тихомирова, 2003

УДК 616-091,8-076.5:615.033

А.Л. Ураков, Н.С.Стрелков, П.Ю.Садилова, С.В.Иванов,

Р.Т. Алхазова, Н.А. Уракова, М.Ю. Тихомирова ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПОСТМОРТАЛЬНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ ПРИЖИЗНЕННОГО ВНУТРИВЕННОГО ИЛИ ИНСТИЛЛЯЦИОННОГО ПРИМЕНЕНИЯ

НЕКОТОРЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Кафедра общей и клинической фармакологии (зав. кафедрой - профессор А.Л. Ураков) Ижевской государственной медицинской академии

В статье показана возможность появления необратимых морфологических изменений в эритроцитах и эпителиоцитах после кратковременного взаимодействия порции крови с 24% и 2,4% раствором эуфиллина и конъюнктивы глазного яблока с 20% раствором сульфацила натрия соответственно.

Ключевые слова: эритроцит, эпителиоцит, эуфиллин, сульфацил натрия.

A.L.Urakov, N.S. Strelkov, P.U. Sadilova, S.V. Ivanov,

R.T. Alkhazova, N.A. Urakova, M.U. Tihomirova CYTOLOGYCAL OF AN OPPORTUNITY POSTMORTAL OF EXAMINATION INTRAVITAL INTRAVENOUS OR INSTILLATION OF APPLICATION OF SOME MEDICINAL AGENTS

Izhevsk

The possibility of appearance of irreversible morphological changes in erythrocytes and epithelyocytes after short-term interaction of blood portion with 24% and 2,4% solutions ofeuphillini as well as the bulbar conjunctiva with 20% solutions albucidi respectively has been revealed.

Keywords: erythrocytes, epithelyocytes, euphillini, albucidi.

Посмертное определение факта и роли прижизненного применения лекарственных средств может быть осуществлено по выявлению их в определенных концентрациях в тканях трупа, а также по анализу информации, содержащейся в медицинской карте (в случае госпитальной смерти) [2] с учетом роли величин физико-химических показателей качества примененных лекарственных средств определенных серий и заводов изготовителей [1, 3]. При отсутствии этих данных и при невозможности обнаружения лекарственных средств в тканях покойного остается надежда на выявление каких-либо "следов" их пребывания хотя бы в местах непосредственного первичного введения, например в виде измененных эритроцитов после появления порции крови внутри шприца или измененных эпи-телиоцитов после введения лекарств в полость конъюнктивы. Поскольку степень выраженности местного действия лекарственных средств напрямую определяется величиной их концентрации [4], появление цитологических изменений наиболее вероятно при введении концентрированных растворов лекарственных средств. В частности, их появление, по-нашему мнению, весьма вероятно при использовании 24% эуфиллина и 20% альбуцида. Проверке указанного предположения и посвящена данная работа.

Цитологическое исследование эритроцитов произведено до и после смешивания порции крови, взятой из вены пациентов, с порцией 24 или 2,4 % раствора эуфиллина "Московского эндокринного завода" в соотношении 1 : 1 при температуре 22 - 24 С. Мазки крови готовили по стандартной методике и окрашивали по Романовскому-Гим-зе. Диаметр эритроцитов измерялся с помощью микро-

метра МОВ-1-15х на микроскопе БИОЛАМ-ЛОМО, при увеличении 40 нм. Морфологическое состояние эритроцитов оценено при 1000-кратном иммерсионном увеличении с помощью микроскопа "ЛОМО-МИКМЕД-2".

Цитологическое исследование эпителиоцитов до и после инстилляции 20 или 10% раствора сульфацила натрия (аптека РОКБ, г. Ижевск) в конъюнктивальную полость пациентов произведено посредством оценки состояния конъюнктивы глазного яблока. Соскобы приготовлены по стандартной методике. Определение размеров и оценка морфологического состояния эпителиоцитов произведены аналогично исследованию эритроцитов.

В результате проведенных исследований установлено, что до взаимодействия крови с лекарством эритроциты имели дисковидную форму, их диаметр был равен 7,2±1,3 мк (Р<0,05, n=30), что соответствовало физиологической норме. Через минутупосле взаимодействия крови с 24% раствором эуфиллина в мазках абсолютное большинство эритроцитов, а именно -79 6,8% (Р<0,05, n=30), оказалось неправильной формы, с диаметром, уменьшенным до 4,3±0,3 мк (Р<0,05, n=30), с просветлением в центре, с выраженной базофилией и выраженной анизохромной реакцией. Анизоцитоз эритроцитов составил 98±9,9% (Р<0,05, n=30). При этом почти все эритроциты оказались с разрушенной плазмолеммой и склеенными в цепочки от 3 до 18 клеток, напоминая собой картину "сладж"-феномена.

Продление периода взаимодействия порции крови с 24% раствором эуфиллина до 3-х минут ведет к усилению указанных выше морфологических дефектов в эритроцитах (Рис. 1). Так, анизоцитоз при этом достиг 100%, соот-

Рис. 1. Микропрепарат мазка крови человека результата 3-х минутного взаимодействия порции крови с порцией 24% эуфиллина. Окраска по Романовскому-Гимзе, увеличение х 1000.

ношение измененных по форме эритроцитов достигло 87 5,9% (Р<0,05, n=30), диаметр эритроцитов уменьшился до 3,9±0,1 мк (Р<0,05, n=30).

Взаимодействие крови с раствором 2,4% эуфиллина на протяжении 1 минуты не ведет к выраженным изменениям в состоянии красных форменных элементов крови. Однако, при увеличении продолжительности их взаимодействия друг с другом до 3-х минут выявляются следующие изменения: анизоцитоз достигает 43±3,9% (Р<0,05, n=30), эхиноцитоз достигает 37±2,7% (Р<0,05, n=30), Диаметр эритроцитов увеличивается до 9,4 1,3 мк (Р<0,05, n=30). Кроме того, выявляется синдром сладжирования эритроцитов, с преобладанием цепочек из 2 - 3 клеток.

В результате проведенных исследований установлено, что до взаимодействия конъюнктивы глазного яблока с лекарством эпителиоциты имели несколько уплощенную форму, их длина была равна 82,2±7,3 мк (Р<0,05, n=30), диаметр ядра составлял 39,5±2,2 мк (Р<0,05, n=30), что соответствовало физиологической норме. Через минуту после взаимодействия с 20% раствором сульфацила натрия выявлены значительные изменения в состоянии эпите-лиоцитов конъюнктивы глазного яблока. Определяются увеличенные в размерах эпителиоциты - их длина оказалась равной 100,1±9,3мк (Р<0,05, n=30), размеры ядра так же увеличились - 47,2±2,6 мк (Р<0,05, n=30), признаки гид-ропической дегенерации клеток.

Продление периода взаимодействия клеток конъюнктивы глазного яблока с порцией лекарства до 3-х минут повышает повреждающее действие 20% раствора сульфацила натрия. Так, появились признаки кариопикноза, объем

Рис. 2. Микропрепарат соскоба с конъюнктивы глазного яблока пациента У. после 3-х минутного взаимодействия с 20% раствором сульфацила натрия при 23 С. Окраска по Романовскому-Гимзе, увеличение х 1000.

цитоплазмы резко увеличился, наблюдалось растяжение и разрывы цитоплазматической мембраны. Длина эпители-оцитов составляла 138±11,3 мк (Р<0,05, n=30)

Через 5 минут взаимодействия клеток конъюнктивы глазного яблока с порцией 20% раствора сульфацила натрия цитоплазма не определялась, наблюдались деформированные и уменьшенные в размерах ядра эпителиоци-тов диаметром 44,3±2,9 мк (Р<0,05, n=30), кариорексис, тельца Русселя.

Взаимодействие крови с раствором 10% сульфацила натрия на протяжении 1 минуты не ведет к выраженным изменениям в состоянии эпителиоцитов. Однако, увеличении продолжительности их взаимодействия друг с другом до 3-х минут ведет к увеличению размеров эпителио-цитов до 97,1±6,1 мк (Р<0,05, n=30) и появляются признаки гидропической дегенерации клеток (Рис. 2). Увеличение продолжительности взаимодействия до 5 минут ведет к еще более выраженным повреждениям эпителиоцитов -объем цитоплазмы значительно увеличивается, размер клеток составляет 123±7,9 мк (Р<0,05, n=30), появляются признаки кариопикноза и растяжения плазмолеммы.

Таким образом, цитологическая оценка форменных элементов крови и эпителиоцитов конъюнктивы глазного яблока после взаимодействия их с порцией лекарственного средства позволяет выявлять значительные, устойчивые и хронозависимые морфологические изменения в клетках, что позволяет судить о вероятности прижизненного применения исследованных лекарств, а также аналогичных им препаратов при неэффективности или невозможности других, более точных судебно-химических исследований.

Литература:

1. Ураков А.Л., УраковаН.А, ТереховВ.З., КорепановаН.Ю, ФедороваИ.В, ФоминаН.В. Схема постмортальной фармакологической экспертизы правильности выбора, эффективности и безопастности назначения лекарственных средств при госпитальной смерти пациентов//Проблемы экспертизы в медицине. - 2002. - № 1. - С. 17 -18.

2. Ураков А.Л., Коровяков А.П., КорепановаМ.В., Кравчук А.П., УраковаН.А. Постмортальная клинико-фармакологическая оценка влияния инфузионно введенных в стационаре лекарственных средств на процесс прижизненного развития гипо- или гперосмотичес-киой комы// проблемы экспертизы в медицине. - 2001. - № 2. - С. 22 - 23.

3. Стрелков Н.С, Ураков А.Л., Коровяков А.П., ПоздеевА.Р, КорепановаМ.В., УраковаН.А., ПесковаМ.В. Постмортальная клиникоморфологическая оценка влияния введенных в вену растворов лекарственных средств на процесс прижизненного развития ацидоза или алкалоза//Проблемы экспертизы в медицине. - 2002. - № 3. - С. 12 - 14.

4. Ураков А.Л. Основы клинической фармакологии. - Ижевск: Ижевский полиграфкомбинат, 1997. - 164с.