CC BY
29
2004
инфекционных заболеваний. - Описание изобретения к патенту РФ № 2147234, Опубл. 10.04.2000 г., Бюлл. № 10 - 3с.
3. Тихонов Н.Г., Рыбкин В.С., Жукова С.И. и др. // Мелиоидоз: Сб. науч. тр. Волгоград. н.-иссл. противо-чум. ин-та. - Волгоград, 1995. - С.119-141.
Zhemchugov V.E., Zhukova S.I., Dyatlov I.A., Volokh O.A., Kutyrev V.V., Avrorova I.V., Drefs N.M. The applying of metabolic correctors for ctimulation of immune response to some pandemic infections // Vestnik of Volgograd state medical University. - 2004. - № 12. - P. 29-31.
Results of study in experiments on mice ability of a new immunomodulator from tyopoetin class, Glutoksim (GL) which refers to metabolytic immunomodulators to raise non-specific resistance and specific immune response to plague, melioidosis and tularemia were presented. It was shown than GL increased the middle duration of lifetime of animals infected by plague and melioidosis and raised specific immune response by vaccination of mice with live plague vaccine and S-complex of F.tularensis.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гланц С. Медико-биологическая статистика. -Пер. с англ. - М.: Практика. - 1998. - 459 с.
2. Жемчугов В.Е., Кутырев В.В. Препарат для экстренной профилактики и лечения особо опасных
УДК 577.352.24:616-097:575.113.001.6
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ПРОТЕКТИВНОСТЬ ЛИПОСОМАЛЬНОЙ И АДЪЮВАНТНОЙ ФОРМ МЕЛИОИДОЗНЫХ АНТИГЕНОВ
В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
С.И. Жукова, В.С. Рыбкин, И.В. Авророва, К.А. Ротов, О.Б. Прошина, Н.М. Дрефс
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Расширение и углубление международных связей России, отмечаемое в последние годы, диктует необходимость интенсификации работ по созданию эффективных средств профилактики опасных инфекционных заболеваний, которые могут быть завезены в нашу страну из-за рубежа. К таким заболеваниям относится, в частности, мелиоидозная инфекция, против которой пока не разработана вакцина.
Работами последних лет показана возможность ряда поверхностных антигенов гликопро-теиновой природы формировать невосприимчивость к мелиоидозу [3, 4]. Однако уровень защиты от инфекции был невысоким. Для повышения иммуногенности мелиоидозных антигенов предпринимались попытки использовать их для вакцинации в различных комбинациях, а также совместно с иммуномодуляторами.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучение возможности усиления иммуноген-ности мелиоидозных антигенов за счет их включения в липосомы, а также при добавлении в схему иммунизации иммуномодулятора бромантана.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Белых беспородных мышей иммунизировали различными фракциями водно-солевого экстракта возбудителя мелиоидоза ВигкИо!Сепа рвеиСотаПе! 111 (Д, С, Н, Р, ^ в дозе 30 мг каждой фракции подкожно с полным адъювантом Фрейнда (ПАФ) в соотношении 1:1, дважды, с интервалом 7 сут. Другую группу животных иммунизировали теми же антигенами, включенными в ли-посомы. Липосомы готовили из хроматографиче-ски чистых фосфатидилхолина Харьковского завода бактерийных препаратов и холестерина
(Serva) в молярном соотношении 7:3 методом обращения фаз. В липосомы включали мелиои-дозные антигенные фракции Д, С, F, H, J [5].
Для иммунизации использовали различные сочетания антигенов как в адъювантной (в смеси 1:1 с ПАФ), так и в липосомальной формах, которые также вводили и с бромантаном в дозе 1 мг внутрибрюшинно. Заражение животных проводили спустя 14 сут. после повторной иммунизации умеренно вирулентными культурами возбудителя мелиоидоза штаммов С-141 и 56830. Через 30 сут. после заражения вычисляли показатели летальности: процент погибших животных и среднюю продолжительность их жизни (СПЖ). Полученные экспериментальные данные обрабатывали статистически [1].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Показано, что иммунизация мышей отдельными антигенными мелиоидозными фракциями с ПАФ защищала от гибели при контрольном заражении небольшое число животных (11-17 % от 3-30 ЛД50). Использование для иммунизации сочетаний адъювантных форм мелиоидозных антигенов (по 2 антигена в каждом сочетании) увеличивало выживаемость животных до 40-60 %, а введение мышам тех же сочетаний антигенов в липосомальной форме увеличивало их выживаемость еще на 20-30 % (табл. 1).
Как видно из данных табл. 1, разница в показателях летальности при заражении 3ЛД50 составляла 20-30 %, при заражении 30 ЛДщ - 13-22 %.
Ранее нами было отмечено, что некоторые иммуномодуляторы способны повышать протек-тивность мелиоидозных антигенов для экспериментальных животных [2].
ВЕСТНИК ВолГМУ
Таблица 1
Протективная активность адъювантной и липосомальной форм композиций мелиоидозных антигенов для белых мышей
Препараты для имму- Летальность при заражении B.pseudomallei С-141
№№ п/п 3 ЛД50 30 ЛД50
низации Пало/ % пав- СПЖ Пало/ % пав- СПЖ
взято ших (сут) взято ших (сут)
1 D+J 6/10 60 12,7 4/9 44 9,8
2 (D+J^ 3/10 30 16,4* 2/9 22 13,4*
3 D+F 4/10 40 13,1 5/10 50 11,6
4 (D+F^ 2/10 20 17,2* 4/11 36 14,3*
5 J+F 5/9 55 15,2 4/10 40 13,8
6 (J+F^ 3/9 33 17,1* 3/11 27 17,6*
7 Контроль (интакт-
ные) 10/10 100 9,3 10/10 100 8,4
Примечание.
Л - липосомальная форма антигенов; * - различия статистически достоверны (р < 0,05).
Таблица 2
Влияния бромантана на иммуногенность композиций липосомальных мелиоидозных антигенов для белых мышей
№№ п/п Препара- Летальность при заражении B.pseudomallei 56830
ты для иммуни- 3 ЛД50 30 ЛД50
зации Пало/ взято % павших СПЖ (сут) Пало/ взято % павших СПЖ (сут)
1 ф+С)л 3/8 37 15,6 4/8 50 12,8
2 ф+С) л + бромантан 1/8 12 18,2* 2/8 25 15,6*
3 (и+И)л 5/9 55 16,2 6/10 60 13,8
4 (и+И) л + бро-монтан 2/8 25 19,1* 3/9 33 17,1*
5 Кон-
троль (интакт- ные) 8/10 80 13,1 10/10 100 9,3
Примечание. верны (р < 0,05)
различия статистически досто-
Наиболее выраженными иммуностимулирующими свойствами обладали иммуностимуляторы глутоксим (новый иммуномодулятор из
класса тиопоэтинов) и актопротектор адаманта-новой группы бромантан. В табл. 2 приведены результаты опыта по изучению влияния бромантана на протективность липосомальных форм мелиоидозных антигенов.
Таким образом, иммунизация мышей композициями мелиоидозных антигенов в липосомальной форме повышала резистентность животных к заражению 3-30 ЛД50 возбудителя мелиоидоза на 25-50 % по сравнению с группой интактных животных. Включение в схему иммунизации мышей бромантана способствовало увеличению выживаемости на 25-30 %. Иммунизация композициями липосомальных антигенов увеличивала показатели СПЖ животных, что было более выражено при использовании для стимуляции иммунного ответа бромантана.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Резюмируя полученные результаты, следует отметить, что протективность композиций ме-лиоидозных антигенов возрастает на 20-30 % при их использовании для введения животным в липосомальной форме по сравнению с традиционной адъювантной формой. Совместная иммунизация мышей липосомальными антигенами и иммуномодулятором бромантаном способствовала увеличению выживаемости животных еще на 20-30 %.
Полученные данные о повышении протек-тивности мелиоидозных антигенов за счет их комбинированного применения в липосомальной форме в сочетании с иммуномодулятором бро-мантаном могут быть использованы в дальнейших исследованиях по конструированию химической вакцины против мелиоидозной инфекции.
ЛИТЕРАТУРА
4. Гланц С. Медико-биологическая статистика. -Пер. с англ. - М.: Практика. - 1998. - 459 с.
1. Жукова С.И., Рыбкин В.С., Пивень Н.Н., Авро-рова И.В., Плеханова Н.Г., Викторов Д.В. // Тез. докл. VIII съезда Итало-Российского общества по инфекционным болезням. 5-6 дек. 2002 г. - С. 119.
2. Пивень Н.Н. // Мелиоидоз: Сб. науч. тр. Волгоград. н.-и.противочум. ин-та. - Волгоград: Нижневолжское книжное изд-во, 1995. - С. 47-56.
3. Пивень Н.Н. Антигенный состав возбудителей мелиоидоза и сапа в аспектах идентификации, диагностики и патогеннсти: Дисс... докт.мед.наук. - Волгоград, 1997. - 296 с.
4. Чупин В.В., Аникин А.В., Серебрянников Г .А. // Биол. мембраны. - 1993. - Т. 10. - № 3. - С. 229-254.
Zhukova S.I., Rybkin V.S., Avrorova I.V., Rotov K.A., Proshina O.B. Comparative protectivity of lyposomal and adjuvant forms of Burkholderia pseudomallei antigens in experiment // Vestnik of Volgograd state medical University. -2004. - № 12. - P. 31-32.
The protectivity of antigen fractions from water-salt extracts of Burkholderia pseudomallei 111 was studied in experiments on mice. Antigens of burkholderies were introduced to animals as with full Freud's adjuvant as in lyposomal form. It was shown that protectivity of lyposomal antigens was higher than their adjuvant analogues. Use of immunomodulator Bromantan promoted increase of protectivity of lyposomal antigens.
*
