CC BY
67
Субпопуляции Т-регуляторных клеток при бронхиальной астме и гетерогенных фенотипах хронической обструктивной болезни легких
Кириллова Н.А., Деев И.А., Кремер Е.Э., Огородова Л.М., Черногорюк Г.Э.
T-regulatory cells subpopulation in bronchial asthma and heterogeneous phenotypes of chronic obstructive pulmonary disease
Kirillova N.A., Deyev I.A., Kremer Ye.E., Ogorodova L.M., Chernogoryuk G.E.
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
© Кириллова Н.А., Деев И.А., Кремер Е.Э. и др.
Проведено исследование уровня отдельных субпопуляций Т-регуляторных (Т-reg) клеток у больных с различными фенотипами хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), среднетяжелой бронхиальной астмой и у здоровых добровольцев. Уровень естественных (CD4+CD25high) Т -клеток при ХОБЛ повышен, при этом эмфизематозный фенотип болезни характеризуется наиболее высоким уровнем содержания пула CD4+CD25high. Бронхиальная астма ассоциирована с низким уровнем индуцибельных (CD4+FoxP3+) Т-reg.
Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких, бронхиальная астма, фенотипы ХОБЛ, Т-регуляторные клетки.
Aim of the study was to investigate the levels of individual subpopulations of T-regulatory (T-reg) cells in patients with different phenotypes of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) with moderate bronchial asthma and healthy volunteers. COPD was associated with increased level of natural (CD4+CD25high) T-cells, while emphysematous phenotype of disease was associated with the highest pool of natural CD4+CD25high. Bronchial asthma was associated with low levels of inducible (CD4+FoxP3+) T-reg.
Key words: chronic obstructive pulmonary disease, bronchial asthma, COPD phenotypes, T-regulatory cells.
УДК 616.248:577.27:616.23/.24-002.2:575.2
Введение
Актуальность проблемы хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) связана прежде всего с ее широким распространением, неуклонно прогрессирующим течением и ростом числа инвалидизирующих форм, что ассоциировано со значительным социально-экономическим ущербом не только для самих больных, но и членов их семей, общества в целом.
Данные последних лет свидетельствуют о том, что одним из важнейших механизмов развития болезней, характеризующихся наличием хронического воспаления в дыхательных путях (ХОБЛ, бронхиальная астма (БА)), является нарушение регуляции T-клеточного ответа [9]. Для ХОБЛ характерно поддержание перси-стрирующего воспаления в дыхательных путях в ответ на внешнее воздействие табачного дыма, сопровож-
дающееся преимущественно накоплением нейтрофи-лов и Т-лимфоцитов хелперов 1-го типа (ГЫ). Хроническое воспаление в данном случае сопровождается образованием участков эмфиземы, изменением количества и состава экстрацеллюлярного матрикса [13]. Такие изменения выражены в большей степени в периферических отделах дыхательных путей и сопровождаются прогрессирующей обструкцией и ремодели-рованием ткани легкого. Для течения ХОБЛ характерна стадийность, связанная с прогрессированием ограничения скорости воздушного потока из-за патологического воспалительного ответа легких на действие ингалируемых патогенных частиц или газов [12]. Когорта пациентов с ХОБЛ неоднородна, у одних больных преобладает эмфизематозное поражение ткани легкого, у других — выраженная обструкция бронхов мелкого и среднего калибра за счет гиперсекреции
и необратимого сужения просвета бронха, обусловленного склеротическими изменениями. Различные проявления болезни — фенотипы, вызванные одним повреждающим фактором (сигаретный дым), по всей видимости, свидетельствуют о различиях биомолекулярных и клеточных механизмов ХОБЛ.
В отличие от ХОБЛ при бронхиальной астме (БА) воздействие антигена сопровождается активацией тучных клеток, увеличением количества активированных эозинофилов, а также T-лимфоцитов хелперов 2-го типа (Th2), продукцией интерлейкинов (ИЛ) -4 и -5 [1, 2]. Несмотря на хроническое течение БА, обструкция дыхательных путей носит обратимый характер, при этом для данного заболевания не характерно развитие эмфиземы и инфекционных осложнений.
Важное значение отводится регуляторной субпопуляции Т-клеток (T-reg), которые способны оказывать супрессорное влияние на различные типы имму-нокомпетентных клеток [4, 22]. T-reg играют ключевую роль в регуляции иммунного ответа, а их дефекты обусловливают развитие аллергических реакций, рецидивирующих инфекций, а также аутоиммунных болезней. Свою функцию супрессорные T-reg выполняют различными способами: оказывают паракринное регуляторное воздействие путем секреции цитокинов; блокируют презентацию антигена, осуществляемую антигенпредставляющими клетками (АПК), или разрушают аутореактивные Т-клетки, распознавая Т-клеточными рецепторами доминирующие идиопепти-ды [18].
Регуляторная субпопуляция Т-лимфоцитов феноти-пически и функционально является гетерогенной [3]. Так, Т-reg способны не только ингибировать Th1- и Th2-лимфоциты, но и тормозить активность В-лимфоцитов, угнетать продукцию провоспалительных цитокинов и нарушать миграцию нейтрофилов в очаг воспаления. В специализированной литературе рассматривается вопрос о влиянии Т-reg на функцию нейтрофилов в условиях стимуляции in vitro липополисахаридом (ЛПС). Исследование, проведенное P. Lewkowicz и соавт., продемонстрировало, что CD4+CD25+ T-reg влияют на функциональную активность и продолжительность жизни нейтрофилов [20]. Так, ЛПС-активированные T-reg ингибируют продукцию нейтрофилами провоспали-тельных цитокинов (ИЛ-6, ИЛ-8, фактор некроза опухолей а) и активного кислорода, ускоряют гибель полиморфно-ядерных гранулоцитов путем апоптоза, что
может способствовать подавлению активности воспаления. Эффект ограничения нейтрофильного воспаления частично обусловлен продукцией ИЛ-10 и трансформирующего фактора роста в (TGF-P), а также непосредственным клеточно-клеточным взаимодействием Т-reg с эффекторными Т-клетками. При этом продемонстрирована устойчивость ЛПС-активированных нейтрофилов к воздействию T-reg, что может иметь ключевое значение в механизмах ограничения воспаления [20].
Согласно последним данным, интерес представляет роль дисфункции T-reg в формировании ХОБЛ, характеризующейся персистирующим нейтрофиль-ным воспалением, а также в определении фенотипи-ческих особенностей течения заболевания [5, 20]. Возможно, из-за несвоевременной либо несовершенной активации отдельных субпопуляций Тч^ происходит излишнее накопление активированных иммуно-компетентных клеток в очаге воспаления при БА и гетерогенных фенотипах ХОБЛ.
Цель исследования — установить роль отдельных субпопуляций Тч^ у больных с различными фенотипами ХОБЛ и среднетяжелой БА в формировании и поддержании персистирующего воспаления в дыхательных путях.
Материал и методы
Клиническое обследование пациентов проводилось на базе отделения пульмонологии Томской областной клинической больницы. В исследовании приняли участие 97 человек: 60 пациентов, страдающих ХОБЛ II—IV стадий (50 мужчин и 10 женщин), из них 13 пациентов с эмфизематозным фенотипом ХОБЛ (11 мужчин, 2 женщины), 28 больных с бронхитическим фенотипом (23 мужчины, 5 женщин), 19 больных со смешанным фенотипом (16 мужчин, 3 женщины); группа сравнения — 20 взрослых, больных среднетя-желой БА (8 мужчин, 12 женщин); группа контроля — 17 практически здоровых взрослых (9 мужчин, 8 женщин) (табл. 1, 2).
Иммунологические исследования проводились в подразделении иммунологии отдела гематологии, иммунологии и морфологии Центральной научно-исследовательской лаборатории Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск). Материалом для иммунологического исследования служила периферическая кровь с гепарином (20 мл), по-
лученная от здоровых респондентов, больных ХОБЛ и БА средней тяжести.
Выделение мононуклеаров периферической крови (МНПК) проводили путем центрифугирования в градиенте плотности фиколл-урографина (плотность 1,077 г/мл, Р052, «ПанЭко», г. Москва).
Выделенные мононуклеары окрашивали для последующего анализа на проточном цитофлюориметре (FACSCalibur Becton Dickinson, США), используя моно-клональные антитела CD4 (FITC, «Сорбент», г. Москва), CD25 (PE-Cy7, № 335824, BD Bioscinces, США) и FoxP3 (PE, № 556855, BD Pharmingen, США). В рамках иммунологического обследования пациентов оценивали относительное содержание популяций регуляторных Т-клеток (CD4+CD25+, CD4+CD25high, CD4+FoxP3+) в периферической крови. Результат представлен в виде процентного содержания соответствующей субпопуляции лимфоцитов по отношению к гейтированным МНПК.
Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи пакета программ Statistica 6.0 for Windows. Данные представлены как М — среднее и m — ошибка среднего. Достоверность различий количественных показателей между группами в несвязанных выборках в случае непараметрического распределения определяли при помощи ^/-критерия Манна— Уитни. Степень взаимосвязи между признаками оценивали посредством вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Для сравнения частот качественных признаков использовали критерий х2 В случае наличия в группе пяти пациентов и менее использовали поправку по Йетсу. Различия считали значимыми при уровне р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Клиническая характеристика пациентов, включенных в исследование, представлена в табл. 1. Достоверных различий по возрасту между группами пациентов с ХОБЛ, БА и здоровых лиц не выявлено, что свидетельствует об однородности сравниваемых выборок. Среди больных основной группы (ХОБЛ) превалировали мужчины (83%), пациенты группы сравнения (40% мужчин) и контроля (53% мужчин) были сопоставимы по полу. Средняя продолжительность течения ХОБЛ составила (10,70 + 1,06) года, что достоверно не отличалось от длительности течения БА в группе сравнения. Основная группа характеризовалась
достоверно более длительным стажем курения в сравнении со здоровыми лицами и группой сравнения. Лиц основной группы (ХОБЛ) в течение последних 7 сут достоверно чаще беспокоили дневные симптомы по сравнению с больными БА, ночные симптомы регистрировались с одинаковой частотой в обеих группах. Здоровые не отмечали приступов удушья. Большинство (90%) пациентов с ХОБЛ предъявляли жалобы на одышку, ограничение физической активности (90%), отделение мокроты (73%), кашель (65%), свистящее дыхание (62%) и ночные приступы удушья (43%). В отличие от пациентов, страдающих БА, одышка и отделение мокроты достоверно чаще беспокоили больных группы ХОБЛ (р < 0,001).
Больные ХОБЛ и БА характеризовались более высоким индексом массы тела (ИМТ) в сравнении со здоровыми добровольцами, в то же время пациенты основой группы обладали более низким питательным статусом по отношению к группе сравнения. Анализ спирометрических данных показал, что пациенты с ХОБЛ имели самые низкие показатели объема форсированного выдоха за первую секунду (ОФВ1), функциональной жизненной емкости легких (ФЖЕЛ) и индекса Тиффно (ОФВ1/ФЖЕЛ) по сравнению с больными БА и здоровыми добровольцами (табл. 1). Значение ОФВ1 статистически достоверно отличалось у пациентов, страдающих БА средней степени тяжести, по сравнению с группой контроля (р < 0,05). Обратимость бронхиальной обструкции у обследованных пациентов с БА в тесте с бронхолитиком (прирост ОФВ1) была более 12%. Толерантность к физической нагрузке у пациентов с ХОБЛ и БА была достоверно ниже в сравнении со здоровыми добровольцами (р < 0,001). Уровень сатурации крови кислородом ^р02), как исходный, так и после теста 6-минутной ходьбы, у больных ХОБЛ был достоверно ниже, чем у пациентов, страдающих БА, и здоровых лиц. В группе контроля сатурация крови кислородом до и после пробы на толерантность к физической нагрузке была выше данного показателя в группе сравнения (БА).
Клиническая характеристика пациентов с разными фенотипами ХОБЛ представлена в табл. 2. Согласно полученным данным, продолжительность заболевания была меньше у пациентов с эмфизематозным фенотипом, у больных этой группы масса тела и ИМТ были ниже. Когорта пациентов со смешанным фенотипом в отличие от лиц с эмфизематозным фенотипом харак-
теризовалась меньшим количеством обострений, при- фенотипом ХОБЛ. В группах с бронхитическим и ведших к госпитализации. Обследование больных смешанным фенотипами достоверно чаще регистри-продемонстрировало преобладание жалоб на кашель ровалась сердечно-сосудистая патология (р < 0,05). (р < 0,05) в группе лиц, страдающих бронхитическим
Таблица 1
Результаты обследования пациентов, включенных в исследование (клиническая характеристика)
Параметр Больные ХОБЛ II—IV стадий (60 человек) Больные среднетяжелой БА (20 человек) Контрольная группа (17 человек)
Возраст, лет 57,80 ± 1,10 54,10 ± 2,17 52,90 ± 3,64
Продолжительность заболевания, лет 10,70 ± 1,06 10,00 ± 1,64 —
Продолжительность курения, пачко-лет 45,60 ± 3,51* 4,70 ± 1,88 4,70 ± 2,01
Количество дневных симптомов в течение последних 7 сут 17,90 ± 1,79* 4,70 ± 1,28** 0
Количество ночных симптомов в течение последних 7 сут 3,60 ± 0,65** 1,70 ± 0,49** 0
Количество обострений, приведших к госпитализации в течение
последних 12 мес 1,10 ± 0,11** 0,80 ± 0,22** 0
Индекс массы тела, кг/м2 25,80 ± 0,65* 30,60 ± 1,93** 22,90 ± 0,78
ОФВ1, % от должной величины 37,20 ± 1,88* 79,20 ± 3,02** 103,40 ± 2,42
ФЖЕЛ, % от должной величины 61,20 ± 2,49* 85,50 ± 3,11** 100,40 ± 2,21
Индекс Тиффно, % 48,50 ± 1,39* 75,30 ± 2,49** 87,10 ± 1,25
Тест 6-минутной ходьбы, м 338,40 ± 11,7** 380,00 ± 21,9** 575,70 ± 15,6
8ро, до теста 6-минутной ходьбы, % 96,00 ± 0,31* 97,60 ± 0,18** 99,00 ± 0,15
8р0, после теста 6-минутной ходьбы, % 95,10 ± 0,45* 97,50 ± 0,17** 98,80 ± 0,10
СЭ4+С025+, % 57,94 ± 1,53** 57,62 ± 1,75** 41,81 ± 3,80
СЭ4+С025Ь'8Ь, % 2,82 ± 0,24* 1,87 ± 0,47 1,56 ± 0,24
СЭ4+БохР3+, % 8,37 ± 0,38 2,58 ± 0,60*** 8,10 ± 0,48
* р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля и при среднетяжелой БА.
** р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля.
*** р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля и ХОБЛ.
Таблица 2
Результаты обследования пациентов с различными фенотипами ХОБЛ, включенных в исследование (клиническая характеристика)
Параметр Фенотип
Эмфизематозный (13 человек) Бронхитический (28 человек) Смешанный (19 человек)
Возраст, лет 53,20 ± 2,97 58,20 ± 1,39 60,42 ± 1,71
Продолжительность заболевания, лет 4,50 ± 0,59 12,57 ± 1,43* 12,10 ± 2,25*
Продолжительность курения, пачко-лет 42,60 ± 6,22 49,60 ± 4,51 41,92 ± 7,89
Количество дневных симптомов в течение последних 7 сут 20,70 ± 3,74 17,60 ± 2,86 16,10 ± 2,86
Количество ночных симптомов в течение последних 7 сут 3,50 ± 1,38 3,90 ± 0,99 3,30 ± 1,17
Количество обострений, приведших к госпитализации
в течение последних 12 мес 1,60 ± 0,33 1,10 ± 0,14 0,68 ± 0,15*
Индекс массы тела, кг/м2 21,87 ± 0,75 26,60 ± 0,98* 27,10 ± 1,12*
ОФВ1, % от должной величины 28,20 ± 3,63 36,20 ± 2,48 45,00 ± 3,25*, **
ФЖЕЛ, % от должной величины 51,30 ± 6,04 59,80 ± 3,59 70,00 ± 3,26*, **
Индекс Тиффно, % 43,50 ± 2,29 48,90 ± 1,86 51,30 ± 2,92*
Одышка по шкале ММЯС, балл 2,40 ± 0,27 2,20 ± 0,16 1,50 ± 0,19*, **
САТ-тест, балл 22,40 ± 1,92 23,10 ± 1,55 16,30 ± 1,89*, **
Тест 6-минутной ходьбы, м 337,30 ± 23,18 320,00 ± 16,1 366,30 ± 22,9
8р0,, до теста 6-минутной ходьбы, % 94,90 ± 0,81 95,90 ± 0,42 96,80 ± 0,46*
8ро, после теста 6-минутной ходьбы, % 93,50 ± 1,44 94,90 ± 0,58 96,60 ± 0,45**
СЭ4+С025+, % 56,20 ± 3,22 58,90 ± 2,33 57,80 ± 2,69
СЭ4+С025Ь18Ь, % 3,44 ± 0,40 2,83 ± 0,22* 2,38 ± 0,22*
СЭ4+БохР3+, % 8,58 ± 0,50 8,40 ± 0,46 8,20 ± 0,25
* р < 0,05 по сравнению с пациентами с эмфизематозным фенотипом ХОБЛ.
** р < 0,05 по сравнению с пациентами с бронхитическим фенотипом ХОБЛ
Лица со смешанным фенотипом обладали более высо- более низкими баллами одышку по шкале ММЕС и кими спирометрическими показателями, оценивали влияние ХОБЛ на состояние своего здоровья при по-
мощи теста по оценке ХОБЛ (COPD Assessment Test — CAT-тест).
Исследование популяции активированных Т-кле-ток (CD4+CD25+) периферической крови показало более высокий (p < 0,05) их уровень у пациентов с брон-хообструктивными заболеваниями в сравнении с группой здоровых добровольцев (рис. 1). Как известно, экспрессия на клеточной мембране молекул CD25, являющихся а-цепью рецептора к ИЛ-2, характерна не только для субпопуляции Т-регуляторных клеток, но и для активированных Т-лимфоцитов [15]. Повышение уровня активированных CD4+CD25+-T-лимфоцитов свидетельствует об их участии в поддержании воспаления в дыхательных путях при БА и ХОБЛ. Показано, что при ХОБЛ CD4+-T-клетки находятся в большом количестве в дыхательных путях и легочной паренхиме. Хемотаксис клеток, отвечающих за врожденный (макрофаги, нейтрофилы и эозинофи-лы) и приобретенный (Т- и В-лимфоциты) иммунный ответ, в легких курильщиков при ХОБЛ, опосредован Thl-направленностью дифференцировки CD4+-T-клеток и регулируется специфичными рецепторами хемокинов, такими как CXCR3, CCR5 и CCR6 [13]. Кроме того, эпителиальные и эндотелиальные клетки дыхательных путей экспрессируют лиганды для CXCR3, что положительно коррелирует с тяжестью ХОБЛ [13].
Рис. 1. Уровень Т-reg у пациентов, включенных в исследование: * — р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля и сред-нетяжелой БА; ** — р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля; *** — р < 0,05 по сравнению с показателями в группе контроля и ХОБЛ
Известно, что у человека супрессорной активностью обладает только малая часть СБ4+-клеток, характеризующаяся высоким уровнем экспрессии СБ25-антигена (СВ4+СБ25ЬщЬ) [6]. В связи с этим на следующем этапе работы определялся уровень СВ4+СБ25Ьщ11 в периферической крови. Установлено, что уровень естественных Тч^ (СВ4+СБ25ЬщЬ) у пациентов, страдающих ХОБЛ, составил (2,82 + 0,24)% вне зависимости от
степени тяжести болезни и достоверно превышал таковой в сравнении с группой пациентов, страдающих БА (1,87 + 0,47)% (p = 0,004) и группой контроля (1,56 + 0,24)% (p = 0,005) (рис. 1). Зарегистрирована положительная корреляционная связь длительности курения (лет) и уровня CD4+CD25high в периферической крови пациентов с ХОБЛ (r = 0,32; р = 0,01). Полученные результаты о повышении уровня CD4+CD25high при ХОБЛ и связи этого показателя со стажем курения не противоречат данным литературы [5, 8]. Так, E. Roos-Engstrand и соавт. продемонстрировали увеличение числа T-reg с фенотипом CD4+CD25high в бронхоальвеоляр-ном лаваже у здоровых курящих, а также при ХОБЛ [21]. Другими авторами показано увеличение популяции CD4+CD25high T-reg у курильщиков с нормальной функцией легких в сравнении с группой здоровых некурящих и курящих при ХОБЛ [5].
Cпецифичным внутриклеточным маркером идентификации индуцибельных T-reg считается транскрипционный фактор (factor forkhead box P3 — FoxP3), который также важен для развития и функциональной активности T-reg [11]. Продемонстрировано, что FoxP3 блокирует способность транскрипционных факторов NFAT и NFkB индуцировать их гены и, как следствие, подавляет транскрипцию гена IL2 и других генов цито-кинов (IL4 и INFy), тем самым инактивируя иммунные клетки [7]. Дальнейший анализ фенотипа Т-reg периферической крови показал, что пациенты, страдающие ХОБЛ, и здоровые участники исследования сопоставимы по уровню индуцибельных Т-reg (CD4+FoxP3+) (р > 0,05). В то же время продемонстрирована положительная корреляционная связь между относительным количеством CD4+FoxP3+ в периферической крови и продолжительностью (в годах) (r = 0,31; р = 0,017) и интенсивностью (пачко-лет) курения (r = 0,32; р = 0,01) в группе пациентов с ХОБЛ. В литературе также есть указания на положительную корреляцию между продукцией FoxP3 в крупных дыхательных путях и длительностью курения согласно индексу курения [17].
Касательно отдельных популяций T-reg при разных фенотипах ХОБЛ установлено, что группа пациентов, страдающих эмфизематозным фенотипом, характеризовалась статистически более высоким относительным количеством популяции регуляторных клеток CD4+CD25high ((3,44 + 0,40)%) по сравнению с группой лиц с бронхитическим ((2,83 + 0,22)%,
р = 0,021) и смешанным фенотипами ХОБЛ ((2,38 ± 0,22)%, р = 0,014) (рис. 2). Статистически значимых различий при анализе CD4+FoxP3+ Т-ге8 между группами пациентов с разными вариантами течения ХОБЛ и когортой здоровых участников не выявлено. Таким образом, эмфизематозный фенотип ХОБЛ характеризуется высоким уровнем содержания пула естественных СБ4+СБ25Ь18Ь-Т-ге8. Супрессорный эффект CD4+CD25hl8h-Т-клеток развивается после предварительного контакта их Т-клеточного рецептора с соответствующим антигеном [16].
И) г
CIM+CDÎ^w CD4+FoxP3+
I Эмфиземлтозныи февотип CZI Бронхитический фенотин ШТЗ Смеимвлыи февотии Рис. 2. Уровень Т-reg у пациентов с различными фенотипами ХОБЛ: * — р < 0,05 по сравнению с бронхитическим и смешанным фенотипами
Будучи однажды активированными, T-reg не зависят ни от природы антигена, ни от клетки, на которую они оказывают воздействие. Гистосовместимость между CD4+CD25+hlgh-T-лимфоцитами и клеткой-мишенью также не является абсолютно обязательной для оказания на нее супрессорного влияния. Для активации супрес-сорной функции данной субпопуляции небходимы распознавание антигена, а также наличие в микроокружении ИЛ-2. По данным Z. Fehervari и соавт., супрессорный эффект указанной клеточной субпопуляции реализуется непосредственно через контакт между клетками без участия цитокинов [10].
При анализе уровня отдельных фенотипов T-reg при астме показано, что БА характеризуется значимо более низким содержанием индуцибельных CD4+FoxP3+-T-reg (2,58 + 0,60) в сравнении с ХОБЛ (8,37 + 0,38; р < 0,001) и группой контроля (8,10 + 0,48; р < 0,001). Сопоставимые уровни CD4+CD25hlgh у пациентов, страдающих БА, и в группе контроля, а также низкий уровень CD4+FoxP3+-T-лимфоцитов при БА могут свидетельствовать о сбое управления иммунным ответом при астме на уровне его регуляции. Считается, что T-reg инги-бируют развитие Т-клеток в направлении Th2, секрети-рующих ИЛ-4 [3]. В литературе активно обсуждается
вопрос о роли низкого уровня отдельных субпопуляций Т-reg и их цитокинов — ИЛ-10, TGF-P в развитии аллергических болезней [14, 19].
Заключение
Таким образом, бронхиальная астма и ХОБЛ характеризуются активацией CD4+CD25+ Т-лимфоцитов. Вместе с тем при БА отсутствие роста уровня естественных (CD4+CD25hlgh) и низкое содержание индуцибельных (CD4+FoxP3+) Т-reg указывают на нарушение клеточноопосредованных механизмов иммуносупрес-сии.
Показано, что ХОБЛ характеризуется высоким уровнем естественных (CD4+CD25hlgh) Т-клеток с наибольшим содержанием этих клеток при эмфизематозном фенотипе в сравнении с бронхитическим и смешанным. Полученные результаты свидетельствуют о высокой степени активации супрессорного пути регуляции иммунного ответа при ХОБЛ, что способствует хронизации воспалительного процесса. Полученные новые сведения могут быть теоретическим обоснованием клеточно-молекулярных механизмов развития ХОБЛ и формирования вариантов ее клинического течения.
Литература
1. Огородова Л.М., Кобякова О.С., Фрейдин М.Б. и др. Роль интерлейкина-5 в патогенезе бронхиальной астмы // Аллергология. 1999. № 4. С. 32—36.
2. Сазонов А.Э., Петровский Ф.И., Иванчук И.И. и др. Экспрессия интерлейкина-5 в мокроте больных бронхиальной астмой // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. Т. 135, № 4. С. 437—440.
3. Фрейдлин И.С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функция // Мед. иммунология. 2005. Т. 7, № 4. С. 347—354.
4. Ярилин А.А., Донецкова А.Д. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3 // Иммунология. 2006. № 3. С. 176—188.
5. Barcelo B., Pons J., Ferrer J.M. et al. Phenotypic characterisation of T-lymphocytes in COPD: abnormal CD4+CD25+ regulatory T-lymphocyte response to tobacco smoking // Eur. Respir. J. 2008. V. 31, № 3. P. 555—562.
6. Beacher-Allan C., Brown J.A., Freeman G.J. et al. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood // J. Immunol. 2001. V. 167. P. 1245—1253.
7. Bettelli E., Dastrange M., Oukka M. Foxp3 interacts with nuclear factor of activated T cells and NF-к to repress cyto-kine gene expression and effector functions of T helper cells // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2005. V. 102, № 14. P. 5138— 5143.
8. Bon J.M., Leader J.K., Weissfeld J.L. et al. The Influence of
Radiographic Phenotype and Smoking Status on Peripheral Blood Biomarker Patterns in Chronic Obstructive Pulmonary Disease // PLoS ONE 2009. V. 4, № 8. P. 6865—6872.
9. Cosio M.G., Majo J., Cosio M.G. Inflammation of the airways and lung parenchyma in COPD: role of T cells // Chest. 2002. V. 121. P. 160—165.
10. Fehervari Z., Sakaguchi S. CD4(+) Tregs and immune control // J. Clin. Invest. 2004. V. 114, № 9. P. 1209—1217.
11. Fontenot J.D., Rudensky A. Y. A well adapted regulatory contrivance: regulatory T cell development and the forkhead family transcription factor Foxp3 // Nature Immunology. 2005. V. 6, № 4. P. 331—337.
12. Global Strategy for the Diagnosis, Management, and Prevention of Chronic Obstructive Pulmonary Disease (update 2009)/ www.goldcopd.org
13. Grumelli S., Corry D.B., Song L.Z. et al. An immune basis for lung parenchymal destruction in chronic obstructive pulmonary disease and emphysema // PLoS Med. 2004. V. 1. № 8. P. 075—083.
14. Hawrylowicz C.M. Regulatory T cells and IL-10 in allergic inflammation // J. Exp. Med. 2005. V. 202, № 11. P. 1459—1463.
15. Hogg J.C., Chu F., Utokaparch S. et al. The nature of small-airway obstruction in chronic obstructive pulmonary disease
// N. Engl. J. Med. 2004. V. 350. Р. 2645—2653.
16. Hudrisier D., van Meerwijk J.P. Romagnoli P. Preferential recognition of self antigens despite normal thymic deletion of CD4(+)CD25(+) regulatory T cells // J. Immunol. 2002. V. 168, № 6. P. 1644—1648.
17. Isajevs S., Taivans I., Strazda G. et al. Decreased FoxP3 expression in small airways of smokers with COPD // Eur. Respir. J. 2009. V. 33, № 1. P. 61—67.
18. Kumar V., Sercarz E. An integrative model of regulation centered on recognition of TCR peptide/MHC complexes // Immunol. Rev. 2001. V. 182. P. 113—121.
19. Larche M. Regulatory T cells in allergy and asthma // Chest. 2007. V. 132, № 3. P. 1007—1014.
20. Lewkowicz P., Lewkowicz N., Sasiak A. et al. Lipopolysac-charide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neu-trophil function and promote their apoptosis and death // J. Immunol. 2006. V. 177, № 10. P. 7155—7163.
21. Roos-Engstrand E., Ekstrand-Hammarstrom B., Pourazar J. et al. // COPD. 2009. V. 6. № 2. P. 112—120.
22. Sakaguchi S., Sakaguchi N. Regulatory T cells in immunologic selftolerance and autoimmune disease // Int. Rev. Immunol. 2005. V. 24. P. 211—226.
Поступила в редакцию 01.11.2010 г. Утверждена к печати 22.12.2010 г.
Сведения об авторах
Н.А. Кириллова — аспирант кафедры госпитальной терапии с курсом физической реабилитации и спортивной медицины СибГМУ (г. Томск).
И. А. Деев — канд. мед. наук, ассистент кафедры факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета СибГМУ (г. Томск).
Е.Э. Кремер — аспирант кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии, мл. науч. сотрудник отдела гематологии, иммунологии и морфологии ЦНИЛ СибГМУ (г. Томск).
Л.М. Огородова — заслуженный деятель науки РФ, д-р мед. наук, профессор, член-корреспондент РАМН, зав. кафедрой факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета СибГМУ (г. Томск).
Г.Э. Черногорюк — д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой госпитальной терапии с курсом физической реабилитации и спортивной медицины СибГМУ (г. Томск).
Для корреспонденции
Кириллова Наталья Александровна, тел. 8-913-888-0637; e-mail: [email protected]
