CC BY
98
3. Иммунокоррекция в клинической ветеринарной медицине / П.А. Красочко [и др.]; под ред. П.А. Красочко. Минск: Техноперспектива, 2008. 507 с.
4. Иммунотропное действие препарата из пчелиной перги «Апистимулина-А» на организм телят и поросят / П.А. Красочко [и др.] // Ветеринарная патология. 2007. №3. С.213-220.
5. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. Л.: Колос. Ленингр. отд-ние, 1979. 184 с.
6. Самбуров, Н.В. Влияние иммуномодуляторов на иммунную систему телят / Н.В. Самбуров, Ю.Н. Федоров // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. 2009. №1. С. 62-67.
7. Самбуров, Н.В. Характеристика гуморальной и клеточной систем защиты организма животных / Н.В. Самбуров, Ю.Н. Федоров // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. 2008. №6. С. 59-64.
8. Прогнозирование и коррекция иммунного статуса новорожденных поросят / А.Л. Симонов [и др.] // Ветеринарная патология. 2003. N»2. С. 77-78.
9. Применение иммуномодуляторов при вакцинации животных против сальмонелле-за / А.Г. Шахов [и др.] // Ветеринария. 2006. № 6. С. 21-26.
УДК 619:616-053.2:636.2
СРЕДНЕМОЛЕКУЛЯРНЫЕ ВЕЩЕСТВА - ПОКАЗАТЕЛЬ СТЕПЕНИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА У ТЕЛЯТ
А.А. БЕЛКО, М.В. БОГОМОЛЬЦЕВА УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. Желудочно-кишечные заболевания молодняка наносят огромный ущерб сельскому хозяйству, снижают темпы развития животноводческой отрасли, являются причиной снижения продуктивности, племенных качеств животных и большого количества падежа и выбраковки животных [12].
Диспепсия (Dyspepsia, Diarrhoea) - острое заболевание новорожденного молодняка, проявляющееся расстройством пищеварения, развитием дисбактериоза, приобретенной иммунной недостаточностью, нарушением обмена веществ, обезвоживанием и интоксикацией [5].
Диспепсия среди заболеваний желудочно-кишечного тракта у животных по частоте, массовости и величине экономического ущерба занимает лидирующее положение [6].
Любая патология или неблагоприятное (стрессовое) воздействие на организм активирует процессы свободнорадикального окисления, что приводит к накоплению различных эндотоксинов [1]. Для определения степени эндогенной интоксикации в медицине принято определение количества веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ). Особенностью ВНиСММ является их отчетливо выраженная высокая биологическая активность. Накопление ВНиСММ не только является маркером эндоинтоксикации [11].
Биологическое действие ВНиСММ заключается в том, что данные вещества обладают нейротоксической активностью, угнетают процес-
сы биосинтеза белка, способны подавлять активность ряда ферментов, разобщают процессы окисления и фосфорилирования, нарушают механизмы регуляции синтеза адениловых нуклеотидов, изменяют транспорт ионов через мембраны, влияют на эритропоэз, фагоцитоз, микроциркуляцию, лимфодинамику, вызывают состояние вторичной иммунодепрессии. Среднемолекулярные пептиды способны соединяться и блокировать рецепторы любой клетки, неадекватно влияя на метаболизм и функции ее. Показана возможность влияния ВНиСММ на тонус гладкомышечных клеток, на трансваскулярный транспорт.
Считается, что ВНиСММ могут проникать через плацентарный барьер, оказывая непосредственное токсическое влияние на плод и вызывая полиорганные нарушения разного характера. Токсическое влияние могут оказывать накапливающиеся в нефизиологических концентрациях промежуточные и конечные продукты нормального и нарушенного белкового и липидного обмена [11].
Как в медицинской, так и в ветеринарной литературе встречается все больше публикаций, указывающих на важность изучения и оценки степени интоксикации организма [3,8,9,14,15].
Для определения клинического проявления интоксикации, при котором отмечено повышенное накопление токсических продуктов в жидкостях организма, и было введено понятие эндогенной интоксикации [2].
По данным Ю.Н. Алехина, эндогенная интоксикация является одной из универсальных реакций организма на различные патологические процессы и неблагоприятные воздействия внешней среды. Показатель содержания «средних молекул» крови является интегральным параметром эндотоксикоза [1,2].
К такого рода веществам относят небелковые вещества любой природы (мочевина, молочные и другие органические кислоты, аминокислоты, фосфолипиды, продукты свободнорадикального перекисного окисления липидов, промежуточного метаболизма и т.д.), накапливающиеся в организме в превышающих нормальные концентрации количествах [9].
Существуют различные методы диагностики эндогенной интоксикации организма, однако наиболее широкое распространение получил метод, основанный на осаждении крупномолекулярных белков в биологических жидкостях трихлоруксусной кислотой.
Цель работы - установить влияние эндогенной интоксикации организма больных диспепсией телят с различной степенью тяжести. Для осуществления поставленной цели проводили определение содержания веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) в плазме крови и моче [4].
Материал и методика исследований. Исследования проводились в два этапа. На первом этапе изучали содержание ВНиСММ в плазме крови и моче у больных диспепсией телят с разной степенью тяжести заболевания.
Определение веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) проводили по методике М.Я. Малаховой и Н.И. Габриэля-на.
Основой методики Н.И. Габриэляна является осаждение крупномолекулярных белков плазмы крови раствором трихлоруксусной кислоты. Кислота изменяет четвертичную и третичную структуру белка, в результате чего он денатурирует и выпадает в осадок. В надоса-дочной жидкости остаются вещества низкой и средней молекулярной массы. Исследования проводили с использованием спектрофотометра при длине волны 254 нм.
К 1 мл сыворотки крови добавляли по каплям 0,5 мл 10%-ной три-хлоруксусной кислоты, перемешивали и центрифугировали при 3000 об/мин 30 мин. Надосадочную жидкость разводили 10 раз дистиллированной водой и измеряли при длине волны 254 нм. По данным И.П. Степановой и др. [14], норма ВНиСММ соответствует (0,24±0,02) ед.
Отличительной особенностью методики М.Я. Малаховой является то, что одновременно определяется содержание ВНиСММ в нескольких биологических средах организма.
В данном случае мы проводили исследование плазмы крови и мочи. По мнению авторов [14], при нарастании степени интоксикации большая часть эндогенных токсинов переходит в мочу, а затем вновь возвращается в плазму.
Кровь центрифугировали, далее вносили в разные пробирки по 1 мл плазмы крови и 0,1 мл мочи.
Осаждение крупномолекулярных частиц плазмы крови и мочи проводили раствором ТХУ в концентрации 15%, пробы размешивали стеклянными палочками и через 5-7 мин центрифугировали.
Отбирали надосадочную жидкость из всех пробирок в количестве 0,5 мл, разводили дистиллированной водой в соотношении 1:9 и фото-метрировали против контроля в кюветах с длиной оптического пути 1 см.
Регистрацию спектра поглощения исследуемого раствора проводили в ультрафиолетовой части спектра на спектрофотометре СФ-2000 при длинах волн от 238 до 306 нм с шагом 4 нм. На основании полученных значений экстинкций плазмы и мочи проводили построение спектрограмм.
Расчет конечного результата производили путем интегрального измерения площади фигуры, образованной полученными значениями экстинкций для типа определения ВНиСММ плазмы и мочи путем умножения суммы установленных значений экстинкций на шаг длины волны [4,7,11]:
ВНиСММплазмы = (Е238 + Е242+ Е246+ ... + Е306) х 4 (усл. ед.), ВНиСММмочи = (Е238 + Е242+ Е246+ ... + Е306) х 4 (усл. ед.).
Анализировали как количественные характеристики, так и формы спектрограмм. Учитывали смещение максимумов длин волн, высоту расположения пиков в плазме и моче [11].
191
На втором этапе изучали динамику изменения количества ВНиСММ в плазме крови телят при различных способах лечения. Под наблюдением находились 2 группы (1-я опытная и 2-я контрольная) по 15 телят в каждой. Формирование групп осуществлялось в соответствии с принципом условных аналогов. В каждую группу входили телята, имевшие явные клинические признаки диспепсии, в возрасте от 3 до 5 дней жизни.
Телятам опытной группы в комплексную схему лечения в качестве антимикробного средства включался раствор анолита нейтрального в дозе 200 мл перорально, телята контрольной группы лечились принятым в хозяйстве способом (раствор глюкозы 5%-ной внутривенно в дозе 150 - 200 мл, 0,9 %-ный раствор натрия хлорида, раствор гента-мицина сульфата 4%-ного внутримышечно в дозе 2 мл на животное, отвар коры дуба и семени льна, витаминотерапия).
Результаты исследований и их обсуждение. При измерении поглощения надосадка с использованием метода Н.И. Габриэляна установлено, что поглощение, обусловленное молекулами средней массы в плазме крови телят с тяжелой степенью диспепсии, было в 1,13 раза выше, чем в плазме телят со средней степенью диспепсии, и в 1,27 раза выше (Р<0,01), чем в плазме телят, не имевших клинических признаков заболевания.
Полученные данные о поглощении, обусловленном молекулами средней массы в плазме, мы рассматривали как значение, характеризующее степень интоксикации организма животного. У телят с тяжелым течением диспепсии степень интоксикации была выше на 27% (Р<0,01) по сравнению со здоровыми телятами и на 13% выше, чем у животных со средней степенью диспепсии, которая протекала у них в более легкой форме. В ряде литературных источников [4,7,11] приводится нормативное значение содержания ВНиСММ в плазме крови, для методики Н.И. Габриэляна равное (0,24±0,02) ед. Учитывая эти данные, можно сделать вывод, что содержание ВНиСММ у телят с тяжелой степенью диспепсии было выше нормативного показателя в 1,4 раза, а у телят со средней степенью тяжести - в 1,2 раза.
При проведении измерения поглощения надосадка по методике М.Я. Малаховой, полученного осаждением плазмы крови и мочи больных диспепсией и здоровых телят 15%-ной ТХУ, установлено, что максимальные значения экстинкций отмечались при длинах волн от 238 до 250 нм. У телят с тяжелой степенью интоксикации при длине волны 238 нм значение экстинкций соответствовало (1,617±0,022), у телят со средней степенью интоксикации - (1,203±0,093), у здоровых животных - (1,301±0,051).
Анализу подвергались как количественные характеристики экс-тинкций плазмы, так и формы спектрограмм [11].
Полученные значения экстинкций указывают на то, что увеличение поглощения, обусловленное молекулами средней массы, в сравнении со здоровыми животными происходило при длине волны 242, 250, 298, 302 нм.
Именно в зоне длин волн 238-244 нм имеют максимум экстинкций мочевина, мочевая кислота и креатинин. По данным С.Л. Нестерова и др. [13], именно при длине волны 238 нм определяются ксенобиотики, а при 270-286 нм - эндогенные вещества. При длине волны 290 нм максимум поглощения имеет рибозид мочевой кислоты. Максимальное поглощение в зонах экстинкций данных токсических продуктов указывает на высокую концентрацию их в плазме.
Расчет конечного результата производили путем интегрального измерения площади фигуры, образованной полученными значениями экстинкций для каждого типа определения ВНиСММ плазмы путем умножения суммы установленных значений экстинкций на шаг длины волны.
При анализе данных содержания ВНиСММ в плазме крови больных диспепсией телят установлено, что у телят с тяжелой степенью диспепсии оно соответствовало (24,78±0,059) и было на 11,32% выше, чем у телят со средней степенью заболевания, и на 39,76% выше, чем у здоровых телят. У телят со средней степенью заболевания данный показатель соответствовал (22,26±0,055) и был выше на 25,55%, чем у здоровых телят. У здоровых животных общее содержание ВНиСММ соответствовало (17,73±0,066).
Аналогичным образом проводилось определение значений экс-тинкций надосадка мочи у телят с разной степенью диспепсии.
Максимальные значения экстинкций мочи у больных диспепсией телят отмечались при длинах волн 238 - 258 нм.
Расчет конечного результата производили путем интегрального измерения площади фигуры, образованной полученными значениями экстинкций для каждого типа определения ВНиСММ мочи аналогично плазме крови.
У телят с тяжелой степенью диспепсии содержание ВНиСММ соответствовало (27,96±0,023), что было на 21% выше, чем у телят со средней степенью, и на 25% выше показателя здоровых телят, у телят со средней степенью тяжести - (23,04±0,055) и было выше на 3%, чем у здоровых животных, у здоровых телят данный показатель соответствовал (22,22±0,115).
По мнению М.Я. Малаховой, определение ВНиСММ в моче может более точно характеризовать состояние выделительной функции почек, чем общепринятые показатели, такие, как концентрация мочевины или креатинина. И в зависимости от фазы развития эндогенной интоксикации и распределения ВНиСММ можно дать рекомендации по обоснованному применению конкретного способа детоксикации [11].
По данным М.Я.Малаховой, выявлены закономерные фазы развития эндогенной интоксикации, заключающиеся в количественном нарастании и перераспределении ВНиСММ.
Учитывая степень клинического проявления заболевания, установленный уровень общей концентрации ВНиСММ, локализацию патологического процесса непосредственно в кишечнике или органах, продуцирующих протеолитические ферменты, по классификации М.Я. Ма-
лаховой, указывают на конец второй и начало третьей фазы эндогенной интоксикации. Вторая фаза - фаза накопления токсических продуктов, поступающих из очага агрессии. В данной фазе отмечается умеренный рост количества ВНиСММ в плазме крови. Система деток-сикации организма в данной фазе работает максимально, однако образование токсических компонентов превышает их выведение из организма и они начинают накапливаться в плазме и моче. Третья фаза полного насыщения называется фазой обратимой декомпенсации систем и органов детоксикации. В данной фазе отмечается значительное увеличение количества ВНиСММ в плазме и моче. Причиной высокого катаболического пула в этой фазе является несостоятельность де-токсикационной функции печени [11].
Таким образом, с учетом классификации стадий эндогенной интоксикации и полученных количественных данных содержания ВНиСММ в плазме крови, а также значительного повышения содержания данных веществ в моче у телят с тяжелой степенью диспепсии можно определить начало третьей стадии эндогенной интоксикации, у телят со средней степенью тяжести диспепсии - начало второй стадии эндогенной интоксикации, так как увеличение общего количества ВНиСММ в моче было менее значительным.
При измерении поглощения надосадка с применением методики Н.И. Габриэляна установлено, что поглощение, обусловленное молекулами средней массы в плазме крови телят, до лечения с использованием анолита было на 15,6% выше, чем на 7-й день лечения. Соответственно и степень интоксикации организма до лечения была в 1,2 раза выше, а к 7-му дню значительно уменьшилась, содержание ВНиСММ приблизилось к нормативному - (0,24±0,02) ед. [4,7,11].
В контрольной группе количество ВНиСММ уменьшилось на 25,8% к 7-му дню лечения, однако данный показатель был в 1,09 раза выше, чем в плазме крови телят опытной группы.
При проведении измерения поглощения надосадка, полученного осаждением плазмы крови по методике М.Я. Малаховой до лечения анолитом, к 7-му дню лечения отмечалось уменьшение поглощения, обусловленного молекулами средней массы, при длинах волн 238, 242, 250, 298, 302 нм.
Необходимо иметь в виду, что в зоне длин волн 238-244 нм максимум экстинкций имеют мочевина, мочевая кислота и креатинин [7,11,13], а понижение поглощения, обусловленного данными молекулами, указывает на снижение концентрации данных веществ в плазме, а следовательно, и на степень интоксикации.
У телят контрольной группы как до начала лечения, так и на 7-й день отмечалось максимальное поглощение надосадка, обусловленное молекулами средней массы, при длинах волн от 238 до 250 нм, что обусловлено высоким уровнем содержания токсических веществ в плазме крови.
В результате расчета конечного результата установлено, что общее
количество ВНиСММ в плазме крови до лечения анолитом соответствовало (23,66±0,056), а к 7-му дню лечения снизилось до (18,99±0,02), в контрольной группе соответствовало (23,34±0,059), а к 7-му дню лечения наблюдалось снижение до (21,19±0,051).
У телят опытной группы на 3-й день отмечалось снижение содержания ВНиСММ на 3,4% и на 19,7% - на 7-й день по сравнению с показателями до лечения.
Общее количество ВНиСММ в плазме крови телят контрольной группы оставалось повышенным на протяжении всего периода лечения и к 3-му дню лечения уменьшилось на 1,4%, а к 7-му - на 6 % .
Количественные данные, полученные при определении содержания ВНиСММ в плазме крови у телят опытной и контрольной групп в начале лечения, указывают на наличие третьей стадии эндогенной интоксикации у больных диспепсией телят.
В результате лечения у телят опытной группы отмечалось снижение общего количества ВНиСММ в плазме крови, а также степени интоксикации и переход к 7-му дню лечения во вторую стадию эндогенной интоксикации. В контрольной группе отмечалась аналогичная тенденция к снижению общего количества ВНиСММ в плазме крови и степени эндогенной интоксикации. Однако изменения в плазме крови контрольной группы были менее интенсивными и общее количество ВНиСММ на 7-й день лечения превышало показатель опытной группы на 10%.
Заключение. На основании полученных данных можно сделать вывод, что степень тяжести заболевания находится в прямой зависимости от уровня эндогенной интоксикации и критерием ее измерения является общее число ВНиСММ, что согласуется с данными [2], которые показывают, что существует прямая зависимость между уровнем СМВ и заболеванием диспепсией, наличие у телят метаболических нарушений приводит к интенсивному накоплению в организме соединений, входящих в группу СМВ [10].
Повышение содержания ВНиСММ в плазме крови и моче больных диспепсией телят указывает на снижение антиоксидантной защиты организма и накопление токсических продуктов в плазме крови, а затем переход их в мочу.
Установление концентрации ВНиСММ в биологических жидкостях является информативной методикой, позволяющей более полноценно оценивать степень интоксикации организма животного и с учетом полученных результатов назначать необходимое лечение.
Использование анолита нейтрального в комплексной схеме лечения больных диспепсией телят указывает на его преимущество перед обычной схемой лечения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Перекисное окисление липидов и эндогенная интоксикация / С.С. Белко [и др.]. Витебск: УО «ВГАВМ», 2009. 216 с.
2. Алехин, Ю.Н. Диагностическое значение интегральных показателей эндогенной интоксикации / Ю.Н. Алехин // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: материалы междунар. координационного совещания. Воронеж, 1997. С. 45-46.
3. Борченко, Р.В. Связывающая способность альбумина и концентрация молекул средней массы в сыворотке крови телят при диарее / Р.В. Борченко, Р.Е. Киселева, И.П. Макогон // Сельскохозяйственная биология. 2007. №2. С.82-86.
4. Камышников, В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике / В.С. Камышников. Минск: Беларусь, 2002. Ч.2. 494 с.
5. Карпуть, И.М. Внутренние незаразные болезни животных / И.М. Карпуть. Минск: Ураджай, 2006. 690 с.
6. Болезни сельскохозяйственных животных / П.А. Красочко [и др.]; науч. ред. П.А. Красочко. Минск: Бизнесофсет, 2005. 800 с.
7. Малахова, М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме / М.Я. Малахова // Эфферентная терапия. СПб., 2000. Т.6. Ч.4. С.3-14.
8. Маржохова, М.Ю. Оценка синдрома эндогенной интоксикации при пищевых токсикоинфекциях / М.Ю. Маржохова, Ж.М. Желихажева // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. №1.С.15-18.
9. Матвеев, С.Б. Оценка эндогенной интоксикации по показателям среднемоле-кулярных пептидов при неотложных состояниях / С.Б. Матвеев, Н.В. Федорова, М.А. Годков // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. №5. С.16-18.
10. Мацинович, А. А. Определение среднемолекулярных веществ (СМ-веществ) в сыворотке крови как индикатор интоксикационных процессов при диспепсии телят / А.А. Мацинович //Актуальные проблемы патологии сельскохозяйственных животных: материалы междунар. науч.-практ. конф. Минск: БелНИИ им. С.Н. Вышелесского, 2000. С.518-520.
11. Медицинские лабораторные технологии: справочник / под ред. А.И. Карпищен-ко. СПб.: Интермедика, 1999. 646 с.
12. Ми кулич, Е.Л. Морфологические изменения слизистой оболочки сычуга новорожденных телят при диспепсии / Е.Л. Микулич // Ученые записки УО «ВГАВМ». Витебск, 2003. Т.39. Ч.2. С.73-74.
13. Средние молекулы мочи в оценке состояния почек у новорожденных / С.Л. Нестеров [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. .№10. С.12-14.
14. Взаимосвязи между пероксидным окислением липидов, активностью антиокси-дантной системы защиты и содержанием веществ низкой и средней молекулярной массы при интоксикации животных ацетальдегидом / И.П. Степанова [и др.] // Сельскохозяйственная биология. 2004. №6. С.16-19.
15. Чистякова, Г.Н. Использование интегральных гематологических индексов для оценки степени аутоинтоксикации организма при осложненной гестозом беременности / Г.Н. Чистякова, И.А. Газиева, И.И. Ремизова // Клиническая лабораторная диагностика. 2005. №12. С.35-37.
УДК 619:614.94:631.227
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ САНАЦИИ ВОЗДУШНОЙ СРЕДЫ ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ ПОМЕЩЕНИЙ
Д.Г. ГОТОВСКИЙ, А.А. КАРТАШОВА УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. В последнее время в практику ведения животноводства прочно внедрен более перспективный производственный метод выращивания животных (птицы) в условиях промышленно-комплексного содержания. Перевод животноводства на промышленную технологию выращивания полностью себя оправдывает и дает возможность полу-
