CC BY
28
^[ГШ > E^^^HZEQ
Новости клеточных технологий
Трансплантация фетальной нервной ткани
при хорее Гентингтона - результаты шестилетнего
наблюдения
Xoрeя Гентингтона [Huntington's disease, Huntington's chorea] - наследственное моногенное неуклонно прогрессирующее нейродегенеративное заболевание, проявляющееся специфическими моторными нарушениями [хореей], изменением поведения и прогрессирующей деменцией. Несколькими группами исследователей для коррекции данного заболевания был предложен метод нейротрансплантации фетальной ткани головного мозга. Целью нейротрансплантации должна была стать замена нервной ткани области стриатума в головном мозге реципиентов, функционирующим трансплантатом. Именно в области подкорковых ядер происходит гибель нейронов и теряется функциональная связь с корой. После преклинического изучения метода [7] несколько групп показали безопасность и выполнимость таких процедур в клинике [З-6].
6 лет назад в рамках ограниченных клинических испытаний S пациентам с хореей Гентингтона [XH были выполнены внутримозговые трансплантации фетальной нервной ткани во Французском госпитале CHU Henri Mondor [Creteil, France]. Клеточный материал получали из головного мозга легально абортированных эмбрионов человека 7,S-9 недель гестации. Ткань пересаживали стереотаксически би-латерильно через 4-S треков в хвостатое ядро и скорлупу. Клиническое улучшение [двигательное и когнитивное] продемонстрировали трое пациентов через З0 месяцев после трансплантации [1-З], один пациент умер через 4 года [З]. Долговременное шести-летнее наблюдение З пациентов, продемонстрировавших положительный результат через 2 года после трансплантации [2], представлено в последнем отчете группы, опубликованном в журнале Lancet Neurology.
Значительное улучшение двигательной функции и стабилизация наблюдалось у 2 пациентов в течение всего времени [6 лет] и у одного пациента в течение первых 4 лет, однако после этого вновь появлялось усиление дистонии. Психомоторика и когнитивные функции по шкалам MDRS [Mattis Dementia Rating Scale] и MMSE [Mini-Mental State Examination] у всех пациентов сильно варьировали с периодами улучшения, стабилизации и ухудшения. Электрофизиологический тест показал стабилизацию заболевания в течение S лет с момента трансплантации. Гипосигнал, ассоциированный с трансплантатом в стриатуме, на магнитно-резонансной томографии оставался неизменным в течение 6 лет. Накопление глюкозы, по данным позитронно-эмиссонной томографии, в этой области оставалось сниженным все время наблюдения, однако на таком же уровне, как и до трансплантации. Тем не менее, накопление глюкозы в коре области лобной доли улучшалось до нормального уровня через 2 года после процедуры и оставалось стабильным в течение всего времени
наблюдения. Такая метаболическая гетерогенность после нейротрансплантации согласуется с данными Furtado S. [9].
Авторы исследования делают вывод о долговременном терапевтическом эффекте метода нейротрансплантации у пациентов с ХГ. Улучшение и стабилизация процесса клинически и по инструментальным данным исследования активности головного мозга наблюдалась у трех пациентов из пяти в течение 6 лет. Авторы выделяют период значительного улучшения - первые 2 года после трансплантации, и период стабилизации - последующие 3-4 года. Интересно, что после трансплантации наблюдалось быстрое восстановление области лобной коры, остальные области поражались при продолжающейся прогрессии заболевания. В аналогичном пилотном исследовании другой группы - Hauser [6] - наблюдали сходные изменения синдрома хореи через год после трансплантации. Хотя в исследовании не было контрольной группы, авторы экстраполировали статистические данные пациентов с ХГ, получающих стандартное лечение, и показали значительную разницу по сравнению с пациентами, получившими нейротрансплантат. Так, например, известно, что метаболическая активность области стриатума у таких пациентов стандартно снижается в среднем на 14% в год [8], следовательно, за 6 лет эта цифра приближается к 60%, однако у 3 анализируемых больных, получивших трансплантат, аналогичный показатель составил только 7% за 6 лет.
К сожалению, в ситуации с ХГ функционирующий трансплантат, внесенный с заместительной целью, не может противостоять прогрессу нейродегенерации в целом, поскольку причиной болезни является наследственный генетический дефект. Тем не менее, на аутопсийном материале было показано, что пересаженные нервные клетки длительно выживают и не подвергаются изменениям, характерным для ХГ [4]. Таким образом, внутримозговая трансплантация фе-тальной нервной ткани пациентам с ХГ, по предварительным данным, может обеспечить период улучшения и длительной стабилизации в течение заболевания. Положительный эффект может быть получен лишь у ряда пациентов, поэтому необходим тщательный отбор и отработка критериев для проведения трансплантации. Как и в онкологии, неврологам-клиницистам и пациентам в будущем, возможно, придется выбирать между степенью и продолжительностью ожидаемого терапевтического эффекта и рисками, связанными с хирургическим вмешательством, иммуносупрессией и т.д. Более информативные данные по клинической эффективности метода будут получены после продолжения испытаний на большей группе пациентов в нескольких центрах, проходящих в настоящее время.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Bachoud-Levi A.-C., Remy P., Nguyen J.-P. et al. Motor and cognitive improvements in patients with Huntington's Disease after intracerebral transplantation. Lancet 2000; 356: 1975-79.
2. Bachoud-Levi A.-C., Hantraye P., Peschanski M. Fetal neural grafts Huntington's disease: a prospective view. Mov. Disord. 2002; 17: 439-44.
3. Bachoud-Levi A.-C., Bourdet C., Brugieres P. et al. Safety assessment of intrastriatal neural allografts in 5 patients with Huntington's disease. Exp. Neurol. 2000; 161: 194-202.
4. Freeman T.B., Cicchetti F., Hauser R.A. et al. Transplanted fetal striatum in Huntington's disease: phenotypic development and lack of pathology. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000; 97: 13877-82.
5. Rosser A.E., Barker R.A., Harrower T. et al. Unilateral transplantation of human primary fetal tissue in four patients with Huntington's disease: NEST-UK safety report ISRCTN no 36485475. J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 2002; 73: 678-85.
6. Hauser R.A., Furtado S., Cimino C.R. et al. Bilateral human fetal striatal transplantation in Huntington's disease. Neurology 2002; 58: 687-95.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 3 (5), 2006
■ мм
ш
Новости клеточных технологий
7. Pa If i S., Conde F., Riehe D. et al. Fetal striatal allografts reverse cognitive deficits in a primate model of Huntington disease. Nat. Med. 1 998; 4: 963-66.
8. Kremer B., Clark C.M., Almqvist E.W. et al. Influence of lamotrigine on
progression of early Huntington disease: a randomized clinical trial. Neurology 1999; 53: 1000-11.
9. Furtado S., Sossi V., Hauser R.A. et al. Positron emission tomography after fetal transplantation in Huntington's disease. Ann. Neurol. 2005; 58: 331 -7.
Подготовил A.B. Берсенев по материалам Lancet Neurol. 2006; 5: 303-9
Аутотрансплантация Сй34+ клеток для лечения хронической печеночной недостаточности - результаты пилотного исследования
В настоящее время все терапевтические подходы к лечению печеночной недостаточности [ПН] остаются малоэффективными. Трансплантация печени доступна лишь небольшому проценту пациентов из-за недостатка донорских органов и высокой стоимости самой процедуры. Ряд исследователей предлагает решать проблему лечения ПН методами клеточной трансплантации. Одним из перспективных видов клеточного материала для этого считают стволовые и прогениторные клетки, выделенные из костного мозга или мобилизированные в периферический кровоток [1 ]. Трансплантация костного мозга или инфузия гемопоэтических стволовых клеток [ГСК] через неясные механизмы приводила к регенерации печени в различных экспериментальных моделях ПН [1].
ГСК уже давно используются для репопуляции кроветворной ткани при ее недостаточности [2]. Общепринятым маркером ГСК у человека считается CD34+. Другой изученной субпопуляцией являются CD133+ и CD34+/CD133+ ге-мопоэтические клетки. В прошлом году были опубликованы результаты первых клинических наблюдений внутрипортальной аутотрансплантации CD133+ клеток для регенерации резецированной печени, проходившего в Heinrich-Heine-University of Duesseldorf [Duesseldorf, Germany] [3]. Исследование продемонстрировало безопасность и выполнимость методики у тяжелой категории пациентов после удаления опухолей печени [3].
Исходя из экспериментальных данных и опираясь на клинический опыт применения ГСК, группой Gordon из Imperial College London [London, UK] было предположено, что именно фракция очищенных CD34+ клеток будет обладать регенеративным потенциалом у пациентов с хронической ПН. Результаты пилотного исследования опубликованы в он-лайн версии журнала Stem Cells.
В исследование было включено 5 пациентов [4 мужчины и 1 женщина] в возрасте от 49 до 61 лет, с хронической ПН различного генеза, имеющих повышенные уровни сывороточного альбумина и/или билирубина, и/или протромбина и не подлежащих лечению методом трансплантации печени. Прогнозируемая продолжительность жизни во всех случаях составляла не менее трех месяцев.
С целью мобилизации ГСК в периферический кровоток все пациенты ежедневно получали подкожные инъекции Г-КСФ [гранулоцитарного колониестимулирующего фактора]. CD34+ клетки выделяли методом магнитного сортинга из аферезного продукта на 5-е сутки от начала мобилизации.
Клетки вводили в печень через печеночную артерию [2 пациента] или портальную вену [3 пациента] в количестве от 1 до 200 млн. На следующий день пациентов отпускали под амбулаторное наблюдение.
Динамическое наблюдение пациентов проводили в течение 60-ти дней с момента трансплантации. Проводились функциональные печеночные тесты, биохимические анализы, инструментальные тесты [ультразвуковое сканирование органа и компьютерная томограмма].
Авторы отмечают безопасность процедуры. Не было выявлено никаких побочных эффектов, кроме легкой боли и дискомфорта в области введения клеток. После инфузий также не было отмечено печеночного и портального кровотечения, тромбозов сосудов, инфекции или ухудшения метаболической функции органа. У всех пациентов наблюдалась нормализация уровней билирубина, альбумина и С-реактив-ного белка, два пациента продемонстрировали резкое улучшение метаболической функции печени. Таким образом, первая фаза клинических испытаний показала безопасность и выполнимость метода трансплантации мобилизированных CD34+ клеток пациентам с хронической ПН.
Кроме начала клинических испытаний, авторы провели интересные эксперименты in vitro. Было обнаружено, что в основной популяции CD34+ клеток существует 2 субпопуляции, различающиеся способностью адгезии к пластику. Способные к адгезии клетки составляли примерно 1% общего количества CD34+. Морфологически они были похожи на малые лимфоциты, в небольших количествах экспрессировали на своей поверхности молекулы CD38, CD33, и HLA-DR. Было показано, что адгезивные и неадгезивные CD34+ клетки отличаются морфологически, фенотипически, а также по профилям экспрессии различных генов, что указывает на различия их свойств. Так, например, неадгезивные CD34+ клетки, в основном, экспрессировали молекулы, ассоциированные с дифференцировкой гемопоэтических клеток. Адгезивные же CD34+ клетки наряду с гемопоэтическими маркерами эксп-рессировали некоторые гены печеночной, панкреатической, нервной и сердечной линий дифференцировки.
Кроме того, авторы предполагают, что мобилизирован-ные ГСК, циркулирующие в крови, не содержат достаточного количества адгезивных CD34+ клеток, способных дифференцироваться в гепатоциты, т.к. они составляли всего лишь 1 % их общей популяции. Поэтому, введение одних факторов, приводящих к мобилизации ГСК у больных с ПН, может быть недостаточным для терапевтического эффекта. Выявленные
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 3 (5), 2006
