Сравнительная характеристика химического состава препаратов постадийной экстракции этанолом омелы белой (Viscumalbuml, семейство ремнецветниковые – Loranthaceae) Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

УДК: 61 DOI: 10.24411/2075-4094-2020-16594

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ПРЕПАРАТОВ ПОСТАДИЙНОЙ ЭКСТРАКЦИИ ЭТАНОЛОМ ОМЕЛЫ БЕЛОЙ (VISCUMALBUML, СЕМЕЙСТВО РЕМНЕЦВЕТНИКОВЫЕ - LORANTHACEAE)

Г.Т. СУХИХ***, А.А. ХАДАРЦЕВ**, В .В. ПЛАТОНОВ*, И.В. ДУНАЕВА**, М.В. ВОЛОЧАЕВА***

ООО «Террапроминвест», ул. Перекопская, д.5б, г. Тула, 300045, Россия ФГБОУ ВПО «Тульский государственный университет», Медицинский институт, ул. Болдина, д.128, г. Тула, 300028, Россия ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И.Кулакова, ул. Опарина, д.4, г. Москва, 117513, Россия

Аннотация. Приведены результаты сравнительной характеристики химического состава препаратов постадийной экстракции этанолом омелы белой. Хромато-масс-спектрометрия позволила идентифицировать в первом препарате - 69; во втором - 110 индивидуальных соединения, для которых определено количественное содержание; получены масс-спектры и структурные формулы, выполнен расчёт структурно-группового состава. Установлены значительные различия в химическом составе препаратов, выход которых - 15,0 и 30,0 (масс. % от сырья). Характерной особенностью первого экстракта (препарата) является его обогащённость гликозидами, составляющие 61,81 (масс. % от экстракта); стеринами, альдегидами и фенолами: 12,19; 17,57 и 0,74 (масс.% от экстракта), соответственно; незначительна доля фуран и пиранпроизводных, углеводородов и сложных эфиров. Основу стеринов составляют: Betulin и а-Amyrin; альдегидов: cis, cis, cis-Hexadecatrienal; фенолов: Catechol, Hidrogiinon, 2-methoxy-4-vinylphenol и 2-methoxy-1.4-Benzennediol. Структурно-групповой состав второго экстракта отличается от первого более высоким количественным содержанием всех групп соединений, структурой последних, полным отсутствием гликозидов. Например, в составе стеринов второго экстракта идентифицированы: Protopin, Rishitin, Piracetam, Retinol, 3,4-Altrosan, отсутствующие в первом экстракте; среди карбоновых кислот велика доля ненасыщенных жирных кислот типа линолевой, Erucic acid, а также предельной Hexadecanoic acid; азот- и серосодержащие соединения представлены производными пиперидина, хинолина, изохинолина, пиримидина, индола, нитрилов, амидов, пирролов и аминов; сложные эфиры, в основном, образованы фумаровой, фталевой, бензойной, линоленовой и гексадекановой кислотами; фуран и пиранпроизводные - спирто- альдегидо- и кетофураны, кетопираны; присутствуют различные по структуре фенолы, спирты, кетоны и углеводороды (от С4 до С44). Сравнительный анализ, в первую очередь, различия в структуре основных групп соединений (стринов, азот- и серосодержащих, фуран- и пиранпроизводных, карбоновых кислот, фенолов и сложных эфиров), первого и второго экстрактов, позволяет сделать заключение о различной направленности их фармакологического действия, а также о целесообразности осуществления постадийной экстракции исходного сырья с получением препаратов, обогащённых строго определёнными группами соединений, а соответственно, с различной физиологической активностью.

Ключевые слова: масс-спектрометрия, омела белая, экстракция этанолом.

COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF THE CHEMICAL COMPOSITION OF THE PRODUCTS OF THE STAGE-EXTRACTION OF THE MISTLETOE ETHANOL (VISCUMALBUML, FAMILY - LORANTHACEAE)

G.T. SUKHIKH***, A.A. KHADARTSEV**, V.V. PLATONOV*, I.V. DUNAEVA**, M.V. VOLOCHAEVA***

LLC "Terraprominvest", Perekopskaya Str., 5b, Tula, 300045, Russia FSBEIHPE "Tula State University", Medical Institute, Boldin Str., 128, Tula, 300028, Russia FSBI "National Medical Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology named after V.I. Kulakov", Oparin Str., 4, Moscow, 117513, Russia

Abstract. The article presents the results of a comparative description of the chemical composition of stepwise extraction of white mistletoe with ethanol. Chromatography-mass spectrometry allows to identify 69 in the first preparation; in the second -110 individual compounds for which quantitative content is determined; mass spectra and structural formulas were obtained; structural-group composition was calculated. Significant differences were found in the chemical composition of the preparations, the yield of which was 15.0 and 30.0 (mass % of raw materials). A characteristic feature of the first extract (preparation) is its enrichment with glyco-sides, comprising 61.81 (wt. % of the extract); sterols, aldehydes and phenols: 12.19; 17.57 and 0.74 (wt. % of extract), respectively; an insignificant proportion of furan and pyran derivatives, hydrocarbons and esters. The

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

basis of sterols is Betulin, a-Amyrin; aldehydes: cis, cis, cis-Hexadecatrienal; phenols: Catechol, Hidrogiinon, 2-methoxy-4-vinylphenol, 2-methoxy-1.4-Benzennediol. The structural-group composition of the second extract differs from the first with a higher quantitative content of all groups of compounds, the structure of the latter, and the complete absence of glycosides. For example, in the composition of the sterols of the second extract identified: Protopin, Rishitin, Piracetam, Retinol, 3,4-Altrosan, absent in the first extract; among carboxylic acids, the proportion of unsaturated fatty acids such as linoleic, Erucic acid, and the limiting Hexadecanoic acid is high; nitrogen and sulfur compounds are represented by derivatives of piperidine, quinoline, isoquinoline, pyrimidine, indole, nitriles, amides, pyrroles and amines; esters are mainly formed by fumaric, phthalic, benzoic, linolenic and hexadecanoic acids; furan and pyran derivatives - alcohol-aldehyde and ketofurans, ketopyranes; phenols, alcohols, ketones and hydrocarbons of various structures are present (from С4 to С44). A comparative analysis, first of all, differences in the structure of the main groups of compounds (strins, nitrogen and sulfur containing, furan and pyran derivatives, carboxylic acids, phenols and esters), the first and second extracts, allows us to make a conclusion about the different directions of their pharmacological action, and also on the feasibility of carrying out stepwise extraction of the feedstock with the preparation of preparations enriched in strictly defined groups of compounds, and accordingly, with different physiological activity.

Keywords: mass spectrometry, white mistletoe, ethanol extraction.

Введение. Омела белая - Viscumalbum L., семейство ремнецветниковые - Loranthaceae - небольшой полупаразитирующий сильно разветвлённый кустарник, встречающийся на фруктовых (яблони, груши) и широколиственных деревьях - тополях, берёзе, клёне, липе, дубе, иве. Лекарственным сырьём являются свежие листья дикорастущих растений.

Химический состав омелы белой определяют присутствующие в её органическом веществе (ОВ): полипептиды - вискотоксин и другие, а также а- и В-вискол; тритерпеноидные соединения: лупеол, В-амирин; холин, ацетилхолин; флавоноиды: флавоядоринины А и В, гликозиды рамнозина и диметиллю-теолина, сирингина и диметоксихалкона, органические кислоты, жирные масла, смолистые вещества, каротин, витамин С [4, 6].

Фармакологическое действие - в литературных источниках со времён Гиппократа упоминается об использовании препаратов омелы белой, следующие: лектин, вискотоксин, холин, алкалоиды, полипептиды и полисахариды. Полипептиды обладают гипотензивным, липолитическим, кровоостанавливающим и некротизирующим действием, замедляют ритм сердечных сокращений, расширяют кровеносные сосуды, уменьшают возбудимость ЦНС, усиливают контракцию матки, уничтожают раковые клетки. Преимущество препаратов омелы белой в лечении рака состоит в том, что они обладают не только цито-статическим, но и иммуномодулирующим действие; водный экстракт в эксперименте задерживает рост раковой опухоли и развитие метастазов. В народной медицине препараты омелы белой используют при головокружении, головной боли, эпилепсии, судорогах и кровотечениях, артрозах, спондилите, как противоопухолевое и противовоспалительное средство, при гипертонической болезни, атеросклерозе, невралгиях. Листья и стебли омелы белой включены в фармакопеи Испании, Венесуэлы, Нидерландов, Германии, Индии и Франции [4-6].

Цель исследования. По данным хромато-масс-спектрометрии установить особенности химического состава экстрактов постадийной экстракции этанолом омелы белой - относительно количественного содержания основных групп соединений, а самое главное, структуры последних, отвечающей за их реакционную и физиологическую активность; подтвердить литературные сведения относительно химического состава препаратов омелы белой, а также идентифицировать новые соединения, что углубит наше познание в вопросе особенностей химического состава органического вещества омелы белой, структурной организации соединений, и как результат этого, обозначить новые направления фармакологического действия препаратов омелы белой.

Материалы и методы исследования. Изготовитель омелы белой - ООО «Лекра-СЭТ», 656008, Алтайский край, г. Барнаул, ул. Интернациональная, 312а, РФ. Постадийная экстракция сухого сырья этанолом с массовой долей 95% осуществлялась в аппарате Сокслета. Массовое соотношение - сырье: спирт 1:10, продолжительность первого этапа 24 часа, после чего использовалась новая порция этанола и второй этап продолжался ещё 24 часа, после которого практически не наблюдалось окрашивание спирта.

Полученные экстракты освобождались от этанола с использованием роторного вакуумного испарителя типа RE-52FF Rotary Evaporator и вакуумного сушильного шкафа, остаток в виде тёмно-зелёной маслянистой жидкости взвешивался и его химический состав исследовался хромато-масс-спектрометрией, условия которой следующие: хромато-масс-спектрометрия осуществлялась с использованием газового хроматографа GC-2010, соединенного с тройным квадрупольным масс-спектрометром GCMS-TQ-8030 под управлением программного обеспечения (ПО) GCMS Solution 4.11.

Идентификация и количественное определение содержания соединений проводились при следующих условиях хроматографирования: ввод пробы с делением потока (1:10), колонка ZB-5MS (30м х

0.25 мм x 0.25 мкм), температура инжектора 280°С, газ-носитель - гелий, скорость газа через колонку 29 мл/мин.

Регистрация аналитических сигналов проводилась при следующих параметрах масс-спектрометра: температура переходной линии и источника ионов 280 и 250°С, соответственно, электронная ионизация (ЭИ), диапазон регистрируемых масс от 50 до 500 Да.

Результаты и их обсуждение. Выход экстрактов: 15 и 30 (масс.% от сухого сырья). Хроматограммы этанольных экстрактов: I и II приведены на рис. 1.

(x1,000,000) TIC (1.00)

7.5-

5.0-

2.5-

25.0 50.0

(x10,000,000) ,.0 JTIC(1.00)

75.0

100.0

125.0

150.0

175.0

200.0

225.0

1.5

1.0

0.5

25.0 50.0 75.0 100.0 125.0 150.0 175.0 200.0 225.0

Рис.1. Хроматограмма

Перечень идентифицированных соединений, их количественное содержание (масс.% от экстракта) даны в табл. 1, 2, которые были использованы для расчёта структурно-группового состава экстрактов.

Таблица 1

Список соединений этанольного экстракта I

1 6.331 0,02 Ethyl orthoformate

2 6.420 0 4-Cyclopentene-1,3-dione

3 6.505 0 Propanal, 3-methoxy-

4 7.045 0,26 2-Furanmethanol

5 7.907 0,11 Ethanamine, 2-methoxy-N-(2-methoxyethyl)-N-methyl-

6 8.042 0,03 4-Cyclopentene-1,3-dione

7 8.703 0,01 1-Butene, 4,4-diethoxy-2-methyl-

8 8.884 0,05 Ethoxy(dimethyl) isopropylsilane

9 9.157 0,03 1-Penten-3-one

10 9.570 0,05 6-Oxa-bicyclo[3.1.0]hexan-3-one

11 11.055 0,05 2-Furancarboxaldehyde, 5-methyl-

12 11.280 0,01 5-Oxotetrahydrofuran-2-carboxylic acid

13 11.631 0,05 2,4-Dihydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furan-3-one

14 12.172 0,11 2H-Pyran-2,6(3H)-dione

15 12.522 0,06 Butane, 1-(1-ethoxyethoxy)-

Продолжение таблицы 1

16 12.962 0,04 Hexanoic acid, butyl ester

17 13.112 0,02 3,4Dehydro-dl-proline

18 13.410 0,02 3-Methylpyridazin-5-one

19 13.691 0,07 1-Pentanol, 5-cyclopropylidene-

20 14.009 0,04 1,3,5-Cycloheptatriene

21 14.156 0,02 2-Oxopentanedioic acid

22 14.678 0,05 2,5-Dimethyl-4-hydroxy-3(2H) -furanone

23 15.197 0,02 2,5-Furandicarboxaldehyde

24 15.414 0,21 Cyclohexanamine, N-3-butenyl-N-methyl-

25 15.756 0,01 Molinate

26 16.134 0,01 1,3-Cyclohexanedione, 2-methyl-

27 17.362 0,01 Ether, heptyl hexyl

28 17.699 0,02 Ethanamine, N-ethyl-N-nitroso-

29 18.155 0,34 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-

30 20.328 0,1 4H-Pyran-4-one, 3,5-dihydroxy-2-methyl-

31 20.879 0,02 Methyl salicylate

32 21.256 0,06 dl-Isocitric acid lactone

33 21.883 0,04 Catechol

34 22.539 0,04 Benzofuran, 2,3-dihydro-

35 23.880 1,68 5-Hydroxymethylfurfural

36 27.147 0,04 2(1H)-Naphthalenone, 3,4,4a,5,6,7-hexahydro-1,1,4a-trimethyl-

37 27.504 0,05 Hydroquinone

38 29.241 0,07 2-Methoxy-4-vinylphenol

39 29.437 0,09 2,4-Dimethyl-3-pentanol acetate

40 31.193 0,19 Phenol, 2,6-dimethoxy-

41 31.831 0,07 Benzaldehyde, 2-hydroxy-

42 33.385 0,08 1,4-Benzenediol, 2-methoxy-

43 34.361 0,07 2-Propenoic acid, 3-phenyl-

44 35.214 0,11 trans-Isoeugenol

45 36.523 0,16 1-Hydroxy-7-hydroxymethylindane, cyclic sulfite ester

46 37.537 0,33 Borane, diethyl-propylamino-

47 38.692 0,11 2-Propanone, 1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-

48 39.409 0,07 Fumaric acid, ethyl isobutyl ester

49 40.433 0,36 3',5'-Dimethoxyacetophenone

50 41.205 0,09 syn-Tricyclo[5.1.0.0(2,4)]oct-5-ene, 3,3,5,6,8,8-hexamethyl-

51 43.267 2,57 2-O-Methyl-d-xylose

52 46.502 0,61 Benzaldehyde, 4-hydroxy-3,5-dimethoxy-

53 50.027 0,2 Phenol, 2,6-dimethoxy-4-(2-propenyl)-

54 54.897 14,43 D-Fructose, 3-O-methyl-

55 65.088 34,99 .alpha.-d-Mannofuranoside, methyl

56 67.880 9,82 4-O-Methylmannose

57 74.976 16,29 cis,cis,cis-7,10,13-Hexadecatrienal

58 99.797 0,5 Hexadecanoic acid, 2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)ethyl ester

59 107.967 1,78 4-Methyldocosane

60 114.457 0,62 1,6,10,14,18,22-Tetracosahexaen-3-ol, 2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E)-

61 119.273 0,45 Pentatriacontane

62 139.381 0,47 Vitamin E

63 160.933 0,47 .beta.-Sitosterol

64 163.125 0,25 .alpha.-Amyrin

65 167.525 0,45 Lupeol

66 171.241 0,26 Lup-20(29)-en-3-ol, acetate, (3.beta.)-

67 184.792 5,15 .alpha.-Amyrin

68 191.151 0,24 dl-. alpha.-Tocopherol

69 195.258 4,9 Betulin

Таблица 2

Список соединений этанольного экстракта II

1 7.144 0,12 2-Furanmethanol

2 7.743 0,25 But-1-ene-3-yne, 1-ethoxy-

3 8.804 0,09 Furan, 2-ethyl-5-methyl-

4 8.967 0,06 6-Desoxy-l-altritol

5 9.250 0,14 1-Penten-3-one

6 10.154 0,1 1-Propene, 1-chloro-2-methyl-

7 10.870 0,46 2-Furancarboxaldehyde, 5-methyl-

8 10.980 0,14 Dimethyl trisulfide

9 11.660 0,21 2,4-Dihydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furan-3-one

10 12.125 0,07 Phenol

11 12.376 0,41 2H-Pyran-2,6(3H)-dione

12 12.668 0,48 2-Propanethiol

13 13.106 0,08 Cyclohexanone, 2-methyl-

14 13.789 0,07 Benzyl alcohol

15 13.892 0,32 1,3,5-Cycloheptatriene

16 14.819 0,19 2(3H)-Furanone, 5-ethoxydihydro-

17 14.893 0,1 Ethanone, 1-(1H-pyrrol-2-yl)-

18 15.356 0,6 2,5-Dimethyl-4-hydroxy-3(2H)-furanone

19 15.487 0,13 Furyl hydroxymethyl ketone

20 15.588 0,18 2,4,5-Trihydroxypyrimidine

21 15.673 0,26 Phenol, 2-methoxy-

22 15.833 0,29 Benzoic acid, hydrazide

23 16.309 0,57 1,3-Cyclohexanedione, 2-methyl-

24 16.536 0,48 2(1H)-Pyridinone, 6-hydroxy-

25 16.780 0,21 Maltol

26 18.528 1,94 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-

27 19.768 0,42 Cycloheptyl cyanide

28 20.713 0,24 Benzoic acid

29 21.252 1,34 1,3-Dioxolan-4-one, 2-(1,1-dimethylethyl)-5-(1-methylethyl)-, (2S-cis)-

30 22.544 0,11 Hexamethylenimine

31 23.277 0,85 Benzofuran, 2,3-dihydro-

32 23.687 0,08 2-Oxepanone, 7-butyl-

33 24.068 0,11 1H-Pyrrole-2,5-dione, 3-ethyl-4-methyl-

34 26.653 0,29 Benzeneacetic acid, hexyl ester

35 27.474 0,32 L-Proline, 1-acetyl-

36 28.224 0,2 Indole

37 28.475 0,3 7,7,9,9,11,11-Hexamethyl-3,6,8,10,12,15-hexaoxa-7,9,11-trisilaheptadecane

38 29.327 1,84 2-Methoxy-4-vinylphenol

39 31.240 1,39 Phenol, 2,6-dimethoxy-

40 32.551 1,02 Undecanoic acid

41 33.241 1,83 2-Piperidinemethanol

42 34.644 1,41 Benzofuran-2-carboxaldehyde

43 35.065 0,8 Piracetam

44 35.283 0,53 Phenol, 2-methoxy-3-(2-propenyl)-

45 35.693 2,31 Piperidine, 2-(tetrahydro-2-furanyl)-

46 36.578 0,56 4-(2,6,6-Trimethylcyclohexa-1,3-dienyl)but-3-en-2-one

47 38.701 0,63 2(4H)-Benzofuranone, 5,6,7,7a-tetrahydro-4,4,7a-trimethyl-

48 39.410 0,38 Fumaric acid, ethyl 2-methylallyl ester

49 39.767 0,24 Ethanone, 1-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-

50 40.265 0,59 3,4-Altrosan

51 40.526 0,42 3',5 '-Dimethoxyacetophenone

52 40.965 0,32 Dodecanoic acid

53 41.267 0,43 Fumaric acid, ethyl 2-propylphenyl ester

54 44.102 0,16 syn-Tricyclo[5.1.0.0(2,4)]oct-5-ene, 3,3,5,6,8,8-hexamethyl-

Продолжение таблицы 2

55 47.495 0,14 Acetic acid, 1-hydroxy-3,3-dimethyl-2-(3-methylbuta-1,3-dienyl)cyclohexylmethyl ester

56 52.655 0,64 2-Naphthalenecarboxylic acid, methyl ester

57 55.580 0,27 Tridecanoic acid

58 57.776 0,25 1H-Indole-3-acetonitrile

59 59.307 0,09 1-Dodecanol, 3,7,11-trimethyl-

60 59.599 1,12 3-Octadecyne

61 59.927 0,32 2-Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl-

62 60.924 0,41 7-Octadecyne, 2-methyl-

63 61.257 0,12 Pentadecanoic acid

64 61.819 0,55 7-Octadecyne, 2-methyl-

65 62.496 0,24 Pentanoic acid, 4-methyl-, ethyl ester

66 63.628 0,31 Ethyl (2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-propenoate

67 63.988 0,21 Hexadecanoic acid, methyl ester

68 64.688 0,16 Rishitin

69 65.056 0,55 3-Tetradecyn-1-ol

70 65.527 0,17 Dibutyl phthalate

71 66.172 2,47 n-Hexadecanoic acid

72 66.579 7,98 n-Hexadecanoic acid

73 67.034 4,43 Hexadecanoic acid, ethyl ester

74 69.175 1,15 1,3-Dioxolo[4,5-g]isoquinolin-5(6H)-one, 7,8-dihydro-

75 71.765 0,31 Methyl 9-cis,11-trans-octadecadienoate

76 72.117 0,32 cis,cis,cis-7,10,13-Hexadecatrienal

77 72.974 1,33 Phytol

78 75.959 16,7 Methyl 9-cis,11-trans-octadecadienoate

79 76.412 4,87 9,12,15-Octadecatrienoic acid, ethyl ester, (Z,Z,Z)-

80 76.780 3,43 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)-

81 86.088 0,05 2,6-Bis[2-(dimethylamino)ethoxy]pyridine

82 87.425 0,09 2-methyloctacosane

83 88.320 0,08 Chloromethyl 5-chlorododecanoate #

84 89.610 0,25 E,E,Z-1,3,12-Nonadecatriene-5,14-diol

85 90.348 0,19 Cyclohexanone, 3-(4-hydroxybutyl)-2-methyl-

86 92.274 0,08 Butyl 6,9,12-hexadecatrienoate

87 94.094 0,54 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol

88 97.799 0,13 Carbamic acid, 2-(dimethylamino)ethyl ester

89 100.595 0,17 cis-9-Hexadecenal

90 101.542 0,39 Phthalic acid, di(2-propylpentyl) ester

91 102.007 0,52 Retinol

92 102.899 0,52 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol

93 103.556 0,62 Ethyl 14-methyl-hexadecanoate

94 107.829 0,44 Tetratetracontane

95 109.109 0,45 Erucic acid

96 111.301 0,06 Phytol, acetate

97 112.719 0,18 Ethyl 14-methyl-hexadecanoate

98 114.339 0,18 trans-Geranylgeraniol

99 119.147 0,2 Heneicosane

100 119.874 0,94 Phenol, 3-pentadecyl-

101 120.916 0,14 Cyclopentadecanone, 2-hydroxy-

102 124.223 2,3 4H-Bis[1,3]benzodioxolo[5,6-a:4',5'-g]quinolizine, 6,7,12b,13-tetrahydro-, (.+/-.)-

103 127.313 7,33 Protopine

104 131.031 0,25 .gamma.-Tocopherol

105 132.994 0,5 Cholest-5-en-3-ol (3.beta.)-, carbonochloridate

106 135.638 0,24 10-Nonadecanone

107 138.461 4,83 Dodecane, 1-cyclopentyl-4-(3-cyclopentylpropyl)-

108 165.156 0,78 7,22-Ergostadienone

109 169.783 1,55 [1,3]Benzodioxolo[5,6-c]-1,3-dioxolo[4,5-i]phenanthridine

110 233.650 0,39 Phytol, acetate

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

Согласно данным табл.1 основа состава экстракта I характеризуется весьма значительным доминированием в нём гликозидов, на долю которых приходится 61,33 (масс.% экстракта), и они представлены: 2-O-Methyl-a-xylosa, D-Fructosa-3-O-methyl, a-d-Mannofuranosid, methyl,4-O-Methylmannosa и др., при значительном преобладании - a-d-Mannofuranosida, methyl - 34,99 (масс.% от экстракта). На долю стери-нов приходится - 12,19 (масс.% от экстракта), их состав определяется наличием: Betulin (40,2); a-Amyrin (44,3) (масс.% от содержания стеринов), в незначительном количестве присутствуют: ß-Sitosterol, dl-a-Tocopherol, Lupeol, Lup-20(29)-en-3-ol, acetat.

Фуран и пиран представлены структурами со спиртовыми (2-Furanmethanol), альдегидными (2-Furancarboxaldehyd, 5-methyl, 5-Hydroxymethylfurfural) и кетонными функциональными группами (2, 4-Dihydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furan-3-one); 4-H-Pyran-4-one, 3,5 dihydroxy-2-methil, 4-H-Pyran-4-one, 2, 3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl, содержание которых - 2,7 (масс.% от экстракта); причём на 5-Hydroxymethylfurfural приходится 62,22 (масс.% от суммы фуран и пиранпроизводных). Общее содержание данной группы соединений в экстракте I - 2,7 (масс.%).

Состав фенолов определяется наличием: Catechol, Hydrogiinon, 2-methoxy-4-vinylphenol, 2,6-dimethoxy Phenol, 1,4-Benzenediol, 2-methoxy и др. при доминировании 2,6-dimethoxy Phenola (25,68 масс.% от суммы фенолов).

Азот и серосодержащие соединения, доля которых в экстракте I - 0,70 %масс., в основном являются аминами: Ethanamin, 2-methoxy-N-(2-methoxyethyl)-N-methyl, Cyclohexanamin, N-3-butenyl-N-methyl, Ethanamin, N-ethyl-N-nitroso, Borane, diethyl-propylamin.

Следует отметить крайне малое содержание в экстракте I карбоновых кислот (0,09 масс.% от экстракта) и их ограниченный набор: 2-Oxopentanedioic acid и 2-Propenoic acid, 3-phenyl.

Углеводородов - 2,48 (масс.% от экстракта).

Существенно, по сравнению с другими группами соединений, выделяют по количественному содержанию альдегиды, но среди них 92,71 (масс.% от альдегидов) приходится на cis, cis, cis-Hexadecatienal; также присутствуют Benzaldehyd, 2-hydroxy и Benzaldehyd, 4-hydroxy-3,5-dimethoxy.

Спирты представлены только одним: 1,6,10,14,18,22-Tetracosahexaen-3-ol, 2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E) - 0,62 (масс.% от экстракта).

Среди кетонов идентифицированы моно (1-Penten-3-one, 6-Oxa-bicyclo [3.1.0] hexan-3-one, 2-Propanone, 1- (4-hydroxy-3-methoxyphenyl), 3 ',5 '-Dimethoxyacetophenon) и дикетоны (4-Cyclopentene-1,3-dione, 1,3-Cyclohexanedion, 2-methyl).

В образовании сложных эфиров участвовали: dl-Isocitric, Hexanoic, Fumaric и Hexadecanoic acid, доля эфиров в экстракте I - 0,95 (масс.%).

Выше было указано на весьма значительные различия I и II экстрактов омелы белой, как по количественному содержанию различных групп соединений, а самое главное, по структуре большинства из них. Так, при практически равном содержании стеринов в экстрактах I и II (12,19 и 12,92), масс.% от экстракта, соответственно, набор соединений резко различный. Так, если основу стеринов экстракта I определяют: Betulin и a-Amyrin, то в экстракте II они отсутствуют, и его состав определяют: Protopin, Retinol, Rishitin, Piracetam, y-Tocopherol, Phytol и Phytol acetat, 3,4-Altrosan, Maltol, отсутствующие в I экстракте.

Если азотсодержащие I экстракта, в основном амины, то состав II экстракта характеризуется большим разнообразием структур азот- и серосодержащих соединений, представленных производными пиперидина, пиримидина, хинолина и изохинолина, индола, тиофена, нитрилов, аминов, имидов, гидразинов. Причём, содержание данной группы соединений составляет 0,70 и 12,08 (масс.% от экстракта), соответственно, I и II - экстракты.

Состав II экстракта характеризуется в 5 раз большим содержанием фуран и пиранопроизводных, в котором преобладают спирто-, альдегидо- и кетофураны - 66,62; пираны, в основном, кетопроизводные -33,38 (масс.% от суммы фуранов и пиранов), в то время как в I экстракте преобладают альдегидофураны.

Отличительной особенностью II экстракта является в 362 раза большее содержание, по сравнению с I экстрактом, карбоновых кислот, основу которых во II экстракте составляют предельные жирные кислоты (С11, С12, С13, С15, С16), на их долю приходится 74,72 (масс.% от суммы кислот), при преобладании Hexadecanoic acid - 64,11 (масс.%); из непредельных кислот идентифицированы: 9,12-Octadecanoic acid (Z,Z) и Erucic acid (С18), а также присутствуют Benzoic acid, т.е. отмечаются весьма существенные различия, как в количественном содержании карбоновых кислот в экстрактах, так и в качественном спектре данной группы соединений. Количественное содержание сложных эфиров во II экстракте в 62 раза больше, чем в I-ом; в их образовании участвовал большой набор кислот, в том числе и непредельных. Эфиры образованы фумаровой, фталевой, бензойной, линоленовой, гексадекановой кислотами.

Содержание фенолов в экстракте II в 13,7 раз больше, чем в I, которые отличаются структурной организацией. Если среди фенолов экстракта I преобладают Catechol, Hydrogiinon, trans-Isoeugenol и 2,6-dimethoxy-4-(2-propenyl) phenol, то во II - 2-methoxy Phenol, 2-methoxy-4-vinylphenol, 2,6-dimethoxyphenol, Phenol, 3-pentadecyl, при доминировании 2-methoxy-4-vinylphenola и 2,6-dimethoxyphenol, на которые приходится - 60,0 (масс.% от суммы фенолов).

Как и в случае с экстрактом I, во II набор альдегидов ограничен двумя соединениями: cis,cis,cis-7,10,13-Hexadecatrienal (0,32) и cis-9-Hexadecenal (0,17), масс.% от экстракта. В то же время II экстракт содержит большой набор спиртов при преобладании непредельных, включающих в углеводородную

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

цепь двойные: E,E,Z-1,3,12-Nonadecatrien-5,14-diol, 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol и тройную связь: 3—Tetradecyn-1-ol; на которые приходится - 77,51 (масс.% от суммы спиртов).

Углеводороды экстрактов I и II также значительно различаются, как их содержанием, что в 6,6 раз больше для экстракта II, а также структурой: предельные углеводороды последнего представлены: 2-methyloctacosan (C29), Heneicosan (C21), Tetratetracontan (C44); непредельные: 2-Octadecyn (C12), 7-Octadecyn, 2-methyl (C19); 1-Propene, 1-Chloro-2-methyl; циклоалканы: 1,3,5-Cycloheptatrien, syn-Tricyclo [5.1.0.0 (2,4)] oct-5-ene, 3,3,5,6,8,8-hexamethyl, Dodecan, 1-cyclopentyl-4-(3-cyclopentylpropyl) и др.

Значительное отличие также отмечено и для кетонов, но преимущественно в их общем содержании, которое выше в 13,7 раз для II-го экстракта; в основном кетоны представлены циклическими структурами.

Сравнительный анализ данных структурно-группового состава изученных экстрактов омелы белой, прежде всего, указал на весьма сложный состав ОВ последней, а самое главное, на большое разнообразие структурной организации соединений. Следовательно, каждый из экстрактов должен проявлять строго специфичный набор фармакологического действия. Например, экстракт I обогащён: Betulin, Lu-peol, a-Amyrin, ß-Sitosterol, dl-a-Tocopherol, Catechol, Hydrogiinon, cis,cis,cis-7,10,13-Hexadecatrienal, а также гликозидами: 2-O-Methyl-d-xylosa, D-Fructosa-3-O-methyl, a-d-Mannofuranosid, methyl и 4-O-Methylmannosa. Несомненно, следует обратить внимание, например, на Betulin, проявляющий большой набор свойств: гепатопротекторное, желчегонное, антилитогенное, антиоксидантное, противовоспалительное, противоопухолевое, противовирусное, гипохолестериномическое, иммуномодуляторное, гипо-липидемическое, антигипоксантное, гастропротекторное, нейропротекторное, антисептическое, антимутагенное. Причём перечисленный спектр свойств взаимосвязан, многие вытекают одно из другого.

Бетулин обладает сродством к биологоческим мембранам клеток человека, не является чужеродным веществом для организма, не является токсичным веществом, не проявляет аллергенных свойств, не обладает ни эмбриолетальным, ни тератогенным, а также не влияет на развитие плацент.

Бетулин нормализует уровень холестерина, выводя его из организма с желчными кислотами, улучшает отток желчи, снимает воспалительные процессы, улучшает работу печени. В присутствии бе-тулина в организме происходит задержка всасывания холестерина из кишечника, усиление выделения холестерина с желчью и окисление его в желчные кислоты, угнетение синтеза холестерина в печени.

Это - препарат сопроводительной терапии при лечении онкологических заболеваний. Раковые опухоли появляются чаще в условиях иммунного дефицита. Даже простая травма на время снижает иммунитет. Бетулин - иммуностимулятор. Опухолевые клетки растут в условиях дефицита кислорода, при котором нормальные клетки не могут развиваться, т.к. бетулин - антигипоксант). В раковых клетках перестроен энергетический метаболизм, в результате чего они потребляют в 20 раз больше питательных субстратов, чем нормальные клетки. Мембрана раковой клетки перестраивается для пропуска этих потоков. Бетулин, встраиваясь в клеточную мембрану раковой клетки, на начальном этапе препятствует её реорганизации и подвергает естественной гибели (апоптазу). Таким образом, бетулин действует избирательно на больные клетки и повышает устойчивость здоровых клеток. Бетулин препятствует развитию воспалительных процессов в стенках сосудов. Обладает противовирусным и бактерицидным действием. Улучшает барьерные функции сосудистого эндотелия. Аналогичные фармакологические действия проявляют и другие соединения I-го экстракта, имеющие углеродный скелет ряда лупана - пентацикличе-ские тритерпены.

Антиоксидантное действие препарата I усиливается наличием в нём фенолов: Catechol, Hydrogiinon, 2-methoxy-4-vinylphenol и др., альдегидов: Benzaldehyd, 2-hydroxy-3,5-dimethoxy; cis,cis,cis-7,10,13-Hexadecatrienal.

Особое значение в формировании специфичности фармакологического действия I-го экстракта имеет доминирование в его составе гликозидов: кардиотоническое, стимулирующее и адаптогенное, отхаркивающее, противосклеротическое, стимуляция пищеварительной функции, гипотензивное, седатив-ное, мочегонное, кровоостанавливающее и другие виды фармакологического действия.

Учитывая особенности структуры соединений различных групп, определяющих состав II-го экстракта омелы белой следует предположить другой спектр и специфичность его фармакологического действия.

Особый интерес представляет наличие во II-ом экстракте: Pro topin, Rishitin, Piracetam, 3,4-Altrosan, Retinol, Phytol и Phytol acetat, большой гаммы азот- и серосодержащих соединений, производных фурана и пирана, замещённых спиртовыми, альдегидными и кетонными функциональными группами, непредельных карбоновых кислот, сложных эфиров, фенолов.

Protopin - benzilizohinolinski alkaloid, являющийся высокоспецифичным средством лекарственного воздействия по типу морфина и кодеина, папаверина и наркотина, атропина и скополамина, хинина и эметина, стрихнина и секуренина и других алкалоидов.

Piracetam - ноотропное лекарственное средство, представляющий собой производное пирролидо-на; применяется в неврологической, психиатрической и наркологической практике. В результате действия Piracetama повышается концентрация АТФ в мозговой ткани, усиливается биосинтез рибонуклеино-

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

вой кислоты и фосфалипидов, стимулируются гликолитические процессы; эффективен при восстановлении после инсульта, улучшает работу мозга при кислородном голодании и улучшает образование нейронных связей в процессе обучения; стимулирует окислительно-восстановительные процессы, усиливает утилизацию глюкозы, улучшает регионарный кровоток в ишемизированных участках мозга, усиливает синтез ядерной РНК в головном мозге. В педиатрической практике Piracetam применяют при различных церебрастенических, энцефалопатических нарушениях, расстройствах памяти, интеллектуальной недостаточности, острых вирусных нейроинфекциях, остром отравлении алкоголем, морфином, барбитуратами и др.

Rishitin - терпенидный двухатомный спирт, снижает отрицательное воздействие на организм при лучевой терапии.

Производные фурана и пирана, количественно преобладающие во II-ом экстракте (более, чем в 5 раз), проявляют капилляроукрепляющее, кардиотропное, гипотензивное и спазмолитичекое действие.

Несомненен факт значительной роли в формировании специфичности фармакологического действия экстракта II наличием в его составе широкой гаммы азотсодержащих структур типа пиперидина, пиримидина, пиррола, хинолина и изохинолина, важных структурных фрагментов разнообразных алкалоидов, что является дополнением к действию Protopina, присутствующего во II-ом экстракте, а также непредельных карбоновых кислот, фенолов, углеводородов, содержащих в углеводородной цепи несколько двойных и тройных связей, являющихся, эффективными ловушками высокоактивных радикалов.

Растительные алкалоиды в большинстве своём являются ингибиторами митоза и относятся к анти-тубулиновым препаратам. Они широко применяются при ходжкинских и неходжскинских лимфомах, опухолях яичника, хорион-эпителиоме матки, нейробластоме, раке лёгкого, молочной железы, опухолях головы и шеи, меланоме, раке яичников и немелкоклеточном раке лёгкого; приводят к остановке митоза [5]. Алефиров А.Н. [1, 2] доказал перспективность применения препаратов растительных алкалоидов в качестве противоопухолевого средства.

Retinol, содержащийся в экстракте II, называемый провитамином витамина А - каротиноид, вносит вклад в антимутагенное действие его антирадикальной активностью, способностью к нейтрализации супероксидных радикалов; является потенциально ценным и перспективным антипромотором и как возможное средство химиопрофилактики гастроканцерогенеза. Именно за счёт антиоксидантной активности ретинол обладает антиканцерогенными, радиопротекторными и иммуномодулирующими свойствами; участвует в процессах пролиферации и дифференциации клеток, механизмах зрения и пролиферации.

Витамин Е (токоферол) является внутриклеточным антиоксидантом; препятствует окислению жиров и образованию из них токсичных перекисей, поддерживает нормальную структуру мембран клеток различных тканей, участвует в образовании коллагена, контролирует синтез нуклеиновых кислот, тканевое дыхание, уменьшает потребление кислорода тканями, что важно, особенно, для раковой клетки, которая при этом погибает [5]. Данные фармакологические действия характерны для экстрактов I и II, содержащих токоферол.

Глубокий анализ особенностей химического состава изученных экстрактов омелы белой, особенно, значительного различия в структуре соединений стеринов, азот- и сероорганических соединений, фуран-пирановых производных, фенолов, карбоновых кислот и углеводородов, сложных эфиров, позволило сделать однозначный вывод о целесообразности проведения постадийной экстракции растительного сырья, даже одним и тем же растворителем, с получением препаратов, существенно различающихся специфичностью и селективностью по отношению к широкому спектру заболеваний, выбору многочисленных вариаций их фармакологического действия [2, 3, 8, 10-11].

Выводы:

1. Доказана целесообразность проведения постадийной экстракции исходного растительного сырья, позволяющей получить препараты, существенно различающиеся качественным набором и количественным содержанием соединений различных классов, что определило специфичность фармакологического действия каждого из препаратов омелы белой.

2. Основа препарата I определяется наличием стеринов, доминированием гликозидов; II-го препарата - стеринов, отличных по структуре от стеринов препарата I, значительного количества непредельных карбоновых кислот, азот- и сероорганических соединений, производных фурана и пирана, кароти-ноидов, углеводородов, содержащих в углеводородной цепи двойные и тройные связи, полным отсутствием гликозидов.

Литература

1. Алеферов А.Н., Беспалов В.Г., Стуков А.Н., Муразов Я.Г., Семёнов А.Л., Крупская Е.О. Противоопухолевая активность настойки Aconitum soogaricum (Ranunculaceae) на модели карциномы эрлиха // Растительные ресурсы. 2012. Т. 48, №3. С. 428-442.

2. Алеферов А.Н., Беспалов В.Г., Стуков А.Н., Муразов Я.Г., Семёнов А.Л, Лесновская Е.Е. Современные проблемы фитотерапии и травничества Противоопухолевая активность настойки Aconitum soogaricum. Материалы 3-го международного съезда фитотерапевтов и травников. М.: Наука, Институт фитотерапии, 2013. С. 9-11.

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2020 - N 3

3. Бетулин. Энциклопедический словарь Брокгауза и Ефрона: в 86 т. (82 т. и 4 доп.). СПб., 19801907. URL: https://ru.Wikipedia.org/w/index.php?title=Бетулин&oldid=98833001 .

4. Виноградов Т. А., Гажев Б.Н. Практическая фитотерапия. Серия «Полная энциклопедия». М.: «ОЛМА-ПРЕСС»; СПб.: Издательский дом «Нева», «Велери СПД», 1998. 640 с.

5. Корсун В.Ф., Трескунов К. А., Корсун Е.В., Мицконас А. / Под ред. Корсун В.Ф. 2-е изд. испр. и доп. СПб.: Эко-Вектор, 2017.432 с.

6. Никонов Г.К., Мануйлов Б.М. Основы современной фитотерапии. ОАО Издательство «Медицина», 2005. 520 с.

7. Новейшая энциклопедия домашней медицины. М.: Престиж Бук, 2012. 480 с.

8. Пирацетам (Piracetam). Энциклопедия лекарств.. URL: http://www.rbsnet.ru/mnn_index id510.htm .

9. Eintrag zu Molinat URL: http://gestis.itrust.de/nxt/gateway.dll?=id$t=default.htm$vid =gestisdeu: sdbdeu$ d510298 in der GEFEST - Stoffdatenbank des IFA, abgerufen am 1. Februar 2016.

10. The Free Dictionary: Protopine URL: http://www.thef reedictionary.com/Prtopine .

11. Katsui N., Murai A., Takasugi M., Imaizumi K., Masamune T., Tomiyama K. The structure of rishitin, a new antifungal compound from diseased potato tubers. Chemical Communications London, 1968. 43 p.

References

1. Aleferov AN, Bespalov VG, Stukov AN, Murazov JaG, Semjonov AL, Krupskaja EO. Protivoopuholevaja aktivnost' nastojki Aconitum soogaricum (Ranunculaceae) na modeli karcinomy jerliha [Antitumor activity of Aconitum soogaricum tincture (Ranunculaceae) on the model of Ehrlich's carcinoma]. Rastitel'nye resursy. 2012;48(3):428-42. Russian.

2. Aleferov AN, Bespalov VG, Stukov AN, Murazov JaG, Semjonov AL Lesnovskaja EE. Sovremennye problemy fitoterapii i travnichestva Protivoopuholevaja aktivnost' nastojki Aconitum soogaricum [Modern problems of phytotherapy and herbalism Antitumor activity of Aconitum soogaricum tincture]. Materialy 3-go mezhdunarodnogo sezda fitoterapevtov i travnikov. Moscow: Nauka, Institut fitoterapii; 2013. Russian.

3. Betulin. Jenciklopedicheskij slovar' Brokgauza i Efrona: v 86 t. (82 t. i 4 dop.) [Betulin. Encyclopedia of Brockhaus and Efron]. Sankt-Peterburg; 1980-1907. Russian. Available from: https://ru.Wikipedia.org/ w/index.php?title=Betulin&oldid=98833001 .

4. Vinogradov TA, Gazhev BN. Prakticheskaja fitoterapija. Serija «Polnaja jenciklopedija» [Practical phytotherapy. Series "Complete encyclopedia"]. Moscow: «OlMA-PRESs»; Sankt-Peterburg: Izdatel'skij dom «Neva», «Veleri SPD»; 1998. Russian.

5. Korsun VF, Treskunov KA, Korsun EV, Mickonas A. Pod red. Korsun VF. 2-e izd.ispr. i dop [2nd ed. ISPR. and additional information]. Sankt-Peterburg: Jeko-Vektor; 2017. Russian.

6. Nikonov GK, Manujlov BM. Osnovy sovremennoj fitoterapii [Fundamentals of modern phytotherapy]. OAO Izdatel'stvo «Medicina»; 2005. Russian.

7. Novejshaja jenciklopedija domashnej mediciny [the Newest encyclopedia of home medicine]. Moscow: Prestizh Buk; 2012. Russian.

8. Piracetam (Piracetam).Jenciklopedija lekarstv [Piracetam (Piracetam).Encyclopedia of medicines.]. Russian. Available from: http://www.rbsnet.ru/ mnn_ index id 510.htm .

9. Eintrag zu Molinat Available from: http://gestis.itrust.de/nxt/gateway.dll?=id$t=default.htm$vid =gestisdeu: sdbdeu$ d510298 in der GEFEST - Stoffdatenbank des IFA, abgerufen am 1. Februar 2016.

10. The Frec Dictionary: Protopine Available from: http://www.thef reedictionary.com/Prtopine .

11. Katsui N, Murai A, Takasugi M, Imaizumi K, Masamune T, Tomiyama K. The structure of rishitin, a new antifungal compound from diseased potato tubers. Chemical Communications London; 1968.

Библиографическая ссылка:

Сухих Г.Т., Хадарцев А.А., Платонов В.В., Дунаева И.В., Волочаева М.В. Сравнительная характеристика химического состава препаратов постадийной экстракции этанолом омелы белой (Viscumalbuml, Семейство Ремнецветниковые - Loranthaceae) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2020. №3. Публикация 3-2. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2020-3/3-2.pdf (дата обращения: 22.05.2020). DOI: 10.24411/2075-40942020-16594* Bibliographic reference:

Sukhikh GT, Khadartsev AA, Platonov VV, Dunaeva IV, Volochaeva MV. Sravnitel'naja harakteristika himicheskogo sostava preparatov postadijnoj jekstrakcii jetanolom omely beloj (Viscumalbuml, Semejstvo Remnecvetnikovye -Loranthaceae) [Comparative characteristics of the chemical composition of the products of the stage-extraction of the mistletoe ethanol (Viscumalbuml, Family - Loranthaceae)]. Journal of New Medical Technologies, e-edition. 2020 [cited 2020 May 22];3 [about 10 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2020-3/3-2.pdf. DOI: 10.24411/2075-4094-2020-16594.

* номера страниц смотреть после выхода полной версии журнала: URL: http://medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2020-3/e2020-3.pdf