Сравнительное изучение морфологических и анатомо-диагностических признаков травы видов череды Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

ФАРМАКОГНОЗИЯ И БОТАНИКА

Н.В. Корожан, Г.Н. Бузук

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И АНАТОМО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ТРАВЫ ВИДОВ ЧЕРЕДЫ

Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет

Изучены морфологические и анатомо-диагностические признаки травы четырех видов череды, произрастающих на территории Республики Беларусь. Основными морфологическими диагностическими признаками сырья являются тип листовой пластинки, строение цветочной корзинки, количество остей и характер поверхности семянки. Анатомо-диагностическими признаками являются количество и форма клеток толстостенных и тонкостенных волосков цветков, листьев, листочков наружной и внутренней обверток, а также наличие секреторных ходов.

Ключевые слова: череды трава, диагностические признаки.

ВВЕДЕНИЕ

Род Череда (Bidens L.) семейства Астровые (Asteraceae) насчитывает 230 видов, распространенных в Европе, северной части Азии, Африке и Америке [1].

На территории Республики Беларусь распространены пять видов этого рода: череда трехраздельная (Bidens tripartitа L.), череда поникшая (Bidens cernua L.), череда лучистая (Bidens radiata ^иШ.), череда олиственная (Bidens frondosa L.) и череда сростнолопастная (Bidens connata МиеЫ. ех Willd.). Они произрастают по берегам рек, озер, реже - как сорные растения на полях, достаточно часто образуя сплошные заросли [2,3].

В официнальной медицине в качестве противоаллергического, потогонного и мочегонного средства применяется только трава череды трехраздельной (Bidentis herba) [4]. Близкие ей виды могут быть органической примесью к данному виду лекарственного растительного сырья.

Для оценки подлинности и доброкачественности лекарственного растительного сырья используются макроскопический и микроскопический анализы [5], что обусловливает важность изучения морфологических и анатомо-диагности-ческих признаков. Для видов череды эти показатели изучены недостаточно, а имеющиеся данные неоднозначны и разрозненны.

Целью данной работы является сравнительное изучение морфологических и анатомо-диагностических признаков тра-

вы видов череды, произрастающих на территории Республики Беларусь.

МА териалы и методы

Объектом исследования являлась трава следующих видов череды: череды трехраздельной, череды поникшей, череды олиственной и череды лучистой. Сырье было заготовлено в июле-августе 2012 года в местах его естественного произрастания на территории Витебской, Гродненской, Брестской и Минской областей, с соблюдением общепринятых правил заготовки, первичной обработки, сушки и хранения лекарственного растительного сырья [6].

Макроскопический и микроскопический анализы сырья проводили согласно требованиям Государственной фармакопеи Республики Беларусь [5].

Морфологические диагностические признаки определяли следующим образом. Высушенные и смятые части сырья предварительно размягчали путем погружения на несколько минут в горячую воду, после чего раскладывали на стеклянной пластинке, тщательно расправляя. Рассматривали невооруженным глазом или с помощью лупы (х10). Отмечали следующие диагностические признаки: тип ветвления стебля, форма его поперечного сечения, размеры (длина и диаметр у основания), характер поверхности, опушенность; листорасположение, тип листа, форма и размеры листовой пластинки и черешка, характер края, жилкование; тип соцветия, его форма и

размеры; размеры, форма и характер поверхности плода.

Микропрепараты готовили по следующей методике. Кусочки сырья помещали в колбу и кипятили в течение 2-3 минут в 25 г/л растворе натрия гидроксида. В случае необходимости сырье тщательно промывали водой и операцию повторяли. Повторное кипячение в растворе щелочи было необходимо для максимального удаления фенольных соединений, которые при окислении окрашивали сырье в оранжевокрасный цвет, что затрудняло микроскопический анализ. Сырье после просветления тщательно промывали водой, помещали на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата. Готовые микропрепараты изучали под микроскопом «Биомед-5» (Россия) на увеличениях 10х20, 10х40. При этом отмечали форму клеток эпидермиса, тип устьичного аппарата, строение волосков, строение и расположение секреторных ходов.

результаты и обсуждение

Макроскопический анализ травы видов череды. Трава видов череды представляет собой олиственные стебли до 20 см длиной и 0,4 см в диаметре и их кусочки, цельные или измельченные листья, цветочные корзинки и семянки. Цвет стеблей зеленый или зеленовато-фиолетовый; листьев и наружных листочков обвертки

- зеленый или коричневато-зеленый; внутренних листочков обвертки - коричневато-желтый, многочисленные жилки на них - темно-фиолетовые; цветков - желтый; семянок - коричневый. Запах слабый, специфический.

Для травы череды трехраздельной характерны листья на коротких крылатых черешках трех- или пятиглубокорассечен-ные, реже, на верхушке - простые (рисунок 1А). Размер листовой пластинки до 9 см в длину и до 8 см в ширину. Средняя доля рассеченных листьев обычно значительно более крупная (до 8 см в длину и до 3,5 см в ширину). Форма листа широколанцетная, край листа неравно-зубчатый, жилкование перисто-сетчатое, опушения нет. Листья расположены супротивно на стеблях с продольно-бороздчатой поверхностью, овальными на поперечном срезе. Соцветия -прямостоящие корзинки диаметром от 0,6 до 1,5 см. Листочки наружной обвертки в количестве до 8, удлиненно-ланцевидные, равные или в два раза превышающие корзинку. Листочки внутренней обвертки прозрачные, пленковидные, удлиненно-овальные, равные по длине цветкам и семянкам. Цветки мелкие, трубчатые, с зазубренными остями вместо чашечки. Плод - сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 8 мм с двумя-тремя зазубренными остями на верхушке (рисунок 2А). Волоски на остях и теле семянки направлены вниз. Поверхность семянки гладкая.

Листья травы череды поникшей сидячие, простые (рисунок 1Б), расположены супротивно на стеблях с продольно-бороздчатой поверхностью, овальными на поперечном срезе. Размер листовой пластинки до 11 см в длину и до 3 см в ширину. Форма листа ланцетная, край листа зубчатый, жилкование перисто-сетчатое, опушения нет. Соцветия - поникающие корзинки диаметром от 0,7 см до 1,8 см. Листочки наружной обвертки в количестве до 8, удлиненно-ланцевидные, равные или

А

Б

В

Г

Примечание: А - череда трехраздельная; Б - череда поникшая; В - череда олиственная; Г - череда лучистая Рисунок 1 - Листовые пластинки видов череды

А

Б

В

Г

Примечание: А - череда трехраздельная; Б - череда поникшая; В - череда олиственная; Г - череда лучистая Рисунок 2 - Семянки видов череды

в два раза превышающие корзинку. Листочки внутренней обвертки прозрачные, пленковидные, удлиненно-овальные, не превышающие длину цветков и семянок. Цветки мелкие, трубчатые с зазубренными остями вместо чашечки в центре соцветия, по краю - язычковые. Плод - сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 8 мм с тремя-четырьмя зазубренными остями на верхушке (рисунок 2Б). Волоски на остях и теле семянки направлены вниз. Поверхность семянки гладкая.

Трава череды олиственной имеет супротивно расположенные листья на длинных черешках тройчатосложные, реже, на верхушке - простые (рисунок 1В). Размер листовой пластинки до 7 см в длину и до 6 см в ширину. Средняя доля рассеченных листьев обычно значительно более крупная (до 5 см в длину и до 2 см в ширину). Форма листа широколанцетная, край листа зубчатый, жилкование перисто-сетчатое, опушения нет. Соцветия - прямостоящие корзинки диаметром от 0,4 см до 1,2 см. Листочки наружной обвертки в количестве до 8, удлиненно-ланцевидные, равные или в два раза превышающие корзинку. Листочки внутренней обвертки прозрачные, пленковидные, удлиненно-овальные, не превышающие по длине цветки и семянки. Цветки мелкие, трубчатые с зазубренными остями вместо чашечки. Плод - сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 10 мм с двумя зазубренными остями на верхушке (рисунок 2В). Волоски на остях направлены вверх, на теле семянки - вниз. Поверхность семянок бородавчатая.

Для травы череды лучистой характер-

ны листья на длинных крылатых черешках простые или трехглубокорассеченные (рисунок 1Г), расположены супротивно на стеблях с продольно-бороздчатой поверхностью. Размер листовой пластинки до 12 см в длину и до 7 см в ширину. Средняя доля рассеченных листьев обычно значительно более крупная (до 10 см в длину и до 4 см в ширину). Форма листа ланцетная, край листа зубчатый, жилкование перистосетчатое, опушения нет. Соцветия - прямостоящие корзинки диаметром от 0,7 см до 1,5 см. Листочки наружной обвертки в количестве до 8, удлиненно-ланцевидные, равные или в два раза превышающие корзинку. Листочки внутренней обвертки прозрачные, пленковидные, удлиненно-овальные, не превышающие по длине цветки и семянку. Цветки мелкие, трубчатые с зазубренными остями вместо чашечки. Плод

- ширококлиновидная семянка длиной до 6 мм с двумя зазубренными остями на верхушке (рисунок 2Г). Волоски на остях и теле семянки направлены вниз. Поверхность семянки гладкая.

Морфологические диагностические признаки травы видов череды приведены в таблице 1.

Таким образом, основными морфологическими диагностическим признаками, позволяющими отличить траву видов череды, являются тип листовой пластинки, строение цветочной корзинки, количество остей и характер поверхности семянки.

Микроскопический анализ травы видов череды. В ходе микроскопического анализа травы видов череды изучали ана-

Таблица 1 - Морфологические диагностические признаки травы видов череды

Вид сырья Часть растения^\ трава череды трехраздельной трава череды поникшей трава череды олиственной трава череды лучистой

Лист на коротких крылатых черешках трех- или пяти-глубокорассе-ченные, реже, на верхушке - простые сидячие, простые на длинных черешках тройчатосложные, реже, на верхушке - простые на длинных крылатых черешках простые или трехглубокорас-сеченные

Цветок прямостоящие корзинки диаметром 0,6-1,5 см; цветки трубчатые поникающие корзинки диаметром 0,7-1,8 см; цветки в центре соцветия трубчатые, по краю - язычковые прямостоящие корзинки диаметром 0,4-1,2 см; цветки трубчатые прямостоящие корзинки диаметром 0,7-1,5 см; цветки трубчатые

Семянка сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 8 мм с двумя-тремя зазубренными остями на верхушке; волоски на остях и теле семянки направлены вниз; поверхность семянки гладкая сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 6-8 мм с тре-мя-четырьмя зазубренными остями на верхушке; волоски на остях и теле семянки направлены вниз; поверхность семянки гладкая сильно сплюснутая, клиновидная семянка длиной до 10 мм с двумя зазубренными остями на верхушке; волоски на остях направлены вниз, на теле семянки - вверх; поверхность семянок бородавчатая ширококлиновидная семянка длиной до 6 мм с двумя зазубренными остями на верхушке; волоски на остях и теле семянки направлены вниз; поверхность семянки гладкая

томио-диагностические признаки листьев, листочков наружной и внутренней обвертки и цветков (таблица 2).

При микроскопическом анализе листа череды трехраздельной были отмечены следующие анатомические признаки. Клетки эпидермиса верхней и нижней стороны листа с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По типу расположения устьиц лист ам-фистоматический. По краю листа, вдоль жилок и секреторных ходов встречаются простые волоски с тонкими стенками из 4-10 клеток. Также часто встречаются простые волоски с толстыми стенками из

2-7 клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

Клетки эпидермиса листочков наружной обвертки с извилистыми стенками, часто встречаются устьица (аномоцитный

тип). По всему листу встречаются тонкостенные волоски из 7-10 клеток. Толстостенные волоски из 2-10 клеток, иногда заполненных оранжевым содержимым, чаще расположены по краю листочка наружной обвертки. В основе толстостенных волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Параллельно жилкам встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Клетки эпидермиса листочков внутренней обвертки многоугольные или округлые, у основания - прямоугольные, встречаются устьица (аномоцитный тип). Тонкостенные волоски из 3-7 клеток встречаются только по краю листочка на верхушке. Вдоль жилок встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Цветки череды трехраздельной трубчатые, с двумя-тремя зазубренными остями, покрытыми волосками, вместо чашечки, либо без них. Клетки эпидермиса у основания цветка прямоугольные, в середине цветка переходят в 5-7-гранные клетки. На

Таблица 2 - Изображения микропрепаратов листа, листочков наружной и внутренней

обвертки, цветков видов череды

Вид сырья

Часть растения

трава череды трехраздельной

Листочек

наружной

обвертки

верхушке лепестков есть сосочковидные выросты эпидермиса. По краю встречаются тонкостенные волоски из 5-12 клеток и секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым. Иногда встречаются эфиромасличные железки, построенные из одного ряда клеток. Пыльца округлая, шиповатая.

Клетки эпидермиса верхней и нижней стороны листа череды поникшей с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По типу расположения устьиц лист амфистоматический. По краю листа, вдоль жилок и секреторных ходов встречаются простые волоски с тонкими стенками из 4-15 сжатых клеток.

Также часто встречаются простые волоски с толстыми стенками из 2-9 сжатых клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

Клетки эпидермиса листочков наружной обвертки с извилистыми стенками, часто встречаются устьица (аномоцитный тип). По всему листу встречаются тонкостенные волоски из 4-15 сжатых клеток. Толстостенные волоски из 2-5 клеток встречаются преимущественно по краю листочка наружной обвертки. В основе толстостен-

ных волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Параллельно жилкам встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Клетки эпидермиса листочков внутренней обвертки с извилистыми стенками, встречаются устьица (аномоцитный тип). По краю листочка внутренней обвертки встречаются тонкостенные волоски из 2-10 сжатых клеток. Вдоль жилок встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Трубчатые цветки с тремя-четырьмя зазубренными остями, покрытыми волосками, вместо чашечки, либо без них. Клетки эпидермиса у основания цветка прямоугольные, в середине цветка переходят в 5-7-гранные клетки. На верхушке лепестков есть сосочковидные выросты эпидермиса. Тонкостенные волоски из 1014 клеток встречаются преимущественно у основания трубчатого цветка. По краю лепестков видны секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым. Эпидермис язычковых цветков построен из прямоугольных клеток, сосочковидные выросты отсутствуют. Часто встречаются тонкостенные волоски из 7-15 клеток, иногда заполненных оранжевым содержимым. Пыльца округлая, шиповатая.

При микроскопическом анализе листа череды олиственной отмечены клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По типу расположения устьиц лист амфистома-тический. По краю листа, вдоль жилок и секреторных ходов встречаются простые волоски с тонкими стенками из 4-14 вытянутых клеток. Также часто встречаются простые волоски с толстыми стенками из

3-10 крупных вытянутых клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

Клетки эпидермиса листочков наружной обвертки с извилистыми стенками, часто встречаются устьица (аномоцитный тип). По всему листу встречаются тонкостенные волоски из 4-12 вытянутых клеток. Толстостенные волоски из 5-11 клеток, заполненных оранжевым содержимым,

встречаются преимущественно по краю листа. В основе толстостенных волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Параллельно жилкам встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Клетки эпидермиса листочков внутренней обвертки прямоугольные, встречаются устьица (аномоцитный тип). Изредка встречаются тонкостенные волоски из 10-15 клеток. Тонкостенные волоски из 5-10 сжатых клеток, также располагаются по краю на верхушке листочка внутренней обвертки. Вдоль жилок встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Цветки трубчатые с тремя зазубренными остями, покрытыми волосками, вместо чашечки, либо без них. Клетки эпидермиса у основания цветка прямоугольные, в середине цветка переходят в 5-7-гранные клетки. На верхушке лепестков есть сосочковидные выросты эпидермиса. По краю встречаются толстостенные волоски из 2-4 клеток. Редко по лепесткам встречаются тонкостенные волоски из 2-4 клеток. По краю лепестков видны секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым. Пыльца округлая, шиповатая.

Клетки эпидермиса верхней и нижней стороны листа череды лучистой с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По типу расположения устьиц лист амфистоматический. По краю листа, вдоль жилок и секреторных ходов встречаются простые волоски с тонкими стенками из 5-11 клеток. Также часто встречаются простые волоски с толстыми стенками из 3-9 клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

Клетки эпидермиса листочков наружной обвертки с извилистыми стенками, часто встречаются устьица (аномоцитный тип). По всему листу встречаются тонкостенные волоски из 8-10 клеток. Толстостенные волоски из 5-14 крупных клеток, встречаются преимущественно по краю листочка. В основе толстостенных волосков лежат несколько клеток эпидермиса,

слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Параллельно жилкам встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Клетки эпидермиса листочков внутренней обвертки прямоугольные, встречаются устьица (аномоцитный тип). На верхушке листочка встречаются тонкостенные волоски из 2-5 узких клеток. Вдоль жилок встречаются секреторные ходы, заполненные оранжевым содержимым.

Цветки трубчатые, из 5-6 сросшихся лепестков, с тремя зазубренными остями, покрытыми волосками, вместо чашечки,

Таким образом, анатомо-диагностиче-скими признаками травы видов череды, позволяющими отличить один вид от другого, являются количество и форма клеток толстостенных и тонкостенных волосков цветков, листьев, листочков наружной и внутренней обверток, что позволяет отличить один вид череды от другого.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Изучены морфологические и анатомодиагностические признаки травы четырех видов череды: череды трехраздельной, че-

либо без них. Клетки эпидермиса у основания цветка прямоугольные, в середине цветка переходят в 5-7-гранные клетки. На верхушке лепестков есть сосочковидные выросты эпидермиса. По краю встречаются тонкостенные волоски из 5-10 клеток. В основании лепестка может находиться вместилище, заполненное оранжевым содержимым. По краю лепестков видны секреторные ходы с оранжевым содержимым. Пыльца округлая, шиповатая.

Основные анатомо-диагностические признаки травы видов череды приведены в таблице 3.

реды поникшей, череды олиственной, череды лучистой. Основными морфологическими диагностическими признаками сырья являются тип листовой пластинки, строение цветочной корзинки, количество остей и характер поверхности семянки. Анатомодиагностическими признаками являются форма и количество клеток толстостенных и тонкостенных волосков цветков, листьев, листочков наружной и внутренней обверток, а также наличие секреторных ходов. Эти признаки могут быть использованы для определения подлинности и доброкачественности травы череды.

Таблица 3 - Анатомо-диагностические признаки травы видов череды

Вид сырья Часть растения трава череды трехраздельной трава череды поникшей трава череды олиственной трава череды лучистой

Лист: тонкостенные волоски толстостенные волоски 4-10 клеток 2-7 клеток 4-15 сжатых клеток 2-9 сжатых клеток 4-14 вытянутых клеток 3-10 крупных вытянутых клеток 5-11 клеток 3-9 клеток

Листочек наружной обвертки: тонкостенные волоски толстостенные волоски 7-10 клеток 2-10 клеток 4-15 сжатых клеток 2-5 клеток 4-12 вытянутых клеток 5-11 клеток 8-10 клеток 5-14 крупных клеток

Листочек внутренней обвертки: тонкостенные волоски 3-7 клеток только на верхушке 2-10 сжатых клеток только на верхушке 5-10 сжатых клеток только на верхушке, редко вдоль жилок -из 10-15 2-5 сжатых клеток только на верхушке

Цветок: тонкостенные волоски толстостенные волоски сосочковидные выросты эпидермиса пыльца 5-12 клеток нет есть округлая, шиповатая 10-14 клеток нет есть округлая, шиповатая 2-4 клеток 2-4 клеток есть округлая, шиповатая 5-10 клеток нет есть округлая, шиповатая

Вестник фармации №1 (59) 2013 SUMMARY

N.V Karazhan, G.N. Buzuk COMPARATIVE STUDY OF MORPHOLOGICAL AND ANATOMICAL-DIAGNOSTIC SIGNS OF SPECIES OF BUR-MARIGOLD HERB

Morphological and anatomical-diagnostic signs of four species of Bidens L. herb which grow in the Republic of Belarus were studied. The main morphological signs of raw materials are the type of leaf, inflorescence, the surface and awns number of fruits. Anatomical-diagnostic signs are thick and thin strands structure of flowers, leaves, leaves of the outer and inner husks, the presence of secretory containers.

Keywords: bur-marigold, herb, diagnostic signs.

ЛИТЕРА ТУРА

1. Silva, D.B. da Atividade antialergica e estudos quimicos das especies Bidens gard-neri Bak. e Bidens sulphurea (Cav.) Sch. Bip. (Asteraceae): tese de doutorado apresentada ao programa de pos-graduacao em ciencias farmaceuticas para a obtencao do titulo de dou-tor em ciencias / D.B. da Silva; Universidade de Sao Paulo. - Ribeirao Preto, 2009. - 53 p.

2. Биологическое разнообразие белорусского поозерья : монография / Л.М. Мержвинский [и др.]; под общ. ред. Л.М. Мержвинского. - Витебск: УО «ВГУ им. П.М. Машерова», 2011. - 413 с.

3. Монографии ВОЗ о лекарственных растениях, широко используемых в новых независимых государствах (ННГ). - 2006.

- 464 с.

4. Государственная фармакопея Республики Беларусь. Т.2. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении // Под общ. ред. А.А. Шерякова - Молодечно: Победа. - 2008. - 472 с.

5. Государственная фармакопея Республики Беларусь (ГФ РБ II): Разработана на основе Европейской фармакопеи. В 2 т. Т.

1. Общие методы контроля лекарственных средств / М-во здравоохр. Респ. Беларусь, УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под общ. ред. А.А. Шерякова. - Молодечно: Тип. «Победа», 2012.

- 1220 с.

6. Правила сбора и сушки лекарственных растений (сборник инструкций). М., 1985. - 465 с.

Адрес для корреспонденции:

210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,

УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», кафедра фармакогнозии с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 37-09-29,

Корожан Н.В.

Поступила 06.03.2013 г.