CC BY
98
ствуют пику вегетативной реакции, выражающейся в виде бради-кардии. Затем следуют циклы «21» и «10», отмечающие переходный процесс кардиодинамики из брадикардии в тахикардию после окончания двигательной реакции (отведение хвоста).
Средние значения показателей вегетативной реакции ноцицепции в контроле и после коагуляции каудального отдела поясного пучка
6,00
*р < 0,05
Рис.2. Диаграммы распределения средних значений величин ЛПВР и КВДР до и после коагуляции каудального отдела поясного пучка. Ось абсцисс -ЛПВР, КВДР. Ось ординат - значения величин ЛПВР и КВДР в с. Различия ЛПВР - критерий Стьюдента, р<0,05
Для последействия наиболее вероятным становится символ «0», причем момент отдергивания хвоста совпадает с появлением символа «10», и окончанием ноцицептивной стимуляции. СД-анализ показал, что вегетативный компонент ноцицептивной реакции имеет двухфазный характер. Первая фаза - первичный вегетативный ответ, характеризующийся появлением символов «12» и «22» на символьной гистограмме (рис. 1Б), т.е. быстрая вегетативная реакция, проявляющаяся кратковременным замедлением сердечного ритма. Вторая фаза вегетативного компонента ноцицептивной реакции - вегетативное последействие, которое характеризуется появлением крайнего левого столбца символов «00» на символьной гистограмме. Появление этого столбца означает учащение сердечного ритма, характерное для последействия, наступающего после окончания двигательной реакции (отдергивание хвоста) и первой фазы вегетативной реакции. Анализ с применением непараметрического 7-критерия знаков показал наличие двух фаз вегетативного компонента ноцицеп-тивной реакции (р<0,05). Это позволило ввести в анализ другие физиологические показатели: латентный период вегетативной реакции (ЛПВР) и коэффициент вегетативно-двигательной реакции (КВДР). Рис. 1В иллюстрирует определение этих показателей: ЛПВР - длительность временного интервала от момента нанесения термального стимула до момента появления символа «2» (момент вегетативной реакции); КВДР -интервала от момента вегетативной реакции до момента отдергивания хвоста (двигательная реакция) и окончания ноцицептивной стимуляции.
КВДР = ЛПДР - ЛПВР (1)
где ЛПДР - латентный период двигательной реакции, т.е. длительность временного интервала от начала до окончания ноци-цептивной стимуляции. Нами были выполнены оценки показателей ЛПВР и КВДР для контрольной группы животных и группы оперированных животных с электрокоагуляцией каудального участка поясного пучка. Результаты анализа представлены на рис.2. Из этого рисунка можно видеть, что электрокоагуляция каудального участка поясного пучка приводит к достоверному ( р<0,05 ) снижению величины латентного периода вегетативной реакции по сравнению с контрольным значением. Из этого же рисунка можно также видеть, что электрокоагуляция каудального участка поясного пучка достоверно не влияет на величину коэффициента вегетативно-двигательной реакции. Болевому ощущению предшествует или сопровождает его замедление кардиоритма [2]. Вероятно, этот эффект соответствует эмоциональному вегетативному сопровождению боли. Ранее нами было показано, что электрокоагуляция заднего поясного пучка приводит к снижению эмоциональной реакции ноцицепции, причем обнаружен эффект усиления вегетативного ответа ноцицептивной реакции в условиях подавления эмоционального ответа [4]. Эта работа с помощью методов СД динамики позволила нам исследовать этот эффект количественно. Количественный анализ латентных периодов вегетативной реакции показал, что у оперированных животных помимо усиления вегетативного ответа, выражающе-
гося в замедлении кардиоритма, наблюдается ускорение самого вегетативного ответа. Настоящее исследование также показало, что вегетативная реакция ноцицепции имеет двухфазный характер. Первая фаза - первичный вегетативный ответ - быстрая вегетативная реакция, проявляющаяся кратковременным замедлением сердечного ритма. Вторая фаза - длительное вегетативное последействие. Величина ЛПДР определяет момент начала фазы вегетативного последействия. Указанное последействие связано с восприятием боли и служит необходимым вегетативным обеспечением для реализации активной поведенческой реакции избавления от болевого воздействия.
Используемый нами СД-метод позволил выявить и проанализировать количественные характеристики общей вегетативной реакции ноцицепции: латентный период первичного вегетативного ответа и характеристики последующего вегетативного последействия. Результаты работы свидетельствуют об эффективности и адекватности СД-метода применительно к анализу быстрых перестроечных процессов, примером которых является регуляция сердечного ритма при ноцицептивных стрессорных нагрузках.
Литература
1. АбрамовЮ.Б. и др. // ВНМТ.- 2005.- T.XII, №3-4.- С.55.
2. Валъдман А.В., Игнатов Ю.Д. Центральные механизмы боли.- Л.: Наука, 1976.
3. Мезенцева Л.В. и др. // Анн. аритмологии.- 2005.- С.27.
4. Никенина Е.В. и др. // Боль.- 2006.- №4.- С.7-10
5. Abramov Y. B. et al. // Nerosci. БеЬау. Physiol.- 2003.-Vol.33 (8).- Р.821-826.
6. Bai-Lin Hao, Wei-Mou Zheng. Applied Symbolic Dynamic and Chaos. World Scientific, Singapore.- 1997.
7. Baranovsky R., Zebrowsky. J. // J.of Electrocardiology.-2002.- Vol. 35(2).- Р. 95-103..
8. Paxinos G, Watson C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. Sydney.- Academic Press.- 1998.
9. The European Communities Council Directives of 24 November.- 1986.- (806/609/EEC)).
10. Zebrovsky J.J. et al: // Chaos, Solutions and Fractals.-2000.- Vol.11.- Р.1061-1072..
УДК 661.12
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ «ЦИТАРИН» И ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ «ТАУФОН» ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ СЕЛЕНИТОВОЙ КАТАРАКТЫ У КРЫС
Е.Б. АРТЮШКОВА*, М.П. ГЛАДЧЕНКО*, Е.Т. ЖИЛЯКОВА**,
В.И. КОЧКАРОВ**, О.О. НОВИКОВ**, М.Ю. НОВИКОВА**,
Т.Г. ПОКРОВСКАЯ*, М.В. ПОКРОВСКИЙ*
Помутнение хрусталика - одна из наиболее частых патологий в офтальмологии. В мире насчитывается >20 млн людей, страдающих от слепоты, у У из них - катаракта. Слепых вследствие катаракты, по данным разных авторов, насчитывается до 17 млн. и число их ежегодно увеличивается на 2 млн. [4]. Наиболее распространенная возрастная катаракта является не просто обычным проявлением старения организма, а развивается вследствие сочетанного повреждающего воздействия множественных факторов риска эндогенной и экзогенной природы. Изучение катарак-тогенеза важно для разработки методов профилактики нарушения прозрачности хрусталика и возможности лечения его помутнения, являющегося основной причиной слепоты во всем мире, которую при своевременном лечении можно устранить [1, 5].
Основным методом восстановления зрения при катарактах является микрохирургия, в которой современная офтальмология достигла больших успехов. К достоинствам микрохирургического лечения следует отнести физиологичность зрения после операции, а также отсутствие необходимости ношения толстых очковых или контактных линз. Но несмотря на преимущества микрохирургических методов, их применение способно увеличивать число послеоперационных последствий, особенно при осложненных каратактах. Высокая стоимость оперативного лечения, ограничения и постоперативные осложнения стимулируют развитие терапевтических методов лечения катаракт. Даже за-
* Курский ГМУ, 305000, г. Курск, ул. К.Маркса, 3, тел. (4712) 58-00-63
Белгородский ГУ, 308015, г.Белгород, ул.Победы, д.85
держка развития катаракты на 10 лет с помощью консервативных методов лечения способна уменьшить число дорогостоящих экстракций на 50%. Большинство пациентов предпочитает глазные капли или общее лечение самому безопасному и надежному оперативному вмешательству.
Применение терапевтических методов лечения имеет под собой в качестве основы энергетическую концепцию. развития катаракты, по которой комплекс факторов, а именно - эндокринные нарушения, недостаток витаминов и аминокислот, физические и химические воздействия, изменение профиля ферментов, развивающиеся на фоне старения организма, ведут к уменьшению обеспечения энергией хрусталика и предрасположенности к возникновению его помутнений. Существует и теория, в которой развитие катаракты связывают с ростом образования свободных радикалов в сочетании со снижением активности метаболических путей их обезвреживания [1, 5]. Суть же процессов может заключаться в наличии повреждения. Повреждающие агенты могут быть разными: прямое или опосредованное механическое или лучевое воздействие, воспалительная реакция, развивающейся в ответ на терапевтические или на токсические агенты. Все эти особенности необходимо учитывать при назначении антикатарактального лечения, как правило, включающего комплекс лекарственных средств с различным механизмом действия [1, 3].
Цель исследования - сравнительное исследование комбинированных глазных капель «Цитарин» и глазных капель «Тауфон», содержащих в своем составе таурин, на модели селенитовой катаракты. Объектом исследования явились разработанные на базе Белгородского госуниверситета глазные капли «Цитарин». Глазные капли «Цитарин» имеют сложный состав, в качестве действующих компонентов в них входят: 2% раствор таурина, декстран, бензалкония гидрохлорид и витамин В12 (цианокобаламин), для сравнения использованы глазные капли «Тауфон», основным компонентом которых является 4% раствор таурина. Работа выполнена при поддержке внутривузов-ского гранта Белгородского госуниверситета [2].
Материалы и методы. Опыты по изучению фармакологической активности проводили на молодняке беспородных белых крыс, через 12-14 суток после рождения. Эффективность исследуемых препаратов оценивали на модели селенитовой катаракты у крыс. Для моделирования катаракты молодняку крыс вводили подкожно на 13 день после рождения селенит натрия, Ка23еОз (Мегск Германия), растворенный в 0,9% №01, в дозе 30 нмоль/г массы тела. Наблюдения проводились на 7 день после инъекции селенита натрия, изучалось состояние хрусталиков методом биомикроскопии с применением фотощелевой лампы с углом 35° и микроскопа СЛ2 с адаптером для цифрового фотоаппарата. Для этого крыс наркотизировали этаминалом натрия в дозе 30 мг/кг, для расширения зрачка применяли смесь 1% р-ра атропина и 10% фенилэфрина гидрохлорида в соотношении 1:1.
Животные были разделены на четыре группы: I группа -контрольная, не получавшая лечения, II группа - леченная глазными каплями «Цитарин». III группа - леченная глазными каплями «Тауфон». Каждая экспериментальная группа животных состояла из десяти особей. Исследуемые препараты вводились в виде инстилляции по 1 капле в конъюнктивальный мешок 3 раза в день, начиная со дня инъекции селенита натрия. Визуальная оценка степени поражения хрусталика глаза производилась при помощи фотощелевой лампы, при этом была принята следующая градация повреждений: 0 степень - прозрачный хрусталик, задний шов хрусталика - узкий с четкими границами; 1 степень -многочисленные субкапсулярные вакуоли, мелкоточечные или в виде щеточки помутнения в области шва; 2 степень - интенсивные помутнения диффузного характера в ядерной зоне, средних и задних корковых слоях; 3 степень - сливные помутнения задних субкапсулярных слоев ядра и коры, передние субкапсулярные слои полупрозрачны; 4 степень - тотальное помутнение хрусталика. В ходе исследования также оценивалась переносимость тканями глаза глазных капель на основании визуальной оценки выраженности гиперемии и отека конъюнктивы век. При этом использовалась следующая градация выраженности раздражающего действия: 0 баллов - гиперемия/отек конъюнктивы век отсутствует; 1 балл - гиперемия/отек конъюнктивы век слабо выражен; 2 балла - гиперемия/отек конъюнктивы век выражен; 3 балла - гиперемия/отек конъюнктивы век резко выражен. Данные
подвергались статистической обработке с вычисление ср. значения изучаемого признака по группе и ошибки среднего (М±т). Сравнение между группа принималось значимым при р<0,05.
Результаты. К 7-м суткам после инъекции селенита натрия у всех крыс контрольной группы развитие катаракты. При этом наблюдалось выраженное, хорошо видимое помутнение хрусталика, различий между степенью повреждения левого и правого глаза у одного животного практически не отмечалось (табл.).
Применение глазных капель «Цитарин» и «Тауфон» приводит к уменьшению выраженности помутнения хрусталика при моделировании селенитовой катаракты. При сравнении между собой эффекта от применения глазных капель «Цитарин» и глазных капель «Тауфон» статистически значимых различий нет, хотя суммарная степень поражения обоих глаз при применении «Цитарина» - 2,30±0,13 имеет более низкое значение, чем при применении «Тауфона» - 2,50±0,11. При оценке переносимости тканями глаза глазных капель на основании визуальной оценки выраженности гиперемии и отека конъюнктивы век при применении глазных капель «Цитарин» и «Тауфон» видимых признаков раздражающего действия не было ни на одном глазу.
Применение в качестве терапевтического средства для лечения катаракты глазных капель «Цитарин» на модели селенитовой катаракты оказалось не менее эффективным, чем применение глазных капель «Тауфон» несмотря на вдвое меньшую концентрацию таурина - 2% раствор в глазных каплях «Цитарин» против 4% раствора в глазных каплях «Тауфон». В первую очередь мы связываем данный эффект с комбинированным воздействием таурина и витамина В12 в составе «Цитарина», что оказывает комплексное воздействие на характер повреждений наблюдаемых при селенитовой катаракте. Наличие в составе глазных капель «Цитарин» антисептика - бензалкония хлорида позволяет применять эти глазные капли и при риске развития инфекционного поражения при повреждениях глаза, которые также могут спровоцировать и развитие катаракты. Фармакологические эффекты витамина В12, при местном применении, способствующем устранению последствий гематом, расширяет спектр применения.
Выводы. Разработанные на базе Белгородского государственного университета глазные капли «Цитарин» уменьшают степень развития селенитовой катаракты; действие глазных капель «Цитарин» в первую очередь обусловлено комбинированным составом, в который помимо таурина входят витамин В12, декстран и бензалкония хлорид, что позволило без уменьшения эффективности в отношении терапевтического эффекта при моделировании катаракты расширить область возможного их применения; учитывая, что таурин широко применяется при лечении открытоугольной глаукомы, а, в свою очередь, катаракта из-за длительности и частоты инстилляций может явиться следствием противоглаукомной терапии, разработанные глазные капли «Цитарин» возможно использовать в лечении глаукомы, обеспечивая при этом профилактику катаракты.
Таблица
Степень повреждения хрусталика глаза крысы при моделировании селенитовой катаракты и применении глазных капель «Цитарин» и «Тауфон» (M±m, n=10)
Номер особи Контроль (не леченные животные) Глазные капли «Цитарин», по 1 капле 3 раза в день в каждый глаз Глазные капли «Тауфон», по 1 капле 3 раза в день в каждый глаз
Левый глаз Правый глаз Левый глаз Правый глаз Левый глаз Правый глаз
4 4 2 1 3 2
2 3 3 3 2 2 2
3 4 3 3 3 2 2
4 3 4 2 2 2 2
5 4 4 3 3 3 3
6 4 4 2 2 3 3
7 4 4 2 2 3 3
8 4 4 2 2 3 3
9 3 4 3 2 2 3
10 4 4 2 3 2 2
Среднее 3,70±0,15 3,80±0,13 2,40±0,16 2,20±0,20 2,50±0,17 2,50±0,17
Среднее по 2 глазам 3,75±0,10* 2,30±0,13* 2,50±0,11*
Примечание: *- при р<0,05 по сравнению с контролем, #- при р<0,05 по сравнению с «Тауфоном»
Литература
1..Витамины и минералы в современной клинической медицине. Возможности лечебных и профилактических технологий / Под ред. О.А. Громова, А.С. Памазовой.- М., 2003.
2.Пат. 2005105159/15 Россия. Глазные капли «Цитарин» репаративного и антиглаукомного действия / Жилякова Е.Т и др. // Опубл. 20.03.2007.
3.Ярцев Г.И. и др. Таурин (фармакологические и противолучевые свойства).- М., 1975.
4.GilliesM. et al. // Arch. Ophthal.- 1998.- Vol.16, №1.-P. 90.
5.LeskeM. et al. // Ophthalmol. 1999.-Vol. 106, N 1.- P. 35.
УДК: 616.36-005.4:616.34-005.4]-092.9:615.03
ФАРМАКОКОРРЕКЦИЯ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ И КИШЕЧНИКА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
А.Л. АЛЬЯНОВ, А.Б. ГОРПИНИЧ, А.Н. МАТЮХИН, И.Л. ПРИВАЛОВА, А.П. СИМОНЕНКОВ*
Тканевая гипоксия ведёт к дисфункции жизненно важных органов, моно- и полиорганной недостаточности и к смерти организма. Изучение патогенеза тканевой гипоксии и разработка новых методов её коррекции являются одной из фундаментальных и актуальных проблем биологии и медицины. Понимание патогенеза тканевой гипоксии и разработка новых эффективных методов её профилактики и лечения, позволяют улучшить результаты лечения различных заболеваний [8].
Цель - анализ коррекции серотонина адипинатом (СА) ишемического поражения печени и кишечника в эксперименте.
ИзвестнГ способностт серотонина повышать скорость кровотока, насыщение тканей кислородом, корригировать нарушенную функцию гладкой мускулатуры и тканевую гипоксию [8, 9]. Ишемическое поражение гепатоцитов при резекции печени, в условиях временного её выключения из кровообращения, путём пережатия печёночно-двенадцатиперстной связки (ПДС), является одним из ведущих факторов в механизме возникновения смертельных осложнений [1, 5]. Изучение коррекции ишемического поражения печени при её обескровливании выполнены на 10 беспородных собаках. У 6 особей пережатие ПДС на 30 минут сочеталось с введением СА по методике (патент РФ на изобретение №2134576). Перед и после пережатия ПДС в/в вводили 5 мг 1% раствора СА на 20 мл физраствора №01.
У 4 животных (контроль) пережатие ПДС на 30 минут не дополнялось введением лекарства. Животные выводились из опыта после 1-х суток. Материал для морфологического исследования брали из печени и обрабатывали по методике: гематоксилин и эозин. Это свидетельствует о том, что в контрольной группе животных (пережатие ПДС на 30 мин, без введения СА) при морфологическом исследовании печени определялась зернистая дистрофия, вакуольная дистрофия и коагуляционный некроз гепатоцитов с рексисом и лизисом ядер во всех зонах. В дистро-фичных гепатоцитах цитоплазма была представлена оксифиль-ными хлопьевидными массами, ядра увеличены, с резко просветлённым матриксом и маргинацией хроматина. Архитектоника паренхимы полностью нарушена. В группе животных, где пережатие ПДС на 30 мин сочеталось с введением СА, при морфологическом исследовании видимых нарушений структуры паренхимы и микроструктуры гепатоцитов не отмечено. Этот способ коррекции ишемического поражения печени при обескровливании позволяет продлить безопасные сроки окклюзии ПДС и предупредить массивные кровотечения при операции на печени.
Несмотря на значительные достижения хирургии, и интенсивной терапии, результаты лечения острой кишечной непроходимости (ОКН) нельзя признать удовлетворительными. Среди часто встречающихся острых хирургических заболеваний органов брюшной полости ОКН сопровождается летальностью, достигающей 15-25% [3, 7]. ОКН идет с ишемией, гипоксией и парезом кишечника. При этом вначале развиваются некробиоти-ческие процессы в стенке кишки, а затем тотальный некроз вовлечённого в патологический процесс участка, с последующей её перфорацией и развитием перитонита. Интраоперационное опре-
* 302038 г.Орёл, ул. Металлургов 27, кв. 160, Мединститут Орловского ГУ, Институт хирургии им. А.В.Вишневского РАМН, Курский ГМУ
деление жизнеспособности кишки является сложной задачей для хирурга. Сохраняются визуальные критерии оценки жизнеспособности: восстановление нормального цвета её стенки, пульсация питающих её сосудов, появление перистальтики.
Для коррекции ишемии кишки, после устранения оперативным путём причины непроходимости, используются способы, улучшающие микроциркуляторные и биоэнергетические процессы в кишечной стенке, путём постановки в брыжейку кишки микроирригатора, через который интраоперационно и в послеоперационном периоде вводятся лекарственные смеси [2]. Также проводится комплексная корригирующая терапия, направленная на борьбу с гемодинамическими и, особенно, микроциркулятор-ными расстройствами [6]. Исследование влияния СА на ишемические изменения тонкой кишки при ОКН для возможности определения ее жизнеспособности, коррекции ишемического поражения и предупреждения осложнений в послеоперационном периоде (некроз, перфорация, перитонит) выполнено на 57 половозрелых беспородных кошках, массой 2-3 кг. Для изучения возможности определения жизнеспособности кишечника при ОКН экспериментальному животному (кошке) под хлоралозным наркозом (0,08 г/кг) выполняли лапаротомию. Моделировали ОКН путём перевязки тонкой кишки матерчатыми полосами в двух местах, при расстоянии в 3-4 см между ними [10]. Спустя 1(3) часа срезали матерчатые полосы, сдавливающие участок кишки и выполняли электроэнтерографию, которую проводили с помощью электроэнцефалографа «Биоскрипт-1» (Б8Т-1) с дополнительными фильтрами для регистрации низкочастотных биопотенциалов ЖКТ. Затем в/в медленно вводили 0,1-0,2 мг/кг массы тела (1% раствора) СА, растворённого в 5,0 мл физраствора и в той же дозе вводили в брыжейку поражённой кишки. Повторяли электроэнтерографию (15 кошек).
Морфологические изменения кишечной стенки после ее ишемии в течение 1, 2 и 3 часов, а также влияние СА на ишемические изменения тонкой кишки при экспериментальной ОКН изучено у 42 особей. В это же время было выполнено термометрическое исследование, которое проводилось с помощью медицинского электронного термометра МТ 3001 (МгсгоШе). Измерение температуры выполнялось три раза: до моделирования экспериментальной непроходимости, перед устранением ОКН и через 1 час после её устранения. Длительность ОКН (час) см. в табл. 1.
Таблица 1
Распределение животных в зависимости от длительности ОКН
n Группа животных Длительность ОКН (час)
1 2 3
21 Контрольная (без введения СА) 7 6 8
21 Основная (с введением СА) 7 6 8
После устранения ОКН, экспериментально особи (кошке) в/в вводили 0,1-0,2 мг/кг массы тела 1% раствора СА, а затем, в той же дозе, лекарственный препарат вводили в брыжейку поражённой кишки. Материалом для морфологического исследования являлся участок ишемизированной кишки, который фиксировали в 10% растворе формалина, дегидротировали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в парафин. Морфологические изменения исследовали на срезах толщиной 5-6 мкм, окрашенных гематоксилином и эозином. Гистологическую картину оценивали с помощью светового микроскопа «Ломо Микмед-2».
Проведенные нами исследования позволили разработать новый способ определения жизнеспособности тонкой кишки при острой кишечной непроходимости (удостоверение на рационализаторское предложение № 1747-07 от 02.02.07г., выданное Курским ГМУ). Ответная реакция на введение СА в виде увеличения амплитуды электроэнтерографической кривой < 20% будет указывать на необратимость изменений поражённой кишки, что подтверждается морфологическими исследованиями.
Таблица 2
Результаты электроэнтерографического исследования кишки при ОКН
n Длительность ОКН (час) А (mv) после устранения ОКН А (mv) после введения серотонина адипината Изменения амплитуды(%)
7 1 2,2 ± 0,12 4,1 ± 0,16 86 (p<0,001)
8 3 1,0 ± 0,05 1,2 ± 0,04 20 (p<0,02)
