CC BY
9ТЕРАПЕВТИЧН1 МОЖЛИВОСТ1 МОДУЛЯЦП АКТИВНОСТ1 NO-СИНТАЗИ ПРИ
КОНТАКТНИХ ДЕРМАТИТАХ
Худан-Цтьо I.I.
Шевчук О.О.
Корда М.М.
ДВНЗ "Тернотльський державний медичний yuieepcumem iMeHi 1.Я. Горбачевського МОЗ Украши ",
м. Тернопшь, Укра'ша.
THERAPEUTIC MODULATION OF NO-SYNTHASE ACTIVITY IN EXPERIMENTAL
CONTACT DERMATITIS
Khudan-Tsilo I.I.
Shevchuk O.O.
Korda M.M.
I. Horbachevsky Ternopil State Medical University, Ternopil
АНОТАЦ1Я
Резюме. Проблема контактних алергшних дерматипв (КД) мае значну медико-сощальну значимють, осшльки так захворювання мають хрошчний nepe6ir та значний негативний вплив на яюсть життя та соцiальну адаптацiю хворих. Метою нашого дослiдження стало вивчення можливостей модуляци актив-ностi iндуцибельноi NO-синтази для лiкування КД, адже важлива роль у розвитковi та хрошзацп захворювання вiдводиться нпрооксидативному стресовi через те, що надмiр NO викликае набряк та розвиток еозинофшьного запалення.
Дослвдження проводили на нелшшних бiлих щурах, КД моделювали за допомогою 5% нiкелю сульфату. Для корекци патологiчного стану, що розвинувся, використовували вiльну та наношкапсульовану форму високоселективного iнгiбiтора шдуцибельно! NO синтази N-(3-(Aмiнометил)бензил)ацетамiдин (1400W).Наночастинки з шкапсульованим 1400W отримували за методикою Hussain Z. et al.
Нанесення 5% сульфату нiкелю супроводжувалося рядом видимих ознак контактного алергiйного шкелевого дерматиту з вираженою запальною реакщею та потовщенням шшрно! складки. Також спо-стерiгався розвиток оксидативного та нирооксидативного стресу зi зростанням рiвня показник1в продуктiв ПОЛ та ослабленням ланок ендогенного антиоксидантного захисту (знижуються показники активностi СОД та вмюту вiдновленого глутатiону).
Застосування нано-шкапсульвано! форми 1400W було б№ш ефективним у зменшенш проявiв запального процесу при КД та супроводжувалося також достовiрним зниженням iнтенсивностi ПОЛ та акти-вацiею показник1в антиоксидантного захисту.Його дiя перевершувала за сво!ми показниками ефекти вшь-но! форми 1400W.
Висновки. Отриманi результати дослвдження сввдчать по перспективнiсть подальшого вивчення та впровадження у клiнiчну практику наношкапсульованих форм лiкарських засобiв, що здатт пригнiчувати iндуцибельну форму NO-синтази, для лшування контактних дерматитiв.
ABSTRACT
Introduction. Allergic contact dermatitis is common disease seen in many countries. It is an important challenge for health care system and immunology because its chronic relapsing inflammatory character, which is thought to be associated with environmental and psychological triggers and skin barrier defects. The prevalence of CD is rising worldwide. Near 15-20% of world population suffers from allergy to at least one contact allergen. Nickel is one of the most common among them. The nitro-oxidative and oxidative stress is the important part of CD pathogenesis.Oxidative stress is defined as the formation of oxidants in the cells of the human body that acutely or chronically exceeds the antioxidant defense capacity. Free radicals, reactive oxygen species (ROS), and nitrogen oxygen species (NOS) are produced during normal metabolic activities. In excess after the initial reaction with ROS, a chain reaction is started, proceeding to cell injury and, ultimately, cell death.
There three main types of NO-synthase (NOS): neuronal (nNOS), endothelial (eNOS) and macropha-gal(iNOS). The signal molecule NO is synthesized from L-arginine following enzyme activation of constitutively expressed eNOS or nNOS. In contrast, the inducible NO synthase (iNOS) is expressed after cell activation only and then produces NO for comparatively long periods of time and is induced by bacteria, interleukins.NO plays an important role in maintenance of chronic CD and its exacerbations because of initiating of eosinophil inflammation and edema.
Ключовi слова. Контактний алергшний дерматит, NO-синтаза, високоселективний шпбггор iNOS 1400W, наночастинки.
Keywords. Allergic contact dermatitis, NO synthase, nano-1400W.
Робота виконана в рамках НДР 0112U000542 токсиканпв i бюлопчних систем» та 0116U003353 «Бюхiмiчнi мехашзми токсичносп наночастинок «Бiохiмiчнi мехашзми порушень метаболiзму за рiзноi природи та шших антропогенних i бюгенних
умов надходження до оргашзму токсикантiв pi3Horo генезу»
Вступ.
Оксидативний та нiтрооксидативний стрес вiдiграють важливу роль у патогенезi захворювань шшри,запускаючи розвиток запалення -нев1д'емно1 частини алергодерма1^в[1-3]. В шкiрi локалiзовано багато клiтин, яш беруть безпосе-редню участь у запальних реакцiях: лiмфоцити, нейтрофiли, плазматичнi клiтини, власне й сам ке-ратиноцити.
Активнi форми кисню постiйно утворюються за аеробних умов в результата рiзноманiтних мета-болiчних реакцiй, однак завжди тдтримуеться баланс мiж про- та антисидантними впливами[4]. Видiляють калька основних активних форм кисню: супероксидний анюн-радикал (О2—); перекис водню (Н2О2) та оргашчш перекиси (ROOH); гiдроксильнi та пероксидш радикали (НО^ , НО2' , RO2' ); синглетнi форми кисню (IO2) та iони НО2-[5, 6].Вiльнi радикали нiтрогену виробляються шд впливом рiзних форм NO-синтази (NOS)[7].Розрiзняють ïï три iзоформи, яш названi вiдповiдно до типу клггин, де вони були вперше ви-явленi: нейрональну або мозкову (nNOS), макро-фагальну (iNOS), та ендотел1альну NOS (eNOS) [8].Окрiм подiлу залежно вiд мiсця локалiзацiï, прийнятий також подш на конститутивну (cNOS) та шдуцибельну (iNOS) синтази оксиду азоту[9]. Конститутивна NOS постiйно перебувае у цитоплазмi i ïï актившсть залежить вiд концентрацiï кальцiю та кальмодул1ну. 1ндуцибельна NOS стимулюеться бактерiальними ендотоксинами та медiаторами запалення, зокрема штерлейкшами[10], та е неввд'емною частиною розвитку вазодилятацiï й ексудацп пiд час запальних процесiв.
Оксид азоту (ендотел1альний фактор релакса-ци судин) утворюеться в процесi окисления L-ар-гiнiну за участi молекулярного кисню, НАДФН, тетрапдробюптерину, ФМН/ФАД, глутатюну, iонiв Са2+ та iнших кофакторiв[11]. Також утворюеться неактивний L-цитрулш, який може знову перетворюватися у арпнш, шдтримуючи його стабiльну концентращю всерединi кл1тин.
Незважаючи на цитотоксичшсть вiльних ради-калiв, вони вщграють важливу роль у функцiонуваннi нейтрофшв, макрофагiв, синтезi ейкозаноïдiв, редокс-регуляцiï експресп генiв, про-цесах метабол1зму, запалення та iмунiтету[5, 6, 12]. Вщомо також, що активнi форми кисню та ниро-гену вiдповiдають за так процеси, як пролiферацiя клгган, iмунна вiдповiдь, апоптоз та диференщащя кл1тин[13, 14].У разi дисбалансу розвиваеться оксидативний стрес, який запускае каскад патолопчних процесiв та провокуе викид прозапальних цито-кiнiв[15].Важлива роль у розвитковi та хронiзацiï' контактного дерматитувщводиться нирооксида-тивному стресовi через те, що надмiр NOвикликае набряк та розвиток еозиноф№ного запалення[9].
Метою нашого дослiдження стало вивчення ефективносп наноiнкапсульованоï та вiльноï форм високоселективного шпбиора iндуцибельноï NO
синтази N-(3 -(Амшометил)бензил)ацетамщин (1400W) при експериментальному контактному шкелевому дерматитi.
Матерiали та методи. Дослвди проведено на 40 статевозрiлих бiлих щурах-самцях масою 180220 г, яких методом слшо! вибiрки було рандомiзо-вано на чотири групи: 1-а - штактш тварини (10 особин); 2-а - тварини з експериментальним кон-тактним нiкелевим дерматитом (КД) (10 особин); 3-я - щури з КД, яким для корекцп застосовували 1400W (КД + 1400W); 4-а - щури з КД, яким наносили на уражену дшянку шк1ри iнкапсульований в хiтозановi наночастинки 1400W (КД + нано-1400W). При проведеннi дослвджень дотримува-лися мiжнародних правил та принцитв «£вропей-сько! конвенцп про захист хребетних тварин, як1 використовуються для експерименпв та з iншою науковою метою» (Страсбург, 1986) i Закону Укра!ни «Про захист тварин вщ жорстокого повод-ження» (№ 1759-VI вiд 15.12.2009) та Директиви £вропейського Союзу 2010/10/63 EU щодо експерименпв на тваринах.
Контактний шкелевий дерматит моделювали шляхом щоденного нанесення протягом 12 днiв на ретельно вистрижену дiлянку шк1ри щурiв (пло-щею 3х3 см) 4 г водного ланол^, що мiстив 5% NiSO4.
Для дослвджень використовували високосе-лективний iнгiбiтор iндуцибельноl NO синтази N-(3 -(Aмiнометил)бензил)ацетамiдин (1400W) (Sigma, Aldrich, USA). Наночастинки з шкапсульо-ваним 1400W готували за методикою Hussain Z. et al.[16]. Полiмернi хiтозановi наночастинки готували шляхом iонного «зшивання» хггозану з три-полiфосфатом натрiю (TPP). Розчин х1тозану (0,2 % на 1 % розчинi оцтово! кислоти, pH=5) iнкубували, перемiшуючи, з 1400W (1 мг/мл) протягом 30 хв при шмнатнш температурi. До 25 мл шкубацшно! сумiшi по краплях додавали 10 мл 0,1% водного розчину TPP. Сумiш постiйно перемiшували за до-помогою магштно! мшалки (700 об/хв). Отриманi наночастинки вщцентрифуговували (28000 об/хв.) протягом 30 хв. Розмiр наночастинок визначали за допомогою морфометрично! програми ВiдеоТест -5.0, КААРА ImageBase, за даними електронно! мшроскопи !х розмiр коливався ввд 40 до 100 нм.
Вшьну та нанокапсульовану форму 1400W у виглядi сумiшей з водним ланолшом пiсля фор-мування контактного шкелевого дерматиту наносили протягом 7 дшв на уражену дiлянку шшри 2 рази на добу.
Тварин виводили з експерименту шляхом де-каштацп шд тiопенталовим наркозом на 20 добу експерименту. Визначали шльшсть лейкоципв та ШОЕ. У гомогенатах печшки (!х отримували за допомогою гомогешзатора HeidolphSilentCrusherM) та сироватщ кровi пiддослiдних тварин до-слiджували вмiст продуктiв вiльно-радикального окиснення: ТБК-активних продуктiв (ТБК-П) (Андреева Л.И. та ш., 1988); показнишв антиоксидант-ного захисту: активностi супероксиддисмутази (СОД) (Чевари С. та ш., 1985), каталази (Королюк М.А. та ш., 1988), вмiсту вiдновленого глутатюну
^^Н) (ЕИтап G.L., 1959), загально! антиокислю-вально! активностi сироватки кровi (ЗАА) (StockJ., etal., 1974). Показники активностi нггрооксидатив-ного стресу визначалися шляхом визначення вмiсту стаб№них метаболiтiв оксиду азоту NOx (нггрит-анiону, N0^ та нiтрат-анiону N0^) (GreenL.C. etal., 1982) та сумарно! активностi N0 синтази (Ridnour L.et а1.. 2000).
Отриманий цифровий матерiал був обробле-ний методом варiацiйно! статистики з використан-ням критерш Манна-Уiтнi та однофакторного дис-персшного анал1зу (AN0VA). Розраховували се-редш арифметичнi величини (М), похибки середшх арифметичних (т), коефiцieнти варiацi!, а також се-реднi квадратичнi вщхилення. Змiни вважали до-стовiрними при р<0,05. У таблицях рiвень значи-мостi вказували тiльки для достовiрних результатiв.
Таблиця 1
Шкiрнi прояви контактного шкелевого дерматиту в щурiв при корекци препаратами 1400W (М±т. п=10)
Для розрахуншв використовували комп'ютерну програму Microsoft Excel ХР (USA) та StatsoftSTA-TISTICA.
Результати та обговорення
Нанесення 5% сульфату шкелю супроводжувалося рядом видимих ознак контактного алергшного нiкелевого дерматиту з вираженою запальною ре-акцieю та потовщенням шкiрноï складки(табл. 1).Iнтенсивнiсть розвитку дерматиту оцiнювали вiзyально за виразшстю запально1 реакцiï шк1ри в балах (0 - ввдсутшсть видимо1 реакцп, 1 - слабка еритема, 2 - чггка еритема, 3 - чггка еритема з yщiльненням, 4 - еритема з явищами геморагп, вираженою iнфiльтрацieю та серозно-геморапчними курками з виразками) та за динамжою товщини шк1рно! складки [15].
Показник Групи тварин Термiн спостереження
12-а доба 20-а доба
1нтенсившсть ураження шк1ри, бали 1нтактш тварини 0 0
КД 3,12 ± 0,38* 2,68 ± 0,43*
КД + 1400W 3,17 ± 0,29* 2,33 ± 0,28*
КД + нано-MOOW 3,22 ± 0,42* 2,02 ± 0,16*, **
Товщина шшрно1' складки, мм Iнтактнi тварини 1,65 ± 0,07 1,71 ± 0,05
КД 4,02 ± 0,29* 3,78 ± 0,19 *
КД + 1400W 4,08 ± 0,36* 3,32 ± 0,32 *
КД + нано-MOOW 3,97 ± 0,29* 2,76 ± 0,23*,**
Примггка. Тут i надалi:
* - вiрогiдно щодо значень штактного контролю, р < 0,05; ** - вiрогiдно щодо значень контрольноï патологiï, р < 0,05.
# - вiрогiдно щодо значень групи, яка отримувала вiльнy форму 1400W, р < 0,05
Застосування вiльноï форми 1400W супроводжувалося деяким покращанням стану шкiрних по-кривiв, однак все ще були виразки та геморагiчнi к1рки та ерози. Явища гiперемiï були менш вира-женi, зберiгався набряк. Вираженiсть шшрних про-явiв у балах мала тенденцш до зниження.
Застосування наношкапсульовано1' форми 1400W супроводжувалося бiльш вираженими пози-тивними змiнами: за вiзyальною бальною шкалою iнтенсивнiсть ураження шшрних покривiв зменшу-
валася на 24,6% порiвняно з контрольною пато-лопею. Спостерiгалася тенденцiя до зниження по-казника у порiвняннi з тваринами яким наносили звичайну форму 1400W.Показник товщини шшрно! складки у тварин, яким наносили на уражену шшру нано-форму 1400W був нижчим на 34,9% порiвняно з нелiкованими тваринами.
Розвиток контактного дерматиту супровод-жувався лейкоцитозом та пiдвищенням ШОЕ: на 20-у добу показникизростали на 55,1 та 48,2% вiдповiдно (табл.2).
Таблиця 2.
Вплив препарапв 1400W на показники загального аналiзу кровi при контактному нiкелевому дерматип в
щурiв (М±т. п=10)
Показник Групи тварин Термш спостереження
12-а доба 20-а доба
Лейкоцити, 109/л Iнтактнi тварини 6,28 ± 0,29 6,24 ±0,32
КД 11,12 ± 0,38* 9,68 ± 0,33*
КД + 1400W 10,99 ± 0,33* 9,11 ± 0,36*
КД + raro-l^W 11,10 ± 0,44* 8,53 ± 0,43*, **
ШОЕ, мм/хв 1нтактш тварини 4,25 ± 0,27 4,71 ± 0,25
КД 7,82 ± 0,39* 6,98 ± 0,49 *
КД + 1400W 7,77 ± 0,44* 6,43 ± 0,27 *
КД + raro-l^W 8,00 ± 0,42* 6,05 ± 0,22 *, **
Застосування вшъно1° форми супроводжува- цитiв, а наношкапсульовано1' форм 1400W- до-лося тенденщею до зменшення кiлькостi лейко- стовiрним зниженням 1'х на 11,9% порiвняно з кон-
трольною патологieю. Швидк1сть освдання еритро-цитiв була нижчою лише при застосуванш нано-форми препарату - на 13,3 %.
Як показали наш дослвдження на та вираже-них шк1рних змiн при КД також зростае рiвень про-
дуктiв ПОЛ та метаболiтiв N0 i мае мiсце дезор-гашзащя ендогенного антиоксидантного та антирадикального захисту(табл. 3 та 4). Подiбнi резуль-тати ми отримали в попередшх дослвдженнях[17].
Таблиця 3.
Показники оксидативного стресу при корекцп контактного нiкелевого дерматиту рiзними фор_мами1400W (М ± т, п=10)_
Група Показник !нтактш тварини КД КД + 1400W КД + нано-1400W
КРОВ
ТБК-П, мкмоль/л 0,83±0,04 1,49±0,08* 1,29±0,11 1,04±0,19**
Каталаза, мкат/л 8,61±0,27 14,86±0,11* 13,68 ±0,17** 12,19±1,09 **,#
СОД, ум.од./л 4,43±0,08 2,79±0,17* 3,02±0,19 3,38±0,22 **
ЗАА, % 53,33±4,08 38,09±2,65* 42,15±3,72 46,97±4,30
ПЕЧ1НКА
ТБК-П, мкмоль/кг 6,72±0,26 9,21±0,31* 8,46±0,55 7,28±0,72**
Каталаза, мкат/кг 7,99±0,08 15,66±0,45* 13,56±0,84 ** 11,64±1,75**, #
СОД, ум.од./кг 5,07±0,01 2,84±0,12* 3,11±0,19* 3,92±0,43**
G-SH, ммоль/кг 2,37±0,05 1,16±0,09* 1,28±0,09** 1,48±0,12**
Топiчне застосування високоселективного шпбггора iNOSу вiльнiй формi супроводжувалося тенденцiею до зниження проявiв дисбалансу у про-/антиоксидантнiй системi. Достовiрнi змiни були лише показник1в активносп каталази: активнiсть ферменту знижувалася на 13,4 та 8,0 % вщповвдно у печшщ та сироватцi кровгЗростав вмiст вщновле-ного глутатiону на 10,3%
Аплжащя нано-iнкапсульованого 1400W мала бшьш виражений вплив. Рiвень ТБК-П у печшщ був нижчим на 30,2%, а у сироватщ кровi - на 21,0% у порiвняннi з тваринами з КД. Актившсть каталази у печiнцi та сироватщ кровi була нижчою на 18,0 та 25,7% порiвняно з контрольною пато-логiею. Водночас цi показники достовiрно вiдрiзня-лися ввд таких у груш тварин, яш отримували не iнкапсульовану форму препарату: на 10,9 та 18,6 % у кровi та печшщ вщповщно. Актившсть СОД при
застосуванш нано-шкапсульованого 1400W зрос-тала на 21,1% у сироватщ кровi та на 36,6% у печшщ.
Рiвень ввдновленого глутатюну зростав на 10,3 та 27,6 % у групах, де застосовували в№ний на наноiнкапсульований високоселективний шпбггор iNOS вiдповiдно.
Застосування вшьно! форми високоселективного шпбггора iNOS знижувало вмiст нiтратiв i нiтритiв на 23,2%, а наношкапсульованого препарату - на 33,1%(табл. 4).
В№на форма 1400W викликала зменшення су-марно! активностi активностi N0-синтази на 26,8%, а наношкапсульована на 48,2%. При цьому цей по-казник був нижчим на 29,3% порiвняно з показни-ком у груш тварин, яш отримували вiльну форму високоселективного шпбггора iNOS.
Таблиця 4
Активнiсть N0-синтази та вмiст нiтратiв i нирипв (N0x) у щурiв з КД при затосуванш 1400W (М±т, _п=10)_
Група Показник ^^^^^^ Iнтактнi тва-рини КД КД + 1400W КД + нано-1400W
КРОВ
NOx, ммоль/л 3,72±0,31 5,95±0,49* 4,57±0,38** 3,98±0,40**
ПЕЧ1НКА
NO-синтаза, нмоль/мг бiлка•хв 3,08±0,26 6,01±0,31* 4,40±0,45** 3,11±0,28**, #
Таким чином:
1. Аплжащя 5 % сульфату шкелю протягом 12 дтв призводить до розвитку виражених ознак контактного дерматиту та пошкодження структур шк1ри у дослiджуваних тварин. Також спостерта-еться розвиток оксидативного та нирооксидатив-ного стресу зi зростанням рiвня показник1в продукта ПОЛ та ослаблениям ланок ендогенного антиоксидантного захисту (знижуються показники активносп СОД та вмiсту вщновленого глута-тiону).
2. Застосування в№но! форми високоселек-тивного iнгiбiтора iNOS 1400Wсупроводжуeться деяким зниженням iнтенсивностi змш шкiриза вiзу-альними ознаками, а такождостовiрним зниженням iнтенсивностi ПОЛ та активащею показник1в анти-оксидантного захисту.
3. Застосування нано-шкапсульвано! форми 1400W впливае як на вiзуальнi змiни шк1ри, так i на показники оксидативного та шгрооксидативного стресу стресу у бшьшому ступенi, нiж викорис-тання звичайно! форми препарату.
4. Отримаиi результати дослщження свiдчать по перспективнiсть подальшого вивчення та впро-вадження у клшчну практику наношкапсульова-них форм лжарських засобiв, що здатнi пригшчу-вати iндуцибельну форму NO-синтази,для лжу-вання контактних дерматитiв.
Лiтература
1. Okayama Y. Oxidative stress in allergic and inflammatory skin diseases / Y. Okayama // Curr. Drug Target -Inflammation Allergy. - 2005. - vol. 4, no. 4. -P. 517-519.
2. The roles of reactive oxygen species produced by contact allergens and irritants in monocyte-derived dendritic cells / D. Byamba, T. G. Kim, D. H Kim [et al.] // Annals of dermatology. - 2010. -vol. 22, no. 3. -P. 269-278.
3. Role of oxidative stress in chemical allergens induced skin cells activation / E. Corsini, V. Galbiati, D. Nikitovic[et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2013. -vol. 61. -P. 74-81.
4. Schieber M. ROS function in redox signaling and oxidative stress / M. Schieber, N. Chandel // Curr. Biol. - 2014. - vol. 24, no. 10. - P. 453-462.
5. Dizdaroglu M.Mechanisms of free radical-induced damage to DNA // M. Dizdaroglu, P. Jaruga // Free Radic. Res. - 2012. - vol. 46, no. 4. - P. 382-419.
6. I. Fridovich, "Superoxide anion radical (O2-.), superoxide dismutases, and related matters /I. Fri-dovich// J. Biol. Chem. - 1997. - vol. 272, no. 30. -P. 18515-18517.
7. Kruk J. Oxidative stress and skin diseases: Possible role of physical activity // J. Kruk, E. Duchnik // Asian Pacific J. Cancer Prev. - vol. 15, no. 2. - P.
561-568.
8. Sybirna N.O. Molekulyarni mekhanizmy de-ponuvannya oksydu azotu v erytrotsytakh / N. O. Sybirna, M. YA. Lyuta, N. I. Klymyshyn // Biolohichni Studiyi/Studia Biol. - 2010. - tom. 4, № 1. - S. 143160
9. Smirnova I. Yu. Rol' oksida azota v razvitii zabolevaniy kozhi / I. Yu. Smirnova, L. M. Ogorodova, I. A. Deyev // Voprosy sovremennoy pediatrii. - 2009.
- vol. 8, no. 4. - P. 90-94
10. Endothelial nitric oxide synthase is a key mediator of interleukin-2-induced hypotension and vascular leak syndrome / W. E. Samlowski, M. Kondapaneni, S. Tharkar, [et al.] // J. Immunother. - 2011. - vol. 34, no. 5. - P. 419-427.
11. Эффективность ингибиторов NO-синтаз при воспалении / О. Попович, Е. Страту, Я. Корец-кий, [и др.] // Вестник современной науки. - 2016. -N 10. - С. 104-108.
12. ATP activates a reactive oxygen species-dependent oxidative stress response and secretion of pro-inflammatory cytokines in macrophages / C. M. Cruz, A. Rinna, H. J. Forman, [et al.] // J. Biol. Chem. - 2007.
- vol. 282, no. 5. - P. 2871-2879.
13. Oxidative stress and its role in skin disease / K. J. Trouba, H. K. Hamadeh, R. P. Amin, [et al.] // Antioxid. Redox Signal. - 2002. - vol. 4, no. 4. -P. 665-673.
14. Effects of topical corticosteroids on cell proliferation, cell cycle progression and apoptosis: In vitro comparison on HaCaT / A. Guichard, P. Humbert, M. Tissot, [et al.] // Int. J. Pharm. - 2015. - vol. 479, no. 2.
- P. 422-429.
15. Perekisnoye okisleniye lipidov v porazhennoy kozhe belykh krys s dermatitom prostym razdra-zhitel'nym kontaktnym pri raznykh metodakh lech-eniya / S. Grebennikova, Yu. Maklyakov, O. Oksenyuk, [i dr.] // Sovremennyye problemy nauki i obrazovaniya. - 2016. - N. 6. -P. 37-41.
16. Self-assembled polymeric nanoparticles for percutaneous co-delivery of hydrocortisone/hydroxyty-rosol: An ex vivo and in vivo study using an NC/Nga mouse model / Z. Hussain, H. Katas, M. C. I. Mohd Amin // Int. J. Pharm. - 2013. - vol. 444, no. 1-2. - P. 109-119.
17. Khudan-Tsil'o I. I. Topichne likuvannya kon-taktnoho nikelevoho dermatytu: potentsial nanoinkapsul'ovanoyi superoksyddysmutazy / I.I. Khudan-Tsil'o, O.O. Shevchuk, M.M. Korda // Visnyk nau-kovykh doslidzhen'. - 2017. - N 4. - S. 140-144.
