CC BY-ND
34
1C
ШМНо! (1QO)
СТЕРИЛЬНЫЕ КОРМА - НЕОБХОДИМОЕ УСЛОВИЕ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ РАБОТ С ЛАБОРАТОРНЫМИ ЖИВОТНЫМИ
В.Б. Сбойчаков, С.В. Борисенко, А.М. Сокурова
Всеросийский научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства РАСМН
Поиски путей получения стандартных условий и сопоставимых результатов при проведении экспериментов обусловливают предотвращение влияния всех негативных факторов. Одним из существенных моментов при проведении таких работ является создание стандартных условий их проведения и, в первую очередь, предотвращение заболеваний среди животных. На основании этого в практику проведения экспериментальных работ введено понятие «SPF-животные» (SPF — Specific Pathogen Free), т. е. животные, свободные от патогенных возбудителей заболеваний.
История проведения экспериментальных работ показывает, что исследователи довольно часто получали неадекватные результаты. При анализе проведенных экспериментов в последствии выяснялось, что тот или иной негативный фактор не был учтен в процессе подготовки и проведения эксперимента. В большинстве случаев причиной являлись некачественные по бактериологическим показателям корма, используемые для кормления лабораторных животных.
Комбикорма — это многокомпонентная система. Они должны восполнять дефицит всех элементов, необходимых организму в процессе его жизнедеятельности. В настоящее время комбикорма для грызунов, используемых в качестве лабораторной модели, отвечают всем требова-
ниям, предъявляемым к кормам для SPF-гры-зунов. В отношении комбикормов для SPF-ПТИ-цы такое требование как стерильность не отработано и не внесено ни в один из регламентирующих документов по содержанию и эксплуатации SPF-птицы на территории России.
Целью наших исследований являлось определение стерилизующих доз у-облучения для комбикормов, используемых в промышленном птицеводстве и экспериментальных исследованиях. В качестве индикатора иммунологического статуса мы использовали показатели наличия антител к Salmonella pullorum gallinarum и Salmonella enteritidis и клиническое состояние птицы.
Материалы и методы исследования. В качестве экспериментальной биологической модели мы использовали перепелов в возрастном интервале от 20 до 86 дней и комбикорм ПК-5 производства ЗАО «Гатчинский ККЗ» (Ленинградская область). Облучение проводили с использованием в качестве источника у-излуче-ния Со60, размещенного в установке для стерилизации ОАО «Фирма Медполимер» (г. Санкт-Петербург).
Подготовка корма к радиационному облучению включала в себя следующие этапы:
— фасовка в полиэтиленовые пакеты от 0,7 до 0,9 кг;
ШМ NqI (140)
17
— упаковка пакетов с комбикормом в картонные коробки;
— проведение у-облучения.
Облучаемый комбикорм предварительно
подвергали микробиологическому анализу по ниже следующей методике в соответствии с Правилами бактериологического исследования кормов (утверждены Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 10 июня 1975 г.).
Отбор проб как нестерильного (пробы № 1 и 2) так и стерилизованного (пробы № 3 и 4) корма для бактериологического исследования проводили от каждой упаковочной единицы сухим стерильным пробным щупом. Масса первичной пробы при этом должна быть не менее 100 г. Для бактериологического исследования от каждой партии корма составляли два средних образца весом по 500 г. Один из них исследовали на бактериальную обсеменен-
ность, а другой сохраняли до окончания исследования.
Исследования проводили по общепринятым стандартным методикам:
— определение общего количества микробных клеток;
— наличие сальмонелл методом последовательного обогащения;
— выявление энтеропатогенных типов кишечной палочки;
— наличие токсинообразующих анаэробов.
Результаты исследования и их обсуждение.
Обобщенные показатели результатов микробиологических исследований комбикорма ПК-5 перед у-облучением представлены в табл. 1.
Из табл. 1 следует: общая бактериальная обсемененность проб № 1 и 2 менее 0,5 млн в 1 г корма. Бактерии рода Salmonella при исследовании корма методом последовательного обогащения не выявлены. Энтеропатогенные типы
Таблица 1. Результаты микробиологических исследований проб комбикорма ПК-5 производства Гатчинского КЗК перед у-облучением
Показатели микробиологического качества комбикорма ПК-5 Номер исследуемой пробы
1 2
Общая микробная обсемененность, млн/г 0,004083 0,002137
Коли-титр 10-1 10-1
Наличие энтеропатогенных Е-соИ отсутствует отсутствует
Наличие сальмонелл отсутствует отсутствует
Наличие анаэробов отсутствует отсутствует
кишечной палочки и токсинообразующие анаэробы отсутствуют. Результаты исследований показывают, что нестерильный комбикорм, используемый в наших исследованиях, не содержит патогенной микрофлоры и соответствует по микробиологическим показателям требованиям ГОСТа, предъявляемого к комбикорму ПК-5.
На следующем этапе проводили определение микробиологической обсемененности комбикорма ПК-5, обработанного у-излучени-ем. И определяли эффективную стерилизующую дозу у-облучения. Результаты экспериментов приведены в табл. 2.
Наличия сальмонелл, энтеропатогенных типов кишечной палочки и токсинообразующих анаэробов в пробах № 3 и 4 не выявлено.
В результате установлено, что при обработке комбикорма в дозе 40 кГр получаем сте-
рильный комбикорм. Используя метод статистического прогнозирования и обрабатывая с его помощью полученные результаты определили, что эффективная доза у-облучения находится в пределах от 36 до 40 кГр с вероятностью 0,95.
Полученные результаты исследования также подтверждены результатами иммунологических исследований. Так, довольно часто Л'. еШегШсИх может не диагностироваться микробиологическими методами, но, попадая в организм птицы, она начинает интенсивно размножаться, вызывая развитие патологического процесса. На данную ситуацию иммунная система организма птицы отвечает выработкой специфических иммуноглобулинов, которые можно определить с помощью серологических реакций.
10
&#иЄО
имш (ічо)
Таблица 2. Результаты микробиологических исследований проб комбикорма ПК-5 производства Гатчинского КЗК после у-облучения
Наименование объекта исследования Первичная микробиологическая обсемененность, млн/г Микробиологическая обсемененность после у-облучения в дозах, кГр
15 40
Комбикорм ПК-5:
проба № 3 0,004083 0,000505 отсутствует
проба № 4 0,002137 отсутствует отсутствует
Перед началом исследований вся экспериментальная птица была проверена на наличие антител к & риПогит gaШnarum и & еШегШсИх. Положительно и сомнительно реагирующих не выявлено.
На момент окончания эксперимента, т. е. по достижении птицей возраста 86 дней, она была повторно обследована на наличие антител к Л'. риПогит gaШnarum и еШегШсИх. Положительно и сомнительно реагирующих не выявлено.
Данное исследование подтвердило результаты микробиологических исследований.
Выводы. На основании полученных результатов мы пришли к заключению, что у-облучение в дозе от 40 кГр и выше обеспечивает надежную стерилизацию промышленно выпускаемого комбикорма и может быть применено для стерилизации корма для птицы — продуцентов биологического сырья и для проведения лабораторных исследований.
Предложенный метод стерилизации комбикорма обеспечивает стойкое благополучие экспериментального птицепоголовья по инфекционным заболеваниям бактериальной этиологии.
ШІЖ Nil (1Q0) ZfoGjO IQ
