CC BY
58
в.д. пасечников, л.р. джанибекова, с.з. чуков 012
Ставропольская государственная медицинская академия
Состояние иммунного ответа у пациентов с H.pylori-ассоциированным хроническим атрофическим гастритом и ранним раком желудка в зависимости от серотипа возбудителя
I Пасечников виктор дмитриевич
доктор медицинских наук, профессор,
заведующий кафедрой терапии Института последипломного и дополнительного образования 355017, г. Ставрополь, ул. Мира, д. 310, тел. (8652) 71-60-35, e-mail: [email protected]
У 55 больных с H.pylori-ассоциированным атрофическим гастритом и 18 с ранним раком желудка изучена взаимосвязь между инфицированием H.pylori определенных серотипов и развитием заболевания. Серологические результаты были сопоставлены с данными, полученными по новой системе OLGA, предложенной М. Rugge и R.M. Genta. Результаты исследования показали связь между инфицированием H.pylori I и Ia серотипов и наличием III и IV стадий атрофии в соответствии с системой OLGA.
Ключевые слова: хронический атрофический гастрит, серотипы H.pylori, ранний рак желудка.
V.D. PASEOHNIKov, L.R. DZHANIBEKovA, S.Z. CHUK0V
Stavropol State Medical Academy
The condition of the immune response in patients with H.pylori-associated chronic atrophic gastritis and early gastric cancer depending on the serotype of the pathogen
In 55 patients with H.pylori — associated atrophic gastritis and 18 with early gastric cancer was studied the relationship between
H.pylori infection of certain serotypes and the development of atrophic gastritis and gastric cancer. The serological results were compared with the data obtained by the new assessment system OLGA (Operative Link for Gastritis Assessment), proposed by M. Rugge and R. M. Genta. The results showed an association between H.pylori infection of I and la serotypes and the presence of the advanced stages Ill and IV of atrophy according to the OLGA system.
Keywords: chronic atrophic gastritis, H.pylori serotypes, early gastric cancer.
Несмотря на снижение заболеваемости раком желудка в развитых странах, он всё еще остается актуальной проблемой гастроэнтерологии. Идентификация H.pylori в значительной степени способствовала прояснению представлений о же-
лудочном канцерогенезе. Инфицирование H.pylori вызывает развитие хронического активного воспаления СОЖ, которое может прогрессировать с развитием атрофии, кишечной метаплазии, — состояний, усиливающих риск развития РЖ
ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ
'3 (SB) май 2012 г.
[1, 2]. Клинический исход инфицирования H.pylori находится под влиянием комплекса взаимодействий между бактериальными патогенными факторами, ответной реакцией хозяина и факторами среды [3].
Для объяснения различий в клинических последствиях инфицирования Helicobacter выдвинута гипотеза о том, что одни штаммы H.pylori более вирулентны, чем другие. Изучение патогенных факторов H.pylori стало развиваться особенно интенсивно после изучения полной последовательности генома этого микроорганизма [4]. В патогенезе H.pylori-инфекции давно известна роль двух протеиновых субстанций, продуцируемых бактерией, — вакуолизирующего цитотоксина VacA и цитотоксин-ассоциированного протеина CagA. Патогенные свойства CagA, VacA описаны в многочисленных исследованиях [5].
Одним из серологических методов диагностики H.pylori-инфекции, обладающим высокой специфичностью, является Western-blot — встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными белками H.pylori, меченными зондами, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. С помощью данного метода штаммы H.pylori в настоящее время подразделяют на 4 серотипа в зависимости от выработки микроорганизмами цитотоксина VacA и цитотоксин-ассоциированного белка CagA: тип I (CagA+, VacA+), тип 1а (CagA+, VacA-), тип Ib (CagA-, VacA+), тип II (CagA-, VacA-) [6]. Определение серотипа штаммов H.pylori у инфицированных имеет важное прогностическое значение. J. Rudi и соавт. [7] приводят данные о том, что пациенты с выявленными у них CagA+ штаммами H.pylori в значительно большей степени подвержены риску развития язвенной болезни и рака желудка, чем инфицированные CagA(-) штаммами.
В связи с этим мы провели изучение взаимосвязи между инфицированием пациента штаммами H.pylori определенных серотипов и развитием атрофии слизистой оболочки желудка при хроническом атрофическом гастрите и раннем раке желудка.
Материал и методы
В исследование включено 55 пациентов с H.pylori-ассоциированным хроническим атрофическим гастритом (АГ) и 18 пациентов с ранним раком желудка (РРЖ). До проведения эндоскопического исследования ни один из пациентов не принимал препараты из групп ингибиторов протонной помпы или нестероидных противовоспалительных средств. Контрольную группу составили H.pylori-негативные добровольцы в возрасте от 17 до 45 лет, у которых в анамнезе отсутствовали заболевания желудочно-кишечного тракта и при ЭГДС гастродуоденальная слизистая оболочка оценивалась как практически неизмененная. Пациентам проводили ЭГДС с множественными биопсиями (по 2 биоптата из тела и антрального отдела желудка и один биоптат из области угла желудка, с учетом требований модифицированной Сиднейской системы) с последующим гистологическим изучением биоптатов. Выявленные изменения классифицировали в зависимости от стадии развития атрофии в соответствии с визуально-аналоговой шкалой Хьюстонской модификации Сиднейской системы. Определение характера В-клеточного иммунного ответа пациентов осуществляли при помощи Вестерн-блоттинга (HELICOBLOT 2.0, Genelabs Diagnostic, Singapore) с выявлением 4 серотипов H.pylori. Полученные при гистологическом исследовании значения воспалительного повреждения слизистой оболочки желудка и ее атрофии в дальнейшем использовали для подсчета стадии атрофии, согласно новой системе оценки OLGA (Operative Link for Gastritis Assessment), предложенной M. Rugge и R. M. Genta [8]. В соответствии с этой системой стадия развития атрофии
оценивается при помощи таблицы (рис.1), в которую заносятся результаты полуколичественноС оценки атрофии слизистой оболочки желудка, и величина стадии атрофии является результатом суммирования показателей атрофии в слизистой оболочее телт и аетральнего оедело желудка. (°таристичепкую об|аабоаку полученных данных п|товодили припомощи точного срите|оиа Фиштра.критйрия г и непафнметрического критерия
х2.
Рисунок 1.
Схема подсчета стадии развития атрофии слизистой оболочки желудка по M. Rugge и R.M. Genta [8]
Стадия развития атрофии слизистой оболочки желудка Тело желудка
Нет атрофпп (0 баллов) Слабо выраженная атрофпя (1 балл) Умеренно выраженная атрофпя (2 балла) Значительно выраженная атрофия (3 балла)
З 6 >3 3 А 2 р- X < Нет атрофии (0 баллов) Стадия 0 Стадия I Стадия II Стадия II
Слабо выраженная атрофия (Ібалл) Стадия I Стадия I Стадия II Стадия III
Умеренно выраженная атрофия (2 балла) Стадия II Стадия II Стадия III Стадия IV
Значительно выраженная атрофия (3 балла) Стадия III Стадия III Стадия IV Стадия IV
Результаты исследования
У пациентов с АГ в подавля ю щем большинст ве случаев выявлялись I и la серотипыН.рylori — каокдый серотип встречался у 22 пациентов (по 40%). Далее, в порядке убывания частоты выявления, следовали серотип II — у 8 пациентов (14,55%) и серотип Ib — у 3 пациентов (5,45%) (табл. 1, рис. 2).
Таблица 1.
Частота определенного серотипа H.pylori при различных стадиях развития атрофии СОЖ по системе OLGA у пациентов с АГ
Серотипы H.pylori Стадия атрофии по системе OLGA
0 I II III IV
Серотип I о 8 5 3 6
Серотип Ia о 7 4 5 6
Серотип Ib о 2 1 о о
Серотип II о 2 4 1 1
Максимальная частота обнаружения серотипов H.pylori I (36,36%), la (31,82%) и Ib (66,67%) выявлялась при I стадии атрофии СОЖ, а серотип II чаще (50%) обнаруживался при II стадии атрофии по системе OLGA. Наименьшая частота обнаружения I серотипа H.pylori выявлялась при III стадии атрофии по системе OLGA (13,64%), серотипов Ia (18,18%) и Ib (33,33%) — при II стадии атрофии, а серотипа II — при III и IV стадиях атрофии (по 12,5%).
Статистический анализ полученных данных показал, что различия между максимальной и минимальной частотой выявления антител были достоверны для серотипов I (P<0.05), Ib (P<0.001) и II (P<0.001). В отношении серотипа !а указанные различия оказались недостоверными (P>0.05).
гастроэнтерология
Рисуно к 2.
Чистота выявления различных серотипов H.pylori у пациентов с АГ
I la Ib II
Таким образом, при хроническом атрофическом гастрите в этиологическойструктурепреобладали штаммы H.pylori I и II серотипок.чаще всеооассе+серуясь с развотием1лтадии атеофpío оо ор^(^‘^^м^ТЭLGA.
а пациечкчвс РРЖ вотвлялтсо толеко I л 1асеротупы
H.pylori. К ри этомие рот тек I всрроаапреуКа пацитреов )66,67%), а серотип la — у 6 пациентов (33,33%). Серотипы Ib и II при рРЖее ттораиались (табл. 2, рис. 3).
Таблица 2.
Чаеоотавееручаемосуиопределе нного серотипа H.pylori при различных стадиях развития атрофии СОЖ по системе OLGA у пациентов с РРЖ
Серотипы H.pylori Стадия атрос >ии по системе OLGA
0 I II III IV
Серотип I 0 1 2 4 5
Серотип Ia 0 0 0 1 5
Максимальная частота обнаружения I серотипа H.pylori у пациентов с РРЖ выявлялась при III и IV стадиях атрофии по системе OLGA (соответственно, 33,33% и 41,67%), серотип Ia в подавляющем большинстве случаев (83,33%) обнаруживался при IV стадии атрофии по системе OLGA. Минимальная частота обнаружения I серотипа H.pylori у пациентов с РРЖ выявлялась при I стадии атрофии (8,33%), при этом различия между максимальной и минимальной частотой выявления данного серотипа оказались достоверными (P<0.05). Минимальная частота обнаружения !а серотипа H.pylori у пациентов с РРЖ выявлялась при III стадии атрофии (16,67%), при этом различия между максимальной и минимальной частотой выявления данного серотипа также были достоверными (P<0.001).
Таким образом, при РРЖ в этиологической структуре выявлялись только штаммы H.pylori I и !а серотипов, достоверно ассоциируясь с развитием III и особенно IV стадий атрофии по системе OLGA. При этом серотип Ia чаще ассоциировался с наиболее тяжелой, IV стадией атрофии.
Выводы
1. Сравнение частоты обнаружения иммунного ответа к различным серотипам H.pylori при АГ и РРЖ выявило наличие общей тенденции преобладания в развитии изучаемой патологии серотипов I и Ia.
Р исунок 3.
Частота выя вл ения различ ных сероти по в H.pylori у пациентов с РРЖ
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
СеротипI СеротипI а
2. Сопоставлениерезультатов вестерн-блоттинга и гисто-логическосо езучения биотсатот СОЖр оказало, чт5 8ре АГ штаммыН .pylori I и II серотипов чаще всего ассоциировались с развитием I стадии атрофии по системе OLGA, в то время каоприРРЖ штаммыН .pT5ri I 2 1телротиловдосиоьтсто ат-ссциировалисьс развилисм 111т, оеобеннс,1\/ стадийатрофти по CHCTeMP0LGA,npHC80Mcep0TKP la чаще и&тоциистврлся с наиболее тяжелой, IV стадией атрофии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Correa P. Human gastric carcinogenesis: A multistep and multifactorial process. First American Cancer Society Award Lecture on Cancer Epidemiology and Prevention. Cancer Res. — 1992. — Vol. 52. — P. 6735-6740.
2. Пасечников В.Д., Балабеков А.В., Чуков С.З. Процессы клеточного обновления при H.pylori-ассоциированном хроническом атрофическом гастрите // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. — 2010. — № 1. — С. 8-12.
3. Денисов Н.Л., Ивашкин В.Т., Лобзин Ю.В., Голофеев-ский В.Ю. Хронический гастрит с позиций взаимодействия иммунного, инфекционного и морфологического факторов // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. — 2008. — № 6. — С. 22-26.
4. Alm R.A., Ling L.S., Moir D.T. et al. Genomic-sequence comparison of two unrelated isolates of the human gastric pathogen Helicobacter pylori // Nature. — 1999. — Vol. 397. — P 176-180.
5. Cassaro M., Rugge M., Tieppo C. et al. Indefinite for non-invasive neoplasia lesions in gastric intestinal metaplasia: the immunophenotype // J Clin Pathol. — 2007. — Vol. 60 (6). — P. 615-621.
6. Пасечников В.Д., Чуков С.З. Определяют ли факторы вирулентности H.pylori характер гастродуоденальной патологии? // Росс. журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. — 2001. — Т. IX, № 2. — Приложение № 13, Материалы IV международного симпозиума «Диагностика и лечение заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori», май 2001, Санкт-Петербург. — С. 74-81.
7. Rudi J., Rudy A., Maiwald M. et al. Direct determination of Helicobacter pylori vacA genotypes and cagA gene in gastric biopsies and relationship to gastrointestinal diseases // Am. J. Gastroenterol. — 1999. — Vol. 94, N6. — P 1525-1531.
8. Rugge M., Genta R.M. Staging and grading of chronic gastritis // Hum Pathol. — 2005. — Vol. 36. — P. 228-233.
ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ
