CC BY
39
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА, ЭКОЛОГИЯ, ПРОФИЛАКТИКА
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РУТИННЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩЕЙ АКТИВНОСТИ АНТИТЕЛ И ИФА В ДИАГНОСТИКЕ ХРОНИЧЕСКОГО БРУЦЕЛЛЕЗА
А. Х. Нурпейсова, А. Д. Сафонов, Н. В. Рудаков, Г. В. Березкина, Л. А. Томилова ГОУ ВПО ОмГМА Росздрава, ФГУН НИИПОИ Роспотребнадзора, БУЗОО «ИКБ №1 им. ДАЛМАТОВА Д. М.»
Диагностика бруцеллеза затрудняется многообразием клинических форм, частичным сходством симптомов многих заболеваний с проявлениями данного зооноза, а также недостаточными настороженностью и знаниями врачей. В связи с этим существенное значение имеют лабораторные исследования. К сожалению, агглю-тинационные тесты обладают сравнительно невысокой чувствительностью и специфичностью, поэтому с их помощью первоначально выявляются, как правило, не более 2/3 больных людей. Перспективным, по мнению многих исследователей, является применение ИФА с целью подтверждения диагноза.
Цель исследования. Провести сравнительный анализ рутинных методов определения общей активности антител (реакции Райта, Хеддлсона) и ИФА в диагностике хронического бруцеллеза.
Материал и методы. Серологическими тестами были обследованы 69 больных с хроническим бруцеллезом, находившихся на стационарном лечении в БУЗОО «ИКБ № 1 им. Далматова Д. М.» в период 2007-2008 гг. Диагноз бруцеллеза устанавливался на основании клинико-анамнестичес-ких и лабораторных данных.
Сыворотки крови на наличие антител к возбудителю бруцеллеза исследовали в пластинчатой реакции агглютинации Хеддлсона и объемной в пробирках Райта на базе серологической лаборатории ИКБ № 1 с применением тест-систем, изготовленных в НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН (Москва).
Антитела к возбудителю бруцеллеза в сыворотке крови определяли также методом ИФА с применением тест-систем «БруцеллаСкрин», изготовленных в НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (Москва). Результаты ИФА учитывали на автоматическом ИФА-ридере ELх800 фирмы BIO-TEK INSTRUMENTS (США). Исследования проводили в лаборатории «ДИАГНОСТ-БЕСТ» на базе ФГУН НИИПОИ г. Омска. Все тесты проводились в соответствии с общепринятыми методиками.
Результаты исследования. При серологическом исследовании больных антитела к бруцеллам в реакции Райта с положительными результатами (1/100 - 1/800) были выявлены у 44, в титре 1/50 —
у 24 пациентов. В сыворотке одного больного агглютинации в пробирке не произошло.
Результаты проведенных серологических исследований представлены в таблице 1.
Наряду с этим ответы реакции Хеддлсона были положительными со степенью агглютинации 4+, 3+ — у 34, сомнительными (2+) — у 30 и отрицательными — у 2 пациентов.
Анализ данных показал, что наибольший удельный вес положительных ответов регистрировался по результатам ИФА (65,2 %). Рутинные методы диагностики при хроническом бруцеллезе сохраняют свою актуальность и возможность их применения на практике, несмотря на меньший процент положительных результатов в реакциях Хеддлсона (49,2 %) и Райта (63,7 %о).
Далее мы провели сравнительный анализ результатов ИФА в зависимости от активности агглютинации сывороток крови в реакции Хеддлсо-на. Результаты представлены в таблице 2.
Максимум совпадений положительных ответов реакции Хеддлсона и ИФА наблюдался при высокой агглютинационной активности сыворотки (4+, 3+). Такой ответ был получен у 23 из 69 обследованных больных (33,3 %). Сопоставление двух диагностических тестов выявило, что достоверно большее количество положительных результатов регистрировалось при хроническом бруцеллезе в ИФА, чем в реакции Хеддлсона (Х2=14,03, р = 0,0002). При уменьшении интенсивности агглютинации в реакции Хеддлсона относительное число положительных результатов ИФА соответственно уменьшалось (при 2+ — 28,9 %о, при 1+, 0-4,1 % случаев). Отрицательные ответы ИФА одинаково часто (15,9 %о) регистрировались при степени агглютинации в реакции Хеддлсона 3+ и 2+.
При анализе полученных данных ИФА было выявлено, что совпадение положительных результатов с аналогичными ответами в реакции Райта встречалось в 30 случаях (43,5 %о) при высокой агглютинационной активности сыворотки 1/100-1/800. Результаты исследования представлены в таблице 3.
Критерий соответствия двух тестов составил Х2=6,57 (р=0,01), указавший на достоверно более
НАЦИОНАЛЬНЫЕ ПРИОРИТЕТЫ РОССИИ. 2009. № 2
Таблица 1
Сравнительный анализ серологических тестов при хроническом бруцеллезе
Лабораторный тест Всего обследовано больных Больные с положительными/резко положительными результатами Частота положительных/резко положительных результатов, %
Р. Хеддлсона 69 34 49,2
Р. Райта 69 44 63,7
ИФА 69 45 65,2
Таблица 2
Сопоставление результатов ИФА в зависимости от активности агглютинации сывороток крови в реакции Хеддлсона при хроническом бруцеллезе
Результат ИФА Количество сывороток с результатами РХ всего
4+ 3+ 2+ 1+, 0
Положительный 10 13 20 2 45
Отрицательный 0 11 11 2 24
Итого 10 24 31 4 69
Таблица 3
Сопоставление результатов реакции Райта и ИФА при хроническом бруцеллезе
Результат ИФА Количество сывороток с титрами Р. Райта всего
1/800 1/100-1/400 1/50 Отрицательный
Положительный 1 29 14 1 45
Отрицательный 0 14 10 0 24
Итого 1 43 24 1 69
частую регистрацию положительных результатов в ИФА, чем в реакции Райта. Количество отрицательных ответов ИФА уменьшалось в соответствии со снижением титра в реакции Райта: 1/1001/400 — 20,2 %, 1/50 — 14,5 %.
Таким образом, сравнительный анализ рутинных методов определения общей активности антител (реакции Райта, Хеддлсона) и ИФА
выявил преимущество последнего метода в диагностике хронического бруцеллеза. Положительные результаты в ИФА регистрируются достоверно чаще, чем в реакциях Райта и Хеддлсона.
Для объективной верификации диагноза не представляется возможным выбрать ведущий лабораторный метод, необходима комплексная оценка результатов нескольких тестов.
ФАКТОРЫ, СПОСОБСТВУЮЩИЕ ПРОГРЕССИРОВАНИЮ КЛЕЩЕВЫХ МИКСТ-ИНФЕКЦИЙ В ПЕРМСКОМ КРАЕ
М. А. Окишев
Кафедра инфекционных болезней ГОУ ВПО ПГМА им. ак. Е. А. Вагнера Росздрава
Как известно, в Европе и Российской Федерации региональная распространенность иксодо-вых клещевых боррелиозов (ИКБ) совпадает с
местностями, эндемичными по другому заболеванию, резервуаром которого в природе являются иксодовые клещи, — клещевому энцефалиту
