CC BY
33
камни размером до 1 см до начала лечения и уменьшением числа больных со сладж-синдро-мом.
При сравнении показателей УЗС в подгруппе ХБХ с гиперкинезом (2.1), поступившей на курс традиционного медикаментозного лечения до начала терапии но сравнению с подгруппой 1.1 выявлено достоверно (р<0,001) меньшая толщина еладжа и рефлюкса желчи (р<0,001). В подгруппе 2.2 до лечения но сравнению с подгруппой 1.2 достоверно (р<0,001) чаще регистрировалась усиленная эхогенность печени, перегибы ЖТТ (р< <0,05) и количество больных со еладж-еиндромом (р<0,05). В подгруппе 2.3 до лечения но сравнению с подгруппой 1.3 достоверно чаще, также как и в предыдущих подгруппах, отмечалась усиленная эхогенность печени (р<0,05), уплотненность стенки ЖГ1 (р<0,01) и количество больных, имеющих камни более 1 см в диаметре (р<0,001). Обращает внимание, что у больных подгруппы 2.3 не
был ни в одном случае диагностирован сладж-еиндром (табл.1).
После лечения различий но данным показателей УЗС в действии на течение ХБХ с гиперкинезом (подгруппы 1.1 и 2.1) санаторно-курортного и медикаментозного курсов не найдено. В подгруппе 1.2 обнаружена значимая (а<0,001) отрицательная корреляционная связь с наличием у больных еладж-еиндрома и его толщиной но сравнению с подгруппой 2.2. В подгруппе 1.3 у одного больного отошли камни, чего не отмечено у больных, пролеченных медикаментозно. Итак, в сравнении с медикаментозным курсом лечения выявлена высокая эффективность санаторнокурортного лечения только в подгруппе больных ХБХ с гинокинезом. Также в отличие от медикаментозного курса отмечается, литолитичеекое действие санаторно-курортного курса лечения, что можно объяснить улучшением коллоидного состава желчи и улучшением моторики ЖП и
ЖВП (табл.1).
THE TNDTCES OF UST TN PATTENTS WTTH CHRONTC CHOLECYSTTTTS BEFORE AND AFTER THE TREATMENT AT THE RESORT "ARSHAN" AS COMPARED WTTH MEDTCAMENTAL COURSE
T.P. Sizieh, L.P. Kovaleva
(Irkutsk State Medical University)
In the article are presented the data of Ultra Sound Investigations (USI) and analysis of indices of the patients with chronic cholecystitis, who received classical course of treatment at the resort "Arshan" as compared with traditional therapy.
Литература
.Алсксс Р.О. Сонография счсмки желчного пузыря // Вссчник рсіпгсн, и радиол. - 1990. - №5-6. -С.11 1.
. Атомов О.С., Рочанов О.II. Ультразвуковая диагностика дискинсзий желчных нуїсй // Тср. архив. -1986. - Т.58, №2,- С.91-93.
. Бородач В.А., Бородач А.В., Шкурачова А.И. Ультразвуковое исследование и компьютерная чо-мография в диагностике холелтиаза // Вест. хир. - 2000. - Т. 159, №6. - С.20-24.
. Втсбский Я.Д. Пачология желчных лучей в свече клапанной гасчроэтсрологии. - Курган, 1983. -128 с.
.Галкин В.А. Современные мечоды диагносчики дискинсзий желчного пузыря и некалькулезного холсцисчича // Тср. архив. - 2001. - №58. - С.37-38.
6. Зубовский Г.А. Лучевая и ульчразвуковая диагно-счика заболеваний печени и желчных пучей. - М., 1988. - 238 с.
7. Нщснко Н,С. Роль УЗ-исслсдования в диспанссри-запии. Авчорсф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 1990. - С.8-16.
8. Поляк Н.З. Рсмчгснологичсскис показачели основных функций желчного пузыря в норме и при хо-лсцисчичс. Авчорсф. дис. ... докч. мед. наук. - Киев, 1968. - 34 с.
9. Millclslacdi С.A. Abdominal ultrasound. New York. Churchill Livingstone, 1987. -467 p.
10. Ohara N., Schacfcr J. Clinical significance of biliary sludge // Clin. 1990, - Vol.12, - P.291-294.
О СМЕКАЛОВ В.П., МЕЛБНИЧУК Л.Н. -
СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ "ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ - АНТИОКСИДАНТЫ" У БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ОСТРОМ ПАНКРЕАТИТЕ НА ФОНЕ ГИПОСЕЛЕНОЗА И ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРЕПАРАТА "НЕОСЕЛЕН" (экспериментальное исследование)
В.П. Смекалов, А.Н. Мелышчук.
(Читинская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. A.B. Говорин, кафедра патологической анатомии, зав. - д.м.н., проф. В,П. Смекалов)
Резюме. Показана динамика содержания селена во внутренних органах и тканях, морфология поджелудочной железы и функциональных изменений параметров перекиеного окисления ли-
пидов (уровни диеновых коньюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов, содержание ТБК -перекисей, общей антиокислительной активности) при остром панкреатите у крыс на фоне ги-поселеноза и его коррекции препаратом ''Неоселен''.
Ключевые слова: панкреатит у белых крыс, гипоселеноз, система ПОЛ-АОА, препарат "Неоселен".
В современной нанк'реатологии проблема острого панкреатита (ОГТ) - одна из наиболее сложных и актуальных. В последнее десятилетие отмечается неуклонное возрастание частоты и течения острого панкреатита в структуре хирургической патологии органов брюшной полости [11]. Благодаря современным методам профилактики, диагностики и лечения летальность при ОГТ в последние годы снизилась до 6-21%. Однако при деструктивных формах ОГТ эта цифра стабильно высока и составляет 50-85% [10]. Среди выживших больных в 73% случаев возникает стойкая утрата трудоспособности [11]. Это придает данной проблеме важную социальную значимость, поскольку ник заболеваемости приходится на лиц активного трудоспособного возраста - 30-50 лет. Панкрео-некроз как тяжелая форма ОГТ, имевший в начале нашего века славу одной из наиболее внушительных катастроф в брюшной полости, до настоящего времени остается заболеванием с непрогнозируемым исходом [9]. Существует выраженная связь между возникновением ОГТ и низким потреблением антиоксиданта - селена (Эе) у больных ОГТ [14]. Хорошо известно, что Забайкалье относится, но данным ряда исследователей, к селенодефицитным геохими-ческим провинциям [2, 4,6].
5е относится к так называемым "эссенциаль-ным", жизненно необходимым микроэлементам [2,6], обладает выраженными антиокеидантными свойствами [2,6]. При его недостаточном, избыточном или несбалансированном поступлении в организме человека возникает ряд отклонений в функционировании антиокеидантной системы (АОС), что, в свою очередь, влияет на течение как физиологических, так и патологических процессов. Значительный дефицит микроэлемента вызывает патологическое состояние - гипоселеноз.
Следует отметить, что наиболее ранними изменениями со стороны АОС при ОП является снижение уровня глутатиона и других сульфгид-рильных групп на фоне общей активности процессов нерекиеного окисления липидов (ПОЛ) [14]. Более того, в последнее время была установлена принципиальная зависимость формирования секреторного отдела поджелудочной железы (ПЖ) от ранней активации процессов генерирования свободных радикалов, причем соотношение окисленный/восстановленный глутатион имеет в данном случае ключевое значение [12]. По мнению Я.Е. Ьи1Ьеп, 1.Н. ОгепёеП [13] возможна более ранняя коррекция процессов антиокислительной защиты (АОЗ) у больных панкреатитом, что может способствовать успешному исходу заболевания. В доступной литературе имеются единичные
сообщения о влиянии 5е на развитие патологии ПЖ [12,13,14].
Нами поставлена задача: установить возможную связь между динамикой развития ОП в эксперименте на животных и особенностями морфофункциональных изменений в ПЖ и содержанием 5е в ней и других органах и тканях.
Материалы и методы
В опыте были использованы 45 беспородных белых крыс 150-200 г в возрасте 3-4 месяцев, находившиеся в стандартных условиях вивария.
Экспериментальные животные были разделены на 3 группы: 1-ую контрольную группу составили 5 крыс, получавших лабораторный пищевой рацион с содержанием 5е 100 мкг/кг/сут. У 2-ой группы моделировали гипоселеноз сочетанным воздействием пищевого рациона с низким содержанием 5е (14 мкг/кг) и добавлением в питьевую воду в качестве нроокеиданта 8-9 мкг/кг/сут А§1Ч0з в течение 72 дней у 20 животных (Л.А. Минина, В,В. Ермаков, 1998). Этим животным на 73 сутки воспроизводили ОП путем охлаждения селезеночного отдела ПЖ [3]. В 3-ей группе 20 особей на фоне гиноселеноза и ОП со дня операции для коррекции ееленодефицита, которые получали ежедневно подкожно ветеринарный препарат "Неоселен" в дозе 30 мкг/кг в сутки в течение последующих 10 суток. У всех животных проводили забор крови из брюшной аорты и внутренних органов (ПЖ, печень и миокард) в следующие сроки: в 1-ой группе в начале эксперимента, во 2-ой группе - после воспроизведения модели острого панкреатита (ОП) на 1-е, 3-й, 6-е и 10-е сутки, также и в 3-ей группе после введения препарата "Неоселен".
В сыворотке крови изучали следующие параметры системы "ПОЛ - антиоксиданты": уровень
диеновых коньюгатов (ДК), кетодиенов и сопряженных триенов (КД и СТ) в изонронанольной фазе [5], величины соединений, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) [1] и общей антиокислительной активности (АОА) [8]. Исследования показателей ПОЛ проводили в группах: во 2-ой - через 24 часа от начала развития острого панкреатита, в 3-ей - через 24 часа после операции и применения "Неоселена". Содержание 5е определяли флуориметричееким методом [7] в крови, ПЖ, печени и миокарде в контроле с момента эксперимента, во 2-ой группе животных с начала развития ОП (на 1, 3, 6 и 10 сутки), в 3-ей после коррекции гиноселеноза в эти же сроки. В методе используется реагент 2,3- диаминонафта-леин в кислой среде с образованием соединения 4,5 бензониазоееленола, экстрагируемого гексаном но И.И. Назаренко (1977).
Рис. 1. Уровень селена во внутренних органах и тканях до и после введения препарата "Пеоселен" Примечание: * - достоверность различия с контролем р<0,001. Достоверные различия между 2-ой и 3-ей группами на 1-е сутки - а, на 3-й сутки - б, на 6-е сутки - в, на 10-е сутки - г.
Для проведения гистологического исследования материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, проводили но спиртам возрастающей концентрации и заливали в парафин. Из блоков готовились срезы толщиной 5-7 мкм и окрашивали гематоксилин-эозином, никрофукеи-ном но Ван-Гизону.
Для оценки достоверности различия между исследуемыми показателями использовались параметрические методы статистического анализа. Вычислялись средние арифметические значения показателей и ошибки средних (М±г). Достоверность результатов оценивалась но критерию Стьюдента.
Результаты п обсуждение
По истечению 72 суток у животных наблюдались участки алопеции, общая слабость, угнетенность, отсутствие половых инстинктов, что свидетельствует о проявлении гиноееленоза, при этом было снижение в крови 5е на 29,68% (р<0,001) но сравнению с контрольными животными.
На 1-е сутки во 2-ой группе животных после операции содержание 5е снизилось, но отношению к 1-ой группе крыс в ПЖ на 16,94% (р<0,001), в миокарде на 35,46% (р<0,001), в крови на 37,49% (р<0,001), в печени на 76,06% (р<0,001) (рис.1).
Наиболее показательным было значительное увеличение продуктов ПОЛ но сравнению с контролем: ДК на 280% (р<0,001), КД и СТ на 249% (р<0,001), уровень ТБК - активных продуктов повысился на 173,26% (р<0,001). Эти изменения протекали на фоне выраженного дефицита фактора АОА, который составил 72,91% (р<0,001) от контрольных животных (рис.2).
Макроскопически ПЖ на 1 -е сутки после операции увеличена в объеме. В селезеночном отделе
железы определялись на темно-коричневом фоне множественные, размерами 1,5-2 мм восковидные некрозы как в самой железе, так и в прилегающих тканях. Иногда эти некрозы сливались между собой. Обнаруживались очаговые кровоизлияния в ПЖ. При гистологическом исследовании диффузная гнойная инфильтрация распространялась на дуоденальный отдел ПЖ и прилегающую жировую клетчатку. В 3-х наблюдениях из 5 острый воспалительный процесс захватывал капсулу печени, селезенки и брюшину (фибринозно-гнойный неригенатит, не-риенленит, слраниченный гнойный перитонит). В сосудах микроциркулягорного русла (МЦР) селезеночного отдела железы определялись полнокровие, стазы, тромбы, очаговые нериваекулярные кровоизлияния.
350 300 250 200
5?
150 100 50 . 0
■ Контроль П2Г+ОП 1 сутки ПЗГ+ОП+К 1 сутки
Рис.2. Показатели процессов липопероксидации и анти-окислительной защиты
Примечание: * - достоверность различия с контролем р<0,001; а - достоверные различия между 2-ой и 3-ей группами на 1-е сутки.
★ А . Аг
— ★ а і =11 і * * -з гЗгі Щ * * li'tw
ДК КД.СТ ТБК АОА
В 3-ей группе животных после введения препарата "Неоселен", количество Бе стало повышаться в ПЖ на 13,08% (р<0,001), в миокарде на 18,52% (р<0,001), в крови на 18,48% (р<0,001), в печени на 46,84% (р< 0,001) от контрольных крыс. По сравнению со 2 группой на 1-е сутки Бе увеличивается в ПЖ на 36,14% (р<0,001), в миокарде на 26,23% (р<0,001), в крови на 30,40% (р<0,001), в печени на 122% (р<0,001) (рис.1).
При этом в группе возрастают уровни ДК на 150,90% (р<0,001), КД и СТ на 143,13% (р<0,001), ТБК - позитивных соединений на 46,53% (р< <0,001), ЛОЛ снижалось на 44,94% (р<0,001) по отношению к 1-ой группе. Выявили снижение содержания продуктов ПОЛ по сравнению со 2-ой группой на 1-е сутки: ДК на 33,98% (р<0,001), КД и СТ на 30,34% (р<0,001), ТБК - активных продуктов на 46,38% (р<0,001), активность ЛОЛ усиливается на 103,25% (р<0,001) (рис.2).
Макроскопически ПЖ у этих животных была серо-белого цвета с выраженным отеком, в селезеночном отделе определялись единичные некрозы величиной от 0,2 до 0,3 см бело-желтого цвета. При гистологическом исследовании в этом же отделе ПЖ регистрировались очаговые некрозы, по периферии долек - умеренная лейкоцитарная инфильтрация. В дуоденальном отделе и прилегающей жировой клетчатке слабо выраженная лейкоцитарная инфильтрация стромы ПЖ. В одном из 5-и наблюдений обнаружены проявления ограниченного серозно-фибринозного перитонита. В МЦР селезеночного отдела железы изменения были менее выражены по сравнению с таковыми 1-ой группы животных.
Па 3-й сутки во 2-ой группе крыс морфологические проявления ОП нарастали и характеризовались обширными восковидными некрозами ткани селезеночного отдела ПЖ и прилегающей жировой клетчатки (до 10% площади). Во всех случаях регистрировались признаки разлитого фибринозно-гнойного перитонита, периспленита, пе-ригепатита. При гистологическом исследовании некрозы обнаруживались как в селезеночном, так и в дуоденальном отделах ПЖ с наличием микробных колоний. Выраженные нарушения МЦР как в ткани ПЖ, так и в ее капсуле, в прилегающей жировой клетчатке, где преобладала диффузная лейкоцитарная инфильтрация. Количество Бе по сравнению с контролем в этой группе продолжает снижаться в ПЖ на 19,54% (р<0,001), в миокарде на 27,93% (р<0,001), в крови на 49,95% (р<0,001), в печени на 74,68% (р<0,001) (рис.1).
У животных 3-ей группы в ПЖ уровень данного микроэлемента повышается на 38,19% (р<0,001), в миокарде на 6,67% (р<0,001), в крови на 42,13% (р<0,001), в печени на 24,12% (р<0,001) по отношению к 1-ой группе крыс, по сравнению со 2-ой группой на 3-й сутки возрастает в ПЖ на 71,74% (р<0,001), в миокарде на 29,50% (р<0,001), в крови на 125,31% (р<0,001), в печени на
307,85% (р<0,001) (рис.2). Микроскопически вокруг участков некроза селезеночного отдела ПЖ
наблюдалась интенсивная макрофагальная и фиб-робластическая реакции и формировалась волокнистая соединительная ткань. Дистрофические изменения в клетках ацинусов уменьшались по мере угасания острого воспаления. В местах повреждения паренхимы ПЖ усиливалась клеточная инфильтрация с большим количеством макрофагов, фибробластов и лимфоцитов.
Па 6-е сутки во 2-ой группе крыс в воспалительном инфильтрате преобладали нейтрофиль-ные лейкоциты (до 30% среди всех клеточных элементов). Формирующаяся капсула из волокон соединительной ткани вокруг некрозов была слабо выражена (толщиной до 56 мкм, а в группе животных с применением препарата "Неоеелен" толщина капсулы достигала 270 мкм) и окружала их не на всем протяжении. В этой группе крыс вокруг ПЖ был выраженный спаечный процесс в брюшной полости. Некротическая ткань в ПЖ плохо рассасывалась. Содержание Бе снизилось в ПЖ на 20,07% (р<0,001), в миокарде на 30,19% (р<0,001), в крови на 39,39% (р<0,001), в печени на 75,21% (р<0,001) в сравнении с контролем (рис.1).
Па 10-е сутки во 2-ой группе крыс отмечалась хронизация воспаления в ПЖ, что проявлялось круглоклеточной и гистиоцитарной инфильтрацией, большим количеством фибробластов, образованием ложных кист. Уровень Бе был низким по отношению к 1-ой группе животных в ПЖ на 31,27% (р<0,001), в миокарде на 36,55% (р<0,001), в крови на 40,87% (р<0,001), в печени на 72,21% (р<0,001) (рис.1).
Па 6-10-е сутки в 3-ей группе у животных появлялись первые признаки активного их поведения и рост волос на месте алопеции. При этом в ПЖ воспалительная инфильтрация была умеренно выражена, преобладали процессы склероза на месте травмы, В конце 10 суток уровень Бе повышался и даже превышал показатели контроля в ПЖ на 148,97% (р<0,001), в миокарде на 21,18% (р<0,001), в крови на 70,85% (р<0,001), в печени на 19,71% (р<0,001) (рис.1).
При введении препарата "Неоселен" животным после воспроизведения модели ОП на 1-е сутки дистрофические и некротические изменения, проявления острого воспаления в паренхиме ПЖ были менее выражены по сравнению с группой крыс, находившихся в тех же условиях, но без коррекции. На 3-6-10-е сутки в 3-ей группе процессы организации и репарации в поврежденной ПЖ происходили интенсивнее с выраженным разрастанием грануляционной ткани на месте гибели паренхимы железы.
Результаты исследований показывают, что развитие ОП на фоне гипоселеноза сопровождается значительным снижением количества селена во внутренних органах и тканях. При этом происходит активация продуктов ПОЛ с образованием ДК, КД и СТ, ТБК = активных продуктов, которые, как известно, обладают высокой реакционной способностью, оказывают системное повреж-
дающее действие на мембрану панкреатоцитов. Резкое снижение факторов ЛОЛ свидетельствует о снижении уровня антиоксидантов при ОП и ги-поселенозе.
Применение препарата "Неоселен" способствует более быстрому накоплению Бе во внутренних органах и тканях, начиная с 1-х суток операции, н это существенно влияет на интенсивность окислительных процессов в ПЖ. Происходит снижение активности липопероксидации, усиление ЛОЛ. Это сопровождается уменьшением выраженности дистрофических, некротических и экссудативных процессов н усилением продуктивной тканевой реакции и репаративной регенерации на месте травмы.
Таким образом, при ОП на фоне гипоселеноза обнаружено резкое снижение содержание Бе во внутренних органах и тканях и значительное повышение первичных, вторичных интермедиатов ПОЛ в крови и угнетение фактора ЛОЛ. Использование препарата "Неоселен" при ОП на фоне гипоселеноза у животных повышает уровень селена во внутренних органах и тканях, восстанавливает баланс в системе ПОЛ - ЛОЛ. У животных с гииоселенозом и ОП дистрофические и некротические процессы в ПЖ были наиболее выраженными по сравнению с группой крыс, получавших 'Неоселен'. Применение этого препарата значительно ускоряет процессы репарации в ПЖ.
"LIPID PEROXIDATION - ANTIOXIDANTS" IN PANCREATIC WHITE RATS WITH HYPOSELENOSIS AND ITS CORRECTION WITH "NEOSELENIUM"
(experimental data)
V.P. Smekalov, L.N. Melnichuk
(Chita State Medical Academy)
Selenium changes in internal organs and tissues, pancreatic structure and functional changes of lipid peroxidation (conjugated diens, ketodien and conjugated trine levels as well as TBA - peroxides values and general antioxidant activity) in pancreatic rats with hyposelenosis and corrected with «Neoselenium» preparation have been studied.
Литература
1. Андреева Л.И., Кожемякин JI.A., Кишкун A.A. Модификация меч ода определения перекисей липидов в чссчс с чиобарбичуровой кислочой // Лаб. дело. - 1988. -№11. - С.41-43.
2. Аникина Л.В. Селен. Экология, начология, коррекция. - Чича, 2002. - 398 с.
3. A.c. 1327152 СССР, Способ моделирования панкреас ича / Э.С.Гульянц, H.A. Лукаш, Ю.А. Калмыкова // Очкрычия, изобретения. - 1987. - №28. -211 с.
4. Белозерцев Ю.А., Иванов В.Н. Экологозависимые состояния и здоровье населения Чичинской облас-чи // Экологозависимые заболевания (биохимия, фармакология, клиника): Тез. докл. Вссрос. науч,-нракч. конф. - Чича, 1997. - С.131-136.
5. Волчсгорский И.А., Налимов А.Г., Яровинс-кий Б.Г., Лифшиц Р.И. Соносчавлснис различных подходов к определению нродукчов нсрскисного окисления липидов в генчан-изонронанольных экс-чракчах крови // Вонр. мед. химии. - 1989. - №1. -С.127-131.
6. Микроэлсмснчозы человека: эчиология, классификация, органоначология / A.II. Авцын, A.A. Жаворонков, М,А. Риш, Л,С. Счрочкова. - М.: Медицина, 1 99 1 .-496 с.
7. Назаренко И.И. Редкие элсмснчы: сырье и экономика. - М: Медицина, 1973. - Вып.9. - С. 138-142.
8. Промыслов М.III., Дсмчук М.Л. Модификация мс-чода определения суммарной анчиоксиданчной ак-чивносчи сыворочки крови // Вонр. мед. химии. -1990. - №4. - С.90-92.
9. Савельев B.C., Кубышкин В.А. Панкрсонскроз. Сосчоянис нсрснскчива // Хирургия. - 1993. - №6. -С.22-28.
10. Филин В.И., Косчючснко А.Л. Неотложная нан-крсачология - СПб.: Пичср, 1994. - 416 с.
П. Шалимов С А , Радзиховский А.П., Нсчичайло М.И. Осчрый нанкрсачич и его осложнения. - Киев: Наук. думка, 1990. - 272 с.
12. Hwang С., Sinkcy A.J, Lodish H.F. Oxidized redox stale of glutathione in the endoplasmic reticulum // Science. - 1992. - Vol.257. - P. 1496-1450.
13. Luthcn R.H., Grcndcll J.H. Thiol metabolism and acute pancreatitis: Trying to make the pieces tit // Gastroenterology. - 1994. - Vol.107. - P.888-892.
14. Swcirv J.N., Mann G.H. Role of oxidative stress in the pathogenesis of acute pancreatitis // Scand. J. Gastroenterol. - 1996. - Vol.31 (suppl.219). - P.10-15.
