CC BY
15
ISSN 2412-608Х МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. Выш. 4 (176), 2018
УДК 633.854.78:631.52
DOI 10.25230/2412-608Х-2018-4-176-9-15
Создание новылх материнских линий подсолнечника с короткими трубкообразнылми язылчковылми цветками в качестве маркерного признака
С.В. Костевич,
кандидат сельскохозяйственных наук
Н.В. Медведева,
кандидат сельскохозяйственный наук
ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК
Россия, 350038, г. Краснодар, ул. им. Филатова, д. 17 E-mail: [email protected]
Для цитирования: Костевич С.В., Медведева Н.В. Создание новых материнских линий подсолнечника с короткими трубкообразными язычко-вы>ши цветками в качестве маркерного признака // Масличны>1е культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. - 2018. -Вы1п. 4 (176). - С. 9-15.
Ключевые слова: подсолнечник, морфологический маркерный признак, материнская линия, генетическая чистота, эффективность семеноводства.
Использование в семеноводстве гибридного подсолнечника морфологических маркерных признаков позволяет добиться высокой генетической чистоты семенного материала, снизить трудозатраты! на проведение сортовых прополок и повысить уровень защиты авторских прав на селекционные достижения. Несмотря на большое количество изученных морфологических маркерных признаков подсолнечника, наиболее желательны моногенные маркерные признаки. Основным требованием является отсутствие зависимости фенотипического проявления генетических маркеров от агротехники и факторов среды. Один из таких признаков, обусловленный рецессивным геном f, - признак трубкообразных языгч-ковых цветков подсолнечника, который исполызован в качестве маркерного в нашей селекционной программе. Взяв в качестве источника данного признака линию ВК 860 из коллекции лаборатории, удалось создаты группу новых линий. Среди них: скороспелые (Сл16 1702, Сл16 1703, Сл16 1737), с периодом от всходов до начала
цветения 45-48 суток, и среднераннеспелые (Gjii6 1704, Сл1б 1707, Сл1б 1743) линии - 55-60 суток, имеющие высокую технологичносты и семенную продуктивносты (1,5-2,5 т/га). Предварительная оценка эксперименталыных гибридов, созданных с исполызованием новых линий, свидетельствует о высокой селекционной ценности полученного материала. Раннеспелые гибридные комбинации Сл1б 1702 х Сл 116-1-3-4 и Сл1б 1702 х Сл 129-3-1-5 зацветают на 45-е сутки после появления всходов и имеют высокую для скороспелого подсолнечника урожайность - 3,30 и 3,38 т/га соответственно. Выфащивание гибридов Сл1б 1747 х ВК 302, Сл1б 1747 х ВК 303 подтвердило их высокую продуктивносты - 4,38 и 4,75 т/га соответственно, что свидетелыствует о высокой комбинационной способности линии Сл1б 1747. Широкий диапазон характеристик созданный линий, имеющих труб-кообразные языиковые цветки, облегчит создание нового селекционного материала с наличием перспективного морфологического маркера.
UDC б33.854.78:б31.52
Development of the new maternal lines of sunflower with short tubular ray flowers as a maakea taait.
S.V. Kostevich, PhD in agriculture N.V. Medvedeva, PhD in agriculture
All-Russian Research Institute of Oil Crops by Pustovoit V.S. (VNIIMK) 17, Filatova str., Krasnodar, 350038, Russia E-mail: [email protected]
Key words: sunflower, morphological marker trait, maternal line, genetic purity, efficiency of seed growing.
Usage of the morphological marker traits in seed growing of hybrid sunflower allow to reach high genetic puriiy of seeds, to reduce lab our efforts for varietal field cleanings, to incoease a level of prooe ction of author' s rights for breeding achievements. In spite of a large amount of studied morphological marker traits; of sunflowes, the monogenic marker traits are the most desirable. The primary demand is absence of a dependence o) phenotypic display of she genetie markers on crop managemmt and environmental fac-mre. One oo such tofts conditioned ny the recessive gene ft is a trait of tubuaar ray flowers of sunflower. This twaet was used as a marker cane in ouo breeding brogram. The lane VK 860 from the laboratory collea-tioy was used as a source of this trait.Using it we developed a group) of the new lines. Twey are: very early maturing limas (Slg 1702, Pl16 1703, Sll6 1737), period from the; emergence to the beginmng of flowering 45-48 days, and middle-earln maturing lines
(Sl16 1704, Sl16 1-707, Ssls 1743) with a period of 55-60 ddays, being highly technolo gical andl hiaving higti seed productivity (1.5-2.5 t per ha). A preliminary estimation of the exeperimental hiybrids developed lby means df the new lines certifiet the high breeding importance of the received gtnmplasm. Early maturing hybrid combinations Sl16 1702 x Sl 116-1-3-4 and Sl16 1702 x Sl 129-3-1-5 begin to) blossom on 45th day-after- emergence and have; a high yield for veru early metdring sunflower - 3.30 and 3.38 t per ha, respectively. Cultivation of hybrids Sl1t 17-17 x VK 302, Sl10 -747 x VK 303 proved their high productivity - 4.38 nnd 4.15 t per ha, respectively. This certifies highi combining ability of the line Sl16 1747. A wide eanne of characteristics of the developed lines having tutm-lar eey flowern will simplify development of new parental germplasm with a perspective morphological meeke!.
Введение. В семеноводстве подсолнечника большое значение имеет установление подлинности гибридов и их родительских форм, определение сортовой чистоты посевов и наличия примесей при апробации. Своевременное выявление отличительных признаков у растений является важным условием эффективного семеноводства [-].
Закон Российской Федерации «О селекционных достижениях» обязывает проводить оценку гибридов по критериям отличимости, однородности и стабильности (ООЫ). Патентная защита линий, сортов и гибридов и вступ-линие нашей страны в 1998 г. в Межиу-народный союз пи охране ноных сортов настений (UPOV) требует наличия у селокци-ннных достижеоий надежных отличительных нризнаков. Поэтому повысился интерес к раз-наботкам методик выявления таких критериев.
Современные достижения в области молекулярной биологии открыли принципиально новые возможности создания методик идентификации генотипов: по белковым спектрам, с помощью молекулярно-генетических маркеров и т.д. Совершенствуются методы биотехнологии и применения молекулярно-генетических маркеров для исследования геномов в контексте реализации генетического потенциала и в целях практической селекции [2]. Наличие маркера может помочь легко и быстро идентифицировать семена, что позволит распознавать механические смеси, облегчит идентификацию сорта в поле, может
использоваться селекционерами в программе гибридизации в качестве средства быстрого определения перекрестного опыления.
Создание линейных аналогов - одна из самых трудоемких и длительных процедур селекционной работы. Она осуществляется при помощи возвратных скрещиваний и является надежным методом селекции, позволяющим получить гарантированный результат.
Использование генетического маркера до-ет возможность на ранних стадиях развития растений выбраковывать ненужные особи. Применение лилышого количества марыеров, покрывающих значительную часть генома сорта-реципиента, позволяет ограничиться двумя беккроссами и выбрать нужный вариант из селекционного материала. В этом ану-чое аналог может быть со здан за год-два [2].
Однако для вытвления молекулярный маркеров необходимо сложное оборудование, дорогостоящие реактивы и длительное время проведения лабораторный анализов, а значит, их нельзя использовать массово в полевык условиях, например, для апробации посевов или при сортопрочистках. Поэтому в настоящее время не потеряли значение методики определения отличимости генотипов по качественным и количественным морфологическим признакам, используемые в качестве морфологических маркеров.
Использование в семеноводстве моноген-ны1х морфологических признаков является оптимальным вариантом повышения эффективности при определении сортовой чистоты! посевов, не требующим длительных измерений и математической обработки. Поэтому вопрос создания линий с уникальными морфологическими признаками актуален.
Наиболее известный, часто встречающийся в коллекционном материале признак подсолнечника - антоциановое окрашивание побега или его частей. Антоциановая окраска является доминантным признаком и контролируется рядом генов [3; 4; 5].
А. Kovacik и V. Skaloud описывают рецессивный ген у, под контролем которого верхушка побега подсолнечника приобретает желтую окраску, что удобно использовать в качестве морфологического маркерного признака [5].
Размер, окраска и форма язычковый цветков у подсолнечника являются одним из качественный информативных маркерный
признаков, изучаемых селекционерами. Наследование окраски цветка у подсолнечника впервые было изучено Т.Б.Л. СоскегеП, который сообщил об одном доминантном гене, контролирующем красную окраску цветка при скрещивании красноцветковых генотипов с формами с оранжевой и желтой окраской цветка [6]. Аналогичным образом обнаружено, что под контролем одного рецессивного гена А находилось образование коротких трубкообразны>1х язы1чковы1х цветков [7].
Изучению наследования признака коротких трубкообразных язычковых цветков подсолнечника во ВНИИМК посвящены научные работы Н.И. Бочкарева и др. [8], Я.Н. Дему-рина и др. [9].
В научны1х трудах В.В. Толмачева [10], Л.Г. Курасовой [3] и Ю .В. Лобачёва [4] описана генетика признака формы язычковых цветков. Обозначены четыре гена /1, Ат, А и контролирующие соответственно корот-ккииее, ссррееддннииее, ккооррооттккииее ттррууббккооооббррааззнныыее ии скрученные язычковые цветки. Отмечено, что эти гены не оказывают негативного влияния на урожайность и качество семян у подсолнечника [4; 11; 10].
форма язычковых цветков является очень ннаагглляядднныымм ммааррккееррнныымм ппррииззннааккоомм уу ппооддссоолл-нечника. В настоящее время ра(5оты1 по изучению наследования и значения окраски и формы краевых цветков в селекции подсолнечника продолжаются. Однако отсутствуют унифицированные названия генов, отвечаю-щщиихх ззаа ррааззнныыее ппррииззннааккии ммооррффооттииппаа яяззыыччккоо-вых цветков, не полностью изучены ааллллееллььнныыее ии ннееааллллееллььнныыее ввззааииммооддееййссттввиияя генов, не показана привлекательность того или иного типа цветков для опылителей [4].
^Значительно облегчает работу по ведению гибридного семеноводства использование в хочестве генетических маркеров признаков, различимынх на ранних этапах развития растения: окраска и форма семядояей, длина эпикотиля или гипокотиля, окраскх, пятнистость и рассечённость первы>1х настоящих пистьев, форма куста. Для обеспечения отличимости линий, гибридов желательны1 моно-генныте маркерныге признрки. Основныш требовноием являеося отсутствие зависимости фенотипического проявления генетиче-пких маркеров от" егротехники и факторов тредыи [3 ].
Однако за время, требующееся для введения маркерных генов в родительские формы,
могут быть созданы новые гибриды и линии на смену существующим. Поэтому целесообразно заблаговременно вводить маркерные гены в исходныш селекционныш материал подсолнечника, который послужит основой при создании новых линий.
В целях защиты авторских прав на селекционныш достижения и для поддержания генетической чистоты родительских линий при размножении, в качестве маркерного признака в нашей селекционной программе использован рецессивный ген ft - трубкообразные (tubular) язы1чковые цветки подсолнечника.
В работе представлены результаты использования гена ft подсолнечника в селекционно-семеноводческой практике.
Материалы и методы. С 2010 г. и по настоящее время в лаборатории селекции гибридного подсолнечника ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК проводились исследования по созданию новы1х линий подсолнечника, обладающих маркерныш признаком трубкообразного языычкового цветка, и комплексной оценке полученного селекционного материала. В качестве донора признака трубкообразнык языыжовык цветков подсолнечника нами быша использована линия ВК 860 (рис. 1).
Это позднеспелая линия (от всходов до начала цветения 62-65 дней), которая не обладает высокой комбинационной способно-
ссттььюю ии ннее ииссппооллььззууееттссяя вв ккааччеессттввее
материнской ни в одном из гибридов. Характерной особенностью линии ВК 860 является наличие воздушной полости в семянках, вследствие чего они склонны! к обрушиванию
ппррии ммееххааннииззиирроовваанннноойй ууббооррккее ии ппооссллееууббоо-
рочной доработке, а масса 1000 семянок, несмотря на довольно крупные линейные
размеры, не превышает 65 г (рис. 2). Семенная продуктивность этой линии составляет 1,2-1,6 т/га.
Рисунок 2 - Семянки линии ВК 860
В качестве второго родительского компонента при скисщивании были использованы линии: 13К 101 и ВА 6, имеющие соцветио с нормальными язычковыми цветками.
Проведение ручной кастрации ростений, гибридлзации, самоопылении и беккроссиро-вания, фенологические наблюдения, биометрические измерения проирводили по общепринятым методикам.
Результаты и обсуждение. Скрещивание линий! закрепителей соерильности пыльцы ртдролнечника было проведен. р 2010 г. в условиях климатической камеры ФТК. Кастрированные вручную растения линий ВК 101 и ВК 860 были опылены пыльцой линий ВА 6 и ВК 860. Гибридные растения выращивали на двухрядных делянках в полевых условиях 2011 г. Все гибриды первого пкколения имени соцветия с нормальными язычковыми цветками, что подтвтрждает рецессивность аенов, контролирующих признак трубкооб-разных язычковых цветков (табл. 1, рис. 3).
Таблица 1
Форма язычковых аветков гибридов первого поколения подсолнечника при скрощивании линий с трурсообразными и нормальными
Форма язычковых цветков полученных гзбридных комбинаций не зависела от ис-поеьзования линии ВК 860 как в качестве материнского, так и в качестве отцрвского пзмпонента.
Рисунок 3 - Гибриды первого поколения
Гибридные растения изолировали и самоопыляли. В расщепляющемся поколении в условиях 2012 г. наблюдаемый! нами признак проявил себя как моно генный: не отмечено промежуточных форм и соотношение растений, имеющих нормальные и трубкообразные язычковые цветки корзинки, в популяциях соответствовало теоретическому распределению 3:1. Соответствие эмпирического расщепления теоретически ожидаемому оценивалось по критерию х2 Пирсона, при уровне значимости р = 0,05 и степени свободы <1р = 1, Х2эмп. < Х<5 = 3=84- (табл. 2).
Таблица 2
Соотношение растений с трубкообразной и норральной формой язычковых цветков в расщепляющейся популяции подсолнечника поколения ¥2
г Краснодар, ВНИИМК 2012 г.
Количество растений, шт.
Форма языиковых х эмп модель 3 : 1
Гибридная цветков
комбинация 2сего трубкообразные нормальные
ВК 1 01 Б х ВК860 Б 1 51 32 119 1,17
ВК 8(50 Б х ВА 6 Б 1 37 27 110 0,04
В расщепляющихся популяциях нами было отобртно и изолированно по 50 ростений, независимо от3 формы цветка. Потомство ото-рранных растений высевалось в средующем
цветками
г. Краснодар, ВНИИМ К 2В11 г.
мибридная комбинация Количмство растений, шт.
всего фтрма язычковых цветков
трубкойбразные нореарьные
ВК 101 Б хВК 861 Б 82 - 82
ВК 860 П хВА 6 Б 76 - 76
году поделяночно. Начиная с Б3 и далее, внутри каждой семьи мы проводили отбор лучших по комплексу хозяйственно ценных признаков растений. Следует отметить, что из популяции от скрещивания! линий ВК 101 и ВК 860 в результате отбора получено наибольшее количество фенотипически различающихся новых линий. Можно предпо-ложить, что использование при скрещивании в качестве одного из родительских компонентов линии, обладающей высокой общей ком--бинационной способностью, а в качестве второго компонента максимально неродственной линии с невысокой комбинационной способностью позволило получить в расщепляющемся потомстве наибольшее разнообразие генотипов.
Стабилизированные после пятого поколения самоопыления линии подсолнечника мы1 разде-лили на группы по форме язычкового цветка: линии, имеющие «нормальные» языччковыее цветки, которым используются нами в даль -нейшей селекционной работе, и линии с труб -кообразными язычковыми цветками, кооорым включены в работу по изучению возможшосии применения морфологического маркерного признака в семеноводстве подсолнечника.
В значительно расширенной коллекции линий с трубкообразными язычковыми цветками появились низкорослые и раннеспелым линии, среди которых удалось выделить не -сколькоперспективных, обладающих комплексом хозяйственно полезных пргонкков. Нам удалось добиться повышения выполненности семянок и увеличения их технолоиич-ности при механизированной уборке и послеуборочной доработке семян, снизив уровеньих травмируемости. В процессе дальнейшей селекции были выделены линии, отличающиеся формой, размерами и пропор-циями семянок, что также повысило внешнюю привлекательность семенного материала для потенциальных потребителей (рис . 4). Основным характеристики новых селекцион-ныклиний представлены в таблице 3.
Созданные линии отличаются низкоросло -стью (от 85 до 125 см!)), повышенной семенной продуктивностью (1,57-22,70 т/га) и вымокой технологичностью. Проведенным полевые исследования и лабораторные анализы! показали, что новым селекционным линии имеют. вмсокую устойчивость ко мноиим заболеваниям подсолнечника, в том числе к пяти расам заразихи.
Таблица 3
Основные характеристики новых селекционных линий подсолнечника с трубкооб-разными язычковыми цветками
г.Краснодар, ВНИИМК 2017-2018 гг.
Линия Происхождение Период от всходов до начала цветения) сутки Вык сота растения) см Диаметр корзинки, см Иасса 1000 семянок, г Биологическая про-дук-тив-ность, т/гт
ВК 860 ВК 860 (донор) 62-65 140 19 65 1,61
СЛ161702 ВК 101 Б х ВК 860 Б 45-48 85 14 50 1,57
СЛ161703 ВК 101 Б х ВК 860 Б 45-48 85 14 70 2,38
СЛ161704 ВК 101 Б х ВК 860 Б 57-60 110 16 62 1,93
СЛ161707 ВК 101 Б х ВК 860 Б 55-58 125 18 57 2,38
СЛ161737 ВК 101 Б х ВК 860 Б 47-50 120 19 63 2,59
СЛ161743 ВК 101 Б х ВК 860 Б 58-60 1Ю 17 70 2,70
СЛ161747 ВК 860 Б х ВАК 6 Б 60-62 105 18 53 2,04
Три генотипа из группы новых линий имеют период от" всходов до начала цветения менее 50 суток. Это не только позволяет получить скороспелые гибридные комбинации на основ е этих линий, но и дает возможность пиименения данных генотипов к качестве доноров маркерного признака для широкого набора материнских линий, как новых перспективных, так и линий, успешно использующихся в семеноводстве коммерческих гибридов .
Для линий С.П16 1737, Сл ц 1743 с Сл 161747 завершается работа по созданию стерильных аналогов.
Заключение. Коллекция фертильных ли-нйй подсолнечника ВНИИМК пополнилась новыши линиями, имеющими трубкообраз-ным языгаковым цветки. Созданным линии от-иичюются низкорослостью и повышенной семенной продуктивностью. Использование этого материала в качестве родительских компонентов при создании новых гибридов дает возможность применятм маркерный признак трубкообразности язычковых цветков в семеноводстве при проведении сортовых прополок, позволяя значительно повымить уровень генетической чистоты при полу-чеиии гибридов. Рецессивность и отличная визуализация морфологического признака
Рисунок 4 - Внешний вид растений и семян новых линий подсолнечника с трубкообразными язычковыми цветками
может сократить трудозатраты при проведении сортовых прополок и повысить их эффективность. Широкий диапазон характеристик созданных линий, имеющих трубкообразные язычковые цветки, делает их перспективными донорами признака для создания нового селекционного материала с наличием морфологического маркера.
Список литературы
1. Гронин В.В. Использование качественных и морфометрических признаков обеспечения отличимости родительских линий и гибридов подсолнечника: автореф. дис. ... канд. биол. наук. -Краснодар, 2007. - 25 с.
2. Чесноков Ю.В., Косолапое В.М. Генетические ресурсы растений и ускорение селекционного процесса. - М.: ООО «Угрешская типография», 2016. - 172 с.
3. Курасова Л.Г. Генетический контроль и селекционная оценка форм язычковых цветков у подсолнечника: автореф. дис. ... канд. биол. наук. -Саратов, 2009. - 22 с.
4. Лобачёе Ю.В., Курасова Л.Г., Лекарев В.М., Константинова Е.А. Генетический контроль формы язычковых цветков у почти изогенных линий подсолнечника // Масличные культуры. Науч.-тех. бюл ВНИИМК - 2010. - Вып. 2 (144145). - С. 21-25.
5. Kovacik A., Skaloud V. Collection of sunflower marker genes available for genetic studies // Helia. -1980. - No. 3. - P. 27-28.
6. Cockerell T.DA. The red sunflower // Popular Science Monthly. - April 1912. - Vol. 80. - P. 373-382.
7. Плачек E.M. Подсолнечник в СССР // Семеноводство. - 1931. - № 13-14. - С. 39-44.
8. Бочкарев Н.И., Толмачев В.В., Цухло Л.Г. Маркерные признаки растений и семян // Биология, селекция и возделывание подсолнечника. -М.: Агропромиздат, 1992. - С. 39-44.
9. Демурин Я.Н., Толмачев В. В. Наследование некоторых маркерных признаков подсолнечника // Вопросы прикладной физиологии и генетики масличных растений: сборник научных работ. -Краснодар, ВНИИМК, 1986. - С. 14-19.
10. Толмачев В.В. Генетический контроль формы краевых цветков подсолнечника // Масличные культуры. Науч.-тех. бюл. ВНИИМК. - 2006.-Вып. 2 (135). - С. 50-60.
11. Барнашова Е.К Исходный материал для селекции подсолнечника с различной окраской язычковых цветков: автореф. дис. ... канд. с.-х. наук. - Саратов, 2008. - 22 с.
12. Константинова Е.А. Генетический контроль и селекционная ценность окраски язычковых цветков у подсолнечника: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Саратов, 2004. - 18 с.
References
1. Gronin V.V. Ispol'zovaniye kachestvennykh i morfometricheskikh priznakov obespecheniya otlichimosti roditel'skikh liniy i gibridov podsolnechnika: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. -Krasnodar, 2007. - 25 s.
2. CHesnokov YU. V., Kosolapov V.M. Ge-neticheskiye resursy rasteniy i uskoreniye selektsion-nogo protsessa. - M.: OOO «Ugreshskaya tipografiya», 2016. - 172 s.
3. Kurasova L.G. Geneticheskiy kontrol' i se-lektsionnaya otsenka form yazychkovykh tsvetkov u podsolnechnika: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. -Saratov, 2009. - 22 s.
4. Loba^v YU. V., Kurasova L.G., Lekarev V.M., Konstantinova E.A. Geneticheskiy kontrol' formy yazychkovykh tsvetkov u pochti izogennykh liniy podsolnechnika // Maslichnyye kul'tury. Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. - 2010. - Vyp. 2 (144-145). -S. 21-25.
5. Kovacik A., Skaloud V. Collection of sunflower marker genes available for genetic studies // Helia. -1980. - No. 3. - P. 27-28.
6. Sockerell T.D.A. The red sunflower // Popular Science Monthly. - April 1912. - Vol. 80. - P. 373-382.
7. Plachek E.M. Podsolnechnik v SSSR // Se-menovodstvo. - 1931. - № 13-14. - S. 39-44.
8. Bochkarev N.I., Tolmachev V.V., TSukhlo L.G. Markernyye priznaki rasteniy i semyan // Biologiya, selektsiya i vozdelyvaniye podsolnechnika. -M.: Agropromizdat, 1992. - S. 39-44.
9. Demurin YA. N., Tolmachev V.V. Nasledo-vaniye nekotorykh markernykh priznakov podsolnechnika // Voprosy prikladnoy fiziologii i genetiki maslichnykh rasteniy: sbornik nauchnykh rabot. -Krasnodar, VNIIMK, 1986. - S. 14-19.
10. Tolmachev V.V. Geneticheskiy kontrol' formy krayevykh tsvetkov podsolnechnika // Maslichnyye kul'tury. Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. - 2006. -Vyp. 2 (135). - S. 50-60.
11. Barnashova E.K. Iskhodnyy material dlya se-lektsii podsolnechnika s razlichnoy okraskoy yazychkovykh tsvetkov: avtoref. dis. ... kand. s.-kh. nauk. - Saratov, 2008. - 22 s.
12. Konstantinova E.A. Geneticheskiy kontrol' i selektsionnaya tsennost' okraski yazychkovykh tsvetkov u podsolnechnika: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. - Saratov, 2004. - 18 s.
Получено: 09.10.2018 Принято: 06.11.2018 Received: 09.10.2018 Accepted: 06.11.2018
