Состояние мастоцитов мышей с ожоговыми повреждениями кожи в условиях воздействия низкоинтенсивного светового излучения
Е.Е. Лаврушина, ст. преподаватель, Ульяновская ГСХА; Г.М. Топурия, д.б.н, Оренбургский ГАУ
Клеточные элементы, заселяющие лимфоидные органы, в том числе центральный орган иммуногенеза — вилочковую железу, играют немаловажную роль в восприятии и трансформации световой энергии при непосредственном и опосредованном действии излучения на организм [1]. Известно, что в ходе регенераторного процесса после повреждения кожи меняется характеристика гуморального компонента микроокружения лимфоцитов тимуса [2]. Тучные клетки, встречающиеся в структурах тимуса (мастоциты), участвуют в поддержании биоаминного гомеостаза органа [3]. Спектр биологических эффектов сек-ретируемых ими веществ весьма обширен, поэтому изменение их синтеза и секреции в тимусе отражается на функциональном состоянии иммунной, нервной и эндокринной систем организма, обеспечивающих ряд процессов, оказывающих мощное, часто адекватное раздражителю влияние на местную воспалительную реакцию [4].
Анализ немногочисленных результатов использования широкополосного излучения в клинической практике доказывает эффективность его применения для коррекции репаративных процессов [5, 6, 7], однако в литературе имеются лишь отрывочные сведения о влиянии светодиодного излучения на функциональное состояние клеток тимуса. Т.о., полученные нами сведения могут иметь большое теоретическое и практическое значение для дальнейшего внедрения физиотерапевтических методов лечения.
Цель настоящего исследования — изучение влияния светодиодного излучения красного спектра света (СДИКСС) на состояние тучных клеток тимуса мышей с ожоговыми повреждениями кожи.
Экспериментальные исследования проводились на половозрелых белых мышах (п = 140) массой 20—25 г. Для изучения воздействия СДИКСС на состояние мастоцитов в условиях патологии экспериментальным животным под нембутало-вым наркозом моделировали термическую рану в центре спины (площадью 5 мм2 каждая).
Животные были разделены на 4 группы. 1 группу составляли интактные животные, 2 контрольную группу — животные, которым имитировалось облучение ожоговой раны при выключенном источнике СДИКСС (имитационный контроль), 3-ю — животные, у которых область
раны подвергалась облучению красным светом, 4-ю — животные с ожоговыми повреждениями, у которых чрескожному воздействию светодиодного излучения подвергалась область проекции тимуса.
Воздействие светом осуществлялось ежедневно в течение 28 дней. Выведение животных из эксперимента для проведения исследований производили на 3, 5, 9, 11, 15, 21, 28 сутки передозировкой эфира.
Для выявления мастоцитов в тимусе использовали модифицированный способ окраски азу-ровым красителем. На каждом препарате подсчитывалось общее число клеток в 20 полях зрения (при увеличении 7 40) с последующим пересчетом на площадь одного поля зрения. Для характеристики степени активности в целом тучноклеточной популяции определяли средний коэффициент дегрануляции (КД):
КД = N/n,
где n — общее количество тканевых базофилов;
N — число дегранулированных форм.
Исследования показали, что увеличение общего числа тучных клеток в соединительнотканной капсуле тимуса в ранние сроки после нанесения ожогов, сопровождающееся повышением их секреторной активности, отмечалось как у контрольных животных, так и животных, подвергавшихся ежедневной терапии СДИКСС. Однако уже к 5-м суткам после начала светового воздействия численность тканевых базофилов в тимусе мышей 3 группы снизилась до 121,2±3,77 клеток на единицу площади, у животных 4 группы — до 72,6±5,26, что на 45% и 67% соответственно было ниже аналогичных показателей в контрольной группе. При этом отмечалось снижение числа активно дегранулирующих форм клеток. Коэффициент дегрануляции при облучении раневой поверхности составлял 0,50±0,051 ед., при облучении области проекции тимуса — 0,60±0,37 ед. Дальнейшее увеличение суммарной дозы облучения на 11-е сутки эксперимента у мышей 3 группы приводило к снижению численности масто-цитов в тимусе до показателей интактных животных. Аналогичные изменения при облучении зоны проекции тимуса наблюдались у животных 4 группы. Дальнейшие количественно-функциональные изменения в тучноклеточной популяции также зависели от способа доставки светового излучения к организму. Так, ежедневное облучение ожоговых регенератов у мышей 3 группы
вызывало заметное увеличение общего числа клеток относительно показателей интактных животных лишь к 21-м суткам наблюдений, при этом коэффициент дегрануляции принимал минимальное значение по отношению к показателям других экспериментальных групп — 0,42± 0,020 ед. Воздействие СДИКСС в 4 группе инициировало увеличение численности мастоцитов уже на второй неделе эксперимента (максимум наблюдался на 15 сутки — 140,8+9,52), после чего их количество постепенно снижалось, приближаясь к показателям контрольных животных. Коэффициент дегрануляции в данной группе оставался на уровне 0,64—0,66 ед. и снижался до исходных показателей только к концу 3 недели терапии. Примечательно, что в течение двух недель после нанесения ожоговых повреждений в обеих экспериментальных группах наблюдались постепенные сдвиги в сторону увеличения в популяции процентного содержания клеток с признаками полной дегрануляции (так называемых «теней»). Так, в период 5—15 суток превышение этого показателя относительно контрольных в 3 группе составляло в среднем 10,65%, в 4 группе — 4,13%.
Таким образом, на основании полученных данных можно заключить, что изменение количественного состава, а также гетерогенности тучноклеточной популяции вил очковой железы в условиях заживления ожоговых ран кожи связано со способом подведения световой энергии к биологическому организму. Коррекция репаратив-ных процессов в коже воздействием СДИКСС на
область проекции тимуса изменяла общие закономерности реакции стромальных мастоцитов на повреждение лишь на ранних сроках течения ожоговой болезни. Изменение функциональной активности мастоцитов при облучении раневой поверхности выражалось в менее резком с ниже -нии их количества в популяции на протяжении всего периода наблюдений, а также характеризовалось более низкой степенью дегрануляции.
Литература
1. Асташов, В.В. Структурный ответ тимуса при его чрескожном облучении низкоэнергетическим лазерным излучением с различной длиной волны / В.В. Асташов, Ю.А. Майорова, Н.В. Белова // Проблемы лимфологии и эндоэкологии: Труды НИИКиЭЛ СО РАМН. Новосибирск, 1998. Т. 7. С. 11-12.
2. Копланский, А.Р. Изменение биоаминного статуса тимуса при повреждении печени и кожи: автореф. дис. ... канд. мед.наук. Саранск, 1997. 29 с.
3. Любовцева, Л.А. Люминесцентно-гистохимическое исследование ам и но содержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов. Чебоксары: Изд-во Чуваш, ун-та, 1993. С. 17—20.
4. Гущин, Г.В. Проблема локальных механизмов воздействия нервной и иммунной систем // Взаимодействие нервной и иммунной систем: тез. докл. Всесоюзного симпозиума. Л.; Ростов-н/Д., 1990. С. 66.
5. Герасимова, Л.И. Эффективность применения низкоинтенсивных лазеров в лечении ожогов / Л.И. Герасимова, В.В. Артемова, М.В. Шахламов // Материалы 6-й Респ. науч.-практ. конф. по проблеме термических поражений. Горький: М3 РСФСР, 1990. С. 112-114.
6. Карандашов, В.И. Фототерапия (светолечение): руководство для врачей / В.И. Карандашов, Е.Б. Петухов, B.C. Зродников; под ред. Н.Р. Палеева. М.: Медицина, 2001. 392 с.
7. Сыч, В.Ф. Заживление ран у крыс под воздействием светодиодного излучения красного диапазона /В.Ф. Сыч, О.В. Столбовская, Л.Д. Калачева // Морфология. 2000. Т. 117. С. 118-119.