CC BY
7
Far Eastern Medical Journal, 4/2021
sian Journal of Cardiology. - 2019. - Vol. 24, № 2. -P. 44-52.
9. Kryzhanovsky S.A., Sirotin B.Z., Zhmere-netsky K.V, Kryzhanovskaya S. Yu. Study of microcir-culatory functions in patients with paroxysmal and con-stanst atrial fibrillation // Far Eastern Medical Journal. -2012. - № 4. - P. 6-9.
10. Lang T.A., Sesik M. How to describe statistics in medicine. A guide for authors, editors and reviewers / Transl. from English / Ed. by Leonov VP. - M.: Practical Medicine, 2011. - 480 p.
11. Leonov V.P. Logistic regression and ROC-analysis. URL: http://www.biometrica.tomsk.ru/logit_4.htm.
12. Makeeva N.P., Balakhonova N.P., Kurakina L.V, Kamshilina L.S. Microcirculation in patients with systemic scleroderma during treatment using hyperbaric oxygenation // Clin. Med. - 1989. - Vol. 67, № 6. - P. 107-109.
13. Sirotin B.Z., Korneeva N.V Vascular permeability and intravascular erythrocyte aggregation in young people after smoking cessation // Ther. Arch. - 2017. - Vol. 89, № 4. - P. 35-38.
14. ACR/EULAR Classification Criteria for Scleroderma. - London: BMJ Publishing Group Ltd, 2013.
15. Dinsdale G., Moore T., O'Leary N., et al. Quantitative outcome measures for systemic sclerosis-related Mi-croangiopathy - Reliability of image acquisition in Nail-fold Capillaroscopy // Microvasc Res. - 2017. - № 113. -P. 56-59.
16. Smith V., Herrick A.L., Ingegnoli F., and al. Standardisation of nailfold capillaroscopy for the assessment of patients with Raynaud's phenomenon and systemic sclerosis // Autoimmun Rev. - 2020. - Vol. 19, № 3. -P. 102-458.
Координаты для связи с авторами: Корнеева Наталья Вячеславовна - д-р мед. наук, доцент кафедры факультетской и поликлинической терапии с курсом эндокринологии, ORCID 0000-0001-9878-180X; Жмеренецкий Константин Вячеславович - д-р мед. наук, член-корр. РАН, ректор ДВГМУ, e-mail: [email protected], ORCID 0000-0002-6790-3146; Ковалева Мария Александровна - аспирант кафедры дополнительного профессионального образования ДВГМУ, e-mail: [email protected]; ORCID 0000-0003-3353-1919; Неврычева Елена Викторовна - канд. мед. наук, зав. кафедрой сестринского дела, доцент кафедры терапии и профилактической медицины КГБОУ ДПО ИПКСЗ, тел. +7-914-548-87-02, e-mail: [email protected], ORCID 0000-0002-9629-7878.
□□□
http://dx.doi.org/10.35177/1994-5191-2021-4-3
УДК 616.993+616-092(571.620)
Е.В. Мокрецова1, Г.С. Томилка1, О.А. Лебедько1,2, Ю.Г. Ковальский1, Н.Ю. Якушева1, А.Ю. Щупак1, В.В. Малеев3
СОСТОЯНИЕ ОКСИДАТИВНОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ КЛЕЩЕВЫМ РИККЕТСИОЗОМ, ОБУСЛОВЛЕННЫМ R. HEILONGJIANGENSIS, ВЫЯВЛЕННЫХ НА ЮГЕ ХАБАРОВСКОГО КРАЯ
1Дальневосточный государственный медицинский университет, 680000, ул. Муравьева-Амурского, 35, тел. 8-(4212)-30-53-11, e-mail: [email protected];
2Хабаровский филиал ФГБНУ «Дальневосточный центр физиологии и патологии дыхания» — НИИ охраны материнства и детства, 680022, ул. Воронежская, 49, кор. 1, г. Хабаровск;
3Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, 111123, ул. Новогиреевская, 3а, г. Москва
Резюме
Проведено исследование оксидативного статуса у пациентов с клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, без сопутствующих хронических заболеваний в стадии декомпенсации. Установлено, что в разгаре заболевания у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, происходило достоверное повышение показателей хемилюминесценции относительно группы сравнения, указывающее на выраженную активацию процессов свободнорадикального окисления.
В динамике заболевания, а именно в периоде реконвалесценции, исследуемые показатели хемилюминесценции оставались по-прежнему значимо повышенными относительно группы сравнения, при этом достоверно повышаясь относительно разгара заболевания, что свидетельствовало об участии кислородсодержащих свободных радикалов в патогенезе клещевого риккетсиоза, обусловленного R. heilongjiangensis.
Ключевые слова: клещевые трансмиссивные инфекции, риккетсиоз, оксидативный стресс.
Дальневосточный медицинский журнал, 4/2021 КЯ
E.V. Mokretsova1, G.S. Tomilka1, O.A. Lebed'ko12, Yu.G. Kovalskiy1, N.Yu. Yakusheva1, A.Yu. Shchupak1, V.V. Maleev3
THE STATE OF THE OXIDATIVE STATUS IN PATIENTS WITH TICK-BORNE RICKETTSIOSIS CAUSED BY R. HEILONGJIANGENSIS, IDENTIFIED IN THE SOUTH OF THE KHABAROVSK TERRITORY
'Far Eastern State Medical University;
2Khabarovsk branch of the Far Eastern Center of Physiology and Pathology of Respiration - Research Institute for the Protection of Motherhood and Childhood, Khabarovsk;
3Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow
Abstract
The state of the oxidative status was studied in patients with tick-borne rickettsiosis caused by R. heilongjiangensis, without concomitant chronic diseases in the decompensation stage. It was revealed that at the peak of the disease in patients with tick-borne rickettsiosis caused by R. heilongjiangensis, there was a pronounced activation of free radical oxidation processes. This was indicated by a significant increase in chemiluminescence indicators relative to the comparison group. In the dynamics of the disease, namely in the period of convalescence, the studied chemiluminescence indicators remained significantly elevated relatively to the comparison group, remaining notably increased compared to the peak of the disease, that indicated the participation of oxygen-containing free radicals in the pathogenesis of tick-borne rickettsiosis caused by R. heilongjiangensis.
Key words: tick-borne vector-borne infections, rickettsiosis, oxidative stress.
Одной из самых актуальных и распространённых на территории Дальнего Востока природно-очаговых инфекций является клещевой риккетсиоз (КР) [4]. Это заболевание относится к группе клещевых пятнистых лихорадок и повсеместно широко распространено, однако на разных географических территориях его этиологический фактор различен [2]. В предыдущих исследованиях было показано, что этиологическим агентом клещевого риккетсиоза в Хабаровском крае является R. heilongjiangensis, особенности которого мало изучены, в том числе и патогенетические аспекты [4]. При этом, экономическая составляющая данной проблемы достаточно велика, учитывая отсутствие специфической профилактики, растущую заболеваемость, существенную долю трудоспособного населения среди заболевших, высокую стоимость стационарного лечения. Решению этой проблемы будет способствовать и изучение отдельных механизмов патогенеза заболевания для совершенствования патогенетической терапии.
Известно, что процессы свободнорадикального окисления отражают патогенетические особенности
Материалы
Соблюдение юридически-правовых норм (одобрение этического комитета, информированное добровольное согласие пациента) позволило провести клинико-лабораторное обследование 82 пациентов в возрасте от 18 до 85 лет (средний возраст 60,3±1,8 года) с клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, получавших стационарное лечении в инфекционном отделении КГБУЗ «Городская клиническая больница № 10» министерства здравоохранения Хабаровского края. В исследования были включены пациенты со среднетяжёлой формой клещевого риккетсиоза без сопутствующих декомпен-сированных хронических заболеваний, так как они составили доминирующую группу среди госпитализированных. Среди них было 42 мужчины (51,2 %) и 40 женщин (48,8 %).
Диагноз установлен клинико-эпидемиологически, а также во всех случаях подтверждён выделением
большинства заболеваний, в том числе инфекционных, объективно указывая на степень тяжести поражения тканей [3]. Нарушение баланса между оксидативным стрессом, являющимся следствием усиленного образования активных форм кислорода, и антирадикальной системой, представленной в первую очередь антиок-сидантными ферментами с целью утилизации кислородсодержащих свободных радикалов (ROS) с последующим восстановлением поврежденных клеточных макромолекул и мембран, приводит к резкой интенсификации свободнорадикальных процессов [5, 6].
В доступной нам литературе отсутствуют сведения о нарушении свободнорадикального окисления у больных клещевыми риккетсиозами, обусловленных R. Heilongjiangensis.
Предметом настоящего исследования явилась оценка состояния оксидативного статуса у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, с целью углублённого понимания отдельных сторон патогенеза, в том числе и дальнейшего совершенствования комплексной терапии данного заболевания.
и методы
ДНК Rickettsiae heilongjiangensis из сыворотки крови с помощью наборов «РеалБест ДНК Rickettsiae species», «РеалБест ДНК Rickettsiae sibirica/Rickettsiae heilongjiangensis» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск).
Метод хемилюминесценции (ХМЛ), использующийся для оценки процессов свободнорадикального окисления в сыворотке крови больных при поступлении в инфекционное отделение (в разгаре заболевания), а также при выписке (период реконвалесценции), включал:
1. Регистрацию ХМЛ на люминесцентном спектрометре LS 50B «PERKIN ELMER».
2. Исследование спонтанной и индуцированной Fe2+ ХМЛ:
2.1. светосуммы за 1 минуту спонтанной ХМЛ (Ssp), величина которой коррелирует с интенсивностью генерации активных кислородных метаболитов;
Far Eastern Medical Journal, 4/2021
2.2. максимум быстрой вспышки (Ъ) индуцированной ХМЛ, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов;
2.3. светосуммы за 2 минуты после «быстрой» вспышки, отражающую скорость накопления перекисных радикалов липидной природы.
3. Анализ кинетики ХМЛ, инициированной Н202 в присутствии люминола [1]:
3.1. светосуммы в присутствии люминола свидетельствующей об интенсивности
образования гидроксил-радикалов;
3.2. максимум свечения (Н), указывающему на потенциальную способность биологического объекта к перекисному окислению;
3.3. светосуммы за 2 минуты ХМЛ величина которой обратно пропорциональна
активности антиоксидантнои антирадикальнои защиты (АОРЗ).
Интенсивность ХМЛ, измеренная в милливольтах, рассчитывалась на 1 мл сыворотки и выражалась в относительных единицах.
Группу сравнения составили 30 человек (12 женщин и 18 мужчин), условно здоровых, в возрасте 25-65 лет.
Обработка полученных цифровых данных проводилась с помощью персонального компьютера на базе процессора Intel® Core ® i3-7300, операционной системы Windows 10 с использованием программы Microsoft Office Excel 2007. Статистическая обработка результатов осуществлялась с использованием t-критерия Стьюдента. Достоверность различии оценивалась по значениям, соответствующим p<0,05.
Результаты и обсуждение
Результаты исследованных параметров оксидатив-ного статуса представлены в таблице.
Таблица
Показатели хемилюминесценции (в относительных единицах) в сыворотке крови у пациентов с клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, в динамике заболевания (М±т)
Показатели Группа сравнения (n=30) В разгаре заболевания (n=82) В период реконвалесценции (n=82)
S sp 0,0035±0,0009 0,0146±0,0008* 0,0186±0,0009**/***
Sind-1 0,0069±0,0019 0,0271±0,0012* 0,0351±0,0018**/***
h 0,0062±0,0009 0,0216±0,0010* 0,0275±0,0013**/***
slum 0,0037±0,0009 0,0144±0,0007* 0,0194±0,0009**/***
Sind-2 0,0071±0,0024 0,0323±0,0016* 0,0401±0,0020**/***
H 0,0065±0,0010 0,0432±0,0031* 0,0367±0,0015**/****
Примечание. * - достоверность различий между показателями в разгаре заболевания по отношению к группе сравнения, p<0,05; ** -достоверность различий показателей в группе сравнения и периоде реконвалесценции, p<0,05; *** - достоверность различий показателей в разгаре заболевания и периоде реконвалесценции, p<0,05; **** - достоверность различий показателей в разгаре заболевания и периоде реконвалесценции, p>0,05.
Полученные данные указывают на выраженную активацию процессов свободнорадикального окисления в разгаре заболевания у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis. Это,
прежде всего, достоверное повышение всех показателей ROS относительно группы сравнения (p<0,05):
1) четырехкратное усиление интенсивности генерации свободных радикалов (S);
2) значительное усиление гидроксильных радикалов (Sj ) и продукции перекисных метаболитов липидной природы (Sind j) - в 3,9 раза;
3) повышение концентрации гидроперекисей липи-дов (h) в 3,5 раза;
4) существенное угнетение активности антиокси-дантной антирадикальной защиты (Sind 2) в 4,6 раза;
5) потенциальная способность к перекисному окислению (Н), увеличенная в 6,6 раза.
В динамике заболевания, а именно в период рекон-валесценции, исследуемые показатели хемилюми-несценции оставались по-прежнему значимо повышенными относительно группы сравнения, при этом достоверно повышаясь относительно разгара заболевания. На этом фоне недостоверно снижалась перекис-ная резистентность исследуемого субстрата (p>0,05).
Таким образом, повышение активности показателей оксидативного статуса у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, свидетельствует об их роли в патогенезе данного заболевания. Продолжающееся увеличение факторов окси-дативного стресса в периоде реконвалесценции может указывать на то, что клиническое выздоровление не отражает патогенетическое завершение инфекции.
Выводы
1. Впервые проведенное исследование оксидатив-ного статуса в сыворотке крови больных среднетя-жёлой формой клещевого риккетсиоза на юге Хабаровского края, обусловленного R. heilongjiangensis, выявило в разгаре заболевания активизацию процессов свободнорадикального окисления и подавление антиоксидантной антирадикальной защиты.
2. Исследуемые хемилюминесцентные показатели оксидативного статуса сыворотки крови больных среднетяжёлой формой клещевого риккетсиоза, обу-
словленного R. heilongjiangensis, в периоде реконва-лесценции оставались высокими и имели тенденцию к дальнейшему повышению, так как достоверно отличались от таковых в разгаре заболевания.
3. Полученные результаты являются основанием для дальнейших исследований, направленных на установление связи процессов свободнорадикального окисления со степенью тяжести клещевого риккетси-оза, обусловленного R. heilongjiangensis, и возможной коррекции терапии.
Дальневосточный медицинский журнал, 4/2021
Литература
1. Арутюнян А.В. Методы оценки свободноради-кального окисления и антиоксидантной системы организма: методические рекомендации. - СПб.: Наука. -2000. - 198 с.
2. Карань Л.С., Мокрецова Е.В., Щучинова Л.Д., Неталиева С.Ж., Григорьева Я.Е., Фёдорова Л.Б., Жу-ренкова О.Б., Томилка Г.С., Малеев В.В. Сравнительный анализ эффективности выявления ДНК риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок в разных видах клинического материала и возможность видовой идентификации возбудителя методом ПЦР // Инфекционные болезни. - 2015. - Т. 13, № 2. - С. 25-29.
3. Лебедько О.А., Тимошин С.С. Активные кислородные метаболиты как универсальные мессенджеры процессов сигнальной трансдукции // Дальневосточный медицинский журнал. - 2004. - № 4. - С. 95-98.
4. Медянников О.Ю., Сидельников Ю.Н., Иванов Л.И., Fournier P.E., Тарасевич И.В., Raoult D. Дальневосточный клещевой риккетсиоз - новая нозологическая единица, но хорошо известное заболевание // Дальневосточный журнал инфекционной патологии. - 2005. - № 6. - С. 61-62.
5. Palma F.R., He C., Danes J.M., Coelho D.R., Sam-paio V.P., Gantner B.N., Bonini M.G. Mitochondrial Superoxide Dismutase: What the established, the intriguing, and the novel revial about a key cellular redox swich // Antioxid Redox Signal. - 2020, jan 22, doi: 10, 1089/ ars.2019.7962.
6. Vrba J., Modriansky M. Oxidative burst of Kupffer cells: target for liver injury treatment // Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. - 2002. -Vol. 146. - № 2. - P. 15-20.
Literature
1. Arutyunyan A.V. Methods for assessing free radical oxidation and the antioxidant system of the body: methodological recommendations. - St. Petersburg: Nauka, 2000. - 198 p.
2. Karan L.S., Mokretsova E.V., Shchuchinova L.D., Netalieva S.Zh., Grigoryeva Ya.E., Fedorova L.B., Zhu-renkova O.B., Tomilka G.S., Maleev VV Comparative analysis of the effectiveness of detecting the DNA of rick-ettsia of the tick-spot fever group in different types of clinical material and the possibility of species identification of the pathogen by PCR // Infectious Diseases. - 2015. -Vol. 13, № 2. - P. 25-29.
3. Lebedko O.A., Timoshin S.S. Active oxygen metabolites as universal messengers of signal transduc-tion processes // Far Eastern Medical Journal. - 2004. -№ 4. - P. 95-98.
4. Medyannikov O.Yu., Sidelnikov Yu.N., Ivanov L.I., Fournier P.E., Tarasevich I.V., Raoult D. Far Eastern tickborne rickettsiosis is a new nosological unit, but a well-known disease // Far Eastern Journal of Infectious Pathology. - 2005. - № 6. - P. 61-62.
5. Palma F.R., He C., Danes J.M., Coelho D.R., Sam-paio V.P., Gantner B.N., Bonini M.G. Mitochondrial Superoxide Dismutase: What the established, the intriguing, and the novel reveal about a key cellular redox switch // Antioxid Redox Signal. - 2020, jan 22, doi: 10, 1089/ ars.2019.7962.
6. Vrba J., Modriansky M. Oxidative burst of Kupffer cells: target for liver injury treatment // Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. - 2002. -Vol. 146, № 2. - P. 15-20.
Координаты для связи с авторами: Мокрецова Евгения Викторовна - канд. мед. наук, доцент кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии ДВГМУ, тел. +7-962-584-09-21, е-таП: [email protected]; Томилка Геннадий Степанович - д-р мед. наук, проф., зав. кафедрой инфекционных болезней и эпидемиологии ДВГМУ, е-таП: [email protected]; Лебедько Ольга Антоновна - д-р мед. наук, директор Хабаровского филиала федерального государственного бюджетного научного учреждения «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» - научно-исследовательский институт охраны материнства и детства, ведущий научный сотрудник ЦНИЛ ДВГМУ, е^ай: [email protected]; Ковальский Юрий Григорьевич - д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой биологической химии и клинической лабораторной диагностики ДВГМУ, е-mail: [email protected]; Якушева Наталья Юрьевна - канд. фармацевт. наук, доцент кафедры фармации и фармакологии ДВГМУ, е-mail: [email protected]; Щупак Александр Юрьевич - канд. мед. наук, доцент, зав. кафедрой клинической токсикологии и экстремальной медицины ДВГМУ, е-mail: [email protected]; Малеев Виктор Васильевич - академик РАН, д-р мед. наук, проф., советник директора по научной работе Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Москва), е-mail: [email protected].
□□□
