CC BY
66
УДК 616-001.47-08-031.84:616.379-008.64.001.6
Е.А. Синельщиков, В.К. Есипов, С.Д. Валов
ТЕЧЕНИЕ ГНОЙНЫХ ПРОЦЕССОВ МЯГКИХ ТКАНЕЙ НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА ПРИ МЕСТНОМ ПРИМЕНЕНИИ ОКСИТОЦИНА
Оренбургская государственная медицинская академия (Оренбург)
Целью исследования явилось экспериментально-гистологическое определение эффективности местного применения препарата окситоцина в лечении, гнойных ран при. сахарном диабете. Изучено течение раневого процесса гнойных ран у 24 экспериментальных животных при. различных методах местного лечения. Выявлено, что применение окситоцина в экспериментальных условиях способствует ускорению эпителизации раневых дефектов, реализации гистобластических и. органотипических программ, гистогенезов.
Ключевые слова: сахарный диабет, гнойная рана, окситоцин
COURSE OF PURULENT PROCESSES IN SOFT TISSUES ON THE BACKGROUND OF EXPERIMENTAL PANCREATIC DIABETES AT LOCAL USE OF OXYTOCIN
E.A. Sinelshchikov, V.K. Esipov, S.D. Valov
Orenburg State Medical Avademy, Orenburg
The aim. of the research was experimental and histological determination of effectiveness of local use of oxytocin in treatment of purulent wounds at pancreatic diabetes. Course of wound process of purulent wounds in 24 experimental animals at different methods of local treatment was studied. It was determined, that use of oxytocin in experimental conditions caused, speeding-up of epithelization of wound, defects, realization, of histoblastic and organotypic programs of histogenesis.
Key words: pancreatic diabetes, purulent wound, oxytocin
Лечение гнойных процессов мягких тканей является одной из актуальных проблем хирургии. Частота гнойно-некротических поражений стоп у больных сахарным диабетом, страдающих заболеванием более 20 лет, независимо от типа диабета, возрастает до 80 % [3]. Развитие гнойно-некротического процесса на фоне диабетической стопы более чем в 50 % случаев приводит к нетравматическим ампутациям [7]. При этом пери- и послеоперационная летальность при «высоких» ампутациях достигает 40 — 68 % в течение первых 5 лет [5]. Половина пациентов, которые перенесли тяжелый гнойно-некротический процесс на фоне нейроишемической формы синдрома диабетической стопы, умирают в течение года после операции [9].
Поиск путей оптимальной коррекции течения гнойных процессов на фоне сахарного диабета является перспективным и практически важным направлением. Известно, что среди большого количества ростковых и пролифератогенных факторов (нейротрансмиттеры, нейрогормоны, иммунные комплексы) определенный интерес представляют гипоталамические нонапептиды (в частности, окситоцин), позитивно влияющие на репарацию различных тканей — в значительной мере усиливают процессы васкулогенеза, пролиферации эпителиоцитов, гистиоцитов и моноци-тарных макрофагов, что в свою очередь приводит к эффективному очищению раны и формированию полноценной грануляционной соединительной ткани, восстановлению эпителиальных структур раневой поверхности [6, 8]. Экспериментальными
и клиническими исследованиями установлено, что гипоталамический нонапептид окситоцин обладает инсулиноподобным действием и способен оказывать регулирующее влияние на углеводный обмен [4]. Все это позволило применить его при лечебной коррекции ран при сахарном диабете в эксперименте.
Целью данного исследования явилось установление закономерностей течения репаративных процессов гнойных ран при сахарном диабете при местном применении окситоцина.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Работа выполнена на 24 белых крысах-самцах линии Вистар массой тела 230 — 250 г. У крыс под эфирным рауш-наркозом, при соблюдении правил асептики была создана модель сахарного диабета путем однократного внутрибрюшинного ведения 5% раствора аллоксана из расчета 150 мг/кг массы животного после 48-часового голодания [1, 2], с биохимическим определением уровня сахара в крови (глюкозо-оксидазный метод).
Через 10 суток после воспроизведения модели сахарного диабета в асептических условиях, после удаления волосяного покрова и обработки кожи антисептиком выполнялось моделирование инфицированных ран задних конечностей крыс путем введения в края раны 1 мл микробной взвеси штаммов золотистого стафилококка в дозе 2 х 106 микробных клеток или кишечной палочки в дозе 2 х 106 микробных клеток и 0,25 мл 25% раствора сульфата магния. В работе использованы музейные
штаммы микроорганизмов, полученных в Институте клеточного и внеклеточного симбиоза УрО РАН (директор — член-кор. РАН О.В. Бухарин). Очаг гнойного воспаления формировался в течение 5 — 7 суток. Все эксперименты на животных проведены в соответствии с «Правилами проведения работы с использованием экспериментальных исследований», утвержденным приказом МЗ СССР № 775 от 12.08.77 г., и основывались на положениях Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (2000)
В первой серии опытов (12 животных), на фоне сахарного диабета изучено течение раневого процесса инфицированных ран (St. aureus 209 P — 6 животных, E. coli — 6 животных) без лечебной коррекции.
Во второй серии опытов (12 животных), после моделирования сахарного диабета, изучено течение раневого процесса инфицированных ран (St. ашвus 209 Р — 6 животных, E. coli — 6 животных), в лечении которых местно, путем орошения, применялся препарат окситоцина фирмы «Gedeon Rixter» в дозе 1,5 ЕД.
На 3-и, 7-е, 14-е сутки измеряли размеры зоны повреждения ран, используя методику, предложенную Л.Н. Поповой (1942). В указанные сроки проводилось морфологические исследование тканей, взятых из краевых зон повреждения раны. Полученный материал фиксировался в 10% водном растворе нейтрального формалина, спирт-формоле и жидкости Буэна. Обезвоживание и уплотнение материала производилось в этаноле возрастающей крепости и заливалось смесью парафина с воском (1 : 1). Гистосрезы толщиной 5 — 6 мкм были окрашены гематоксилином Майера и эозином.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исходный уровень сахара к крови животных колебался от 4,5 до 5,1 ммоль/л. После введения аллоксана он повышался до 17,2 — 23,1 ммоль/л. На 10-е сутки после создания экспериментальной модели сахарного диабета уровень сахара составлял 9,1 — 13,9 ммоль/л. Исходная площадь ран у животных всех серий экспериментов составляла 92,3—101,4 мм2.
На 3-и сутки во второй серии опытов, где применялся препарат окситоцин, отмечалось более эффективное очищение ран по сравнению с первой серией, без применения лечения. К 7-м суткам исчезают зоны некроза, наблюдается выраженное образование грануляционной ткани, отмечены начальные проявления краевой эпителизации, что опережает таковые процессы в первой серии опытов без применения окситоцина. Во второй серии опытов происходит уменьшение площади ран на 13,7 %, что более выражено по сравнению с первой серией опытов (уменьшение на 6,1 %). К 14-м суткам активно идут процессы эпителизации, во второй серии опытов уменьшение площади ран на 72,4 %, наблюдается практически полное закрытие раневого дефекта, что превосходит данный показатель в первой серии опытов (уменьшение на 30,1 %).
При гистологическом исследовании в сериях опытов, где применялся окситоцин, уже на 3-и сутки в ранах происходили положительные изменения. Прекращались процессы очищения ран, и отмечалось начало развития репаративных процессов уже на 3-и сутки, что опережало таковые в сериях опытов без применения препарата оксито-цина. Происходили начальные явления активации пролиферативных процессов, что выражалось в трансформации моноцитов в макрофаги с последующим резким увеличением их количества, ростом числа лаброцитов, появлением клеточных элементов грануляционной ткани. Происходила дифференцировка клеточных элементов, в частности, фибробластов, а также отмечено резкое увеличение количества лейкоцитов.
Отмечалось и опережение процессов эпители-зации у животных, которым применялся оксито-цин. Во второй серии опытов с моделью гнойной раны картина острого гнойно-некротического воспаления существенно уменьшалось, обнаруживалась отчетливая картина формирования малодифференцированной (грануляционной) ткани. В значительной мере усиливался процесс васкулогенеза. Отмечались явления краевой эпите-лизации — по краям раны был виден нарастающий на грануляционную ткань тонкой слой эпителия, в последующие дни его ширина увеличивалась. При гистологическом изучении ростовой зоны эпителия были замечены обширные очаги митотического деления камбиальных клеток, что способствует ускорению эпителизации раневых дефектов.
Значительный рост фибробластов и эпителиальных клеток на 7-е и 14-е сутки, при применении окситоцина, свидетельствует о преобладании пролиферативных процессов, ускорении регенерации и более раннем появлении эпителизации.
ВЫВОДЫ
Таким образом, местное применение препарата окситоцина в лечении асептических и гнойных ран на фоне экспериментального сахарного диабета позволяет оптимизировать течение раневого процесса, создавая условия для реализации ги-стобластических и органотипических программ гистогенезов. Полученный результат обусловлен влиянием окситоцина на пролиферативную деятельность макрофагов, что в конечном итоге способствует заживлению раны в целом, а также восстановлению специфической морфофункциональной организации тканей.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баранов В.Г., Соколоверова И.М., Гаспа-рян Э.Г. и др. Экспериментальный сахарный диабет. Роль в клинической диабетологии. — Л.: Наука, 1983. - 240 с.
2. Беляева Н.М., Корнеев Г.И. Нарушение регуляции углеводного обмена при гепатоканцеро-генензе, индуцированном нитрозодиметиламином // Экспериментальная онкология. — 1981. — Т. 3, № 4. — С. 20 — 24.
3. Бреговский В.Б. Поражение нижних конечностей при сахарном диабете. — СПб.: Изд-во «ДИЛЯ», 2004. - 272 с.
4. Гавриленко В.Г. Клиническое обоснование применения окситоцина в комплексном лечении диабетических гнойно-некротических поражений стоп: автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Оренбург, 2000. - 25 с.
5. Дедов И.И., Анциферов М.Б., Галстян Г.Р., Токмакова А.Ю. Синдром диабетичской стопы (клиника, диагностика, лечение и профилактика). — М., 1998. — 143 с.
6. Поленов А.Л. Эволюция гипоталамо-гипофизарного эндокринного комплекса // В кн.:
Эволюционная физиология. — Л.: Наука, 1983. —
Ч. 2. — С. 53—109.
7. Светухин А.М., Земляной А.Б. Комплексное хирургическое лечение гнойно-некротических форм диабетической стопы // Избранный курс лекций по гнойной хирургии. — М., 2007. — С. 153—171.
8. Стадников А.А. Гипоталямические факторы регуляции процессов роста, пролиферации и ци-тодифференцировки эпителия аденогипофиза. — Екатеринбург: УрО РАН, 1999. — 137 с.
9. Edmonds M. The diabetic foot. Diabetes // Metabolism Research and Reviews. — 2003. — Vol. 20, Suppl 1. — P. 9 — 11.
Сведения об авторах
СинельщиковЕ.А. - аспирант кафедры общей хирургии Оренбургской государственной медицинской академии (460048, г. Оренбург, пр. Победы 140в; тел.: 8 (3532) 75-67-22)
Есипов Вячеслав Константинович - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей хирургии Оренбургской государственной медицинской академии (460000, г. Оренбург, ул. Советская, 6; тел.: 8 (3532) 77-94-08, факс: 8 (3532) 77-24-59; e-mail: [email protected])
Валов Сергей Дмитриевич - доктор медицинских наук, профессор кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии Оренбургской государственной медицинской академии (460000, г. Оренбург, ул. Советская, 6)
