CC BY
45
13. Fischer H.P., Ortiz-Pallardo M.E., Ko Y., Esch C., Zhou H. Chronic liver disease in heterozygous alphal-antitrypsin deficiency PiZ. J. Hepatol. 2000; 33(6): 883-92.
14. Goltz D., Hittetiya K., Vossing L.M., Kirfel J., Spengler U., Fischer H.P. alpha-Antitrypsin PiMZ heterozygosity has an independent aggravating effect on liver fibrosis in alcoholic liver disease. Virchows Arch 2014.
15. Gomez F.P., Rodriguez-Roisin R. Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease (GOLD) guidelines for chronic obstructive pulmonary disease. Curr. Opin. Pulm. Med. 2002; 8(2): 81-6.
Поступила 27.05.15 Received 27.05.15
цитология
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015 УДК 618.11-006.04-074
Долгова Д.Р., Генинг Т.П., Абакумова Т.В., Антонеева И.И., Бутов А.А., Корчагина И.А., Тузеева А.Ю., Фомина А.В.
способ уточняющей диагностики прогрессирующих форм рака
яичников
ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», 432017, г. Ульяновск
Рак яичников - наиболее частая причина смерти от злокачественных новообразований у женщин. При этом не существует патогномоничных симптомов, позволяющих с достаточной степенью достоверности диагностировать стадию процесса. Последнее же является определяющим не только при выборе схемы лечения, но и для соотнесения предполагаемых результатов лечения с экономическими факторами в целях оценки эффективности затрат при ведении таких больных. Целью исследования была разработка способа уточняющей диагностики прогрессирующих форм рака яичников на основе оценки окислительной модификации белков в плазме крови. У100 пациенток с первичным раком яичников (III и IV стадии по FIGO) в плазме крови по стандартизированным методикам определен 21 показатель: абсолютное количество лейкоцитов, абсолютное и относительное количество нейтрофилов, продукты окислительной модификации белков основного и кетонного характера (при длинах волн 356, 370, 430, 530 нм), Her-2/neu, CA-125, матриксные металлопротеиназы 2 и 9 в сыворотке крови и нейтрофилах, интерлейкин-6 (ИЛ-6), ИЛ-10, ИЛ-lfi, интерферон-у, фактор некроза опухоли а, малоновый диальдегид, каталаза, глутатионтрансфераза, глутатионредукта-за. Для каждого параметра с помощью метода наименьших квадратов проведена аппроксимация относительных частот плотностью распределения Рэлея. Построены функции отношения правдоподобия и определены для каждого показателя интервалы на каждой стадии. Достоверность аппроксимации подтверждена при проверке гипотезы соответствия практических значений параметров теоретическому закону плотности распределения критерием Пирсона. Полученные результаты позволяют утверждать, что уровень окислительной модификации белков может служить достоверным показателем для дифференциальной диагностики III и IV стадий рака яичников.
Ключевые слова: рак яичников; диагностика; окислительная модификация белков.
Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60 (10): 32-36. DolgovaD.R., Gening T.P., Abakumova T.V., AntoneevaI.I., ButovA.A., KorchaginaI.A., TuzeevaA.Yu., FominaA.V. THE MODE OF CLARIFYING DIAGNOSTIC OF PROGRESSING FORMS OF OVARIAN CARCINOMA
The Ulyanovsk state university, 432017 Ulyanovsk, Russia
The ovarian carcinoma is the most frequent cau.se of death because of malignant neoplasms in women. At that, there is no pathognomonic symptoms permitting diagnosing stage of process with sufficient degree of confidence. This is a determinative not only for choosing treatment regimen but also for correlation of expected results of treatments with economic factors with purpose to evaluate cost effectiveness under monitoring of these patients. The study was carried out to develop mode of clarifying diagnostic of progressing forms of ovarian carcinoma on the basis of evaluation of oxidative modification of proteins in blood plasma. In 100 female patients with primary ovarian carcinoma (stage III andIV according FIGO) in blood plasma 21 indicators were determined in blood plasma using standardized techniques: absolute number of leukocytes, absolute and relative number of neutrophils, products of oxidative modification ofproteins of basic and ketonic character (under wavelength of356, 370, 430, 530 nm), Her-2/neu, CA-125, matrix metalloproteinase 2 and 9in blood serum and neutrophils, interleukin-6, interleukin-10, interleukin-1p, interferon-y, tumor necrosis factor-a, malonic dialdehyde, catalase, glutathione transferase, glutathione reductase. The least squares method was applied to every parameter to approximate relative rates by density of Rayleigh distribution. For
Для корреспонденции: Генинг Татьяна Петровна, [email protected] For correspondence: Gening T.P., [email protected]
every indicator likelihood ratio functions of likelihood ratio were constructed and intervals at every stage were determined. The reliability of approximation was proved under testing with Pirson criterion hypothesis of compliance of practical values of parameters to theoretical law of density of distribution. The results permit to assert that level of oxidative modification ofproteins cab be used as a reliable indicator for differentiated diagnostic of .stage III and IV of ovarian carcinoma.
Keywords: ovarian carcinoma; diagnostic; oxidative modification
The study was organized and carried out with support of public task by Minobrnauka of Russia
Citation: KlinicheskayaLaboratornayaDiagnostika. 2015; 60 (10): 32-36. (in Russ.)
Введение. Наиболее частая причина смерти от злокачественных новообразований у женщин - рак яичников (РЯ) [1]. Согласно данным EuroCare-5 Study, пятилетняя выживаемость больных РЯ не превышает 30% [2]. Ежегодно в России регистрируется 11,7 тыс. злокачественных новообразований яичников и 7,3 тыс. летальных исходов от них [3]. Низкая выживаемость при РЯ - следствие поздней диагностики. На сегодня в 70% случаев диагностируется распространенная стадия заболевания [4]. Увеличение за последнее десятилетие пятилетней выживаемости больных злокачественными опухолями яичников в Европе на 3%, а в США - на 4% объясняется не столько улучшением диагностики, сколько эффективным применением платиновой химиотерапии в лечении диссеминированных форм РЯ и герминогенных опухолей.
Экономический ущерб, связанный с последствиями заболеваемости населения злокачественными опухолями, составляет в настоящее время порядка 90 млрд руб. в год и, по мнению ряда авторов, будет и дальше увеличиваться [5]. Поэтому необходимо соотносить результаты лечения с экономическими факторами для определения эффективности затрат при ведении больных РЯ. Сегодня существует точка зрения о нецелесообразности химиотерапии раковых больных на терминальной стадии заболевания [6-9]. В связи с этим возрастает актуальность уточняющей диагностики распространенной (III-IV стадии) формы рака.
Злокачественные опухоли яичников характеризуются бессимптомностью течения процесса. Не существует пато-гномоничных симптомов для неоплазий гонад. Диагностика РЯ, согласно рекомендациям Национального руководства [10], включает, помимо прецизионного сбора анамнеза, полного физикального, бимануального, ректовагиналь-ного обследования, абдоминальную и трансвагинальную ультрасонографию и компьютерную томографию, а также развернутые биохимические и общеклинические анализы крови и исследование уровня опухолевых маркеров. Для постановки окончательного диагноза проводится адекватное хирургическое стадирование. Нами был проведен анализ биохимических и гематологических показателей крови 404 больных РЯ и установлено отсутствие статистически значимой разницы между этими показателями на различных клинических стадиях заболевания, а также отсутствие значимых корреляционных связей между вышеуказанными показателями и стадией РЯ [11]. Мы также не выявили корреляции между уровнем онкомаркера СА-125 и стадией злокачественного процесса у первичных больных РЯ. Согласно данным литературы, изменение метаболизма кислорода играет значительную роль в канцерогенезе [12]. Показано, что переключение метаболизма с окислительного фосфорилирования на гликолиз связано с усилением образования активных форм кислорода [13]. При этом усиливается перенос электронов через пентозомонофосфатный путь на НАДФН и GSH. В итоге в неоплазме изменяется редокс-гомеостаз [14]. Существует точка зрения, согласно которой высокая пролиферативная активность, лекарственная резистентность, снижение апоптоза и иммортализация опухолевых клеток могут быть опосредованы повышением уровня активных форм кислорода, приводящим к изменению экспрессии генов [15]. Окислительная модификация белков (ОМБ) считается одним из ранних и надежных инди-
каторов нарушения редокс-гомеостаза [16]. Продукты ОМБ - карбонильные производные белков - имеют длительный период полураспада; их количество возрастает не только в результате посттрансляционной окислительной модификации, но и вследствие протеолитической деструкции. Целью нашего исследования была разработка способа уточняющей диагностики прогрессирующих форм РЯ на основе определения уровня ОМБ в плазме крови.
Материалы и методы. Обследованию подверглись 100 пациенток с диагнозом первичный РЯ III-IV стадии по FIGO, впервые лечившихся в период с 01.2010 г. по 08.2013 г. в Ульяновском областном клиническом онкологическом диспансере. У каждой пациентки в плазме крови по стандартизированным методикам был определен 21 показатель: количество лейкоцитов, нейтрофилов, уровни металлопро-теиназ (ММП) 2 и 9 в нейтрофилах и в сыворотке крови, уровни цитокинов - интерлейкина-ф (ИЛ-ф), ИЛ-6, ИЛ-10, интерферона-у (ИФН-у), фактора некроза опухоли а (ФНО-а), уровни Her-2/neu и СА-125, четыре показателя ОМБ, а также уровень малонового диальдегида, активность глутатионредуктазы, глутатионтрансферазы и каталазы.
Для каждого показателя здоровья x,, i = 1, ... N, i G N, были построены функции {p!(x)}. = 1 N и {p2(x)}, = 1 N, каждая из которых описывает плотности вероятностей каждой стадии заболевания из двух исследуемых. На основании этих функций для каждого показателя было построено отношение правдоподобия [3]
{¿(x) = p2(x)/p'(x)}, i = 1, ., N. (1).
Таким образом, для каждого показателя x, i = 1, . N, i G N, были определены интервалы (a ; b.) и (c ; d.), k > 1, где z>D и z! < 1/D соответственно (D - пороговое значение). Объединим интервалы (a!; b!), k > 1 во множество
K' = {U (a.; b.)} и (c.; d. ), во множество Ki = {U (c.; d.)}
2 lk> Л k v> v k k' 1 4 > Л k ikJi
соответственно.
Для каждого показателя здоровья x, i = 1, ., 21, на каждой стадии заболевания значения признаков были упорядочены путем уменьшения в 10-100 раз.
Результаты и обсуждение. Рассмотрим три ситуации:
1) если 3i0 такое, что y!0 е K1», j = 1,2, то требуется проверить, чтобы Vi Ф i y. е K.. Если нет противоречия, можно диагностировать j стадию заболевания;
2) если 3i0 такое, что y!0 е K1?, j = 1,2, то требуется проверить, чтобы Vi Ф i y. е K'.. Если есть противоречие, то увеличиваем D на 3-10%;
3) нет ни одного такого i что y! е K\ то рассчитываем значение 0
N
z = П z1.
(2)
Если 2 < 1Ю или 2 >D, то можно однозначно диагностировать^ соответствующую стадию заболевания, если же 1Ю < - < D , то нельзя однозначно судить о том, какая стадия заболевания у пациента.
В соответствии со статистикой каждый параметр был поделен на 5 групп. Была проведена аппроксимация статистики плотностью распределения р(х) = х/а2ехр(-х2/2а2) методом наименьших квадратов [4]. Оптимальные значения а представлены в табл. 1-3.
Пример. Пусть пороговое значение D=1, тогда интервалы показателей определены следующим образом (табл. 4-6).
Таблица 1
Оптимальные значения п (лейкоциты, нейтрофилы, Нег-2/пеи, СА-125, ММП-2, ММП-9 в нейтрофилах) для III и IV стадий РЯ
Стадия Лейкоциты Нейтрофилы Her-2/neu СА-125 ММП-2 ММП-9
III 0,79675 0,596502 1,96315 1,20299 0,650714 1,380432
IV 1,86213 0,8433268 1,94747 1,18701 0,63294 2,034398
Рассмотрим пациентку с III стадией заболевания (табл.
7). В результате анализа по тринадцати параметрам (№№ 1, 2, 4-6, 8, 10, 12-14, 18, 20 и 21) можно диагностировать III стадию, по остальным восьми (№№ 3, 7, 9, 11, 15-17 и 19) -IV стадию заболевания. Так как в данном случае невозможно однозначно диагностировать стадию, то, используя формулу (2), получим. z = 2,74796Е-13. Пусть пороговое значение D =1, тогда z < D, следовательно, у пациентки можно диагностировать III стадию РЯ.
Рассмотрим пациентку с Iv стадией заболевания (табл.
8). По трем параметрам можно диагностировать III стадию, по остальным восемнадцати - Iv стадию заболевания. Так как в данном случае невозможно однозначно определить стадию, то, используя формулу (2), получим z = 28089,27. Пусть пороговое значение D=1, тогда z > D, следовательно, у пациентки можно диагностировать Iv стадию заболевания.
Достоверность аппроксимации. Достоверность аппроксимации была подтверждена при проверке гипотезы соответ-
ствия практических значений параметров теоретическому закону плотности распределения критерием Пирсона [3]. Для проверки вводится статистика
%2=ХМ (/Геор -/1ракг)2М/геор, (3)
где N - количество групп показателей, N = 5. Гипотеза принимается, когда Х2<Х2Ц,М, где а - уровень значимости. Достоверность аппроксимации рассчитывается как у =1 - а.
С использованием предполагаемых параметров дообследования было проведено уточнение стадии у 100 пациенток с первичным РЯ, получавших лечение в Ульяновском областном клиническом онкологическом диспансере. У 21 из них стадия злокачественного процесса была изменена: у 9 больных - с IV на III и у 12 пациенток - с III на IV.
С учетом полученных данных у больных с уточненной III стадией процесса было увеличено количество курсов полихимиотерапии с 4 до 6; пациенткам с уточненной IV стадией была назначена иммунотерапия.
Выводы. Полученные результаты позволяют утверждать,
Таблица 2
Оптимальные значения п (ОМБ, малоновый диальдегид, глутатионредуктаза, глутатионтрансфераза, каталаза) для III и IV стадий РЯ
Стадия ОМБ при длине волны, нм Малоновый диальдегид Каталаза Глутатионтрансфераза Глутатионредуктаза
356 370 430 530
III 5,25719 6,46599 3,93999 2,17439 0,996194 3,54199 1,89599 1,57761
IV 2,29001 2,63601 1,53241 0,53801 0,617518 0,28201 4,01999 0,67055
Таблица 3
Оптимальные значения п (ИЛ-lß, ИЛ-6, ИЛ-10, ИФН-у, ФНО-а, ММП-2, ММП-9 в сыворотке) для III и IV стадий РЯ
Стадия ИЛ-6 ИЛ-10 Hn-1ß ИФН-у ФНО-а ММП-2 ММП-9
III 3,69995 0,88705 2,4446012 1,237234 1,044316 2,0501928 3,932618
IV 1,35715 1,25999 2,304716 1,155144 0,9374848 1,780624 3,879402
Таблица 4
Интервалы показателей на III и IV стадиях РЯ (лейкоциты, нейтрофилы, Her-2/neu, CA-125, ММП-2, ММП-9 в нейтрофилах)
Стадия Лейкоциты Нейтрофилы Her-2/neu СА-125 ММП-2 ММП-9
III [0; 1,278] [0; 0,993] [2,765; +<] [1,690; +<] [0,907; +<] [0; 2,341]
IV [1,278; +<] [0,993; +<] [0; 2,765] [0; 1,690] [0; 0,907] [2,341; +<]
Таблица 5
Интервалы показателей на III и IV стадиях РЯ (ОМБ, малоновый диальдегид, глутатионредуктаза, глутатионтрансфераза, каталаза)
Стадия ОМБ при длине волны, нм Малоновый Каталаза Глутатион- Глутатион-
356 370 430 530 диальдегид трансфераза редуктаза
III [4,638; +<] [5,469; +<] [3,232; +<] [1,312; +<] [1,088; +<] [0,900; +<] [0; 3,728] (1,370; +<]
IV [0; 4,638] [0; 5,469] [0; 3,232] [0; 1,312] [0; 1,088] [0; 0,900] [3,728; +<] [0; 1,370]
Таблица 6
Интервалы показателей на III и IV стадиях РЯ (ИЛ-lß, ИЛ-6, ИЛ-10, ИФН-у, ФНО-а, ММП-2, ММП-9 в сыворотке)
Стадия ИЛ-6 ИЛ-10 ИЛ-tß ИФН-у ФНО-а ММП-2 ММП-9
III [2,922; +<] [0; 1,480] [3,355; +<] [1,690; +<] [1,398; +<] [2,697; +<] [5,523; +<]
IV [0; 2,922] [(1,480; +<] [0; 3,355] [0; 1,690] [0; 1,398] [0; 2,697] [0; 5,523
Таблица 7
Значение функции правдоподобия Z1 для параметров диагностики РЯ у пациентки с III стадией заболевания
№ п/п Показатель Стадия Значение функции правдоподобия z.
1 Лейкоциты III 0,678
2 Нейтрофилы III 0,588
3 ОМБ, 356 нм IV 2,04
4 ОМБ, 370 нм III 0,292
5 ОМБ, 430 нм III 0,027
6 ОМБ, 530 нм III 1,179E-07
7 Her-2/neu IV 1,007
8 CА-125 III 0,938
9 ММП-2 в сыворотке IV 0,0007
10 ММП-9 в сыворотке III 1
11 ММП-2 в нейтрофилах IV 1,06
12 ММП-9 в нейтрофилах III 0,992
13 ИЛ-6 III 1,045
14 ИЛ-10 III 0,665
15 ИЛ-10 IV 1,079
16 ИФН-у IV 1,094
17 ФНО-а IV 1,144
18 Малоновый диальдегид III 1,083
19 Каталаза IV 1
20 Глутатионтрансфераза III 1,1111
21 Глутатионредуктаза III 0,463
Таблица 8
Значение функции правдоподобия Z1 для параметров диагностики РЯ у пациентки с IV стадией заболевания
№ п/п Показатель Стадия Значение функции правдоподобия z
1 Лейкоциты IV 1,001
2 Нейтрофилы IV 1,1051
3 ОМБ, 356 нм IV 4,7999
4 ОМБ, 370 нм IV 3,632
5 ОМБ, 430 нм IV 3,442
6 ОМБ, 530 нм IV 3,227
7 Her-2/neu IV 1,015
8 CА-125 IV 1,017
9 ММП-2 в сыворотке IV 1,093
10 ММП-9 в сыворотке III 0,989
11 ММП-2 в нейтрофилах IV 1,048
12 ММП-9 в нейтрофилах III 0,859
13 ИЛ-6 IV 2,689
14 ИЛ-10 III 1
15 ИЛ-10 IV 1,055
16 ИФН-у IV 1,062
17 ФНО-а IV 1,1184
18 Малоновый диальдегид IV 2,099
19 Каталаза IV 157,65
20 Глутатионтрансфераза IV 0,2478
21 Глутатионредуктаза IV 4,713
что уровень ОМБ может служить достоверным показателем для дифференциальной диагностики III и IV стадий РЯ.
Получено положительное решение на выдачу патента на данный способ дифференциальной диагностики РЯ.
Работа выполнена при поддержке государственного задания Минобрнауки России.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бахидзе Е.В., Малек А.В. Значение методов исследования генома для диагностики и терапии рака яичника. Вопросы онкологии. 2005. 51(1): 50-1.
2. Roberta De Agelis et al. Eurocare-5. The Lancet oncology. 2014. 15(1): 23-4.
3. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2004. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина. 2006. 17(3), прил.1: 97.
4. Charles N., Zanden Jr., Michal J. Birher, Anil K. Sood. Ранние этапы патогенеза рака яичников. J. of clinical oncology. (Русское издание). 2008. 2 (2): 149-60.
5. Урманчеева А.Ф., Кутушева Г.Ф. Диагностика и лечение опухолей яичников: С.-Пб.; 2001.
6. Wright A.A., Zhang B., Keating N.L., Weeks J.C., Prigerson H.G. Associations between palliative chemotherapy and adult cancer patients' end of life care and place of death: prospective cohort study. BMJ. 2014. 348: 1219.
7. Nappa U., Lindqvist O., Rasmussen B.H., Axelsson B. Palliative chemotherapy during the last month of life. Ann. Oncol. 2011. 22(11): 2375-80.
8. Adam H., Hug S., BosshardG. Chemotherapy near the end of life: a retrospective single-centre analysis of patients' charts. BMC Palliat Care. 2014. 13: 26.
9. Mehta D.A., Hay J.W. Cost-effectiveness of adding bevacizumab to first line therapy for patients with advanced ovarian cancer. Gynecol. Oncol. 2014. 132(3): 677-83.
10. Чиссов В.И., Давыдов М.И., ред. Онкология. Национальное руководство. Москва, 2008.
11. Антонеева И.И., Генинг Т.П., Абакумова Т.В., Арсланова Д.Р., Генинг С.О. Алгоритм диагностики прогрессирующих форм рака яичников. Медицинский альманах. 2012. 4 (23): 29-31.
12. Zhang Y., Chen F. Reactive oxygen species (ROS), troublemakers between nuclear factor-B (NF-B) and c-Jun NH2-terminal kinase (JNK). Cancer Res. 2004. 64: 1902-5.
13. Lopez-Lazaro M. A new view of carcinogenesis and an alternative approach to cancer therapy. MolMed. 2010. 16(3-4): 144-53.
14. Lopez-Lazaro M. Excessive superoxide anion generation plays a key role in carcinogenesis. Int. J. Cancer. 2007. 120 (6): 3075-83.
15. Martinovich G.G., Golubeva E.N., Cherenkevich S.N., et al. Redoks-biotekhnologii as a basis for new strategy in antineoplastic Therapies. Messenger of national academy of Sciences of Belarus. Series of medical sciences. 2012. 2: 85-103.
16. Droge W. Free radicals in the physiological control of cell function. Physiol. Rev. 2002. 82(1): 47-95.
Поступила 15.02.15
REFERENCES
1. Bahidze E.V., Malek A.V. The value of genome research methods for diagnosis and therapy of ovarian cancer. Voprosy oncologii. 2005. 51 (1): 50-1. (in Russian)
2. Roberta De Agelis et al. Eurocare-5. The Lancet oncology. 2014. 15 (1): 23-4.
3. Davydov M.I., Axel E.M. Statistics malignancies in Russia and the CIS countries in 2004. Journal of N. N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS. 2006. 17 (3), pril. 1: 97. (in Russian)
4. Charles N., Zanden Jr., Michal J. Birher, Anil K. Sood. The early stages of the pathogenesis of ovarian cancer. J. of clinical oncology. 2008. 2 (2): 149-60. (in Russian)
5. Urmancheeva A.F., Kutusheva G.F. Diagnosis and treatment of ovarian tumors [Diagnostika i lechenie opukholei yaichnikov]. St.-Pb.; 2001. (in Russian)
6. Wright A.A., Zhang B., Keating N.L., Weeks J.C., Prigerson H.G.
Associations between palliative chemotherapy and adult cancer patients' end of life care and place of death: prospective cohort study. BMJ. 2014. 348: 1219.
7. Näppä U., Lindqvist O., Rasmussen B.H., Axelsson B. Palliative chemotherapy during the last month of life. Ann. Oncol. 2011. 22 (11): 2375-80.
8. Adam H., Hug S., Bosshard G. Chemotherapy near the end of life: a retrospective single-centre analysis of patients' charts. BMC Palliat Care. 2014 13: 26.
9. Mehta D.A., Hay J.W. Cost-effectiveness of adding bevacizumab to first line therapy for patients with advanced ovarian cancer. Gynecol. Oncol. 2014. 132 (3): 677-83.
10. Chissov V.l., Davydova M.I., ed. Oncology. National leadership. Moscow, 2008. (in Russian)
11. Antoneeva I.I., Gening T.P., Abakumova T.V., Arslanova D.R., Gening S.O. Algorithm for the diagnosis of progressive forms of
ovarian cancer. Meditsinsky al'manakh. 2012. 4 (23): 29-31. (in Russian)
12. Zhang Y., Chen F. Reactive oxygen species (ROS), troublemakers between nuclear factor-B (NF-B) and c-Jun NH2-terminal kinase (INK). Cancer Res. 2004. 64: 1902-5.
13. Lopez-Lazaro M. A new view of carcinogenesis and an alternative approach to cancer therapy.Mol. Med. 2010. 16 (3-4): 144-53.
14. Lopez-Lazaro M. Excessive superoxide anion generation plays a key role in carcinogenesis. Int. J. Cancer. 2007. 120 (6): 3075-83.
15. Martinovich G.G., Golubeva E.N., Cherenkevich S.N., et al. Redoks-biotekhnologii as a basis for new strategy in antineoplastic Therapies. Messenger of national academy of Sciences of Belarus. Series of medical sciences. 2012. 2: 85-103.
16. Droge W. Free radicals in the physiological control of cell function. Physiol. Rev. 2002. 82 (1): 47-95.
Reseived 15.02.15
иммунология
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015
УДК 616.98:578.825.12]-07:616.153.962.4-78.33
Никитина А.В.1, Помелова В.Г.1, Соколова М.В.2, Осин Н.С.3, Марданлы С.Г.4
выбор антигенов для определения иммуноглобулина g к цитомегаловирусу на основе технологии фосфан™
1ФГУП «ГосНИИ биологического приборостроения» ФМБА России, 125424, г. Москва; 2ГБУЗ г. Москвы «Инфекционная клиническая больница № 1 Департамента здравоохранения г. Москвы», 125367, г. Москв; 3ЗАО «Иммуноскрин», Москва, 125424, г. Москва; 4ЗАО «ЭКОлаб», 142530, Московская обл., г. Электрогорск
Представлены результаты выбора композиции антигенов цитомегаловируса в составе мультиплексного теста на основе технологии ФОСФАН™. При определении иммуноглобулина G (IgG) к этому вирусу лучшие показатели чувствительности зарегистрированы с мозаичным антигеном, содержащим иммунодоминантные последовательности белков pp150, gB, pp28 и pp52; достоверно ниже - с фосфопротеином рр150; самые низкие - с белками gB и pp65. Специфичность составила от 93,5 до 96,8% независимо от вида антигена. Мозаичный антиген обеспечил лучшее соотношение между чувствительностью и специфичностью иммуноанализа и рассматривается в качестве основного компонента иммуно-чипа для определения IgG к цитомегаловирусу.
К л ю ч е в ы е с л о в а : цитомегаловирус; мультиплексный иммуночиповый анализ на основе технологии ФОСФАНТМ; мозаичный антиген; рекомбинантные белки pp150, gB, pp65, pp28, pp52.
Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60 (10): 36-39. NikitinaA.V1, Pomelova VG.1, SokolovaM.V2, OsinN.S.3, Mardanly S.G.4
THE SELECTION OF ANTIGENS FOR DETECTING OF IMMUNOGLOBULIN G TO CYTOMEGALOVIRUS ON THE BASIS OF FOSFAN TECHNOLOGY
1The state research institute of biological instrument engineering of the Federal medical biological agency of Russia, 125424 Moscow, Russia; 2 The infectious clinical hospital № 1 of the health department of Moscow, 125367Moscow, Russia; 3 "Immunoscreen", 125424 Moscow, Russia; 4"ECOlab", 142530 Elektrogorsk, Moscovskaia oblast, Russia
The results of selection of composition of antigens to cytomegalovirus in the structure of multiplex test on the basis of FOSFAN™ technique are presented. In the process of detection of immunoglobulin G (IgG) to this virus the best indicators of sensitivity were registered with mosaic antigen containing immunodominant sequences of proteins pp150, gB, pp28 and pp52; reliably lower indicators of sensitivity was registered with phosphoprotein pp150; the lowest indicators of sensitivity were registered with proteins gB and pp65. The specificity made up from 93.5% to 96.8% independently of type of antigen. The mosaic antigen ensured the best ratio between sensitivity and specificity of immunoassay and is considered as the main component of immunochip for detecting IgG to cytomegalovirus.
Keywords: cytomegalovirus; multiplex immunochip analysis on the basis of FOSFAN™; mosaic antigen; recombinant proteins pp150, gB, pp65, pp28, pp52.
Citation: Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2015; 60 (10): 36-39. (in Russ.)
Для корреспонденции: Никитина Анна Викторовна, [email protected] For correspondence: NikitinaA.V., [email protected]
