CC BY
45
УДК 576.6:631.529:634.511
DOI: 10.24411/1728-323X-2020-12045
ЦИТОЭКОЛОГИЯ ОРЕХА ГРЕЦКОГО (JUGLANS REGIA L.) В УСЛОВИЯХ ИНТРОДУКЦИИ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ
С. С. Карпова, кандидат биологических наук, преподаватель, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный институт физической культуры» (ВГИФК), [email protected], Воронеж, Россия,
Ф. Р. Х. Аль-Хачами, аспирант, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), [email protected], Воронеж, Россия, В. Н. Калаев, доктор биологических наук, профессор, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), [email protected], Воронеж, Россия, И. В. Игнатова, преподаватель, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), [email protected], Воронеж, Россия, В. А. Славский, кандидат сельскохозяйственных наук, доцент, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный лесотехнический университет им. Г. Ф. Морозова» (ВГЛТУ), [email protected], Воронеж, Россия
Проведено изучение цитогенетических характеристик семенного потомства деревьев инт-родуцента — ореха грецкого (Juglans regia L.), длительное время произрастающих на территории Воронежской области. Показано преимущественно стабильное протекание митоза в клетках корневой меристемы проростков. Отмечается средний уровень митотической активности (5,8 ± 0,4 % и 3,8 ± 0,3 %, с учетом и без учета профазных клеток соответственно), низкий уровень патологий (6,0 ± 0,8 %) и остаточных ядрышек в митозе (0,6 ± 0,2 %). Представлены микрофотографии некоторых видов функциональных и структурных нарушений клеточного деления. Приводится описание и фотографии ядрышек, наблюдавшихся в интерфазных клетках проростков семенного потомства ореха грецкого. Отмечается значительная функциональная активность ядрышкового аппарата с преимущественным преобладанием в спектре высокоактивных типов ядрышек — «кора-сердцевина» (66,7 ± 3,0 %) и компактных (3,0 ± 1,2 %). Умеренноактивные ядрышки типа «кора-сердцевина» с вакуолью встречались с частотой 30,2 ± 3,0 %, а их пониженная активность компенсируется увеличением площади их поверхности. Делается вывод о хорошей адаптации материнских растений к условиям произрастания в Воронежской области и возможности рекомендовать их семенное потомство для отбора форм ореха грецкого с лучшими для данных экологических условий качествами.
The cytogenetic study of the walnut (Juglans regia L.) seed progeny, the mother trees of which have been introducing and growing in the Voronezh Region for a long time, was made in the paper. Pre-
Введение
Орех грецкий (Juglans regia L.) по праву занимает ведущее место среди орехоплодных культур в России по потреблению, однако продукция, поступающая на российский рынок, имеет преимущественно зарубежное происхождение. Территория России располагает достаточным количеством площадей, пригодных для разведения данной культуры, но сама отрасль ореховодства развита слабо. В связи с этим перед селекционерами стоит задача в подробном и всестороннем изучении ореха грецкого, выделении наиболее ц енных форм и разведении устойчивых растений с плодами высокого качества [1].
В последние десятилетия проведено немало исследований биологических и экологических показателей ореха грецкого в условиях интродукции в различных странах и в России [2—6]. Отмечается, что орехи рода Juglans успешно произрастают и стабильно плодоносят на территории Воронежской области [7]. В то же время, орех грецкий слабо изучен с позиций генетики и ци-тогенетики. К настоящему моменту известно, что в диплоидном наборе у ореха грецкого 32 хромосомы (2n = 32) [8], но отсутствуют сведения о протекании клеточного деления на ранних этапах прорастания семян. Изучение цитологических основ наследственности семенного потомства необходимо для оценки стабильности генетической системы растений, произрастающих вне привычных для данного вида условий обитания. Такие исследования важны как для ускоренной оценки отобранных деревьев, так и для раннего определения наследственных свойств их потомства. Целенаправленный отбор на наследственно обусловленную повышенную экологическую устойчивость древесных видов-интродуцентов будет способствовать улучшению качества селекционной работы [9—11].
dominantly stable course of mitosis in the root meristematic cells of the seedlings was shown. The high level of mitotic activity was 5.8 ± 0.4 % (taking into account prophase cells) and 3.8 ± 0.3 % (excluding prophase cells), low levels of pathologies (6.0 ± 0.8 %) and persistent nucleoli in mitosis (0.6 ± 0.2 %) were registered. Micrographs of some types of functional and structural disorders of cell division were presented. The description and micrographs of nucleoli in the interphase cells of the walnut seedlings were given. The significant functional activity of the nucleolar apparatus with a predominance in the spectrum of highly active types of nucleoli ("bark-core" (66.7 ± 3.0 %) and compact (3.0 ± 1.2 %)) were observed. Moderately-active nucleoli ("bark-core" type with vacuole) were found at the frequency of 30.2 ± 3.0 %. Their reduced activity is compensated by the increase in their surface area. It was concluded that the mother plants were well adapted to the growing conditions in the Voronezh Region and that it is possible to recommend their seed offspring to select the walnut forms with the best qualities for the given environmental conditions.
Ключевые слова: митоз, орех грецкий, патология митоза, остаточное ядрышко, цитогене-тические характеристики, ядрышковые характеристики.
Keywords: mitosis, walnut, pathological mitosis, persistent nucleolus, cytogenetic characteristics, nucleolar characteristics.
Ранее проводилось изучение вариабельности цитогенети-ческих характеристик в семенном потомстве лиственных ле-сообразующих пород Центрального Черноземья — дуба че-решчатого (Quercus robur L.) и березы повислой (Betula pendula Roth) [12, 13], а также некоторых интродуцентов, длительное время произрастающих на территории Воронежской области (катальпа гибридная, различные виды рододендронов) [14, 15]. Было показано, что на изменения цитогенетических показателей в семенном потомстве данных видов растений оказывают влияние условия произрастания материнских деревьев. В неблагоприятных условиях происходит изменение уровня митотической активности (усиление или депрессия), возрастает количество и расширяется спектр патологических митозов, изменяется синтетическая активность ядрышек. Прогностическое значение изучения цитогенетических характеристик проростков для селекционной работы было обосновано при изучении семенного потомства дуба черешчатого: было установлено, что проростки с высоким уровнем цитогенетических нарушений и низкой ядрышковой активностью обладали худшими ростовыми показателями [16].
В связи с изложенным выше целью нашего исследования явилось описание цитогенетических характеристик семенного потомства деревьев ореха грецкого, произрастающих на территории Воронежской области, для оценки степени адаптации материнских растений к новым условиям произрастания и возможности использования их семенного потомства для дальнейшей селекционной работы.
Материалы и методы
Для проведения эксперимента были отобраны фенотипи-чески нормальные деревья ореха грецкого семенного происхождения в возрасте 30—40 лет, произрастающие на частном приусадебном участке в г. Воронеже. Плоды ореха урожая 2017 г. в количестве 200 штук были поставлены на проращивание во влажном песке без проведения стратификации. По достижении проростками длины 1—2 см производили их фиксацию в этанол-уксусном фиксаторе в 9 ч утра. Изготовление микропрепаратов проводили по общепринятой методике [11]. Нами было просмотрено на микроскопе Laboval-4 (Carl Zeiss, Jena) 40 микропрепаратов (1 проросток — 1 микропрепарат).
При цитологическом изучении семенного потомства ореха грецкого на препаратах учитывали общее количество просмотренных клеток (не менее 700), фиксировали количество клеток на различных стадиях митоза, количество и тип патологических митозов, количество остаточных ядрышек на стадии метафазы, анафазы, телофазы. На основании полученных данных вычисляли (в %) митотический индекс, долю патологических митозов, долю каждого типа нарушений клеточного деления (в соответствии с классификацией Алова [16]) и долю клеток с остаточными ядрышками на стадиях метафазы — анафазы митоза.
Для изучения ядрышковых характеристик в клетках корневой меристемы семенного потомства ореха грецкого производили измерение диаметра ядрышек с помощью окуляр -микрометра (анализировали по 200 клеток на каждом микро-
препарате) и высчитывали площадь поверхности ядрышек (мкм2); учитывали количество клеток с разным числом ядрышек и вычисляли их долю (%); определяли долю (%) ядрышек различных типов по классификации, разработанной Челидзе и Зацепиной [17].
Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета статистических программ Stadia 7.0 Professional по рекомендациям, описанным в работе Калаевой с соавт. [18].
Результаты и обсуждение
Средние значения цитогенетических показателей семенного потомства ореха грецкого представлены в таблице 1.
Нами было показано, что в целом по средним значениям всех изученных цитогенетических критериев показатели семенного потомства ореха грецкого сопоставимы с таковыми как у аборигенных видов лиственных древесных растений (дуб черешчатый, береза повислая), так и у других лиственных интродуцентов (различные виды рододендронов, катальпы гибридной), длительное время произрастающих на территории Воронежской области [12—16]. Это свидетельствует о высоком уровне адаптации ореха грецкого к новым для данного вида условиям произрастания.
Распределение клеток по стадиям митоза в корневой меристеме проростков ореха грецкого отражает продолжительность разных стадий митоза в нормальных физиологических условиях: наибольшие значения отмечались у показателей «доля клеток на стадии профазы» и «доля клеток на стадии анафазы-телофазы митоза», т.е. на стадиях, связанных с процессами синтеза: профаза и телофаза.
Типичными нарушениями митоза у ореха грецкого (табл. 2) являлись отставания хромосом в метакинезе и анафазе митоза, мосты в ана- и те-лофазе, а также агглютинации хромосом в мета-фазе. К числу редких патологий (1,6 %) относятся многополюсный и асимметричный митоз. У ореха грецкого не было выявлено каких-либо нарушений митоза, которые не встречались бы у других ранее изученных лиственных растений, произрастающих в условиях Воронежской области. Фотографии некоторых патологий представлены на рис. 1.
В меристеме проростков ореха грецкого обнаружено явление присутствия остаточного ядрышка на стадии метафазы, анафазы, телофазы (рис. 2). Остаточные ядрышки наблюдались в виде округлых образований по одну из сторон мета-фазной пластинки, отдельно от нее либо соединенные с ней. В анафазе и телофазе остаточные ядрышки, как правило, оттесняются к одному из
полюсов клетки. Появление остаточных ядрышек в делящихся клетках, вероятно, обусловлено компенсаторным синтезом белка, необходимым для поддержания нормального прохождения митоза [19]. Необходимо отметить, что данное функциональное нарушение — довольно редкое явление в клетках ореха грецкого по сравнению с другими изученными видами лиственных, что подтверждает предположение о стабильности протекания процессов клеточного деления в новых для вида природных условиях.
В м еристеме проростков семян ореха грецкого отмечается высокая пластичность ядрышковых
Таблица 1
Цитогенетические характеристики проростков семян ореха грецкого при интродукции в Воронежской области
Цитогенетические показатели Среднее значение, % Пределы варьирования (95 % доверительный интервал)
Митотический индекс 5,8 ± 0,4 от 5,0 до 6,5
Митотический индекс без 3,8 ± 0,3 от 3,2 до 4,3
учета клеток на стадии
профазы
Доля клеток на стадии
профазы 34,5 ± 2,5 от 29,6 до 39,6
метафазы 18,1 ± 1,4 от 15,4 до 20,9
анафазы-телофазы 47,4 ± 1,9 от 44,0 до 51,5
Уровень патологий митоза 6,0 ± 0,8 от 4,4 до 7,6
Уровень патологий м итоза 9,1 ± 1,1 от 6,9 до 11,3
без учета клеток на стадии
профазы
Частота встречаемости 0,6 ± 0,2 от 0,2 до 1,0
остаточных ядрышек
в митозе
Таблица 2
Спектр патологических митозов в корневой меристеме проростков ореха грецкого при интродукции в Воронежской области
Тип патологий Частота встречаемости патологий, % Пределы варьирования (95 % доверительный интервал)
Отставание хромосом 37,2 ± 4,1 от 29,2 до 46
в метакинезе
Мост 29,5 ± 3,9 от 22,1 до 38,0
Отставание хромосом 21,7 ± 3,5 от 15,3 до 29,7
в анафазе
Агглютинация 10,1 ± 2,6 от 5,9 до 16,6
Редкие патологии 1,6 ± 1,1 от 0,4 до 5,5
Рис. 1. Некоторые типы патологических митозов в клетках корневой меристемы проростков ореха грецкого (а — агглютинация хромосом в метафазе; б — мосты в анафазе; в — отставание хромосом в метакинезе;
г — многополюсный митоз)
Рис. 2. Остаточные ядрышки на различных стадиях метафазы (а, б), анафазы (в) и телофазы (г) митоза в клетках
корневой меристемы проростков ореха грецкого
•к. I «I»
Л-
т
*
в) г)
Рис. 3. Ядрышки различных типов в клетках корневой меристемы проростков ореха грецкого (а — «кора-сердцевина», б — «кора-сердцевина» с вакуолью, в — компактные, г — вакуолизированные)
Таблица 3 Характеристики ядрышкового аппарата в интерфазных клетках корневой меристемы проростков семян ореха грецкого при интродукции в Воронежской области
характеристик, проявляющаяся в изменении размеров, морфологии и количества ядрышек в ядре (табл. 3), что рассматривается рядом авторов в качестве главного признака при адаптации к неблагоприятным факторам среды [14, 20].
В интерфазных клетках проростков ореха грецкого наблюдались такие же типы ядрышек, как и у аборигенных видов древесных (дуб череш-чатый, береза повислая). Фотографии обнаруженных в клетках ядрышек представлены на рис. 3.
Как видно из табл. 3, чаще в спектре обнаруживались высокоактивные типы ядрышек: «кора-сердцевина» и компактные. Менее функционально активные ядрышки типа «кора-сердцевина с вакуолью» и вакуолизированные встречались реже. Преобладание высокоактивных ядрышек в клетках корня проростков ореха грецкого согласуется с представлениями о высоком уровне синтетических процессов в активно пролифери-рующих клетках меристемы. В то же время, наибольшая площадь поверхности наблюдалась у ядрышек типа «кора-сердцевина с вакуолью». Увеличение размеров ядрышек, по-видимому, может являться своеобразным механизмом компенсации пониженной функциональной активности данного типа ядрышек, обусловленной вакуолизацией ядрышка. Изменения такого рода носят
Цитогенетические показатели Среднее значение, % Пределы изменчивости (95 %-й доверительный интервал)
Частота встречаемости 2,3 ± 0,2 от 1,9 до 2,7
клеток с д вумя ядрышка-
ми в ядре
Частота встречаемости
ядрышек различных
типов
«кора-сердцевина» 66,7 ± 3,0 от 60,6 до 72,8
«кора-сердцевина» 30,2 ± 3,0 от 24,2 до 36,2
с вакуолью
вакуолизированных 0,2 ± 0,1 от 0,0 до 0,4
компактных 3,0 ± 1,2 от 0,6 до 5,4
Площадь поверхности 85,5 ± 2,0 от 81,5 до 89,4
ядрышек в клетках
с 1 ядрышком в ядре
Площади поверхности
ядрышек различных
типов
«кора-сердцевина» 81,1 ± 1,7 от 77,7 до 84,4
«кора-сердцевина» 101,7 ± 3,0 от 95,7 до 107,7
с вакуолью
вакуолизированных 74,6 ± 2,5 от 66,9 до 82,5
компактных 36,6 ± 3,1 от 27,1 до 43,1
адаптивный характер и необходимы для восстановления нормального уровня синтеза белка в активно делящейся меристеме корня.
В меристеме корней проростков семян ореха грецкого отмечались также клетки с двумя ядрышками в ядре. Вероятно, у ореха грецкого имеется одна пара хромосом с ядрышковыми организаторами, а наличие одно- и двуядрышковых клеток свидетельствует о морфо-функциональ-ных переходах в работе синтетического аппарата клеток корня.
Заключение. Произрастающие на территории Воронежской области деревья ореха грецкого про-
дуцируют семенное потомство, отличающееся довольно стабильными цитогенетическими показателями. Высокий уровень митотической и яд-рышковой активности, а также низкие уровни нарушений клеточного деления и остаточных ядрышек в митозе позволяют сделать вывод о высокой степени адаптации материнских деревьев интродуцента — ореха грецкого к условиям произрастания в Воронежской области. Продуцируемое ими потомство возможно рекомендовать для последующей селекционной работы по выведению сортов, обладающих лучшими качествами в данных экологических условиях.
Библиографический список
1. Корниенко П. С., Потанин Д. В. Перспективы выращивания ореха грецкого в Республике Крым и России // Наука вчера, сегодня, завтра: сб. ст. по матер. XLII междунар. науч.-практ. конф. № 1(35). — Новосибирск: СибАК, 2017. — С. 77—92.
2. Балапанов И. М. Биологические аспекты в селекции ореха грецкого // Научный журнал КубГАУ. — 2014. — № 101 (07). — С. 828—842.
3. Биганова С. Г., Сухоруких Ю. И., Луговской А. П. Современные тенденции селекции ореха грецкого в России // Современные проблемы науки и образования. — 2015. — № 2. — С. 531.
4. Gauthier M. M., Jacobs D. F. Walnut (Juglans spp.) ecophysiology in response to environmental stresses and potential acclimation to climate change Annals of Forest Science. — 2011. — V. 68 (8). — P. 1277—1290.
5. Solar A., Ivancic A., Stampar F., Hudina M. Genetic resources of walnut (Juglans regia L.) improvement in Slovenia: Evaluation of the largest collection of local genotypes // Genet. Resour. Crop. Evol. — 2002. — Vol. 49 (5) — P. 191—501.
6. Славский В. А., Тимащук Д. А., Мироненко А. В. Районирование ореха грецкого в Воронежской области по зонам устойчивости к неблагоприятным факторам // Лесотехнический журнал. — 2017. — Т. 7, № 3. — С. 143—150.
7. Hans A. S. Chromosome numbers in the Juglandaceae // Journal of the Arnold Arboretum. — 1970. — Vol. 51, No. 4. — P. 534—539.
8. Буторина А. К. Способ предварительной генетической оценки отобранных плюсовых деревьев для создания кло-новых и семенных плантаций // Лесохозяйственная информация, рекомендуемая для внедрения. — М.: ВНИИЦ Лесресурс, 1989. — Вып. 8. — С. 8—12.
9. Zoldos V., Besendorfer V., Jelenic S., Lorkovic Z. J., Littvay T., Papes D. Cytogenetic damages as an indicator of pedunculate oak forest decline // Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. — Zagreb, 1997. — P. 275—284.
10. Богданова Е. В. Цитогенетическая характеристика гомеостаза древесных видов — интродуцентов: автореферат дис. ... кандидата биологических наук: 03.00.15 / Ин-т биологии развития им. Н. К. Кольцова РАН. — Москва, 2004. — 24 с.
11. Буторина А. К., Калаев В. Н., Вострикова Т. В., Мягкова O. E. Цитогенетическая характеристика семенного потомства некоторых видов древесных растений в условиях антропогенного загрязнения г. Воронежа // Цитология. — 2000. — 42, № 2. — С. 196—201.
12. Kalaev V. N., Butorina A. K. Cytogenetic effect of radiation in seed of oak (Quercus robur L.) trees growing on sites contaminated by Chernobyl fallout // Silvae Genetica. — 2006. — Vol. 55, No. 3. — Pp. 93—101.
13. Kalaev V. N., Karpova S. S., Artyukhov V. G. Cytogenetic characteristics of weeping birch (Betula pendula Roth) seed progeny in different ecological conditions // Bioremediation, Biodiversity and Bioavailability. — 2010. — Vol. 4, No. S1. — P. 77—83.
14. Назарова М. Н., Некрылова Е. А., Животягина М. В. Особенности митоза у видов рода Catalpa Scop. при интродукции в условиях г. Воронежа // Цитология. — 1999. — Т. 41, № 12. — С. 1072.
15. Калаев В. Н., Попова А. А. Цитогенетические характеристики и морфологические показатели семенного потомства деревьев дуба черешчатого (Quercus robur L.), произрастающих на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения // Вестник Воронежского государственного университета. Серия Химия. Биология. Фармация. — 2014. — № 4. — С. 63—72.
16. Алов И. А. О делении опухолевых клеток // Вопросы онкологии. — 1965. — Т. 1, № 6. — С. 40—45.
17. Челидзе В. П., Зацепина О. В. Морфофункциональная классификация ядрышек // Успехи современной биологии. — 1988. — Т. 105, вып. 2. — С. 252—267.
18. Калаева Е. А., Артюхов В. Г., Калаев В. Н. Теоретические основы и практическое применение математической статистики в биологических исследованиях и образовании: учебник. — Воронеж: Издательский д ом ВГУ, 2016. — 282 с.
19. Butorina A. K., Kosichenko N. E., Isakov Y. N., Pozhidaeva I. M. The effects of irradiation from the Chernobyl nuclear power plant accident on the cytogenetic behavior and anatomy of trees // Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. — Zagreb, 1997. — P. 211—226.
20. Grummt I. The nucleolus-guardian of cellular homeostasis and genome integrity // Chromosoma. — 2013. — Vol. 122. — P. 487—497.
CYTOECOLOGY OF THE WALNUT (JUGLANS REGIA L.) UNDER THE CONDITIONS OF INTRODUCTION IN THE VORONEZH REGION
S. S. Karpova, Ph.D. (Biology), Lecturer, Voronezh State Institute of Physical Training (VSIPT), [email protected], Voronezh, Russia, F. R. H. Al-Hachami, postgraduate student, Voronezh State University (VSU), [email protected], Voronezh, Russia, V. N. Kalaev, Ph.D. (Biology), Dr. Habil, Professor, Voronezh State University (VSU), [email protected], Voronezh, Russia, I. V. Ignatova, Lecturer, Voronezh State University (VSU), [email protected], Voronezh, Russia,
V. A. Slavskiy, Ph.D. (Agriculture), Associate Professor, Morozov Voronezh State University of Forestry and Technologies (VSUFT), [email protected], Voronezh, Russia
References
1. Kornienko P. S., Potanin D. V. Perspektivy vyrashchivaniya orekha gretskogo v Respublike Krym i Rossii. [Prospects of cultivation of the walnut in the Republic of Crimea and Russia]. Nauka vchera, segodnya, zavtra: sbornik statey po mater. XLII mezhdunar. nauch.-prakt. konf. № 1 (35). [ Science ofyesterday, today, tomorrow: collected articles on the proceedings of the XLII International Scientific and Practical Conference. No 1 (35)]. Novosibirsk, SibAK, 2017. P. 77—92 [in Russian].
2. Balapanov I. M. Biologicheskie aspekty v selektsii orekha gretskogo [Biological aspects in the breeding of the walnut]. Nauch-nyj zhurnal KubGAU [Scientific Journal of KubSAU]. 2014. No 101 (07). P. 828—842 [in Russian].
3. Biganova S. G., Sukhorukih Yu. I., Lugovskoy A. P. Sovremennye tendentsii selektsii orekha gretskogo v Rossii [Modern trends in the walnut selection in Russia]. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Modern problems of science and education]. 2015. Vol. 2. P. 531 [in Russian].
4. Gauthier M. M., Jacobs D. F. Walnut (Juglans spp.) ecophysiology in response to environmental stresses and potential acclimation to climate change. Annals of Forest Science. 2011. Vol. 68 (8). P. 1277—1290.
5. Solar A., Ivancic A., Stampar F., Hudina M. Genetic resources of walnut (Juglans regia L.) improvement in Slovenia: Evaluation of the largest collection of local genotypes. Genet. Resour. Crop. Evol. 2002. Vol. 49 (5). P. 191—501.
6. Slavskiy V. A., Timashchuk D. A., Mironenko A. V. Rajonirovanie orekha gretskogo v Voronezhskoj oblasti po zonam usto-jchivosti k neblagopriyatnym faktoram [Zoning of Juglans Regia in the Voronezh Region in the Zones of Resistance to Adverse Factors]. Lesotekhnicheskij zhurnal [Forestry Engineering journal]. 2017. Vol. 7 (3). P. 143—150 (in Russian).
7. Hans A. S. Chromosome numbers in the Juglan daceae. Journal of the Arnold Arboretum. 1970. Vol. 51. No 4. P. 534—539.
8. Butorina A. K. Sposob predvaritel'noj geneticheskoj otsenki otobrannyh plyusovyh derev'ev dlya sozdaniya klonovyh i semen-nyh plantatsij [Method for preliminary genetic evaluation of selected plus trees for creating clone and seed plantations]. Le-sohozyajstvennaya informatsiya, rekomenduemaya dlya vnedreniya [Forestry information recommended for implementation]. Moscow, VNIIC Lesresurs. 1989. Vol. 8. P. 8—12 [in Russian].
9. Zoldos V., Besendorfer V., Jelenic S., Lorkovic Z. J., Littvay T., Papes D. Cytogenetic damages as an indicator of pedunculate oak forest decline. Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. Zagreb, 1997. P. 275—284.
10. Bogdanova E. V. Tsitogeneticheskaya harakteristika gomeostaza drevesnyh vidov — introdutsentov: avtoreferat dis. ... kandi-data biologicheskih nauk: 03.00.15 [Cytogenetic characteristics of homeostasis of tree species-introducers: abstract of dis. for Ph.D. in Biology: 03.00.15]. Institut biologii razvitiya im. N. K. Kol'cova RAN. Moscow, 2004. 24 p. [in Russian].
11. Butorina A. K., Kalaev V. N., Vostrikova T. V., Myagkova O. E. Citogeneticheskaya harakteristika semennogo potomstva nekotoryh vidov drevesnyh rastenij v usloviyah antropogennogo zagryazneniya goroda Voronezha [Cytogenetic characteristics of seed progeny of some species of woody plants under conditions of anthropogenic pollution in Voronezh]. Tsitologiya [Cytology]. 2000. Vol. 42 (2). P. 196—201 [in Russian].
12. Kalaev V. N., Butorina A. K. Cytogenetic effect of radiation in seeds of oak (Quercus robur L.) trees growing on the sites contaminated by the Chernobyl desaster. Silvae Genetica. 2006. Vol. 55 (3). P. 93—101.
13. Kalaev V. N., Karpova S. S., Artyukhov V. G. Cytogenetic characteristics of weeping birch (Betulapendula Roth) seed progeny in different ecological conditions. Bioremediation, Biodiversity and Bioavailability. 2010. Vol. 4 (S1). P. 77—83.
14. Nazarova M. N., Nekrylova E. A., Zhivotyagina M. V. Osobennosti mitoza u vidov roda Catalpa Scop. pri introduktsii v usloviyah goroda Voronezha [Features of mitosis in species of the genus Catalpa Scop. at introduction in the conditions of Voronezh]. Tsitologiya [Cytology]. 1999. Vol. 41 (12). P. 1072 [in Russian].
15. Kalaev V. N., Popova A. A. Tsitogeneticheskie harakteristiki i morfologicheskie pokazateli semennogo potomstva derev'ev duba chereshchatogo (Quercus robur L.), proizrastayushchih na territoriyah s raznym urovnem antropogennogo zagryazneniya [Cytogenetic characteristics and morphological indicators of seed progeny of oak trees (Quercus robur L.) growing in territories with different levels of anthropogenic pollution]. Vestnik Voronezhskogogosudarstvennogo universiteta. Seriya Himiya. Biologiya. Farmaciya [Proceedings of Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy]. 2014. Vol.4. P. 63—72 [in Russian].
16. Alov I. A. O delenii opuholevyh kletok [About the division of tumor cells]. Voprosy onkologii [Questions of Oncology]. 1965. Vol. 1 (6). P. 40—45 [in Russian].
17. Chelidze V. P., Zatsepina O. V. Morfofunktsional'naya klassifikatsiya yadryshek [Morphofunctional classification of nucleoli]. Uspekhi sovremennoj biologii [Advances in modern biology]. 1988. Vol. 105 (2). P. 252—267 [in Russian].
18. Kalaeva E. A., Artyukhov V. G., Kalaev V. N. Teoreticheskie osnovy i prakticheskoe primenenie matematicheskoj statistiki v biologicheskih issledovaniyah i obrazovanii: uchebnik [Theoretical foundations and practical application of mathematical statistics in biological research and education: textbook]. Voronezh, Izdatel'skij dom VGU, 2016. 282 p. [in Russian].
19. Butorina A. K., Kosichenko N. E., Isakov Y. N., Pozhidaeva I. M. The effects of irradiation from the Chernobyl nuclear power plant accident on the cytogenetic behavior and anatomy of trees. Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. Zagreb. 1997. P. 211—226.
20. Grummt I. The nucleolus-guardian of cellular homeostasis and genome integrity. Chromosoma. 2013. Vol. 122. P. 487—497.
