CC BY
44
УДК 615.322.451.16.07
СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКТА ЖИДКОГО 1:1 ТРАВЫ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО COMARUM PALUSTRE L.
НА 70%-М СПИРТЕ ЭТИЛОВОМ
© 2006 г. Е.В. Малюк
Methods of qualitative and quantitative analysis of biological active compounds composition were developed and quality rates by containment of dry residue, heavy metals, ethyl alcohol and sum of flavonoids in recalculation to rutin for liquid extract 1:1 of Comarum palustre L. herb on ethyl alcohol 70 % were developed.
Современный стиль жизни на фоне увеличения общей продолжительности жизни людей почти вдвое приводит к широкому распространению целого ряда заболеваний, ухудшающих качество жизни без угрозы смертельного исхода. К таким заболеваниям относятся, прежде всего, поражения опорно-двигательной системы. Лидерами в терапии этой группы заболеваний являются хондропротекторы и противовоспалительные лекарственные средства, но в связи с длительным течением заболевания не мене актуальна и фитотерапия. Представляет интерес изучение лекарственных растений, используемых в народной медицине в аналогичных случаях. Известно, что сабельник болотный применяется при остеохондрозе, артрозе и подагре. На основе этого растения выпускается большое количество БАДов, но имеется мало данных о стандартизации сырья и БАДов к пище на его основе. Поэтому нам представилось интересным разработать свою лекарственную форму - экстракт жидкий и разработать методики стандартизации. Чтобы правильно выбрать экстрагент, нами был проведен качественный анализ полифенольного комплекса извлечений из травы сабельника болотного, полученных спиртом этиловым 70 и 40%-й концентрации. Мы сделали акцент на соединениях полифенольной природы в связи с тем, что флавоноиды и оксикоричные кислоты обладают противовоспалительным, регулирующим обменные процессы, обезболивающим, общеукрепляющим, десенсибилизирующим действием и могут оказывать благоприятное влияние на течение заболеваний опорно-двигательной системы. Анализ проводили с использованием высокоэффективного жидкостного хроматографа «Gilston», модель 305, Франция, с последующей обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для «Windows». Результаты анализа (табл. 1) показали, что в извлечении, полученном на 40%-м спирте этиловом, содержание флавоноидов и окси-коричных кислот гораздо ниже, поэтому в качестве экстрагента нами был выбран спирт этиловый 70%-й концентрации.
Экстракт готовили методом реперколяции в модификации по Чулкову в батарее из 6 перколяторов завершенным циклом. Полученный экстракт представляет собой прозрачную темную жидкость зеленовато-коричнево-
го цвета со специфическим запахом. Определение тяжелых металлов, содержания спирта этилового и сухого остатка проводили методом, рекомендованным Государственной фармакопеей (ГФ) XI [1].
Таблица 1
Содержание флавоноидов и оксикоричных кислот в сумме полифенолов, извлекаемой спиртом этиловым 40 и 70%-й концентрации
Концентрация спирта этилового, % Идентифицированный компонент Содержание компонента в смеси полифенолов, %
Виценин 3,71
Цикориевая кислота 4,96
Феруловая кислота 4,09
Геспередин 5,72
Лютеолин-7-гликозид 5,42
70 Апигенин 14,11
Гиперозид 4,81
Рутин 9,18
Робинин 9,97
Дигидрокверцетин 10,76
Кверцетин 6,05
Виценин 5,95
Феруловая кислота 3,32
Геспередин 2,98
Лютеолин-7-гликозид 2,97
40 Апигенин 3,95
Кофейная кислота 11,32
Рутин 0,6
Дигидрокверцетин 0,14
Кверцетин 0,21
Качественный анализ.
1. Присутствие флавоноидов подтверждали качественными реакциями (проба Синода, наблюдали появление красного окрашивания) и хромато-графическими методами. На пластинку 10 х 10 см со слоем силикагеля в 60 Б 254 фирмы «Мерк» или «Сорбфил» ПТСХ-АФ-А в виде полосы шириной 10 мм, толщиной не более 2 мм, наносили 30 мкл экстракта и параллельно по 10 мкл раствора кверцетина и кемпферола. Хроматографи-ровали в системе бензол - этилацетат (75:2,5), проявляли парами аммиака. В УФ -свете при длине волны 365 нм на пластинке обнаруживаются зоны по цвету (желто-зеленая флуоресценция) и положению (Я^ = 0,4 и 0,28), соответствующие кемпферолу и кверцетину соответственно.
2. Присутствие дубильных веществ подтверждали качественными реакциями (1%-м раствором ванилина в концентрированной серной кислоте на катехины и с железоаммониевыми квасцами) и методом бумажной хроматографии в системе н-бутанол - уксусная кислота - вода (40:12:29). В качестве проявителя применяли 1%-й раствор ванилина в соляной кислоте. Наблюдали 3 зоны адсорбции, характерные для сырья - травы сабельника болотного [2]. Значения показателя хроматографической подвижности Я = 0,47, 0,55, 0,75.
Количественный анализ.
1. Содержание суммы флавоноидов определяли методом дифференциальной спектрофотомерии в пересчете на рутин [3].
2. В качестве образца сравнения использовали раствор ГСО рутина, потому что максимумы поглощения комплексов экстракта и рутина с 2%-м раствором алюминия хлорида находятся в близких областях (Хтах ком -плекса рутина с Л1С13/НС1 410-412). Максимум поглощения продуктов реакции 2%-го раствора алюминия хлорида с экстрактом жидким сабельника болотного - 412 нм.
Методика
В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 1 мл экстракта жидкого, прибавляли 2 мл 2%-го раствора алюминия хлорида и 4 капли кислоты хлористоводородной разведенной, доводили объем раствора до метки спиртом этиловым 96%-м и перемешивали. Через 40 мин измеряли оптическую плотность раствора на спектрофотометре марки СФ-46 при длине волны 412 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали раствор, содержащий 1 мл экстракта жидкого, 2 капли кислоты хлористоводородной разведенной, доведенный в мерной колбе спиртом этиловым 96%-м до 25 мл.
Параллельно измеряли оптическую плотность раствора комплекса ГСО рутина с алюминия хлоридом.
Содержание суммы флавоноидов в абсолютно сухом сырье в пересчете на рутин безводный в процентах (Х) вычисляют по формуле:
Б • 250 • 25 • т0 • (100 - -0) • 100
Х — -,
Б0 • т 10-100 • 25 • (100 --)
где Б - оптическая плотность раствора Б; Б0 - оптическая плотность раствора ГСО рутина с алюминия хлоридом; т - масса сырья, г; то - масса ГСО рутина, г; - - потеря в массе при высушивании сырья, %; -0 - содержание воды в ГСО рутина по К. Фишеру, %.
Содержание флавоноидов в пересчете на рутин составило 0,551± ±0,09 %. Относительная погрешность определения среднего результата при доверительной вероятности 0,95 не превышает ±3 %.
Следующим этапом была разработка норм качества на экстракт жидкий травы сабельника болотного 1:1 на 70%-м спирте этиловом. Результаты представлены в табл. 2.
Таблица 2
Нормы качества для экстракта жидкого травы сабельника болотного 1:1 на 70%-м спирте этиловом
Показатель качества Требования к экстракту
Описание Темная жидкость зеленовато-коричневого цвета со специфическим запахом
Подлинность 1. Цианидиновая реакция
2. Реакция с 1%-м раствором ванилина в концентрированной серной кислоте
3. Реакция с железоаммониевыми квасцами
Сухой остаток Не менее 15,5 %
Спирт 65 - 69 %
Тяжёлые металлы Не > 0,01 %
Количественное содержание биологически активных веществ Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин -0,48-0,50 %
Таким образом, разработаны методики качественного и количественного состава биологически активных веществ и нормы качества содержания действующих веществ в экстракте жидком травы сабельника болотного 1:1 на 70%-м спирте этиловом.
Литература
1. Государственная фармакопея: В 2 т. Т. 2. М., 1990.
2. НаумчикГ.Н., РозенцвейгП.Е. // Аптечное дело М., 1964. Т. 12. № 6. С. 27-29.
3. Георгиевский В.П. и др. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск, 1990.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия 31 мая 2006 г.
УДК 541.49+535.37
ЛЮМИНЕСЦИРУЮЩИЕ ЦИНКОВЫЕ КОМПЛЕКСЫ ГЕТАРИЛГИДРОКСИАЗОМЕТИНОВ И ИХ ЦИКЛИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ
© 2006 г. А.В. Метелица, А.С. Бурлов, С.О. Безуглый, Е.В. Сенникова, И.Г. Бородкина, В.П. Рыбалкин, Д.В. Брень, В.А. Брень, А.Д. Гарновский
The series of coordination compounds with six-membered metallocycles and ZnN2O2 units were synthesized. Their absorption and fluorescence spectral properties were studied.
Координационные соединения цинка(2+) с основаниями Шиффа (I) [14] и их бензаналогами (II) [5-7] занимают важное место среди органоме-таллсодержащих люминофоров.
