CC BY
49
гттт
ri
ш
Новости клеточных технологий. Клеточная трансплантология
■
детей, сформировали хрящевую ткань. Никаких значимых различий в морфологическом строении ткани обнаружено не было.
Таким образом, исследователи делают вывод, что хон-дроциты, выделенные от детей с микротией, могут сформировать правильную трехмерную структуру нормальной хрящевой ткани, следовательно, они могут быть использованы в качестве источника для реконструкции ушной раковины методами тканевой инженерии. Это исследование касается лишь тканей, подвергнувшихся действию тератогенных факторов. Нельзя пока сказать то же самое о тканях, клетки которых несут поврежденные гены. Возможность использования аутологичных тканей, несущих «генетические поломки» остается предметом будущих исследований.
Рис. Культура хондроцитов после первого пассажа,
а - от здоровых детей; б - от детей, страдающих микротией. Сканирующая электронная микросопия. Из Laryngoscope 2004; 114: 12 с изменениями.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Милешина Н.А. Особенности функциональной реабилитации врожденных пороков развития органа слуха у детей. Вестник оториноларингологии 2003; 5: 19-22.
2. Солониченко В.Г., Красовская Т.В. Клиническая дисморфология хирургических болезней у детей. Детская хирургия 1998; 4: 4-9.
3. Brent B. Microtia repair with rib cartilage grafts: a review ofpersonal perience with 1000 cases. Clin Plast Surg 2002; 29: 257-71.
Rodriquez A. et al. Characteristics of cartilage engineered from human pediatric auricular cartilage. Plast Reconstr Surg 1999; 103: 1111-9.
Kamil S.H. et al. In vitro tissue engineering to generate a human-sized auricle and nasal tip. Laryngoscope 2003; 113: 90-4. Kamil S.H. et al. Expansion of the number of human auricular chondrocytes: recycling of culture media containing floating cells. Tissue Eng 2004; 10: 139-44.
Подготовил А.В. Волков; по материалам Laryngoscope 2004; 114: 12.
Создание функционирующей ткани слюнной железы человека в эксперименте
+
Около 500000 человек в мире страдает гипофункцией слюнных желез. Ежегодный прирост заболевших составляет от 20000 до 40000 человек. Гипофункция слюнных желез возникает в результате поражения железистой ткани во время лучевой терапии онкологических заболеваний лица и шеи, аутоиммунных поражений, хронических воспалительных заболеваний и пороков развития. Чаще всего на фоне этих состояний, развивается гипосиалия (снижение количества слюны) и ксеростомия (сухость слизистой оболочки полости рта), постепенно прогрессирующая со временем. Больных беспокоит периодическая или постоянная
сухость полости рта. С целью коррекции этого состояния прибегают к пожизненной терапии препаратами группы пилокарпина. Однако постепенно развивающиеся побочные эффекты лишь ухудшают качество жизни пациентов [1-9]. Современные клеточные технологии позволяют создавать органы и ткани de novo. Ранее уже были опубликованы работы по изоляции, культивированию и изучению функции in vitro железистого эпителия слюнных желез [10-14]. В журнале The Laryngoscope опубликовано исследование группы Atala A., демонстрирующее возможность получения функционирующей ткани слюнной железы человека. В качестве
Рис. Первичная культура клеток слюнной железы человека, выделенных из биоптатов,
а - иммуноцитохимическое окрашивание на аквапорин-5; б - иммуноцитохимическое окрашивание на цитокератины AE1/AE3. Из Laryngoscope 2005; 115: 244-48 с изменениями.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 1, 2005
J_CTTE_pages_approved_v6_.pmd
19
25.08.2005, 17:10
4
Б.
■ мм
ш
Новости клеточных технологий. Клеточная трансплантология
20
экспериментальной модели использовались бестимусные мыши, которым имплантировалась тканеинженерная конструкция, состоящая из гландулоцитов слюнных желез человека и матрицы из PGA (полигликоевая кислота). Клетки выделяли из биоптатов слюнных желез пациентов, подвергшихся хирургических вмешательствам на этом органе. После чего клетки железы были размножены в культуре. На PGA-матрицы размером 1х1х0.3 см наносили по 50 млн клеток. Конструкцию помещали под кожу бестимусных мышей на срок 2, 4 и 8 недель.
Через 4 недели, при гистологическом исследовании, определялась железистая структура с ацинусами и выводными протоками. Эти клетки экспрессировали панцитоке-ратин АЕ1/АЕ3 (маркёр железистого эпителия) и синтезировали амилазу. В течение всего времени прогрессивно увеличивалась степень экспрессии аквапорина 5, что указывало на секреторную функцию железы. Уровень экспрессии этих маркёров был сходным с таковым в нормальной
ткани слюнной железы человека. В контрольных группах мышей - имплантация матрицы без клеток и анализ подкожной клетчатки - подобных изменений обнаружено не было. Таким образом, на экспериментальной модели была показана возможность создания функционирующей ткани слюнной железы человека методами тканевой инженерии. Присутствие амилазы и аквапорина 5 указывало на достаточную синтетическую и секреторную активность железистой ткани. Данная технология может быть апробирована у людей, страдающих гипофункцией слюнных желез. Например, при злокачественном новообразовании железы, перед началом химио- и лучевой терапии или при радиационной ксеростомии можно взять образец здоровой железистой ткани размером 1 куб. см. Из этого объёма получить достаточное (для трансплантации и коррекции функции) количество клеточной массы in vitro. Вопрос о создании искусственного выводного протока также можно решить методами тканевой инженерии.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Ивасенко П.И. Хронические воспалительные заболевания околоушных слюнных желез. Автореф. дисс...д-ра мед. наук. Новосибирск, 1995.
2. Коваленко А.Ф. Клинико-экспериментальное исследование патогенеза, диагностики и лечения заболеваний слюнных желез. Автореф. дисс...д-ра мед. наук. Киев, 1982.
3. Ромачева И.Ф., Юдин Л.А., Афанасьев В.В., Морозов А.Н. Заболевания и повреждения слюнных желез. М.: Медицина; 1987. 239 с.
4. Рыбакова М.Г. Аутоиммунные заболевания слюнных желез. Архив патологии 1979; 11: 85-90.
5. Hamlar D.D. et al. Determination of the efficacy of topical oral pilocarpine for postirradiation xerostomia in patients with head and neck carcinoma. Laryngoscope 1996; 106: 972-76.
6. Wiesenfeld D. et al. Bilateral parotice gland aplasia. Brit J Oral Surg 1983; 21; 3: 175-8.
7. Eversole Z.R., Jacobsen P.Z., Stone C.E. Oral and gingival changes in systemic sclerosis (scleroderma). J Periodontol 1984; 55; 3: 175-8.
8. Warde P. et al. A phase III placebocontrolled trial of oral pilocarpine In patients undergoing radiotherapy for head-and-neck cancer. Int J Radiat Oncol Biol Phys 2002; 54: 9-13.
9. Haddad P., Karimi M. A randomized, double-blind, placebocontrolled trial of concomitant pilocarpine with head and neck irradiation for prevention of radiation-induced xerostomia. Radiother Oncol 2002; 64: 29-32.
10. Delporte C. et al. Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands. PNAS 1997; 94: 3268-73.
11. Hokari S.M.K. et al. A restriction endonuclease assay for expression of human a-amylase isozymes. Clin Chim Acta 2002; 322: 113-6.
12. Wang W.H.P. et al. Aquaporin expression in developing human teeth and selected orofacial tissues. Calcif Tissue Int 2003; 72: 222-7.
13. Ma T. et al. Defective secretion of saliva in transgenic mice lacking aquaporin-5 water channels. J Biol Chem 1999; 274: 20071-4.
14. He X. et al. Polarized distribution of key membrane transport proteins in the rat submandibular gland. Pflugers Arch 1997; 433: 260-8.
Подготовил А.В. Волков; по материалам Laryngoscope 2005; 115: 244-48.
Использование коралла, как материала для создания васкуляризованной тканеинженерной конструкции с целью восстановления дефекта нижней челюсти
Одной из актуальных проблем современной челюстно-лицевой хирургии являются дефекты костной ткани нижней челюсти, возникшие в результате травм, воспалительно-деструктивных процессов, онкологических заболеваний и пороков развития. Пациенты с такими заболеваниями вынуждены питаться жидкой пищей, а косметический дефект и социальная дезадаптация вызывают психологическую травму. Широкое использование в реконструктивной хирургии металлических, синтетических и пластиковых конструкций позволяет облегчить страдания больного. Однако эти конструкции обладают рядом принципиальных недостатков [1]. Восстановление костной структуры нижней челюсти могло бы улучшить лечебный эффект, минимизировать послеоперационные осложнения и добиться улучшения качества жизни пациентов. Waгnke Р.Н. с соавт. [6] впервые
в клинической практике использовали тканеинженерную конструкцию из децеллюлированной костной биоматрицы и аутогенного костного мозга у пациента, перенесшего резекцию тела нижней челюсти по поводу онкологического заболевания. Через 7 лет пациент вновь смог есть твердую пищу и был вполне доволен косметическим и функциональным результатом [6].
В настоящее время, технологии тканевой инженерии позволяют получить васкуляризованные костные трансплантаты, готовые к клиническим испытаниям. Однако начало этих испытаний сдерживается законодательством развитых стран, возможно, в связи с недостаточными доклиническими данными [2-5].
В одном из номеров недавнем номере журнала British Journal of Oral and Maxillofacial Surgery опубликовано ис-
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 1, 2005
J_CTTE_pages_approved_v6_.pmd
25.08.2005, 17:10
20
