CC BY
16
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
35
зано, что в выбранных условиях возможность протекания побочных процессов поликонденсации незащищенных пептидов и белков при использовании карбодиимидов незначительна.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (проект № 14-15-00247) в части синтеза и МРТ-ис-следований наноконъюгатов МНЧ-pHLIP и TagGFP2. А также РФФИ (№ 14-03-00146-а) и УрО РАН(№ 15-21-3-6) в части синтеза наноконъюгатов MH4-CD117.
А. С. Дерюжкин1, Ю.Н. Потапов2
СРАВНИТЕЛЬНОЕ МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ
ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ
ПЛОСКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ГОРТАНИ
И ЛЕГКОГО
БУЗ ВО ВОПБ, Воронеж;
2БУЗ ВО ВОКОД, Воронеж
Введение. С определенным допущением можно сказать, что плоскоклеточный рак гортани и легкого представлен разными клеточными популяциями. Это следует, например, из различий в эффективности лучевой и химиотерапии при лечении больных раком гортани и легкого одинакового гистогенеза.
Цель исследования — выявление различий в пролиферации клеток плоскоклеточного рака гортани и легкого.
Материалы и методы. Исследованы опухоли 180 больных плоскоклеточным раком гортани и 160 пациентов с плоскоклеточным раком легкого. После рутинного гистологического исследования и подтверждения диагноза плоскоклеточного рака методом иммуногистохимического анализа срезы части опухолей окрашивали антителами к Ki67 и р53. В готовых препаратах определяли долю позитивных к данным антителам опухолевых клеток.
Результаты. В популяциях исследованных опухолей обеих локализаций имело место практически отсутствие новообразований высокой и низкой степеней дифферен-цировки. Среди опухолей гортани было 2 случая высоко-дифференцированного рака и 1 — низкодифференцирован-ного. Среди опухолей легкого выявлены 4 случая рака высокой степени дифференцировки и 2 случая низкой степени дифференцировки. Средняя доля Ю67-положи-тельных клеток составила соответственно 17,5 и 25,0 % в высокодифференцированных новообразованиях гортани и легкого. В низкодифференцированных опухолях гортани и легкого доля Ю67-положительных клеток была равна соответственно 80 и 70 %. При сравнении двух групп, включавших по 15 случаев умеренно-дифференцированного рака гортани и легкого, выявлено, что пролифератив-ная активность клеток в этих новообразованиях практически не различалась: средний Ki67 при раке гортани составил 49,2 % при разбросе от 30 до 70 %, при раке легкого — 50,2 % (колебания 43—72 %). Экспрессия мутант-ного гена p53 имела место во всех исследованных случаях умеренно-дифференцированного рака гортани со средней долей клеток в опухоли 48,9 % (колебания 10—70 %). В 4 из 15 случаев умеренно-дифференцированного рака легкого клетки опухоли не экспрессировали мутантный ген p53, а в 11 опухолях среднее количество клеток с его гиперэкспрессией составила 47,1 % (разброс 17—97 %).
Заключение. Среди популяций плоскоклеточного рака гортани и легкого преобладают умеренно-дифференцированные новообразования, в которых нет зависимости интенсивности клеточного деления от локализации опухоли. Популяция умеренно-дифференцированного рака легкого более гетерогенна по способности клеток к р53-опосредо-ванному апоптозу, но в опухолях, где имеются клетки, экс-прессирующие этот антиген, доля таких клеток одинакова в новообразованиях обеих локализаций. Отсутствие значимых отличий по параметрам пролиферации клеток при раке гортани и легкого позволяет предположить, что их различная чувствительность к цитотоксическим воздействиям определяется другими характеристиками клеточных популяций.
Е.В. Долгова, Е.А. Поттер, А. С. Проскурина, С. С. Богачев СВОЙСТВО СТВОЛОВЫХ ИНИЦИИРУЮЩИХ РАКОВЫХ КЛЕТОК ИНТЕРНАЛИЗОВАТЬ ЭКЗОГЕННУЮ ДВУЦЕПОЧЕЧНУЮ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ И ЕГО ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ФГБНУИЦГ СО РАН, Новосибирск
Введение. В настоящее время общепризнанной остается модель строения опухоли, где на вершине иерархической лестницы находятся стволовые инициирующие раковые клетки (СИРК). Основными свойствами, характерными для СИРК, являются самоподдержание в ряду неограниченного числа делений, способность производить комми-тированную дочернюю клетку, устойчивость к многократной пересадке с сохранением гистологических характеристик опухоли. Индивидуализация СИРК в массе опухолевых клеток является необходимым условием терапевтического изменения статуса раковой клетки или ее прямой элиминации.
Цель исследования — поиск принципиально нового универсального маркера низкодифференцированных клеток различного генеза, включая СИРК, и характеристика возможных направлений его применения в диагностике и лечении онкологических заболеваний.
Материалы и методы. Экспериментальными моделями исследования являлись мышиная опухоль Кребс-2, а также человеческая глиома. В качестве экзогенной дезоксирибо-нуклеиновой кислоты (ДНК) использовали меченную флу-орофором TAMRA ДНК человеческого АИ-повтора. В исследовании использовались современные молекулярные и цитологические методы работ, такие как проточная ци-тометрия, флуоресцентная и конфокальная микроскопия, а также физиологические методы работы с лабораторными животными.
Результаты. В настоящей работе впервые показано, что в различных сообществах активно пролиферирующих клеток млекопитающих присутствует популяция клеток, способная интернализовать фрагменты двуцепочечной ДНК (TAMRA-позитивные клетки), и что эта популяция в сообществах раковых клеток обладает признаками СИРК. Впервые приводятся данные (на модели опухоли Кребс-2) о том, что совместная обработка цитостатиком циклофос-фаном и препаратом двуцепочечной ДНК приводит к эра-дикации туморогенных свойств перевиваемого графта,
36
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
что связано с удалением популяции клеток, обладающей признаками СИРК. На модели опухолей головного мозга человека показано, что доброкачественные новообразования не содержат TAMRA-позитивных клеток, тогда как в злокачественных опухолях такие клетки детектируются. Показано, что с повышением степени злокачественности опухоли наблюдается тенденция к росту числа СИРК, способных интернализовать экзогенную двуцепочечную ДНК.
Заключение. Обнаруженное свойство СИРК — интернализовать фрагменты двуцепочечной экстраклеточной ДНК естественным механизмом — является перспективной базой как для создания диагностикумов для анализа содержания СИРК, так и для разработки стратегии таргетной терапии при лечении онкологических заболеваний, включая глиомы, направленной на элиминацию СИРК.
Ю.И. Должикова1, В. А. Даванков2, М.П. Цюрупа2, Л.А. Павлова2, М.В. Киселевский1 ПОИСК АЛЬТЕРНАТИВНЫХ ГЕМОСОРБЕНТОВ ДЛЯ ЛИМФОСОРБЦИИ БОЛЬНЫХ С СЕПСИСОМ
ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ФГУН «ИНЭОС им. А.Н. Несмеянова» РАН, Москва
Введение. Анализ причин смерти онкологических больных выявил, что инфекционные осложнения являлись причиной гибели не менее 1/3 пациентов. Для решения проблем по нивелированию последствий синдрома системной воспалительной реакции организма пациентов внимание было обращено на методы экстракорпоральной детоксика-ции (ЭКД). В настоящее время лимфосорбция является одним из перспективных методов ЭКД для комплексной терапии сепсиса. Использование существующих устройств приводит к потере целевых молекул и некоторых необходимых организму белков, а также наблюдается недостаточная биосовместимость ряда применяемых сорбентов. Это обосновывает необходимость поиска новых материалов, перспективных для использования в качестве матрицы для лимфосорбции. Вызывают интерес в данном аспекте гемосовместимые сверхсшитые полистиролы, внутренняя удельная поверхность которых порядка 1500 м2/г и которые, возможно, эффективны для снижения концентрации триггеров воспаления и метаболитов в лимфе.
Цель исследования — оценка перспективности применения сверхсшитого полистирола серии Стиросорб в качестве матрицы устройства для элиминации метаболитов (мочевина, креатинин), бактериального липополисахари-да (ЛПС) из лимфы больного с сепсисом in vitro.
Материалы и методы. Для исследования был создан макет колонки объемом 100 мл на основе сорбента ряда сверхсшитого полистирола, разработанного в ИНЭОС им. А.Н. Несмеянова. Через этот макет было перфузиро-вано 700 мл лимфы онкологического больного с тяжелым сепсисом со скоростью 80—100 кап/мин. Биохимические параметры лимфы были получены на анализаторе Sapphire 400 (TOKYO BOEKI, Япония). Уровень ЛПС был определен с использованием коммерческих наборов на основе LAL-теста (Hycult Biotechnology, Нидерланды).
Результаты. Анализ лимфы до и после перфузии через макет колонки со Стиросорбом показал снижение уровня
ЛПС на 86 %, мочевины — на 20 %, креатинина — на 40 %. Уровень альбумина снизился менее чем на 2 %.
Заключение. Применение сорбента серии Стиросорб в качестве матрицы устройства для элиминации мочевины, креатинина и ЛПС из лимфы больного с сепсисом in vitro показало обнадеживающие результаты, которые могут стать основанием для внедрения в клиническую практику сверхсшитых полистиролов и устройств на их основе для ЭКД онкологических больных с сепсисом.
Е.А. Дудко1, В.Ю. Чернов2, Т.А. Богуш1, Н.С. Сапрыкина1, Ю.Б. Дьякова1, В.Ю. Кирсанов1, З.С. Шпрах1, А.А. Каменский2, Б.Е. Полоцкий1, С.А. Тюляндин1 ПОВЫШЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ЦИСПЛАТИНА В КОМБИНАЦИИ СДИГОКСИНОМ
ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ФГБОУ ВО «МГУ им. М. В Ломоносова», Москва
Введение. Использование гликолиза в качестве основного источника энергии даже в аэробных условиях (эффект Варбурга) является фундаментальным отличием опухолевой клетки от нормальной. Ингибирование гликолиза при воздействии сердечных гликозидов сопровождается повышением цитотоксичности противоопухолевых препаратов в отношении опухолевых клеток in vitro — не только чувствительных, но и резистентных.
Цель исследования — оценка модифицирующего воздействия сердечного гликозида дигоксина (Диг) на противоопухолевый эффект цисплатина (ЦП), реализация которого ассоциирована с активностью энергетически зависимых ферментов репарации повреждений дезоксирибонуклеи-новой кислоты.
Материалы и методы. Исследование проведено на самках мышей линии СВА/Lac массой тела 20—22 г с внутри-брюшинно (в/б) трансплантированным раком молочной железы Эрлиха, в клетках которого основным путем генерации энергии является гликолиз. Изучено влияние однократного в/б введения сердечного гликозида Диг за 1 ч до в/б введения ЦП на противоопухолевый эффект цито-статика в диапазоне концентраций с линейной зависимостью доза — эффект — 2,5 и 5,0 мг/кг. Статистическую оценку достоверности различий между группами по медиане и средней продолжительности жизни павших мышей проводили с помощью критериев Манна — Уитни и Стью-дента. Различия считали достоверными прир < 0,05.
Результаты. 1. При введении Диг достигнут противоопухолевый эффект ЦП, превышающий максимально возможный на использованной экспериментальной модели: увеличение продолжительности жизни животных с опухолью на 77 % при дозе ЦП 2,5 мг/кг, что в 2 раза выше эффекта монотерапии цитостатиком в этой дозе, и в 1,5 раза — при дозе ЦП 5,0 мг/кг, которая является максимально эффективной (при дальнейшем повышении дозы ЦП отмечалась гибель мышей от токсичности). В пересчете на дозу цитостатика введение Диг за 1 ч до ЦП привело более чем к двукратному повышению его эффективности.
2. При оценке достоверности выявленных различий показано, что противоопухолевый эффект ЦП при дозах
