СРАВНЕНИЕ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ИТРАКОНАЗОЛА ИЗ ВАГИНАЛЬНЫХ СУППОЗИТОРИЕВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



УДК 615.454.20

http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-6-79-83

COMPARISON OF METHODS FOR DETERMINING THE RELEASE OF ITRAKONAZOLE FROM VAGINAL SUPPOSITORIES

Salova V.G., Odintsova E.B., Kozlova Zh.M.

First Moscow state medical university named after I.M. Sechenov, (Sechenov University), Moscow, Russian Federation

СРАВНЕНИЕ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ИТРАКОНАЗОЛА ИЗ ВАГИНАЛЬНЫХ СУППОЗИТОРИЕВ

Салова В.Г., Одинцова Е.Б., Козлова Ж.М.

ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет), г. Москва, Российская Федерация

Аннотация. Данная работа посвящена сравнению четырех методов оценки степени высвобождения итракона-зола из вагинальных суппозиториев, так как тип суппози-торной основы влияет на технологические и биофармацевтические свойства суппозиториев. Исходя из этого, правильный подбор суппозиторной основы является наиболее важным аспектом в разработке лекарственных препаратов в форме суппозиториев. Одним из критериев оценки корректности выбора суппозиторной основы является определение высвобождения действующего вещества с помощью теста «Растворение». Однако для разных типов суппозиторных основ Фармакопеями предусмотрены различные методы оценки высвобождения. Учитывая вышеизложенное, исследования проводили, используя все приведенные в ГФXIV издания «Тест растворения» приборы для проведения данного теста (вращающейся корзинки, лопастной мешалка, проточной ячейки) и диализом. Объектами исследования служили суппозитории, приготовленные методом выливания на липофильной, дифильной и гидрофильной основах массой 3,0 г. Средой растворения выступила модель вагинальной жидкости. Оценку проводили по следующим показателям: профиль высвобождения, максимальное высвобождение и вариабельность метода. Сравнение профилей высвобождения показало, что фармакопейные аппараты для проведения теста растворения дают соотносимые величины высвобождения, однако, результаты диализа через полупроницаемую мембрану показывают недостаточную степень высвобождения относительно других методов. По результатам сравнения в случае суппозиториев с итраконазолом лучшие параметры показал метод с использованием проточной ячейки. Ключевые слова: вращающаяся корзинка, лопастная мешалка, диализ, итраконазол, проточная ячейка, высвобождение Abstract. The aim of this research is to compare four methods for assessment of the degree of the Itraconazole release from the vaginal suppositories as the suppository bases affect the technological and biopharmaceutical properties of the suppository. On this basis, the correct selection of suppository bases is the most important aspect in the development of drugs in suppository form. One of the criteria for evaluating the validity of a suppository base choice is the determination of the release of active substance using the "Dissolution" test. However, for different types of suppository bases, there are different methods for assessing the release in the Pharmacopoeias. Given the above, studies were carried out using all of the Pharmacopoeia of the XIVedition "dissolution Test" devices for this test (rotating basket, paddle, flow-through cell) and dialysis. The objects of study served as the suppository prepared by the outpouring method for lipophilic, hydrophilic and diphilic basis and weight 3.0 g. The dissolution liquid was a model of vaginal fluid. The evaluation was conducted according to the following criteria: the profile of the release, the maximum release, and the variability of the method. Comparison of release profiles showed that the Pharmacopoeia apparatus for testing of dissolution correlated the magnitude of the release, however, the results of dialysis through a semipermeable membrane indicates insufficient release in relation to other methods. The results of this comparison in the case of Itraconazole suppositories showed that the best parameters were in a flow-cell method. Keywords: rotating basket, paddle, dialysis, Itraconazole, flow cell, release

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК [1] Государственная фармакопея Российской Федерации. Издание XIV, т. 2 [Электронный ресурс]. URL: http://resource.rucml.ru/ feml/pharmaco-pia/14_2/HTML/93/index.htm [2] Todaro V. et al. Characterization and simulation of hydrodynamics in the paddle, basket and flow-through REFERENCES [1] The State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Edition XIV, vol. 2 [Electronic resource]. URL: http://re-source.rucml.ru/ feml / pharmacopia / 14_2 / HTML / 93 / index.htm [2] Todaro V. et al. Characterization and simulation of hydrodynamics in the paddle, basket and flow-through dissolution

dissolution testing apparatuses-a review //Diss Tech. -2017. - Т. 24. - №. 3. - С. 24-36.

[3] D.H. Owen, D.F. Katz, A vaginal fluid simulant, Contraception. 59 (1999) 91-95.

[4] Беликова З. Ф., Кастуева Н. З., Цаллагова Л. В. Комплексная терапия урогенитального кандидоза у женщин репродуктивного возраста с учетом состояния вагинального микробиоценоза //Кубанский научный медицинский вестник. - 2014. - №. 2.

[5] Gjellan K., Graffner C. Comparative dissolution studies of rectal formulations using the basket, the paddle and the flow-through methods: II. Ibuprofen in suppositories of both hydrophilic and lipophilic types //International journal of pharmaceutics. - 1994. - Т. 112. - №. 3. - С. 233240.

[6] Медик В. А., Токмачев М. С. Математическая статистика в медицине. - Финансы и статистика, 2007.

testing apparatuses - a review // Diss Tech. - 2017. - T. 24. -No. 3. - S. 24-36.

[3] D.H. Owen, D.F. Katz, A vaginal fluid simulant, Contraception. 59 (1999) 91-95.

[4] Belikova Z. F., Kastueva N. Z., Tsallagova L. V. Complex therapy of urogenital candidiasis in women of reproductive age, taking into account the state of vaginal microbiocenosis // Kuban Scientific Medical Bulletin. - 2014. - No. 2.

[5] Gjellan K., Graffner C. Comparative dissolution studies of rectal formulations using the basket, the paddle and the flow-through methods: II. Ibuprofen in suppositories of both hydrophilic and lipophilic types // International journal of pharmaceutics. - 1994. - T. 112. - No. 3 .-- S. 233-240.

[6] Medic V. A., Tokmachev M. S. Mathematical statistics in medicine. - Finance and statistics, 2007.

Author Contributions. Salova V.G. — collection and processing of materials, research concept; Kozlova Zh.M. —research concept

and design; Odintsova E.B. — literature review, writing a text.

Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest.

Salova V. G. - SPIN-ID 5673-8918 ORCID 0000-0003-4210-2315

Research interests, number of main publications: Pharmaceutical drug developement, 3 publications were published, 3 of them in SCOPUS.

Odintsova E.B. - SPIN ID 2847-9669 ORCID 0000-0002-3798-1071

Research interests, number of main publications: Pharmaceutical drug developement, more than 20 publications were published, 4 of them in SCOPUS, 1 in WoS, 5 in the Higher Attestation Commission and more than 10 in conference proceedings. Kozlova ZhM. - SPIN-ID 4582-4173 ORCID 0000-0003-1525-732X

Research interests, number of main publications: Pharmaceutical drug developement, more than 100 publications were published, 8 of them in SCOPUS, 2 in WoS, more than 30 in the Higher Attestation Commission and more than 30 in conference proceedings.

Вклад авторов. Салова В.Г. - сбор и обработка материалов, планирование исследования; Козлова Ж.М. —концепция и дизайн исследования; Одинцова Е.Б. — обзор литературы, написание текста. Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Салова В.Г. SPIN-код 5673-8918 ORCID 0000-0003-4210-2315

Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Фармацевтическая разработка лекарственных препаратов, опубликованы 3 публикаций из них 3 в СКОПУС. Одинцова Е.Б. SPIN-код 2847-9669 ORCID 0000-0002-3798-1071

Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Фармацевтическая разработка лекарственных препаратов, опубликованы более 20 публикаций из них 4 в СКОПУС, 1 в WoS, 5 в ВАК и более 10 в материалах конференций. Козлова Ж.М. SPIN-код 4582-4173 ORCID 0000-0003-1525-732Х

Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Фармацевтическая разработка лекарственных препаратов, опубликованы более 100 публикаций из них 8 в СКОПУС, 2 в WoS, более 30 в ВАК и более 30 в материалах конференций.

Введение. Тип суппозиторной основы является важнейшим фактором, влияющим на высвобождение действующего вещества (ДВ) из лекарственной формы. Высвобождение, в свою очередь, напрямую влияет на эффективность и биодоступность лекарственного препарата. Фармакопейным способом определения высвобождения лекарственного вещества из суппозиториев служит тест «Растворение» в приборе «Проточная ячейка» для суппозиториев на липофильной основе и тест «Растворение» в приборах «Вращающаяся корзинка» и «Лопастная мешалка» для суппозиториев на гидрофильной основе [1]. Данные методы также описаны в фармакопеях других стран: Европейская фармакопея, Британская фармакопея. Однако, они достаточно далеки от физиологических условий введения данных лекарственных форм по крайней мере по причине большого объема среды растворения и её высокой скорости движения по сравнению с

физиологическими условиями [2]. Нефармакопейным методом, применяющимся при разработке суппозиториев, является метод диализа.

Целью данного исследования является сравнение четырех методов оценки высвобождения итраконазола из вагинальных суппозиториеыв.

Материалы и методы. В качестве действующего вещества использовался Итраконазол производства Нош Лабз Прайвет Лимитед - Индия. В качестве суппози-торных основ использовали: Estaram Н15 (и8Р), Witepsol 855 (И8Р), Макрогол 1500 (И8Р), Макрогол 400 (ШР)

Методики проведения тестов «Растворение» в приборах «Вращающаяся корзинка» (ВК) и «Лопастная мешалка» (ЛМ) описаны в 0ФС.1.4.2.0014.15, для прибора «Проточная ячейка» (ПЯ) - 0ФС.1.4.2.0015.15. Диализ (ДЗ) выполнялся по следующей методике: в стеклянную трубку длиной 15 см и сечением 20 мм,

один конец которой закрыт целофановой полупроницаемой пленкой толщиной 40 мкм. В трубку на пленку помещается суппозиторий и на 3 мл погружается в тер-мостатируемую при 37 оС диализную среду. Объем диализной среды составлял 100 мл. Через определенные отрезки времени отбирали 1 мл диализной среды, замещая соответствующим объемом чистой среды. В пробе проводили определение содержания действующего вещества.

Средой для растворения для всех методов была выбрана модель вагинальной жидкости, наиболее подходящая по физико-химическим качествам к натуральному влагалищному секрету [3]. Для всех методов были выбраны одинаковые временные точки отбора проб: 0, 15, 30, 45, 60, 90 и 120 минут.

Состав модели вагинальной жидкости: натрия хлорид -3,51 мл; калия гидроксид -1,40 мл; кальция гид-роксид -0,222 мл; бычий сывороточный альбумин -

0,018 мл; молочная кислота -2,00 мл; уксусная кислота -1,00 мл; глицерол - 0,16 мл; мочевина - 0,40 мл; глю-коза-5,0 мл; вода очищенная до 1 000 мл; соляная кислота до рН 4,2.

Для оценки параметров тестов были выбраны следующие показатели: среднее время растворения и количество вещества в %, высвободившееся к концу исследования 120 минут [5]. Также оценивался коэффициент вариабильности методов. Для этого проводилось 6 повторов для каждого метода [6].

Количественное определение итраконазола в пробе определяли спектрофотометрический методом на спектрофотометре Ц^1800 (Shimadzu, Япония) при длине волны 260±2 нм.

Результаты и обсуждение. Вагинальные суппозитории массой 2,5 г следующих составов (таблица 1) были приготовлены методом выливания.

Таблица 1

Составы образцов вагинальных суппозиториев с инраконазолом

№ Состава Действующее вещество Суппозиторная основа

Estaram H15 (E)- итраконазол (ITR) Итраконазол 200 мг Estaram H15 - 2300 мг

Витепсол (W)- итраконазол (ITR) Итраконазол 200 мг Witepsol S55 - 2300мг

Полиэтиленгликоль (ПЭГ)- итраконазол (ITR) Итраконазол 200 мг ПЭГ 1500: ПЭГ 400 в соотношении 9:1 - 2300 мг

Table 1

Compositions of vaginal suppositories samples

№ Composition Active substance Suppository base

Estaram H15 (E)- Itraconazole (ITR) Itraconazole 200 mg Estaram H15 - 2300 mg

Witepsol (W)- Itraconazole (ITR) Itraconazole 200 mg Witepsol S55 - 2300 mg

Polyethylene glycol (PEG)- Itraconazole (ITR) Itraconazole 200 mg PEG 1500 : PEG 400 in the ratio 9:1 - 2300 mg

Результаты исследования высвобождения отражены на рисунке 1 и в таблице 2, где ВК - вращающаяся корзинка, ЛМ - лопастная мешалка, ПЯ - проточная ячейка, ДЗ - диализ.

Таблица 2

Результаты оценки высвобождения итраконазола из вагинальных суппозиториев различными методами

Тип суппозиториев Метод Высвобождение макс, % Коэффициент вариабельности

E-ITR ВК 58,1±6,3 10,0

ЛМ 85,8±1,2 5,4

ПЯ 76,3±0,7 1,9

ДЗ 35,3±3,5 9,9

W-ITR ВК 97,9±1,2 0,7

ЛМ 92,1±1,2 0,9

ПЯ 89,4±2,4 2,1

ДЗ 30,7±2,6 10,1

ПЭГ-ITR ВК 98,1±0,8 0,8

ЛМ 97,3±0,8 0,8

ПЯ 96,2±0,6 0,9

ДЗ 28,1±1,0 4,6

Table 3

Results of evaluating the release of itraconazole by various methods

Suppository type Method Release, % Coefficient of variability

E-ITR RB 58,1±6,3 10,0

PM 85,8±1,2 5,4

FT 76,3±0,7 1,9

D 35,3±3,5 9,9

W-ITR RB 97,9±1,2 0,7

PM 92,1±1,2 0,9

FT 89,4±2,4 2,1

D 30,7±2,6 10,1

PEG-ITR RB 98,1±0,8 0,8

PM 97,3±0,8 0,8

FT 96,2±0,6 0,9

D 28,1±1,0 4,6

Рис. 1. Профили высвобождения Итраконазола из суппозиториев

150

RB

PEG-ITR; 98

ITR; 77

-50

50

100

150

о4

а и

150 100 50 0

PM

PEG-ITR; 97

-50

50

100

-ITR; 75

150

0

0

Fig. 1. Itraconazole release profiles from suppositories.

Таким образом, можем наблюдать, что вариабельность всех методов была ниже в случае суппозиториев на гидрофильной основе. Самая высокая вариабельность наблюдалась во время исследования суппозиториев на липофильной основе, однако в этом случае наименьшая вариабельность видна в случае исследования методом проточной ячейки. Наименьшая вариабельность среди всех типов исследуемых

суппозиториев также наблюдалась у метода проточной ячейки. Диализ через полупроницаемую мембрану показал себя как метод с самой большой вариабельностью, а также с низкой результативностью.

По результатам исследования можно сделать вывод, что в процессе подбора суппозиторной основы целесообразно использовать метод с применением проточной ячейки.

Ответственный за переписку: Салова Валентина Геннадьевна — ассистент кафедры фармацевтической технологии Института фармации им. А.П. Нелюбина ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова (Сеченовский Университет) Минздрава России, E-mail: [email protected]

Corresponding Author: Salova Valentina Gennadievna -associate professor, Department of Pharmaceutical Technology, Institute of Pharmacy named after A.P. Nelyubina First Moscow State Medical University named after I. M. Sechenov (Sechenov University)

of the Ministry of Health of Russia, E-mail: valentina. 94.12@gmail. com