CC BY
125
48 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
УДК 616-006.04-085.277.3-092.4:577.11
I.A. Kudryavtsev, N.V. Myasishcheva
CYCLOOXYGENASE-1 AND CYCLOOXYGENASE-2 AS TARGETS FOR CHEMOTHERAPY AND CHEMOPREVENTION OF ANIMAL AND HUMAN TUMORS
N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS, Moscow
ABSTRACT
The literature data about the effect of inhibitors of cyclooxygenase pathway of arachidonic acid metabolism on development of tumors induced by chemical carcinogens in different animals, the relative risk of malignant tumor development among persons with regular intake of nonsteroidal antiinflammatory drugs, the growth modulating effect of cyclooxygenase-1 and cyclooxygenase-2 inhibitors on animal and human tumor cells in vitro and in vivo and their efficacy in anticancer therapy are presented. The significance of constitutive and inducible forms of this enzime as targets for chemotherapy and chemoprevention of cancer is discussed.
Key words: arachidonic acid metabolism, animal and human tumors, cyclooxygenase-1 and cyclooxygenase-2 inhibitors, chemotherapy and chemoprevention of malignant tumors.
И.А. Кудрявцев, H.B. Мясищева
ЦИКЛООКСИГЕНАЗА-1 И ЦИКЛООКСИГЕНАЗА-2 КАК МИШЕНИ В ХИМИОТЕРАПИИ И ХИМИОПРОФИЛАКТИКЕ ОПУХОЛЕЙ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА
ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
РЕЗЮМЕ
В обзоре представлены данные литературы о влиянии ингибиторов циклооксигеназного пути метаболизма арахидоновой кислоты на развитие опухолей, индуцированных химическими канцерогенами у экспериментальных животных, относительном риске возникновения злокачественных новообразований среди лиц, регулярно принимающих нестероидные противовоспалительные средства, ростмодулирующем действии ингибиторов циклооксигеназы-1 и циклооксигеназы-2 на опухолевые клетки животных и человека in vitro и in vivo, а также их эффективности в противоопухолевой терапии. Обсуждается значение конститутивной и индуцибельной форм энзима как мишеней в химиотерапии и химиопрофилактике рака.
Ключевые слова: метаболизм арахидоновой кислоты, опухоли животных и человека, ингибиторы цик-лооксигеназы-1 и циклооксигеназы-2, химиотерапия и химиопрофилактика злокачественных опухолей.
ВВЕДЕНИЕ
Нестероидные противовоспалительные средства (НСПВС) представляют собой один из самых востребованных классов фармакологических препаратов в медицине. Общим для всего ряда НСПВС, несмотря на значительное разнообразие в их химической структуре, является способность ингибировать циклоокси-геназный путь метаболизма арахидоновой кислоты (АК), ведущий к образованию простагландинов (PG) и других простаноидов. При общем механизме фарма-
кологического действия НСПВС различаются между собой особенностями торможения конститутивной и индуцибельной форм циклооксигеназы (COX), по этому признаку они относятся к COX-1- или COX-2-специфическим ингибиторам. Каскад АК играет исключительно важную роль на всех этапах канцерогенеза, начиная от метаболической активации химических канцерогенов, эффекта промоторов, экспрессии онкогенов и иммуносупрессии до способности про-станоидов влиять на пролиферацию, апоптоз, диффе-
ренцировку и метастазирование опухолевых клеток. В данном обзоре обсуждаются особенности модулирующего влияния ингибиторов циклооксигеназного пути метаболизма АК на развитие опухолей, индуцированных химическими канцерогенами у экспериментальных животных, ростмодулирующее действие различных НСПВС на опухолевые клетки разного типа in vitro и in vivo, эффективность ингибиторов COX-1 и COX-2 при использовании в противоопухолевой терапии, а также эпидемиологические данные о заболеваемости злокачественными новообразованиями среди лиц, регулярно принимающих НСПВС. Особое внимание в обзоре уделено сравнительной характеристике COX-1 и COX-2 как мишеней в химиотерапии и химиопрофилактике злокачественных опухолей, а также перспективам использования с этой целью ключевых ферментов другого пути метаболизма АК.
ЦИКЛООКСИГЕНАЗНЫЙ ПУТЬ МЕТАБОЛИЗМА АК И ЕГО ИНГИБИТОРЫ
Ключевым звеном этого метаболического пути каскада АК, ведущего к образованию PGE2, PGD2, PGF2a, тромбоксана A2 и простациклина (PGI2), является COX (более часто употребляемый термин) или про-стагландинсинтетаза (PHS) - микросомальный гемосодержащий ферментный комплекс (EC 1.14.99.1) с цик-лооксигеназной и пероксидазной активностью [57]. В настоящее время наиболее изучены 2 изоформы энзима: конститутивная (COX-1) и индуцибельная (COX-2), которая чаще обнаруживается в стимулированных тканях [7; 66]. Гены человека COX-1 и COX-2 расположены на разных хромосомах, первый из них локализован на 9q32-q33.3, второй - на 1q25.2-q25.3 [42]. Хотя COX-2 и считается индуцибельной формой энзима, тесно связанной с воспалением и опухолевым процессом, многие нестимулированные нормальные клетки и ткани способны экспрессировать ее. В частности, COX-2 конститутивно экспрессируется в почках [28] и головном мозге [15] крысы, а также в клетках эпителия трахеи [71], эндотелиальных клетках артерий и вен, гладкомышечных и фибробластоподобных клетках слизистой желудка [75] человека.
Все известные НСПВС в разной степени ингибируют как COX-1, так и COX-2, причем эффективность торможения каждого изоэнзима зависит не только от химической структуры ингибитора, но и от используемой модели для тестирования. В частности, на тест-системе с использованием венозной крови и клеток A549 аденокарциномы легкого человека специфичность ингибиторов с преимущественным действием на COX-1 возрастает в таком порядке: ампирон, ибупрофен, толметин, напроксен, аспирин, индомета-цин, кетопрофен, супрофен, фторбипрофен, кеторолак [72]. В порядке возрастания COX-2-специфичности авторами ранжированы препараты другой группы: пироксикам, томоксипрол, меклофенамовая кислота, сулиндак сульфид, диклофенак, нимесулид, целекок-сиб, мелоксикам, этодолак, NS-398, рофекоксиб, L-
745,337. Целекоксиб и рофекоксиб считаются первыми СОХ-2-селективными ингибиторами [66], относительный коэффициент их избирательности (СОХ-2/СОХ-1) составляет 7,6 и 35 соответственно [60].
По кинетическим параметрам различают 4 вида взаимодействия НСПВС с СОХ-1 и СОХ-2: конкурентное ингибирование, слабое или плотное времязависимое связывание, а также ковалентное ингибирование [25]. Из всех известных НСПВС уникальным механизмом ингибирования обладает аспирин, который является ковалентным модификатором конститутивной и индуци-бельной форм энзима, ацетилируя их активные центры в положении серин 530 и серин 516 соответственно [62]. Ацетилирование приводит к необратимому ингибированию СОХ-1 и модификации СОХ-2, следствием которой является нарушение циклизации АК и синтез несвойственного ферменту липоксигеназного метаболита -15^)-гидроксиэйкозатетраеновой кислоты.
ВЛИЯНИЕ ИНГИБИТОРОВ ЦИКЛООКСИГЕНАЗНОГО ПУТИ МЕТАБОЛИЗМА АК НА РАЗВИТИЕ ОПУХОЛЕЙ, ИНДУЦИРОВАННЫХ ХИМИЧЕСКИМИ КАНЦЕРОГЕНАМИ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
Выраженное ингибирующее действие на индуцированные опухоли животных проявляют многие НСПВС, включая индометацин, аспирин, меклофена-мовую кислоту, кетопрофен, пироксикам, целекоксиб. Однако имеются данные об отсутствии эффекта НСПВС или его противоположной направленности на некоторых моделях. Так, индометацин в значительной степени подавляет у крыс развитие доброкачественных и злокачественных опухолей молочной железы, индуцированных К-метил-К-нитрозомочевиной [1] и ДМБА [46], опухолей толстой кишки, индуцированных 1,2-диметилгидразином [47]. Подобное действие этого НСПВС наблюдается также на опухолях пищевода и преджелудка, индуцированных этиловым эфиром К-нитрозосаркозина и опухолях головного мозга и периферической нервной системы, индуцированных К-этил-К-нитрозомочевиной [1], но отсутствует при индукции К-этил-К-нитрозомочевиной опухолей почек и индукции бенз(а)пиреном низкодифференцированных сарком [1]. В то же время стимулирующий (до 500 %) эффект индометацина обнаружен на ДМБА-индуцированных опухолях кожи у мышей [20].
Разнонаправленное действие на развитие индуцированных опухолей разного гистогенеза выявлено и у других ингибиторов СОХ. В частности, аспирин, более, чем в 2 раза угнетающий частоту развития рака мочевого пузыря крысы, индуцированного производными 5-нитрофурана, вызывает у 26 % животных развитие опухолей преджелудка, которые не возникают при действии одного канцерогена [50].
Следует отметить, что отдельные НСПВС иногда значительно различаются между собой выраженностью модифицирующего эффекта при развитии индуцированных опухолей одного типа. Так, при раке тол-
стой кишки, индуцированном диметилгидразином, сильный антиканцерогенный эффект характерен для индометацина и его отсутствие - для меклофенамовой кислоты [47]. При раке мочевого пузыря, индуцированном №бутил-№(4-гидроксибутил)-нитрозамином (OH-BBN) у мышей B6D2F1, высокую активность как ингибиторы канцерогенеза проявляют кетопрофен и сулиндак и практически не эффективен аспирин [58]. В то же время один и тот же ингибитор COX может по-разному влиять на развитие индуцированных опухолей одинакового гистогенеза у разных животных. В частности, аспирин, неэффективный в торможении развития индуцированного OH-BBN рака мочевого пузыря у мышей [58], значительно снижает частоту этих опухолей, индуцированных OH-BBN [41] и N-(4-(5-нитро-2-фурил)-тиазолил)формамидом [50] у крыс.
Особо следует отметить ярко выраженные антиканцерогенные свойства целекоксиба, который проявляет высокую активность в торможении развития индуцированного OH-BBN рака мочевого пузыря как у мышей, так и у крыс [27], значительно уменьшает частоту и множественность аденокарцином толстой кишки, индуцированных азоксиметаном у крыс Fisher 344 [59]. Сохранение эффективности препарата даже при позднем (на стадии промоции/прогрессии) его введении предполагает, по мнению авторов, высокую ценность этого НСПВС для химиопрофилактики семейного аденоматозного полипоза (FAP) и спорадических полипов [59].
Полученные данные об использовании НСПВС при FAP и спорадических полипах являются одними из важных доказательств антиканцерогенного действия ингибиторов COX. В этих исследованиях было показано, что применение НСПВС не только подвергает обратному развитию колоректальные полипы у пациентов [61], но и препятствует появлению интестинальных опухолей на модели FAP у мышей C57Bl/6J-Min/+ [36].
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ О ВЛИЯНИИ НСПВС НА ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ НАСЕЛЕНИЯ
Имеющиеся данные о выраженных антиканцерогенных свойствах ингибиторов COX при развитии индуцированных опухолей пищеварительного тракта у экспериментальных животных согласуются с эпидемиологическими наблюдениями о значительном снижении частоты рака этой локализации у лиц, регулярно принимающих те или иные НСПВС. Убедительные результаты исследований о влиянии аспирина на возникновение рака толстой кишки у человека, зависимости эффекта от дозы препарата получены на довольно большом материале (более 600 тыс. обследованных лиц) M.J. Thun et al. [69]. Согласно этим данным при приеме аспирина 16 и более раз в месяц относительный риск заболеть раком толстой кишки составляет для мужчин 0,60, для женщин
- 0,58. Авторами также обнаружено, что у лиц, регулярно принимающих аспирин, особенно в течение длительного срока (от 10 лет и больше), наблюдается выраженное снижение смертности от рака не только толстой кишки, но и пищевода, желудка, прямой кишки. R.E. Harris et al. [29], анализируя данные о заболеваемости наиболее распространенными злокачественными новообразованиями среди лиц с разным уровнем потребления аспирина, ибупрофена и других НСПВС, указывают на высокую эффективность ингибиторов COX в защите от рака желудочно-кишечного тракта при регулярном приеме их в течение не менее 5 лет. Так, ежедневный прием НСПВС, прежде всего аспирина, уменьшает риск заболеть раком пищевода на 73 %, толстой кишки - на 63 %, желудка - на 62 %. Более низкие показатели ингибирующего влияния НСПВС отмечены среди больных раком яичника (47%), предстательной и молочной желез (39 %), легкого (36 %). По мнению авторов, при раке поджелудочной железы, мочевого пузыря и почки регулярный прием НСПВС не является столь эффективным. Однако следует отметить, что эпидемиологические данные о риске возникновения рака поджелудочной железы у лиц, регулярно принимающих НСПВС, в целом достаточно противоречивы. В частности, K.E. Anderson et al. [10], признавая неэффективность неас-пириновых НСПВС при раке этой локализации, выявили значительное снижение риска (0,57) заболеть раком поджелудочной железы у женщин в постменопаузе при непрерывном использовании аспирина. Напротив, E.S. Schernhammer et al. [64] при анализе 18летней выборки (более 80 тыс. женщин) показали, что длительное (более 20 лет) регулярное применение аспирина существенно повышает риск возникновения этой формы рака, причем прослежена четкая зависимость и от дозы принимаемого препарата. Так, при увеличении приема аспирина от 1-3 до 14 таблеток в неделю относительный риск заболеть раком поджелудочной железы возрастал от 1,11 до 1,86. E.J. Jacobs et al. [35], исследуя смертность от рака поджелудочной железы среди взрослого населения США с 1982 по 2000 гг., не обнаружили взаимосвязи этого показателя ни с высокой частотой приема аспирина (30 и более раз в месяц), ни с длительным применением препарата (20 и более лет) при той же частоте.
РОСТМОДУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ИНГИБИТОРОВ COX-1 И COX-2 В ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VIVO И IN VITRO
Исследования ростмодулирующего действия ингибиторов COX на опухолевые клетки в системах in vivo и in vitro показали важную роль циклооксигеназ-ного пути метаболизма АК в процессах роста многих опухолей животных и человека. Первыми работами в этом направлении было установлено, что пероральное введение индометацина значительно подавляет рост перевиваемых опухолей молочной железы у мышей
[22] и крыс [39]. Впоследствии подобный эффект ин-дометацина был обнаружен и на гетеротрансплантатах рака молочной железы человека у бестимусных мышей [17].
Дальнейшие исследования на иммунодефицитных мышах с имплантированными ксенографтами различных опухолей человека выявили высокую противоопухолевую активность НСПВС 1-го и 2-го поколений. В частности, было показано, что и сулиндак, и целекоксиб, один из сильных COX-2-специфических ингибиторов, практически одинаково тормозят пролиферацию, индуцируют апоптоз, угнетают ангиогенез и ослабляют инвазивность в ксенографтах из клеток SGC7901 рака желудка человека [21]. Интересные результаты о влиянии различных НСПВС на рост 3 линий клеток рака мочевого пузыря человека в стандартных исследованиях in vitro и ксенографтов из этих клеток, имплантированных бестимусным мышам, получены S.I. Mohammed et al. [49]. Целекоксиб и пироксикам значительно тормозили рост ксенограф-тов из клеток HT1376, экспрессирующих COX-2, но не ксенографтов из клеток UMUC3, которые не экспрессируют COX -2. Ни один из используемых ингибиторов COX, целекоксиб, пироксикам, валерилсали-цилат или NS-398, не ингибировали роста клеток HT1376, RT4 и UMUC3 в концентрациях, эффективных in vivo. Однако при увеличении концентрации на порядок целекоксиб ингибировал пролиферацию и индуцировал апоптоз на всех 3 клеточных линиях независимо от уровня экспрессии COX-2, в связи с чем авторы делают вывод о том, что при тестировании на противоопухолевое действие ингибиторов COX более целесообразно использование гетеротрансплантатов опухолевых клеток на бестимусных мышах.
Следует отметить, что ингибиторы обеих COX не всегда эффективны в торможении роста опухолей животных и человека. Так, целекоксиб не проявлял выраженного противоопухолевого, антипролифератив-ного или антиангиогенного действия у иммунодефи-цитных мышей с имплантированными ксенографтами рака поджелудочной железы человека, хотя при этом эффективно ингибировал биосинтез PGE2 в гетеротрансплантатах рака [37]. Более того, у мышей с солидной и асцитной формами меланомы B-16, получавших индометацин, наблюдалось значительное стимулирование роста опухоли [4; 19]. Интересно, что на этом штамме индометацин также не усиливал химиотерапевтического эффекта многих противоопухолевых препаратов: адриамицина, винкристина, Тио-ТЭФ, 5-фторурацила и др. [32].
Важным элементом при изучении ростмодули-рующего действия ингибиторов COX, способствующим пониманию столь выраженного разнообразия эффектов НСПВС на опухолях разного гистогенеза, стали параллельные исследования биосинтеза цикло-оксигеназных и липоксигеназных метаболитов АК (эйкозаноидов) в опухолевой ткани. Первые же исследования показали, что эффективность ингибитора COX - индометацина находится в прямой зависимо-
сти от способности опухолей продуцировать PG [23]. При сравнительном радиохроматографическом анализе профиля синтезируемых эйкозаноидов в различных перевиваемых опухолях мышей было установлено, что ростмодулирующий эффект индометацина коррелирует с интенсивностью биосинтеза основного цик-лооксигеназного метаболита АК - PGE2 [4]. Максимальная конверсия [14С]АК в этот простаноид (до 10 %) наблюдалась в карциноме легких Льюис, торможение роста которой индометацином достигало 89 %. Менее высокие показатели угнетения опухолевого роста и включения метки в PGE2 были отмечены в аденокарциномах молочной и подчелюстной слюнной железы. Крайне низкая способность опухолевой ткани к синтезу не только циклооксигеназных, но и липоксигеназных метаболитов АК при отсутствии эффекта или ростстимулирующем действии индоме-тацина была обнаружена у мышей с лейкозом L-1210 и меланомой B-16.
Ростлимитирующие свойства PGE2 продемонстрированы и для многих опухолевых клеток в исследованиях in vitro. В частности, показана прямая зависимость между включением [3Н]тимидина в ДНК клеток A549 аденокарциномы легкого человека и синтезом PGE2 из инкорпорированной в опухолевые клетки [14С]АК в контрольных культурах и при введении ин-дометацина, установлено важное значение этого про-станоида в реализации митогенного эффекта основного фактора роста фибробластов [2]. Однако исследования последних лет свидетельствуют о том, что ключевую роль в контроле роста опухолевых клеток определенного типа играет не PGE2, а представители другого, липоксигеназного, пути метаболизма АК. Так, фактором роста для клеток PC-3 рака предстательной железы человека является 5(S)-гидроксиэйкозатетраеновая кислота [24], а для клеток A431 эпидермоидного рака человека - 12( S)-
гидроксиэйкозатетраеновая кислота [3], которые доминируют в профиле синтезируемых эйкозаноидов у указанных линий. Соответственно мощное антипро-лиферативное действие на эти опухолевые клетки оказывают не ингибиторы COX-1 или COX-2, а селективные ингибиторы 5-LOX - AA861 и 12-LOX - бай-калеин [3; 24].
ПРИМЕНЕНИЕ НСПВС ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ ОПУХОЛЕЙ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА
Усиление цитотоксического действия противоопухолевых препаратов характерно для многих ингибиторов COX. Так, фторбипрофен увеличивает на 50 % выживаемость мышей WHT/Ht с аденокарциномой молочной железы NC, получавших лечение метотрексатом и мелфаланом [14]. Усиление фторби-профеном эффекта адъювантной химиотерапии и местной радиотерапии на локальные метастазы и продолжительность жизни животных с этой опухолью отмечают и другие авторы [43]. Другой ингибитор
COX-1 - индометацин существенно усиливает цито-токсическое действие цисплатина и 5-фторурацила на 2 линиях рака шейки матки человека - SKG-2 и HKUS [53], а также противоопухолевый эффект метотрексата in vitro и in vivo [13]. Подобные результаты на культуре клеток T24 рака мочевого пузыря и гетеротрансплантатах этих клеток у иммунодефицитных мышей получены Y. Mizutani et al. [48] с использованием COX-2-специфического ингибитора - JTE-522, который значительно усиливал цитотоксическое действие и апоптоз, индуцированные цисплатином. Высокая активность целекоксиба в усилении противоопухолевого действия 5-фторурацила отмечена у мышей BALB/c с перевиваемой колоректальной аденокарциномой CT-26 [34], в то время, как in vitro продемонстрирован выраженный синергизм оксалиплатина с этодолаком и целекоксибом в торможении роста и гибели клеток RKO рака толстой кишки человека [44]. Представляют значительный интерес и данные J.S. Park et al. [55] о повышении целекоксибом эффективности радиотерапии при раке легкого.
Следует отметить, что усиление комбинированного воздействия на опухоль ингибиторами COX наблюдается не во всех случаях. В частности, целекок-сиб не усиливает противоопухолевой активности гем-цитабина и оксалиплатина при комбинированной терапии у больных раком поджелудочной железы [16]. Меклофенамат натрия не влияет на эффект радиационной терапии при лимфосаркоме Гарднера 6C3HED у мышей C3H, однако существенно уменьшает развитие вторичных опухолей после проведенного лечения [9]. Фторбипрофен, эффективный, как и многие другие ингибиторы COX, в подавлении метастазирования в кости в экспериментальных исследованиях, лишь слабо усиливает ингибирующее влияние химиотерапии (винкристин + адриамицин) на развитие костных метастазов у больных раком молочной железы [56].
Следует отметить, что делаются попытки использовать НСПВС и при паллиативном лечении онкологических больных с выраженной генерализацией опухолевого процесса. В частности, показано, что индо-метацин более, чем в 2 раза по сравнению с плацебо увеличивает выживаемость больных различными злокачественными опухолями, уменьшает боль и потребность в анальгезирующих средствах [45].
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА COX-1 И COX-2 КАК МИШЕНЕЙ АНТИКАНЦЕРОГЕННОГО И ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ НСПВС
В последнее десятилетие американские онкологи в качестве важного звена в противораковой борьбе рассматривают ингибиторы COX-2, которые, по их мнению, могут быть с успехом использованы как в профилактике, так и в лечении рака толстой кишки, желудка, пищевода, легких, предстательной и молочной желез, яичника, кожи, мочевого пузыря [18; 27; 29; 31; 44; 48; 49; 51; 55; 59; 63; 74]. Выбор именно
этой изоформы COX как реальной мишени в химиопрофилактике и химиотерапии опухолей был обусловлен вовлеченностью COX-2 во все основные события канцерогенеза [8; 70] и меньшим проявлением гастротоксичности у ингибиторов COX-2 [66; 72].
Однако в свете имеющихся данных литературы о сравнительной экспрессии обеих COX в разных опухолевых клетках и тканях, эффективности различных НСПВС в торможении химического канцерогенеза у животных и роста опухолевых клеток in vitro и in vivo, а также эпидемиологических данных о влиянии регулярного приема этих препаратов на возникновение опухолей человека, пока трудно говорить о явном преимуществе COX-2 над COX-1 как мишени. Во-первых, даже при раке толстой кишки, где высокоэффективны ингибиторы COX-2, COX-2 экспрессируется не во всех опухолях. Так, в опухолевых тканях больных раком этой локализации экспрессия COX-2 не обнаруживалась в 6 случаях из 25, в то время, как COX-1 постоянно определялась в неопластической и непораженной опухолевым процессом ткани [38]. По данным R.A. Soslow et al. [67], умеренный или сильный уровни экспрессии COX-2 наблюдаются в 90 % случаев опухолей легкого (плоскоклеточный рак, аденокарцинома), в 71 % аденокарцином толстой кишки и в 56 % опухолей молочной железы. При сравнительном анализе экспрессии ключевых ферментов метаболизма АК на широкой панели линий раковых клеток наиболее часто поражаемых органов человека обнаружено, что только COX-1 и 5-липоксигеназа (5-LOX) экспрессируются во всех тестируемых опухолевых клетках, COX-2, 12-LOX и 15-LOX имеют более низкую частоту экспрессии - 60 %, 35 % и 90 % соответственно [33]. Во-вторых, более выраженная экспрессия COX-2 часто наблюдается в менее злокачественных опухолях одного и того же органа. В частности, COX-2 намного слабее экспрессируется при мелкоклеточном раке и низкодифференцированной аденокарциноме - наиболее злокачественных формах рака легкого [73]. Аналогичная зависимость отмечается и при раке толстой кишки, а в опухолях молочной железы экспрессия COX-2 при раке in situ значительно выше, чем при инвазивной карциноме [67]. В-третьих, наиболее убедительные эпидемиологические данные об антиканцерогенных свойствах НСПВС получены по ингибиторам COX-1 [29; 69]. Подобных глубоких эпидемиологических исследований с участием ингибиторов COX-2 проведено не было: как фармакологические препараты они стали использоваться относительно недавно. В-четвертых, при развитии индуцированных опухолей у экспериментальных животных выраженные антиканцерогенные свойства проявляют не только ингибиторы, действующие больше на COX-2, чем COX-1, такие, как пироксикам, сулиндак, целекоксиб, нимесулид [36; 40; 54; 58; 61], но и ингибиторы с преимущественным влиянием на COX-1 - аспирин, индометацин, кетопрофен, фторбипрофен [1; 46; 47; 50; 58].
ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ИНГИБИТОРОВ МЕТАБОЛИЗМА АК В ХИМИОТЕРАПИИ И ХИМИОПРОФИЛАКТИКЕ ОПУХОЛЕЙ РАЗНОГО ГИСТОГЕНЕЗА
В целом выраженное антиканцерогенное и противоопухолевое действие ингибиторов обеих COX, а также целесообразность их применения прежде всего при лечении многих злокачественных опухолей человека не вызывают сомнений. Однако прогнозирование высокой эффективности ингибиторов COX-2 в химиопрофилактике и комбинированной химиотерапии при столь многих локализациях рака представляется довольно спорным моментом. Даже при суммировании всей информации по ингибиторам обеих COX достаточно полным и убедительным выглядит блок данных только по колоректальному раку, который базируется на обстоятельных экспериментальных, клинических и эпидемиологических исследованиях. По мнению J.M. Herendeen and C. Lindley [30], торможение COX-2 является примером таргетного подхода к химиопрофилактике колоректального рака.
Меньше подобной информации имеется по другим опухолям желудочно-кишечного тракта, раку молочной железы, немелкоклеточному раку легкого.Что же касается рака кожи и предстательной железы, целесообразность использовать НСПВС в этих случаях недостаточно обоснована, так как имеются экспериментальные данные, которые не согласуются с указанной точкой зрения. В частности, к таким данным можно отнести работы о значительном стимулирующем влиянии индометацина на развитие индуцированных опухолей кожи у мышей [20], ключевой роли в контроле роста опухолевых клеток определенного типа липоксигеназных метаболитов АК —12(S)-гидроксиэйкозатетраеновой и 5^)-гидроксиэйкоза-тетраеновой кислот [3; 24].
Противоопухолевое, впрочем, как и антиканцерогенное, действие НСПВС является многофакторным и включает в себя влияние на различные фазы клеточного цикла [12; 23; 65], индукцию апоптоза [21; 48], торможение ангиогенеза и инвазии [21; 34], усиление поглощения цитостатиков опухолевыми клетками [53]. Молекулярные механизмы антиканцерогенного и противоопухолевого действия НСПВС пока не совсем ясны и являются в настоящее время предметом активных исследований. К их важным результатам можно отнести угнетение ингибиторами COX экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2 [48], подавление теломеразной активности [52], индукцию экспрессии гена-супрессора EGR-1 [11].
Одной из важных тенденций в развитии данного направления исследований является изучение противоопухолевых свойств 15^)-гидроксиэйкозатетра-еновой кислоты, продукта модифицированной аспирином COX-2 [62], а также синтез новых НСПВС. Представители нового поколения ингибиторов COX-2
- вальдекоксиб и эторикоксиб, созданные на основе целекоксиба и рофекоксиба, проявляют более высо-
кую избирательность к COX-2, чем предшественники, коэффициент селективности у них достигает 30 и 106 соответственно [60].
Однако следует отметить, что принципиальных различий в эффективности ингибиторов COX-1 и COX-2 как в онкологическом, так и других аспектах нет, эти различия в основном обусловлены побочными действиями НСПВС, которые связаны с особенностями локализации изоэнзимов в различных органах и клетках [66]. Цитопротективные свойства PGE2 и преимущественная локализация COX-1 в слизистой желудочнокишечного тракта являются причиной его повреждения при длительном применении ингибиторов COX-1. В то же время ингибиторы COX-2 способствуют развитию инфаркта миокарда вследствие усиления тромбообра-зования, вызываемого подавлением COX-2-зависимого синтеза простациклина в эндотелиальных клетках и нарушением баланса PGI2 и тромбоксана A2, продукция которого в тромбоцитах COX-1-зависима. Это безусловно необходимо учитывать при назначении традиционных НСПВС и высокоселективных ингибиторов COX-2 онкологическим больным.
В последнее время ряд авторов предлагают новый подход к использованию модуляторов метаболизма АК в химиотерапии опухолей - сочетанное применение ингибиторов COX-2 и 5-LOX как представителей НСПВС разного класса, мотивируя это тем, что медиаторами воспаления являются не только PG, но и лейкотриены [26]. Следует отметить, что попытки использования комбинаций различных цитотоксиче-ских препаратов с ингибиторами COX и LOX одновременно предпринимались и ранее. В частности, на модели перевиваемой карциномы Льюис мышей было показано, что самым эффективным сочетанием с цис-платином является фенидон (ингибитор LOX) + ин-дометацин, а с циклофосфамидом, мелфаланом и ионизирующей радиацией - фенидон + сулиндак [68].
Одним из «подводных камней» при использовании ингибиторов COX-1 и COX-2 с химиотерапевтической или химиопрофилактической целью может быть разнонаправленность их эффекта, обусловленная значительными различиями в метаболизме АК в опухолях разного гистогенеза [4; 6]. В первую очередь, такие опасения вызывают опухоли с крайне низкой способностью синтезировать не только циклооксиге-назные, но и липоксигеназные метаболиты АК - мелкоклеточный рак легкого, эмбриональный рак яичка, гемобластозы, меланома, обладающие высоким метастатическим потенциалом [5; 6], рост которых ингибиторы COX могут стимулировать [4; 19]. Проявление ингибиторами COX как ростингибирующего, так и ростстимулирующего действия на опухолях разного гистогенеза является, на наш взгляд, серьезным препятствием к широкому использованию НСПВС в химиопрофилактике злокачественных новообразований. В связи с этим наиболее обосновано, на наш взгляд, их применение с профилактической целью при рецидивирующих PG-синтезирующих опухолях у больных с уже установленным диагнозом.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Совокупность экспериментальных, эпидемиологических и клинических данных свидетельствует о выраженном антиканцерогенном и противоопухолевом действии НСПВС 1-го и 2-го поколений, которые являются ингибиторами СОХ-1 и СОХ-2, конститутивной и индуцибельной изоформ одного из ключевых ферментов метаболизма АК. Высокая эффективность этих препаратов продемонстрирована на доброкачественных и злокачественных эпителиальных опухолях желудочно-кишечного тракта, молочной железы, легких и некоторых других органов животных и человека, что позволяет рассматривать СОХ-1 и СОХ-2 как важные мишени в химиотерапии и химиопрофилактике рака. Многофакторное противоопухолевое действие НСПВС реализуется через торможение пролиферации, индукцию апоптоза, подавление ангиогенеза и ослабление инва-зивности. Для прогнозирования эффективности ингибиторов СОХ-1 и СОХ-2 в опухолях разного гистогенеза важным критерием являются особенности метаболизма АК в опухолевых тканях.
ЛИТЕРАТУРА
1. Беспалов В.Г., Лидак М.Ю., Петров А.С. и др. Антиканцерогенный эффект ортофена и индометаци-на у крыс и мышей с индуцированными опухолями различных органов // Эксперим. онкология. - 1992. -Т. 14, № 1. - С. 36-40.
2. Кудрявцев И.А., Голенко О.Д., Гудкова М.В., Мясищева Н.В. Метаболизм арахидоновой кислоты в контроле роста клеток А549 аденокарциномы легкого человека // Биохимия. - 2002. - Т. 67, вып. 9. - С. 1233-40.
3. Кудрявцев И.А., Гудкова М.В., Павлова О.М. и др. Липоксигеназный путь метаболизма арахидо-новой кислоты в контроле роста опухолевых клеток разного типа // Биохимия. - 2005. - Т. 70, вып. 12. -
С. 1696-704.
4. Кудрявцев И.А., Мясищева Н.В. Синтез эйко-заноидов каскада арахидоновой кислоты в опухолях разного гистогенеза у мышей // Вестник РАМН. -
1995. - № 4. - С. 42-5.
5. Кудрявцев И.А., Мясищева Н.В., Полоцкий Б.Е. и др. Способность неопластической ткани к биосинтезу 12- и 15-гидроксиэйкозатетраеновых кислот как критерий метастазируемости опухолей легких человека // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. -1998. - № 9. - С. 338-41.
6. Кудрявцев И.А., Полоцкий Б.Е., Мачаладзе З.О. и др. Особенности биосинтеза [14С]-арахидоновой кислоты в метастазирущих опухолях // Доклады Академии Наук. - 1996. - Т. 346, № 6. - С. 822-4.
7. Мясищева Н.В. Взаимодействие эйкозаноидов с факторами роста в процессах пролиферации опухолевых клеток // Успехи современной биологии. -2005. - Т. 125, № 2. - С. 157-66.
8. Мясищева Н.В., Кудрявцев И.А. Эндогенные модуляторы канцерогенеза / Под ред. Заридзе Д.Г. Канцерогенез. - М.: Медицина, 2004. - С. 415-28.
9. Ambrus J.L., Ambrus C.M., Halpern J., Gastpar
H. Effect of second tumors and of prostaglandin-leukotriene inhibitors on radiation therapy of transplanted rodent tumors // J. Med. - 1984. - 15(2). - P. 93-103.
10. Anderson K.E., Johnson T.W., Lazovich D., Folsom A.R. Association between nonsteroidal antiinflammatory drug use and the incidence of pancreatic cancer // J. Nat. Cancer Inst. - 2002. - 94. - P. 1168-71.
11. Baek S.J., Kim J.-S., Moore S.M. Cyclooxy-genase inhibitors induce the expression of the tumor suppressor gene EGR-1, which results in the up-regulation of NAG-1, an antitumorigenic protein // Mol. Pharmacol. -2005. - 67. - P. 356-64.
12. Bayer B.M., Kruth H.S., Vaughan M., Beaven M.A. Arrest of cultured cells in the G1 phase of the cell cycle by indomethacin // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1979.
- 210(1). - P. 106-11.
13. Bennett A., Gaffen J.D., Melhuish P.B., Stamford
I.F. Indomethacin increases the cytotoxicity of methotrexate in vitro and in vivo // Advances in Prostaglandin, Thromboxane and Leukotriene Research. - New York: Raven Press, 1987. - 17B. - P. 986-8.
14. Berstock D.A., Houghton J., Bennett A. Improved anticancer effect by combining cytotoxic drugs with an inhibitor of prostaglandin synthesis // Advances in Prostaglandin and Thromboxane Research. - New York: Raven Press, 1980. - 6. - P. 567-9.
15. Breder C.D., DeWitt D.L., Kraig R.P. Characterization of inducible cyclooxygenase in rat brain // J. Comp. Neurol. - 1995. - 355. - P. 296-315.
16. Cascinu S., Scartozzi M., Carbonari G. et al. COX-2 and NF-KB overexpression is common in pancreatic cancer but does not predict for COX-2 inhibitors activity in combination with gemcitabine and oxaliplatin // Am. J. Clin. Oncol. - 2007. -30(5). - P. 526-30.
17. Connolly J.M., Liu X.H., Rose D.P. Dietary li-noleic acid-stimulated human breast cancer cell growth and metastasis in nude mice and their suppression by in-domethacin, a cyclooxygenase inhibitor // Nutr. Cancer. -1996. - 25(3). - P. 231-40.
18. Dempke W., Rie C., Grothey A. et al. Cyclooxygenase-2: a novel target for cancer chemotherapy? // J. Cancer Res. Clin. Oncol. - 2000. - 127. - P. 411-7.
19. Favalli C., Garaci E., Etheredge E. et al. Influence of PGE on the immune response in melanoma-bearing mice // J. Immunol. - 1980. - 125. - P. 897-902.
20. Fischer S.M., Slaga T.J. Modulation of prostaglandin synthesis and tumor promotion // Prostaglandins and Cancer: First International Conference. - New York: Alan R. Liss, Inc., 1982. - P. 255-64.
21. Fu S.L., Wu Y.L., Zhang Y.P. et al. Anti-cancer effects of COX-2 inhibitors and their correlation with angiogenesis and invasion in gastric cancer // World J. Gastroenterol. - 2004. - 10(13). - P. 1971-4.
22. Fulton A.M. In vivo effects of indomethacin on the growth of murine mammary tumors // Cancer Res. -1984. - 44. - P. 2416-20.
23. Furuta Y., Hall E.R., Sanduja S. et al. Prostaglandin production by murine tumors as a predictor for
therapeutic response to indomethacin // Cancer Res. -1988. - 48(11). - P. 3002-7.
24. Ghosh J., Myers C.E. Arachidonic acid stimulates prostate cancer cell growth: critical role of 5-lipoxygenase // Biochem. Biophys. Res.Commun. - 1997.
- 235(2). - P. 418-23.
25. Gierse J.K., Koboldt C.M., Walker M.C. et al. Kinetic basis for selective inhibition of cyclo-oxygenases // Biochem. J. - 1999. - 339. - P. 607-14.
26. Goossens L., Pommery N., Henichart J.P. COX-2/5-LOX dual acting anti-inflammatory drugs in cancer chemotherapy // Curr. Top. Med. Chem. - 2007. - 7(3). -P. 283-96.
27. Grubbs C.J., Lubert R.A., Koki A.T. et al. Cele-coxib inhibits N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine-induced urinary bladder cancers in male B6D2F1 mice and female Fischer-344 rats // Cancer Res. - 2000. -60(20). - P. 5599-602.
28. Harris R.C., McKanna J.A., Akai Y. et al. Cyclooxygenase-2 is associated with the macula densa of rat kidney and increases with salt restriction // J. Clin. Invest. - 1994. - 94. - P. 2504-10.
29. Harris R.E., Beebe-Donk J., Doss H., Burr Doss
D. Aspirin, ibuprofen, and other non-steroidal antiinflammatory drugs in cancer prevention: a critical review of non-selective COX-2 blockade (review) // Oncol. Rep.
- 2005. - 13,(4). - P. 559-83.
30. Herendeen J.M., Lindley C. Use of NSAIDs for the chemoprevention of colorectal cancer // Ann. Pharmacol. - 2003. - 37(11). - P. 1664-74.
31. Hida T., Kozaki K., Muramatsu H. et al. Cyclooxygenase-2 inhibitor induces apoptosis and enhances cytotoxicity of various anticancer agents in nonsmall cell lung cancer cell lines // Clin. Cancer Res. -2000. - 6(5). - P. 2006-11.
32. Hofer D., Dubitsky A.M., Reilly P. et al. The interactions between indomethacin and cytotoxic drugs in mice bearing B-16 melanomas // Prostaglandins. - 1980. -20(6). - P. 1033-8.
33. Hong S.H., Avis I., Vos M.D. et al. Relationship of arachidonic acid metabolizing enzyme expression in epithelial cancer cell lines to the growth effect of selective biochemical inhibitors // Cancer Res. - 1999. - 59. - P. 2223-8.
34. Irie T., Tsujii V., Tsuji S. et al. Synergistic antitumor effects of celecoxib with 5-fluorouracil depend on IFN-gamma // Int. J. Cancer. - 2007. - 121(4). - P. 878-83.
35. Jacobs E.J., Connell C.J., Rodriguez C. et al. Aspirin use and pancreatic cancer mortality in a large United States cohort // J. Nat. Cancer Inst. - 2004. - 96. -P. 524-8.
36. Jacoby R.F., Marshall D.J., Newton M.A. et al. Chemoprevention of spontaneous intestinal adenomas in the Apc Min mouse model by nonsteroidal antiinflammatory drug piroxicam // Cancer Res. - 1996. - 56.
- P. 710-4.
37. Jimeno A., Amador M.L., Kulesza P. et al. Assessment of celecoxib pharmacodynamics in pancreatic cancer // Mol. Cancer Ther. - 2006. - 5(12). - P. 3240-7.
38. Kargman S.L., O'Neill G.P., Vickers P.J. et al. Expression of prostaglandin G/H synthase-1 and -2 protein in human colon cancer // Cancer Res. - 1995. -55(12). - P. 2556-9.
39. Karmali R.A., Schellekens H., Lefevre F. et al. Growth inhibition and eicosanoid metabolism in the R3230AC mammary adenocarcinoma by interferon // Cancer Treat. Rep. - 1986. - 70(3). - P. 397-400.
40. Kawamori T., Rao C. V., Seibert K., Reddy B.S. Chemopreventive activity of celecoxib, a specific cyclooxygenase-2 inhibitor, against colon carcinogenesis // Cancer Res. - 1998. - 58. - P. 409-12.
41. Klan R., Knispel H.H., Meier T. Acetylsalicylic acid inhibition of N-butyl-(1-hydroxybutyl)nitrosamine induced bladder carcinogenesis in rats // J. Cancer Res. Clin. Oncol. - 1993. - 119. - P. 482-5.
42. Kosaka T., Miyata A., Ihara H. et al. Characterization of the human gene (PTGS2) encoding pros-taglandin-endoperoxide synthase 2. // Eur. J. Biochem. -1994. - 221. - P. 889-97.
43. Leaper D.J., French B., Bennett A. Reduction by flurbiprofen of primary tumor growth and lokal metastasis formation in mice // Advances in Prostaglandin and Thromboxane Research. - New York: Raven Press, 1980.
- 6. - P. 591-3.
44. Lin J., Hsiao P.W., Chiu T.H., Chao J.I. Combination of cyclooxygenase-2 inhibitors and oxaliplatin increases the growth inhibition and death in human colon cancer cells // Biochem. Pharmacol. —2005. - 70(5). - P. 658-67.
45. Lundholm K., Gelin J., Hyltander A. et al. Antiinflammatory treatment may prolong survival in undernourished patients with metastatic solid tumors // Cancer Res. - 1994. - 54(21). - P. 5602-6.
46. McCormick D.L., Madigan M.J., Moon R.C. Modulation of rat mammary carcinogenesis by indomethacin // Cancer Res. - 1985. - Vol. 45. - P. 1803— 1808.
47. Metzger U., Uhischmid G., Largiader F. Influence of prostaglandin synthesis inhibitors on DMH-induced rat colon cancer // Eur. Surg. Res. - 1983. - 15, Suppl. 1. - P. 81-2.
48. Mizutani Y., Nakanishi H., Li Y.N. et al. Enhanced sensitivity of bladder cancer cells to cisplatin mediated cytotoxicity and apoptosis in vitro and in vivo by the selective cyclooxygenase-2 inhibitor JTE-522 // J. Urol. - 2004. - 172(4), Pt 1. - P. 1474-9.
49. Mohammed S.I., Dhawan D., Abraham S. et al. Cyclooxygenase inhibitors in urinary bladder cancer: in vitro and in vivo effects // Mol. Cancer Ther. - 2006. - 5.
- P. 329-36.
50. Murasaki G., Zenser T.V., Davis B.B., Cohen
S.M. Inhibition by aspirin of N-[4-(5-nitro-2-furyl)-2-thiazolyl]formamide-induced bladder carcinogenesis and enhancement of forestomach carcinogenesis // Carcinogenesis. - 1984. - 5(1). - P. 53-5.
51. Nardone G., Rocco A. Chemoprevention of gastric cancer: role of COX-2 inhibitors and other agents // Dig. Dis. - 2004. - Vol. 22, N 4. - P. 320—326.
52. Ogino M., Hisatomi H., Murata M., Hanazono M. Indomethacin suppresses the growth of colon 26, Meth-A and FM3A tumors in mice by reducing the prostaglandin E2 content and telomerase activity in tumor tissues // Jpn. J. Cancer Res. - 1999. - 90(7). - P. 758-66.
53. Ogino M, Minoura S. Indomethacin increases the cytotoxicity of cis-platinum and 5-fluorouracil in the human uterine cervical cancer cell lines SKG-2 and HKUS by increasing the intracellular uptake of the agents // Int. J. Clin. Oncol. - 2001. - 6(2). - P. 84-9.
54. Okajima E., Denda A., Ozono S. et al. Chemo-preventive effects of nimesulide, a selective cyclooxy-genase-2 inhibitor, on the development of rat urinary bladder carcinomas initiated by N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine // Cancer Res. - 1998. - 58. -P. 3028-31.
55. Park J.S., Jun H.J., Cho M.J. et al. Radiosensitivity enhancement by combined treatment of celecoxib and gefitinib on human lung cancer cells // Clin. Cancer Res. - 2006. - 12. - P. 4989-99.
56. Powles T.J., Muindi J., Coombes R.C. Mechanisms for development of bone metastases and effects of anti-inflammatory drugs // Prostaglandins and Cancer: First International Conference. - New York: Alan R. Liss, Inc., 1982. - P. 541-53.
57. Prostaglandins and related substances / Pace-Asciak C., Granstrom E. (eds.). - Amsterdam: Elsevier Science Publishers B.V., 1983. - P. 229.
58. Rao K.V.N., Detrisac C.J., Steele V.E. et al. Differential activity of aspirin, ketoprofen and sulindac as cancer chemopreventive agents in the mouse urinary bladder // Carcinogenesis. - 1996. - 17. - P. 1435-8.
59. Reddy BS, Hirose Y, Lubet R, et al. Chemoprevention of colon cancer by specific cyclooxygenase-2 inhibitor, celecoxib, administered during different stages of carcinogenesis // Cancer Res. - 2000. - 60. - P. 293-7.
60. Riendeau D., Percival M.D., Brideau C. et al. Etoricoxib (MK-0663): preclinical profile and comparison with other agents that selectively inhibit cyclooxygenase-2 // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2001. - 296. - P. 558-66.
61. Rigau J., Pique J.M., Rubio E. et al. Effects of long-term sulindac therapy on colonic poliposis // Ann. Intern. Med. - 1991. - 115(12). - P. 952-4.
62. Rowlinson S.W., Crews B.C., Goodwin D.C. et al. Spatial requirements for 15-(R)-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenoic acid synthesis within the cyclooxygenase active site of murine COX-2. Why acety-lated COX-1 does not synthesize 15-(R)-HETE // J. Biol. Chem. - 2000. - 275, Issue 9. - P. 6586-91.
63. Sarkar F.H., Adsule S., Padhye S. Back to the future: COX-2 inhibitors for chemoprevention and cancer therapy // Mini Rev. Med. Chem. - 2007. - 7(6). - P. 599-608.
64. Schernhammer E.S., Kang J.H., Chan A.T. et al. A prospective study of aspirin use and the risk of pancreatic cancer in women // J. Nat. Cancer Inst. - 2004. - 96.
- P. 22-8.
65. Shiff S.J., Koustsos M.I., Qiao I. et al. Nonsteroidal antiinflammatory drugs inhibit the proliferation of colon adenocarcinoma cells: effects on cell cycle and apoptosis // Exp. Cell Res. - 1996. - 222(1). - P. 179-88.
66. Simmons D.L., Botting R.M., Hla T. Cyclooxy-genase isozymes: the biology of prostaglandin synthesis and inhibition // Pharmacol. Rev. - 2004. - 56. P. 387-437.
67. Soslow R.A., Dannenberg A.J., Rush D. et al. COX-2 is expressed in human pulmonary, colonic, and mammary tumors // Cancer. - 2000. - 89(12). - P. 2637-45.
68. Teicher B.A., Korbut T.T., Menon K. et al. Cyclooxygenase and lipoxygenase inhibitors as modulators of cancer therapies // Cancer Chemother. Pharmacol.
- 1994. - 33(6). - P. 515-22.
69. Thun M.J., Namboodiri M.M., Calle E.E. et al. Aspirin use and risk of fatal cancer // Cancer Res. - 1993.
- 53(6). - P. 1322-7.
70. Tsuji S., Tsujii M., Kawano S. et al. Cyclooxy-genase-2 upregulation as a perigenic change in carcinogenesis // J. Exp. Clin. Cancer Res. - 2001. - 20(1). - P. 117-29.
71. Walenga R.W., Kester M., Coroneos E. et al. Constitutive expression of PGHS-2 but not PGHS-1 in human tracheal epithelial cells in vitro // Prostaglandins. -
1996. - 52. - P. 341-59.
72. Warner T.D., Giuliano F., Vojnovic I. et al. Nonsteroid drug selectivies for cyclo-oxygenase-1 rather than cyclo-oxygenase-2 are associated with human gastrointestinal toxicity: A full in vitro analysis // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1999. - 96. - P. 7563-8.
73. Wolff H., Saukkonen K., Anttila S. et al. Expression of cyclooxygenase-2 in human lung carcinoma // Cancer Res. - 1998. - 58. - P. 4997-5001.
74. Ziegler J. Early trials probe COX-2 inhibitors' cancer-fighting potential // J. Nat. Cancer Inst. - 1999. -91(14). - P. 1186-7.
75. Zimmermann K.C., Sarbia M., Schror K., Weber A.-A. Constitutive cyclooxygenase-2 expression in healthy human and rabbit gastric mucosa // Mol. Pharmacol. -1998. - 54(3). - P. 536-40.
Поступила 24.01.2008.
