CC BY
17
УДК 611-013.018 DOI: https://doi.org/10.34680/2076-8052.2019.1(113).51-55
ТКАНЕВЫЕ РЕАКЦИИ В ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЕ ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ПЕРИНАТАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ У КРЫС
А.В.Савищев, Е.Ю.Панкратова, А.В.Дробленков***
PANCREATIC TISSUE REACTIONS AFTER EXPOSURE TO ALCOHOL INTOXICATION DURING THE PERINATAL PERIOD OF THE RAT
A.V.Savischev, E.Yu.Pankrashova, A.V.Droblenkov***
Астраханский государственный медицинский университет * Институт медицинского образования НовГУ, [email protected] ** Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург
Количественные параметры и степень выраженности реактивных изменений эпителиев экзо- и эндокринного аппаратов, а также интерстициальной соединительной ткани поджелудочной железы у потомства, обусловленные перинатальным воздействием этанола на материнский организм, слабо изучены. Это затрудняет дальнейшее изучение патогенеза и эффективности медикаментозной терапии алкогольной перинатальной патологии. С целью установления реактивных изменений основных типов тканей в дольках поджелудочной железы у молодых самцов крыс после алкогольной интоксикации в перинатальном периоде, половозрелым самкам крыс устанавливали алкогольную диету, предусматривающую полупринудительное поглощение 15% раствора этанола, начиная с 1-го дня беременности до 17-го дня постнатального развития (n = 5). Интактные самцы крыс служили контролем (n = 5). Гисто-морфометрический анализ панкреатических долек осуществляли у животных при достижении ими 61 сут. В 0,01 мм2 площади срезов после их окрашивания методом Маллори и докрашивания базофильных гранул В-инсулоцитов паральдегид-фуксином при помощи программы Imagescope (Электронный анализ, Россия) устанавливали площадь ацинусов, ациноцитов, В-инсулоцитов, прослоек внутридольковой межацинарной соединительной ткани, количество в ней фибробластов, отношение площади гомогенной части ациноцита к площади его зимогенной части. В результате исследования установлено, что алкогольная интоксикация в пренатальном периоде вызывает в дольках поджелудочной железы у крыс пубертатного возраста атрофические изменения эпителия и фиброз. Атрофия эпителиального компонента долек выражается уменьшением площади ацинусов, образованием участков их дезинтеграции, уменьшением площадей ациноцитов, их гомогенной зоны, сморщиванием и распылением базофильных гранул в цитоплазме В-инсулоцитов. Фиброз выражается увеличением площади внутридольковой соединительной ткани и числа ее клеток.
Ключевые слова: алкогольная интоксикация, ткани поджелудочной железы, реактивные изменения
The quantitative parameters and the severity of reactive changes in the epithelia of the exo-and endocrine apparatus, as well as interstitial connective tissue of the pancreas in the offspring, due to the perinatal effect of ethanol on the maternal organism, are poorly understood. This complicates the further study of the pathogenesis and efficacy of drug therapy of alcohol-free perinatal pathology. In order to establish reactive changes in the main types of tissue in the pancreatic lobules in young male rats after alcohol intoxication in the perinatal period, an adult diet was established for sexually mature female rats, providing for a semi-compulsive absorption of a 15% solution of ethanol from the 1 st day of gestation to the 17th day postnatal development (n = 5). Intact male rats served as controls (n=5). Histo-morphometric analysis of the pancreatic lobules was performed in animals when they reached 61 days. In 0.01 mm2 of the sectional area after staining with Mallory method and coloring the basophil granules of B-insulocytes with paraldehyde-fuchsin using the Imagescope program (Electronic analysis, Russia), the area of acini, acinocytes, B-insulocytes, interacinar connective tissue, the number in it fibroblasts, the ratio of the area of the homogeneous part of the acinocyte to the area of its zimogen part. As a result of the study, it was established that alcohol intoxication in the prenatal period causes atrophic changes in the epithelium and fibrosis in pancreatic lobules in rats of pubertal age. Atrophy of the epithelial component of the lobules is expressed by a decrease in the area of acini, the formation of areas of their disintegration, a decrease in the areas of acinocytes, their homogeneous zone, wrinkling and spraying of basophilic granules in the cytoplasm of B-insulocytes. Fibrosis is expressed by an increase in the area of the intralobular connective tissue and the number of its cells.
Ключевые слова: alcohol intoxication, pancreatic tissue, reactive changes
Введение
Сегодня накоплено много данных, раскрывающих молекулярные механизмы инсулярной и внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы в разные возрастные периоды у организмов при алкогольной фетопатии [1-9]. Однако
фундаментальные исследования реактивных изменений тканевых элементов органа в результате трансплацентарного и раннего постнатального влияния низких концентраций этанола являются единичными. Многие важные морфологические явления, выражающие функциональную недостаточность поджелудочной железы в условиях алкоголь-
ной фетопатии, остаются неизвестными, что может затруднять дальнейшее изучение патогенеза и эффективности медикаментозной терапии данной перинатальной патологии.
Целью исследования было установить особенности реактивных изменений эпителия и соединительной ткани в дольках поджелудочной железы у молодых крыс после алкогольной интоксикации в пренатальном периоде.
Материалы и методы
Объектом исследования были дольки поджелудочной железы у двух групп самцов крыс Вистар (по 6 животных) в возрасте 61 суток. Выбирали наиболее крупные особи. Для постановки эксперимента половозрелым самкам крыс устанавливали алкогольную диету, включающую 15%-й раствор этанола в качестве единственного источника жидкости и свободный доступ к брикетированному сухому корму. Алкоголизацию самок проводили, начиная с 1 -го дня беременности до 17-го дня постнатального развития (средний возраст окончания грудного вскармливания). 5 самцов двухмесячных интактных крыс служили контролем. Этот метод был апробирован в морфологических исследованиях печени [10] и головного мозга [11]. В контрольной группе крысы были интактными, поскольку материнские особи содержались в аналогичных условиях и спирт не поглощали.
Аутопсия тела поджелудочной железы была выполнена в утренние часы до кормления животных через 3 мин после декапитации, осуществленной согласно «Правилам лабораторной практики в Российской Федерации» (приказ МЗ РФ от 2003 г. №267). Кусочки фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в 96% изопро-паноле и заливали в парафин. Для выявления цито-плазматических зон ациноцитов и матрикса соединительной ткани долек срезы толщиной 3 мкм окрашивали методом Маллори (Biovitrum). Базофиль-ную зернистость клеток островков, вырабатываю-
щих инсулин (В-инсулоцитов), выявляли в результате докрашивания этих же срезов паральдегид-фуксином (Biovitrum).
Произвольно выбранные срезы исследовали при помощи морфометрической программы Im-agescope (Электронный анализ, Россия). На площади 0,01 мм2 устанавливали площадь ацинусов, ациноцитов, В-инсулоцитов, прослоек внутридольковой ме-жацинарной соединительной ткани, количество в ней фибробластов, отношение площади гомогенной части ациноцита к площади его зимогенной части. Площадь тканевых элементов определялась программой автоматически после очерчивания контуров их поверхности.
Для всех вычисленных средних величин с помощью компьютерной программы Exell были определены среднее арифметическое, среднее квадратиче-ское отклонение и стандартная ошибка среднего арифметического. Сравниваемые параметры считали значимыми при р < 0,05.
Результаты исследования
У интактных крыс в пубертатном периоде панкреатические ацинусы на всей площади долек почти слабо различались между собой по размерам, имели вид мешочков с выпуклым и слегка неровным контуром их наружной поверхности. Средняя площадь ацинусов составила 214,3±12,7 мкм2 (рис.1, табл.1). Относительно мономорфные ацино-циты обладали высокой конусовидной формой, контрастно окрашенными базофильной (гомогенной) и зернистой оксифильной (зимогенной) частями цитоплазмы. Ядра ациноцитов, имевшие чаще всего правильную округлую форму, локализовались в области середины базофильной зоны. Площадь ациноцитов составила 22,1±0,9 мкм2. Площадь гомогенной части ациноцитов (12,6±0,7) в 1,5 раза превышала площадь их зимогенной части (8,2±0,5; р < 0,05). Отношение площади гомогенной части ациноцитов к площади их зимогенной части было равно 1,7±0,1.
Рис.1. Строение тканей поджелудочной железы 61-суточной интактной крысы. Окраска методом Маллори, докрашивание секреторных гранул В-инсулоцитов паральдегид-фуксином. МСТ — междольковая соединительная ткань, ВВП — внутридолько-вый выводной проток, фибробласты обозначены стрелками. Пунктиром обведена площадь исследования, равная 0,01 мм2. а — ок. х10, об х40, б — ок. х10, об. х 100
Таблица 1
Изменения морфометрических параметров тканевых элементов экзокринной части поджелудочной железы у 61-суточных крыс после перинатального воздействия этанола на площади 0,01 мм2 (х ± Sх)
Воздействие этанола Площадь, мм2 Отношение площади гомогенной зоны к площади зимогенной зоны ациноцита
ацинусов ациноцитов гомогенной зоны зимогенной зоны
Нет (интактные крысы) 214,3±12,7 22,1±0,9 12,6±0,7 8,2±0,5 1,7±0,1
Есть (эксперимент) 178,2±13,4* 17,6±0,9* 5,9±0,4* 12,5±0,5* 0,8±0,3*
Примечание. * — различие величин значимо (р < 0,05); количество подсчетов ш = 36
Панкреатические островки были преимущественно небольшими. Хорошо развитая цитоплазма содержала компактное скопление базофильных гранул. Площадь инсулиноцитов составила 17,8 ± 0,8 мкм2 (табл.2).
Таблица 2
Изменения морфометрических параметров В-инсулоцитов и межацинарной соединительной ткани поджелудочной железы у 61-суточных крыс после перинатального воздействия этанола на площади 0,01 мм2 (х ± Sх)
Воздействие этанола Площадь, мм2 Количество фибробла-стов
В-инсуло-цитов межацинар-ной соединительной ткани
Нет (интактные крысы) 17,8±0,8 512,6±21,4 11,1±0,5
Есть (эксперимент) 14,1±0,7* 5,9±0,4* 15,2±0,8*
Примечание. * — различие величин значимо (р < 0,05); количество подсчетов ш = 36
Интерстициальная соединительная ткань в эк-зокринной части железы представляла собой тонкие прерывистые прослойки площадью 512,0 ± 21,4 мкм2 (в пределах области интереса). Плотность ее распределения визуально была равномерной. Фибробласты и фиброциты в межацинарной строме располагались хаотично: некоторые клетки локализовались вблизи сосудов, основная же их часть была удалена от сосудов на разное расстояние. Количество клеток (на площади 0,01 мм2) было равно 11,1 ± 0,5 единицам.
После трансплацентарного воздействия этанола на систему «мать-плод» в поджелудочной железе крыс пубертатного периода жизни был выявлен ряд значительных патологических изменений тканей (рис.2, табл.2). Панкреатические ацинусы различались между собой по величине и форме. В некоторых частях долек отмечались участки их измельчения и дезинтеграции. Интерстициальная соединительная ткань в последних располагалась между ациноцита-ми. Средняя площадь ацинусов уменьшилась по сравнению с контролем в 1,2 раза (р < 0,05).
Форма и размеры ациноцитов были значительно более гетероморфными, чем в контроле. У многих клеток отмечалось истончение базофильной гомогенной зоны, выраженное в разной степени вплоть до ее отсутствия. Мелкодисперсная зернистость была рас-
••••
1*1
V ' ! «
•V
Рис.2. Реактивные изменения тканей поджелудочной железы 61-суточной крысы при трансплацентарном воздействии этанола на систему «мать-плод». Окраска методом Маллори, докрашивание секреторных гранул паральдегид-фуксином. МСТ — меж-дольковая соединительная ткань, ВВП — внутридольковый выводной проток, фибробласты обозначены стрелками. Пунктиром обведена площадь исследования, равная 0,01 мм2. а — ок. х10, об *40, б — ок. *10, об. *100
пределена в апикальной части ациноцитов менее равномерно и окрашивалась слабее, чем у интактных крыс. Ядра ациноцитов также отличались от контроля определенной полиморфией; многие из них были мельче, чем в контроле, располагались вплотную по отношению к базальной поверхности клетки, некоторые были уплощены. Были отмечены ядра округлой, овальной, треугольной и удлиненной формы, нормо-хромные, гипер- и гипохромные, различные по величине. Площадь ациноцитов в эксперименте уменьшилась по сравнению с контролем в 1,3 раза (р < 0,05). Площадь гомогенной зоны ациноцитов оказалась меньше данной величины у интактных крыс в 2,3 раза, тогда как площадь зимогенной зоны, наоборот, возросла в 1,5 раза (р < 0,05). Отношение площади гомогенной зоны ациноцитов к площади их зимоген-ной зоны, соответственно, по сравнению с контролем сократилось в 2,1 раза и составило 0,8 ± 0,3 единицы.
Панкреатические островки в результате перинатального воздействия этанола отличались от нормы значительной вариабельностью размеров. Площадь В-инсулоцитов была меньше, чем у интактных крыс в 1,3 раза. Форма клеток, размеры и строение ядер визуально от нормы не отличались. Базофильные гранулы у большинства клеток располагались менее плотно, чем у интактных крыс данного возраста.
Прослойки соединительной ткани между аци-нусами экспериментальных животных были такими же тонкими, как и у интактных крыс, однако менее прерывистыми. В отдельных небольших участках долек, преимущественно вблизи сосудов, они были несколько утолщены и содержали скопления фиброб-ластов. Площадь стромы в дольках экспериментальных крыс, по сравнению с контролем, увеличилась в 1,5 раза (на площади в 0,01 мм2, р < 0,05). Количество фибробластов возросло, по сравнению с их количеством у интактных крыс в 1,4 раза (р < 0,05).
Результаты и их обсуждение
Реактивные изменения эпителия панкреатических ацинусов и В-инсулоцитов, выявленные у молодых крыс после перинатальной алкогольной интоксикации, могут быть квалифицированы как атрофиче-ские. В этиологии атрофии заложен фактор длительной интоксикации [12] этанолом и его метаболитами, которые вызывают деструкцию, уменьшение количества органелл, конденсацию цито- и нуклеоплазмы у различных тканевых клеток, например, гепатоцитов [13] и нейронов [14]. При условии длительного воздействия данного фактора на клетки развиваются устойчивые изменения, в частности гиперхромия и сморщивание [11,15,16]. В настоящей работе большинство перечисленных изменений эпителиоцитов являются устойчивыми и, по-видимому, необратимыми, поскольку они определялись через 61 сутки после прекращения воздействия этанола на организм после его рождения. В отличие от резидентных атро-фических явлений, дистрофические признаки, как известно, являются преходящими [12]. При остром воздействии на клетки этанола и его метаболитов развиваются обратимые явления дистрофии типа гид-ропической. Если же при хронической алкогольной
интоксикации воздействовать этанолом на клетки остро, то признаки их дистрофии развиваются временно, после выведения из организма токсикантов они исчезают, уступая место резидентным признакам атрофического сморщивания [4,5].
Атрофические изменения эпителиальных клеток поджелудочной железы, установленные в настоящей работе, могут быть обусловлены хорошо известными патогенетическими механизмами. Главными из них являются устойчивое снижение уровня синтеза в клетках ДНК и белка [17], накопление в ациноцитах и инсулиноцитах активных форм кислорода [6,8,9], деполяризация мембран этих клеток, в том числе митохондриальных [8]. Названные биохимические явления, установленные авторами в результате воздействия этанола и важнейших его метаболитов в пренатальном периоде, могут являться причиной образования таких существенных атрофических изменений исследуемых железистых клеток, как уменьшение размеров, разреженность секреторных гранул, истончение гомогенной зоны ациноцитов.
Имеющиеся данные об активации каспаз в аци-ноцитах и инсулиноцитах, индуцированной воздействием этанола и его важнейших метаболитов [8,9] могут помочь в понимании причины возникновения участков дезинтеграции, определенной гетероморфии ациноци-тов, участков их выпадения и заместительной гиперпластической реакции соединительной ткани в дольках. Вполне вероятно, что гиперплазия интерстициальной соединительной ткани, наблюдавшаяся в эксперименте, могла развиваться в прежние сроки, которые в данной работе не исследованы, и вызывать атрофические изменения эпителия ацинусов от их сдавления.
Отдельные положения настоящего исследования не лишены противоречий с данными литературы. В частности, гомогенная зона ациноцитов в нашем эксперименте не содержала скоплений гранул зимогена вблизи основания и боковой поверхности клеток, наблюдавшихся при культивировании панкреатических ацинусов взрослых крыс в растворе этанола и его метаболитов [5].
Атрофические изменения железистого эпителия долек поджелудочной железы, индуцированные перенатальным воздействием этанола, выявленные в ходе настоящего исследования, представляют собой морфологический эквивалент функциональной недостаточности данного органа. Работы последних лет дополняют большую серию исследований патогенеза алкогольной фетопатии новыми данными об алко-голь-индуцированном снижении экзокринной функции [1,3,7], выработки инсулина [2], иммунной резистентности В-инсулоцитов [9].
Таким образом, алкогольная интоксикация в пренатальном периоде вызывает в дольках поджелудочной железы у крыс пубертатного возраста атро-фические изменения эпителия и фиброз долек. Первые выражаются уменьшением площади ацинусов, образованием участков их дезинтеграции, уменьшением площадей ациноцитов, их гомогенной зоны, сморщиванием и распылением базофильных гранул в цитоплазме В-инсулоцитов. Вторые выражаются увеличением площади внутридольковой соединительной ткани и числа ее клеток.
1. Cano M.J., Murillo M.L., Delgado M.J., Can-eras O. Effects of ethanol and folic acid consumption during pregnancy and lactation on basal enzymatic secretion in the duodenal juice of offspring rats // Nutrition. 2003. Vol.19. №9. Р.778-783.
2. Chen L., Nyomba B.L. Effects of prenatal alcohol exposure on glucose tolerance in the rat offspring // Metabolism. 2003. Vol.52. №4. Р.454-462.
3. Garcia-Benitez O., Delgado-Villa M.J., Murillo M.L., Cameras O. Sex-related differences in effect of ethanol administration and folic acid supplementation on pancreatic amylase in rats // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2004. V.74. №1. Р.64-75.
4. Dolai S., Liang T., Lam P.P. et al. Effects of ethanol metabolites on exocytosis of pancreatic acinar cells in rats // Gastroenterology. 2012. Vol.143. №3. Р.832-843.
5. Garcia-Benitez O., Delgado-Villa M.J., Murillo M.L., Cameras O. Sex-related differences in effect of ethanol administration and folic acid supplementation on pancreatic amylase in rats // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2004. V.74. №1. Р.64-75.
6. Lee J.H., Nguyen K.H., Mishra S., Nyomba B.L. Prohibitin is expressed in pancreatic beta-cells and protects against oxidative and proapoptotic effects of ethanol // FEBS J. 2010. Vol.277. №2. P.488-500.
7. Probyn M.E., Parsonson K.R., Gardebjer E.M. et al. Impact of low dose prenatal ethanol exposure on glucose homeostasis in Sprague-Dawley rats aged up to eight months // Published online. Pubmed. 2013. Doi: 10.1371/journal.pone. 0059718.
8. Seo J.B., Gowda G.A., Koh D.S. Apoptotic damage of pancreatic ductal epithelia by alcohol and its rescue by an antioxidant // Published online. Pubmed. 2013. Doi: 10.1371/journal.pone.0081893.
9. Suguna P., Geetha A., Aruna R., Siva G.V. Effect of thymoquinone on ethanol and high fat diet induced chronic pancreatitis a dose response study in rats // Indian J. Exp. Biol. 2013. Vol.51. №4. P.292-302.
10. Бобков П.С., Дробленков А.В., Карелина Н.Р. Количество эндотелиоцитов синусоидных капилляров печени как показатель направленности алкогольного фиброза // Учен. зап. СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова. 2011. Т.18. №2. С.29-31.
11. Дробленков А.В., Карелина Н.Р. Усиление программированной гибели и дегенеративные изменения нейронов мезокортиколимбической дофаминергической системы как причина врожденной алкогольной зависимости // Морфология. 2012. Т.141. Вып.1. С.16-23.
12. Абрикосов А.И. Основы частной патологической анатомии. М: Медгиз, 1950. 474 с.
13. Джаманкулов З.Т. Ультраструктурные изменения печени как дополнительный критерий алкогольной интоксикации // Судебно-медицинская экспертиза. 1987. №4. С.47-50.
14. June H.L., Cason C.L., Cheatham G. et al.. GABBA-benzodiazepine receptors in the striatum are involved in the sedation produced by a moderate, but not an intoxicating ethanol dose in out-bred Wistar rats // Brain Res. 1998. Vol.794. №1. Р.103-118.
15. Дробленков А.В. Дифференциальная диагностика отравления этанолом, алкогольной абстиненции и хронической алкогольной интоксикации по изменениям нейронов и макроглиоцитов коры головного мозга // Судебно-медицинская экспертиза. 2010. Т.53. №4. С.28-33.
16. Дробленков А.В. Морфологическите признаки отравления этанолом, алкогольной абстиненции и хронической алкогольной интоксикации в мезокортиколимбической дофаминергической системе // Судебно-медицинская экспертиза. 2011. Т.54. №5. С.11-18.
17. Тимошенко Л.В., Скакун И.П., Скакун Г.К. Алкогольный синдром плода. Киев: Здоров'я, 1987. 248 с.
References
1. Cano M.J., Murillo M.L., Delgado M.J., Cameras O. Effects of ethanol and folic acid consumption during pregnancy and lactation on basal enzymatic secretion in the duodenal juice of offspring rats Nutrition., 2003, vol. 19, no.9, pp. 778-783.
2. Chen L, Nyomba B.L. Effects of prenatal alcohol exposure on glucose tolerance in the rat offspring. Metabolism, 2003, vol. 52, no.4, pp. 454-462.
3. García-Benítez O., Delgado-Villa M.J., Murillo M.L., Carreras O. Sex-related differences in effect of ethanol administration and folic acid supplementation on pancreatic amylase in rats. Int. J. Vitam. Nutr. Res., 2004. vol. 74, no.1, pp. 64-75.
4. Dolai S., Liang T., Lam P.P., Fernandez N.A., Chidambaram S., Gaisano H.Y. Effects of ethanol metabolites on exocytosis of pancreatic acinar cells in rats. Gastroenterology, 2012, vol. 143, no.3, pp. 832-843.
5. García-Benítez O, Delgado-Villa MJ, Murillo ML, Carreras O. Sex-related differences in effect of ethanol administration and folic acid supplementation on pancreatic amylase in rats. Int. J. Vitam. Nutr. Res., 2004, vol. 74, no.1, pp. 64-75.
6. Lee J.H., Nguyen K.H., Mishra S., Nyomba B.L. Prohibitin is expressed in pancreatic beta-cells and protects against oxida-tive and proapoptotic effects of ethanol. FEBS J., 2010, t. 277, no.2, pp. 488-500.
7. Probyn M.E., Parsonson K.R., Gardebjer E.M. et al. Impact of low dose prenatal ethanol exposure on glucose homeostasis in Sprague-Dawley rats aged up to eight months. Published online. Pubmed, 2013. doi: 10.1371/journal.pone. 0059718.
8. Seo J.B., Gowda G.A., Koh D.S. Apoptotic damage of pancreatic ductal epithelia by alcohol and its rescue by an anti-oxidant. Published online. Pubmed, 2013. doi: 10.1371/journal.pone.0081893.
9. Suguna P., Geetha A., Aruna R., Siva G.V. Effect of thymoquinone on ethanol and high fat diet induced chronic pancreatitis a dose response study in rats. Indian J. Exp. Biol., 2013, vol. 51, no 4, pp. 292-302.
10. Bobkov P.S., Droblekov A.V., Karelina N.R. Kolichestvo endoteliotsitov sinusoidnykh kapillyarov pecheni kak poka-zatel' napravlennosti alkogol'nogo fibroza [The number of endothelial cells of sinusoidal capillaries of the liver as an indicator of the orientation of alcoholic fibrosis]. The Scientific Notes of the I. P. Pavlov St. Petersburg State Medical University, 2011, vol.18, no.2, pp. 29-31.
11. Droblekov A.V., Karelina N.R. Usileniye programmirovannoy gibeli i degenerativnyye izmeneniya neyronov mezokortikolim-bicheskoy dofaminergi-cheskoy sistemy kak prichina vrozhden-noy alkogol'noy zavisimosti [Activation of programmed cell death and degenerative changes of neurons of mesocorticolimbic dopaminergic system as a possible cause of inherited alcohol addiction]. Morfologiya. 2012, v.141, no.1, p.16-23.
12. Abrikosov A.I. Osnovy chastnoy patologicheskoy anatomii. [Fundamentals of private pathological anatomy]. Moscow, Medgiz Publ., 1950.
13. Dzhamankulov Z.T. Ul'trastrukturnyye izmeneniya pecheni kak dopolnitel'nyy kriteriy alkogol'noy intoksikatsii [Ultrastructural liver damage as an additional criterion of alcohol intoxication]. Sudebno-meditsinskaya ekspertiza. 1987, no.4, pp. 47-50.
14. June H.L., Cason C.L., Cheatham G. et al GABBA-benzodiazepinovyye retseptory v polosatom tele uchastvuyut v sedatsii, vyzvannoy umerennoy, no ne op'yanyayushchey dozoy etanola u razvedennykh krys Wistar [GABBA-benzodiazepine receptors in the striatum are involved in the sedation produced by a moderate, but not an intoxicating ethanol dose in out-bred Wistar rats]. Brain Res., vol. 794, no.1, pp. 103-118.
15. Droblenkov A.V. Differentsial'naya diagnostika otravleniya etanolom, alkogol'noy abstinentsii i khronicheskoy alkogol'noy intoksikatsii po izmeneniyam neyronov i makro-gliotsitov kory golovnogo mozga [Differential diagnosis of ethanol poisoning, alcohol abstinence and chronic alcoholic intoxication on the changes of neurons and microgliosis of the cerebral cortex] Sudebno-meditsinskaya ekspertiza, 2010, vol.53, no.4, pp.28-33.
16. Droblenkov A.V. Morfologicheskite priznaki otravleniya etanolom, alkogol'noy abstinentsii i khronicheskoy alkogol'noy intoksikatsii v mezokortikolimbicheskoy dofam-inergicheskoy sisteme [Morphological signs of ethanol poisoning, alcohol absistence and chronic alcohol intoxication in the mesocorticolimbic dofa-minergic system] Sudebno-meditsinskaya ekspertiza, 2011, vol.54, no.5, pp. 11-18.
17. Timoshenko L. V., Skakun I. P., Skakun G. K. Alkogol'nyy sindrom ploda [Fetal alcohol syndrome]. Kiev, Zdorovya Publ., 1987.
