УДК 615. 322:547.9
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПОДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА ЛАПЧАТКА В РАМКАХ РАЗРАБОТКИ РЕСУРСОСБЕРЕГАЮЩИХ
ТЕХНОЛОГИЙ
© 2014 В.А. Куркин1, Д.М. Хисямова1, И.Х. Шайхутдинов1, Н.Д. Лужнов2
1 Самарский государственный медицинский университет 2 ЗАО «Самаралектравы»
Поступила в редакцию 22.05.2014
Одним из путей рационального использования ресурсов флоры является комплексная переработка растительного сырья. Для представителей рода Лапчатка актуально использование и надземной и подземной частей растения. В частности, трава может быть использована в качестве кормовой культуры для сельскохозяйственных животных, а корни и корневища представляют интерес как источники биологически активных соединений. В работе приводятся данные по исследованию фи-тохимического состава подземной части некоторых представителей рода Лапчатка как перспективного лекарственного сырья.
Ключевые слова: Лапчатка белая, Potentilla alba L., Лапчатка прямая, Potentilla recta L., Лапчатка серебристая, Potentilla argentea L., Лапчатка, Potentilla, флавоноиды, фитостерины, фитохимия
Растения рода Лапчатка широко распространен в Самарской области и при этом недостаточно изучен. Известно, что надземная часть некоторых представителей данного рода может быть использована в качестве кормовой культуры в сельском хозяйстве, а подземные органы лапчатки, согласно литературным данным, содержат целый ряд биологически активных соединений (БАС), представляющих интерес для медицины в качестве антитиреоидных средств.
Цель работы: сравнительное фитохими-ческое изучение некоторых представителей рода Лапчатка.
Объектом исследования являлись подземные органы лапчатки белой (Potentilla alba L), лапчатки прямой (Potentilla recta L.) и лапчатки серебристой (Potentilla argentea L.), заготовленные в июне-октябре 2013 г. в Ботаническом саду Самарского государственного университета, а также на экспериментальном участке Средне-Волжского филиала ГНУ ВИЛАР (пос. Антоновка, Самарская область). Исследовались хлороформные и спиртовые извлечения из
Куркин Владимир Александрович, доктор технических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Email: Kurkinvladmir@yandex. ru Хисямова Динара Мидхатовна, интерн Шайхутдинов Ильнур Хясяинович, студент Лужнов Николай Данилович, генеральный директор. E-mail: [email protected]
подземной части вышеперечисленных растений. В качестве методов фотохимического анализа нами были использованы: хроматография в тонком слое сорбента, спектрофотометрия. Хрома-тографический анализ проводили на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» с использованием различных систем растворителей: хлороформ -этанол - вода (26:16:3), н-бутанол - ледяная уксусная кислота - вода (4:1:2). Детекцию флаво-ноидных и стериновых веществ проводили в УФ-свете при длине волны 254 и 366 нм, а также обработкой хроматограмм растворами диазобен-золсульфокислоты (ДСК), концентрированной серной кислотой, фосфорномолибденовой кислотой с последующим нагревом при 100 °С.
Результаты и их обсуждение. На начальном этапе исследования были изучены условия экстракции целевых групп БАС растворителями различной полярности - хлороформ, спирт (концентрация 40%, 70%, 95%), вода. По результатам хроматографического анализа выявлено, что оптимальным экстрагентом для стериновых соединений является хлороформ, для флавоноидных веществ - спирт с концентрацией 40% и 70%. Наиболее полное разделение суммы изучаемых веществ наблюдалось в системе растворителей н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:2). При этом фенольные соединения детектировались после обработки хроматографических пластин раствором ДСК в виде желто-оранжевых пятен с различными значениями Я: 0,43; 0,6;
0,73 (рис. 1). Фитостериновые соединения детектировали после обработки хроматографических пластинок 20% раствором серной кислоты и нагревании при 100 °С в течение 15 минут в виде
розовых пятен с величиной Rf около 0,7 на уровне стандартного образца Р-ситостерина ( рис. 2).
Д 1234567^1 2345 6 7 В 1 2 3 4 5 67
Рис. 1. Хроматографический профиль извлечений из подземной части представителей рода РМвпйИа: А - Лапчатка белая; Б - Лапчатка прямая; В - Лапчатка серебристая; 1 - 40% спирт; 2 -70% спирт; 3 - 95% спирт; 4 - вода; 5 - рутин; 6 - кверцетин; 7 - цинарозид
А I 2 3 4 5 67Б1 2 34567В1234567
Рис. 2. Хроматографический профиль извлечений из подземной части представителей рода Лапчатка: А - Лапчатка белая; Б - Лапчатка прямая; В - Лапчатка серебристая; 1 - 40% спирт; 2 -70% спирт; 3 - 95% спирт; 4 - вода; 5 - хлороформ; 6 - Р-ситостерин; 7 - олеаноловая кислота
Спектрофотометрический анализ флавоно-идного комплекса лапчаток проводили для извлечения на 70% спирте (экстрагирование проводили в течение 1 часа на кипящей водяной бане). При добавлении в исследуемые извлечения раствора алюминия хлорида наблюдался батохромный сдвиг кривой. Максимумы поглощения наблюдались при длине волны 285 нм (рис. 3). Рассчитано, что количественное содержание флавоноидных соединений (в пересчете на цинарозид) в изучаемых растениях не превышает 0,15%. Наибольшее содержание характерно
для корней и корневищ лапчатки серебристой -0,14%.
Лапчатка белая 70%
_ 2вбмм
/
И0 300 5» 400 4» 5« *$0 «О 650 Г
Мы
А
Лапчатка прямая 70%
1
1
285НМ
\/ \
1
200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
Х,нм
Б
Лапчатка серебристая 70%
JW ÍW МО 1W «00 «¿0 W0 Ш ЫН tw ки
Ким
В
Рис. 3. Электронные спектры поглощения водно-спиртовых извлечений из корней и корневищ
представителей рода Лапчатка: А - Лапчатка белая; Б - Лапчатка прямая; В - Лапчатка серебристая
Спектрофотометрический анализ фитосте-ринового комплекса БАС представителей рода Лапчатка проводили для хлороформного извлечения, упаренного до сухого остатка, который затем растворяли в необходимом объеме концентрированной серной кислотой. Максимум поглощения полученного раствора наблюдается в электронном спектре при длине волны 308-310 нм, что характерно для данной группы веществ (рис. 4). Определено, что количественное содержание стериновых соединений в пересчете на стандарт составило около 3,4 % для лапчатки белой, 4,2% для лапчатки прямой и 6,5% для лапчатки серебристой.
п лапчатка белая
А
Лапчатка прямая
г**ч314нм
Б
Лапчатка серебристая
AillHM
В
Рис. 4. Электронные спектры поглощения хлороформных извлечений из корней и корневищ представителей рода Лапчатка: А - Лапчатка белая; Б - Лапчатка прямая; В - Лапчатка серебристая
Выводы: проведено сравнительное фито-химическое исследование трех представителей рода Ро1епй11а - лапчатки белой, лапчатки прямой и лапчатки серебристой. Выявлено наличие и рассчитано количественное содержание биологически активных соединений - флавоноидов и фитостеринов в сырье. Полученные данные позволяют разработать ресурсосберегающие технологий переработки фитомассы представителей рода Ро(вШШа, учитывающие использование подземной части для выделения биологически активных соединений фенольной и стериновой природы.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Зенкевич, И.Г. Методы количественного хромато-графического анализа лекарственных веществ: пособие для фармацевтических работников / И.Г. Зенкевич, В.М. Косман. - СПб.: СПХФА, 1999. 81 с.
2. Куркин, В.А. Фармакогнозия: Учебник для фармацевтических вузов (факультетов) - 2е изд., перераб. и доп. - Самара: ООО «Офорт», 2007. 1239 с.
3. Мешков, А.И. Выделение и идентификация фито-стеринов из корней и корневищ лапчатки белой / А.И. Мешков, В.И. Шейченко, В.А. Стихин, ТА. Сокольская // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2009. № 2. С. 3637.
4. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец. - М.: Мир, 1980. Т. 1,2. -С. 20.
COMPARATIVE PHYTOCHEMICAL RESEARCH OF UNDERGROUND PART OF THE REPRESENTATIVES OF GENUS POTENTILLA WITHIN THE DEVELOPMENT OF RESOURCE-SAVING TECHNOLOGIES
© 2014 V.A. Kurkin1, DM. Khisyamova1, I.H. Shaykhutdinov1, N.D. Luzhnov2
1 Samara State Medical University 2 JSC "Samaralektravy"
One of ways of rational use the flora resources is complex processing the vegetable raw materials. For representatives of genus Potentilla actually use the elevated and underground parts of a plant. In particular, the grass can be used as fodder culture for agricultural animals, and roots and rhizomes are of interest as sources of biologically active compouds. In work are cited data on research the phytochemical composition of underground part of some representatives of genus Potentilla as perspective medicinal raw materials.
Key words: Potentilla alba L. Silverweed straight line, Potentilla recta L. Silverweed silvery, Potentilla argentea L. Silverweed, Potentilla, flavonoids, phytosterols, phytochemistry
Vladimir Kurkin, Doctor of Technical Sciences, Professor, Head of the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy. E-mail: [email protected] Dinara Khisyamova, Intern Ilnur Shaikhutdinov, Student
Nikolay Luzhnov, General Director. E-mail: [email protected]