CC BY
90
Химия растительного сырья. 2016. №3. С. 73-78. DOI: 10.14258/jcprm.2016031174
УДК 577.121:582.29:633.877.3(571.56-191.2)
СОДЕРЖАНИЕ ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ В ЛИШАЙНИКАХ СОСНОВЫХ ЛЕСОВ ЦЕНТРАЛЬНОЙ ЯКУТИИ
© И. А. Прокопьев , JI.H. Порядина, Г.В. Филиппова, A.A. Шеин
Институт биологических проблем криолитозоны СО РАН, пр. Ленина, 41, Якутск, 677980 (Россия), e-mail: [email protected]
В результате проведенного исследования были выделены вторичные метаболиты эпигейных кустистых лишайников Cladonia amaurocraea, С. arbuscula, С. stellaris, С. rangiferina и Flavocetraria cucullata, произраставших в сосновых лесах Центральной Якутии, которые были идентифицированы как лишайниковые кислоты (дибензофураны, деп-сиды и а-метилен у-лактоны). Показано, что содержание лишайниковых кислот в талломах лишайников зависело от типа соснового леса, из которого они были отобраны. Наибольшее содержание усниновой кислоты во всех изученных лишайниках, а также содержание лихестериновой, протолихестериновой кислот в талломах F. cucullata, наблюдалось в образцах, отобранных в бруснично-лишайниковых, толокнянково-бруснично-лишайниковых и шикшево-бруснично-лишайниковых сосняках. В то же время содержание перлатолиевой кислоты, орцинолового депсида и атра-норина было, напротив, выше в образцах С. stellaris С. amaurocraea и С. rangiferina, отобранных в лишайниково-брусничном сосняке с примесью лиственницы. Предположено, что различное содержание вторичных метаболитов в лишайниках, произрастающих в изученных типах лесных сообществ Центральной Якутии, может быть обусловлено как действием абиотических факторов среды (свет, температура, влажность), так и конкуренцией со стороны других видов растений.
Ключевые слова: лишайники, сосновые леса, вторичные метаболиты, лишайниковые кислоты.
Работа выполнена в рамках государственных заданий по проектам №0376-2014-0005 и №0376-20140003 при финансовой поддержке гранта главы PC (Я) для молодых ученых специалистов и студентов на 2016 г.
Введение
Территория Якутии обладает значительными запасами природного лишайникового сырья, что обусловливает высокий потенциал развития биотехнологического производства. В настоящие время в Якутии и Бурятии на основе лишайников рода кладония налажено производство ряда пищевых биологически активных добавок - «Ягель», «Ягель детокс», «Кладосент» и т.д. [1-3].
Известно, что накопление органических метаболитов в лишайниках зависит от различных абиотических факторов среды: освещенность, температура, влажность и т.д. [4, 5]. В то же время сведений о накоплении вторичных метаболитов в лишайниках, произрастающих в различных типах одного растительного сообщества, практически нет.
В пределах Центрально-Якутского флористического района господствует светлохвойная тайга из ли-
Прокопьев Илья Андреевич - кандидат биологических ственницы Каяндера (Larix cajanderi Мауг) и сосны наук, старший научный сотрудник, обыкновенной (Pinus sylvestris L.). Сосняки занимают
хорошо прогреваемые и относительно сухие участки южных склонов и вершин водоразделов среди лист-
e-mail: [email protected] Порядина Лена Николаевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, e-mail: [email protected] венничной тайги. В районе исследования распростра-
Филиппова Галина Валерьевна - кандидат нены толокнянковые, брусничные, лишайниковые
биологических наук старший научный сотрудник, и разнотравные сосновые леса [6, 7]. Сосняки Цен-e-mail: [email protected]
Шеин Алексей Анатольевич - кандидат биологических тральной Якутии выделяются по обилию эпигейных
наук, старший научный сотрудник, кустистых видов лишайниковой флоры, отмечено 34
e-mail: [email protected]
вида лишайников из 4 семейств и 5 родов [8].
Автор, с которым следует вести переписку.
Цель работы - определить содержание вторичных метаболитов в кустистых лишайниках, произрастающих в различных типах сосновых лесов Центральной Якутии.
Экспериментальная часть
В качестве объектов исследования были выбраны эпигейные кустистые лишайники, относящиеся к семействам Cladoniaceae (кладония звездчатая - Cladonia stellaris (Opiz) Pouzar & Vëzda, кладония лесная - Cladonia arbuscula (Wallr.) Flot., кладония стройная - Cladonia amaurocraea (Flôrke) Schaer., кладония оленья - Cladonia rangiferina (L.) F.H.Wigg.) и Parmeliaceae (флавоцетрария клубочковая - Flavocetraria cucullata (Bellardi) Kârnefelt & A.Thell), талломы которых формируют лишайниковый покров сосновых лесов Центральной Якутии.
Отбор образцов лишайников для определения содержания в них вторичных метаболитов был произведен в конце июня 2014 г. в окрестностях Якутска на следующих участках: 62°3' с.ш. 129°34' в.д. сосняк лишайниково-брусничный с примесью лиственницы (точка 1), 62°4' с.ш. 129°27' в.д. сосняк толокнянково-бруснично-лишайниковый (точка 2), 61°55' с.ш. 129°31' в.д. сосняк шикшево-бруснично-лишайниковый (точка 3) и 61°50' с.ш. 129°30' в.д. сосняк бруснично-лишайниковый (точка 4). Места отбора проб имели следующие проективное покрытие лишайниками: точка 1 - 15%, точка 2 - 35%, точка 3 - 50%, точка 4 -40%. С участков площадью 10 м2 отбирали среднюю пробу лишайников, состоявшую не менее чем из пяти образцов каждого изучаемого вида. Почвенный покров в местах отбора проб относился к мерзлотному песчаному и супесчаному типу.
Для выделения и последующей идентификации лишайниковых кислот брали по 50 г измельченных воздушно-сухих талломов каждого вида лишайника, после чего экстрагировали с использованием аппарата Сокслета в два этапа. На первом этапе измельченные талломы экстрагировали легким петролейным эфиром (температура кипения фракции 40-70 °С) в течение 12 ч. После остывания из частично упаренных экстрактов лишайников С. stellaris, С. arbuscula, и С. атаигосгае выпадал мелкокристаллический осадок желтого цвета (выход 0,1-0,5 г), из экстракта С. rangiferina - светлый мелкокристаллический осадок (выход 0,1 г). Из петролейного экстракта F. cucullata сразу после остывания обильно выпадал светлый мелкокристаллический осадок (выход 1,5 г); дальнейшее частичное упаривание экстракта приводило к выпадению желтого мелкокристаллического осадка (выход 0,1 г). На втором этапе оставшийся шрот повторно экстрагировали легким петролейным эфиром (С.stellaris, и F. cucullata) или хлороформом (С. атаигосгае) в течение 48 ч. После остывания и частичного упаривания полученных экстрактов С.stellaris, С. атаигосгае и F. cucullata выпадал светлый мелкокристаллический осадок (выход 0,2-2,5 г). Все полученные кристаллы отделялись фильтрованием, после чего отчищались последовательной перекристаллизацией из бензола и ацетона.
Для идентификации выделенных из экстрактов лишайниковых веществ (смеси веществ) использовали методы ИК- и УФ-спектроскопии. ИК-спектры выделенных соединений снимали на инфракрасном спектрометре с преобразователем Фурье Vanan 7000 FT-IR (США) с приготовленных из бромида калия таблеток в диапазоне 4000-400 см"1. УФ-спектры метанольных растворов выделенных веществ снимали на спектрофотометре Shimadzu UV-2600 (Япония) в диапазоне 190-350 нм. Идентификацию проводили, сопоставляя полученные спектры выделенных веществ с уже известными спектрами лишайниковых метаболитов [9, 10].
Выделенные и идентифицированные лишайниковые вещества использовали в качестве стандартов для определения их содержания в талломах. Для анализа брали только верхние молодые части воздушно-сухих лишайников длиной не более 1,0 см. Измельченную пробу исследуемого образца навеской 0,1 г экстрагировали 10 мл ацетонитрила, выбранного в качестве растворителя за счет хорошей растворяющей способности и отсутствия поглощения в УФ области. Экстракцию проводили при постоянном перемешивании в течение 24 ч и температуре 20-25 °С. Полученный экстракт пропускали через мембранный фильтр с диаметром пор 0,20 мкм и проводили его анализ методом ВЭЖХ на микроколоночном хроматографе Мили-хром А-02 фирмы «ЭкоНова» (Россия) с последующей компьютерной обработкой результатов исследования программой «МультиХром» для «Windows».
Разделение проводили на обращено-фазовой колонке ProntoSIL 120-5-С18 AQ размером 2x75 мм. В качестве подвижной фазы «А» использовали 0,1% водный раствор уксусной кислоты, «В» - ацетонит-рил, градиентный режим элюирования с возрастанием доли «В» от 10 до 50% в течение 5 мин и от 50 до 100% - в течение 20 мин при скорости потока 100 мкл/мин и температуре колонки 40 °С. Объем вносимой пробы - 4 мкл. Детектирование осуществляли с помощью сканирующего УФ - спектрофотометрического детектора на длинах волн 210 и 230 нм.
Все аналитические измерения выполнены в четырех повторностях. Результаты экспериментов представлены в виде средней арифметической величины и ее стандартного отклонения. Нормальность распределения проверялась с помощью критерия Шапиро-Уилка. Сравнение средних значений выборок проводили методом однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA), значимость отличий между средними значениями определяли, используя критерий Ньюмена-Кейлса для множественного сравнения при уровне р<0,05. Расчет проводился с помощью пакета AnalystSoft, StatPlus - программа статистического анализа, v.2007.
Обсуждение результатов
Идентификация выделенных из лишайников вторичных метаболитов показала, что они относятся к типу лишайниковых кислот (дибензофураны, депсиды, а-метилен у-лактоны) и характеризуются достаточно высокой степенью чистоты. Показано, что лишайники Cladonia. amaurocraea, C.arbuscula, C.stellaris и Flavocetraria cuculí ata содержат усниновую кислоту (табл. 1). Кроме усниновой кислоты, в талломах лишайников были идентифицированы ароматические соединения - атранорин (С. rangiferina), перлатолиевая (С. stellaris) кислота, а также алифатические протолихестериновая и лихестериновая кислоты в (F. cucullata).
Соединение, выделенное из талломов С. amaurocraea, не удалось полностью идентифицировать путем сопоставления полученных спектров с уже известными спектрами лишайниковых метаболитов. Основываясь на данных о максимумах поглощения в УФ-спектре и наличии полос поглощения в области характеристических частот валентных колебаний С=0 карбонильной группы (1700-1660 см"1); валентных колебаний С-С ароматического кольца (1650-1570 см"1); валентных антисимметричных и симметричных колебаний С-О-С сложной эфирной связи (1300-1250 см"1 и 1120-1070 см"1 соответственно); валентных колебаний С-0 связи (1250-1180 см"1) и деформационных внеплоскостных колебаний С-Н связей ароматического кольца (1000-650 см"1) в ИК-спектре, можно предположить, что выделенное из лишайника С. amaurocraea соединение, соответствует депсидам орционолового типа [9, 11].
Из таблицы 2 следует, что суммарное содержание лишайниковых кислот для образцов С. stellaris, С. arbúsculo и F. cucullata, отобранных в точках 3 и 4, было выше в 1,3-1,9 раза в сравнении с точками 1 и 2. Для образцов С. rangiferina и С. amaurocraea, наоборот, наибольшее суммарное содержание лишайниковых кислот наблюдалось в точках 1 и 2.
Содержание отдельных лишайниковых кислот изменялось следующим образом: наибольшее содержание усниновой кислоты, в талломах С. stellaris наблюдалось в образцах, отобранных в точках 2, 3 и 4 -1,1% от сухой массы, что в 1,6 раза выше, чем в точке 1 (табл. 2). Содержание перлатолиевой кислоты в образцах С. stellaris, отобранных в точках 1 и 4, было в среднем в 2,0 раза выше, чем в образцах, отобранных в точках 2 и 3.
Таблица 1. Идентифицированные вторичные метаболиты в лишайниках, произрастающих в различных типах сосновых лесов Центральной Якутии
Лишайниковая кислота УФ (МеОН), нм УФ (МеОН), нм [9, 10] ПК (КВг), см"1
1690, 1628, 1538, 1451, 1421, 1375,1356, 1334,
Усниновая кислота 232,282 234, 282 1317, 1287, 1221, 1189, 1144, 1118, 1070, 1040, 1024, 992, 958, 840, 819, 802, 701 1659, 1637, 1610, 1461, 1353, 1319, 1301, 1284,
Перлатолиевая 213,269, 306 213,269, 306 1239, 1210, 1163, 1140, 1074, 1043, 1018, 955, 865, 850, 840, 792, 766, 737 1651, 1583, 1451, 1408, 1378, 1352, 1284 1268,
Атранорин 209,251,312 210,252,312 1236, 1214, 1200, 1163, 1106, 1076, 1028, 1007, 990, 937, 860,821,802,783 1658, 1630, 1610, 1574, 1503, 1451, 1399, 1381,
Орционоловый депсид 214,275,305 1273, 1233, 1156, 1132, 1079, 1050, 992, 833, 810, 790, 728 1725, 1690, 1470,1430, 1380, 1350, 1320, 1215,
Лихестериновая 227 227 1150, 1135, 1022, 1010, 990, 955,900,770,722, 710 2919,2848, 1741, 1717, 1661, 1462, 1434, 1403,
Протолихестериновая 218 218 1352, 1309, 1252, 1217, 1199, 1182, 1127, 1106, 1021, 972, 962, 947, 853, 815, 712
Таблица 2. Содержание вторичных метаболитов в лишайниках, произрастающих в различных типах
сосновых лесов Центральной Якутии
Точка Описание мес- Вид Содержание лишайниковых кислот, % от воздушно-сухой массы
отбора та отбора проб лишайника
УК пж лек ПЛСК ОД АТР ЕЖ
Сосняк с при- С. stellaris 0,7±0,1а 1,0±0,2а - - - - 1,7±0,2а
месью лист- С. arbuscula 0,7±0,1а - - - - - 0,7±0,1а
1 венницы ли- F. cucullata 0,6±0,1а 0,9±0,1а 3,0±0,2а - - 4,5±0,За
шайниково- С. атаигосгаеа 0,2±0,0а - - - 1,5±0,1а - 1,7±0,1а
брусничный C.rangiferina - - - - - 0,9±0,1а 0,9±0,1а
2 Сосняк толок-нянково-бруснично-лишайниковый С. stellaris С. arbuscula F. cucullata С.атаигосгаеа 1Д±0ДЬ 0,8±0,1а 0,8±0,1ь 0,9±0,1ь 0,6±0,1ь 1,2±0,1ь 3,3±0,3а'ь 1,2±0,1ь - 1,7±0,1а 0,8±0,1а 5,3±0,3Ь 2,1±0,2Ь
C.rangiferina - - - - - 0,6±0,1ь 0,6±0,1ь
3 Сосняк шик-шево-бруснично-лишайниковый С. stellaris С. arbuscula F. cucullata С. атаигосгаеа 1Д±0ДЬ 1,4±0,2Ь 1,3±0,2Ь 0,5±0,1с 0,7±0,1ь 1,4±0,1ь'с 3,7±0,3Ь 1,2±0,1ь - 1,8±0,2а 1,4±0,2Ь 6,4±0,4С 1,7±0,2а
C.rangiferina - - - - - 0,5±0,1ь 0,5±0,1ь
С. stellaris 1Д±0ДЬ 1,3±0,2а - - - - 2,4±0,2Ь
Сосняк брус- С. arbuscula 1,5±0,2Ь - - - - - 1,5±0,2Ь
4 нично- F. cucullata 1,6±0,2Ь - 1,7±0,2С 4,0±0,4Ь - - 7,3±0,5С
лишайниковый С. атаигосгаеа 0,4±0,1с - - - 0,7±0,1с - 1,1±0,1с
C.rangiferina - - - - - о,з±о,ос 0,3±0,0С
Примечания: УК - усниновая кислота, ПЛЕС - иерлатолиевая кислота, JICK - лихестериновая кислота, ПЛСК - протоли-хестерииовая кислота, ОД - орцииоловый деисид, АТР - атраиории, S ЛК - суммарное содержание лишайниковых кислот. Средние значения с одинаковыми буквенными надстрочными индексами статистически неразличимы при р<0,05.
В талломах С. агЬияси1а была идентифицирована только усниновая кислота, наибольшее содержание которой было выявлено в образцах, отобранных в точках 3 и 4 -1,4±0,2 и 1,5±0,2% от сухой массы соответственно, что в среднем в 1,9 раза выше ее содержания в лишайниках, отобранных в точках 1 и 2 (0,7±0,1 и 0,8±0,1% от сухой массы соответственно).
Показано, что содержание усниновой и лихестериновой кислот в образцах /•'. сиси1Ша, отобранных в точках 2, 3 и 4, было в 1,3-2,7 раза выше, чем в лишайниках, отобранных в точке 1. Наибольшее содержание протолихестериновой кислоты наблюдалось в образцах /•'. сиси1Ша, отобранных в точках 3 и 4 (3,7±0,3 и 4,0±0,4% от сухой массы, соответственно), что в 1,2-1,3 раза выше ее содержания в лишайниках, отобранных в точке 1 (3,0±0.2% от сухой массы).
Минимальное содержание усниновой кислоты было выявлено в образцах талломов С. атаигосгаеа, отобранных в точке 1 - 0,2±0,0% от сухой массы, что 2,0-4,5 раза ниже, чем точках 2, 3 и 4 - 0,9±0,1, 0,5±0,1 и 0,4±0,1% от сухой массы соответственно.
В то же время содержание депсида орцинолового типа в образцах С. атаигосгаеа и атранорина в С. га^1/егта, отобранных в лишайниково-брусничном сосняке с примесью лиственницы (точка 1), было в 1,3-2,1 и 1,5-3,0 раза соответственно выше, чем в образцах лишайников, отобранных в точках и 2, 3 и 4.
Таким образом, содержание усниновой, лихестериновой и протолихестериновой кислот в изученных видах лишайников было минимальным в образцах, отобранных в точке 1. Вместе с тем, изученные лишайники, произрастающие в лишайниково-брусничном сосняке с примесью лиственницы (точка 1), характеризовались наибольшим содержанием различных депсидов (атранорин, перлатолиевая кислота, орциноловый депсид), что может указывать на адаптивную функцию ароматических лишайниковых кислот в данных условиях произрастания.
Можно предположить, что различное содержание вторичных метаболитов в лишайниках, произрастающих в изученных типах лесных сообществ Центральной Якутии, может быть обусловлено как действием абиотических факторов среды (свет, температура, влажность), так и конкуренцией со стороны других видов растений. Известно, что лишайниковые кислоты играют важную роль в аллелопатическом взаимодействии с другими растительными организмами [5]. Так, было показано, что лишайниковые кислоты способны оказывать ингибирующие действие на прорастание семян, а также рост и развитие проростков высших растений и мхов [12].
Выводы
В результате проведенных исследований были выделены вторичные метаболиты лишайников Cladonia. amaurocraea, С. arbuscula, С. stellaris, С. rangiferina и Flavocetraria cucullata, произраставших в сосновых лесах Центральной Якутии, которые были идентифицированы как лишайниковые кислоты (ди-бензофураны, депсиды, а-метилен у-лактоны). Показано, что содержание лишайниковых кислот в талломах лишайников зависело от типа соснового леса, из которого они были отобраны. Наибольшее содержание усниновой кислоты во всех изученных лишайниках, а также содержание лихестериновой, протолихе-стериновой кислот в талломах F. cucullata, наблюдалось в образцах, отобранных в бруснично-лишайниковых, толокнянково-бруснично-лишайниковых и шикшево-бруснично-лишайниковых сосняках. В то же время содержание перлатолиевой кислоты, орцинолового депсида и атранорина было, напротив, выше в образцах С. Stellaris, С. amaurocraea и С. rangiferina, отобранных в лишайниково-брусничном сосняке с примесью лиственницы.
Список литературы
1. Бураева Л.Б., Николаева М.Г., Пожарицкая О.Н., Дугарова Г.О., Николаев С.М., Асеева Т.А. Радиопротекторное действие растительного препарата «Кладосент» при острой лучевой болезни у белых крыс // Растительные ресурсы. 1998. №1. С. 77-81.
2. Кершенгольц Б.М., Журавская А.Н., Хлебный Е.С., Шеин A.A., Филиппова Г.В., Шашурин М.М., Анынако-ва В.В. Биопрепараты из природного арктического биосырья в сохранении здоровья населения в условиях изменений климата // Экология человека. 2010. №3. С. 8-15.
3. Анынакова В.В. Биотехнологическая механохимическая переработка лишайников рода Cladonia. M., 2013. 116 с.
4. Равинская А.П., Вайнштейн Е.А. Влияние некоторых экологических факторов на содержание лишайниковых веществ//Экология. 1975. №3. С. 82-85.
5. Rundel P.W. Ecological role of secondary lichen substances // Biochemical Systematics and Ecology. 1978. Vol. 6. Pp. 157-170.
6. Уткин А.И. Леса Центральной Якутии. M., 1965. 208 с.
7. Тимофеев П.А., Исаев А.П., Щербаков И.П. Леса среднетаежной подзоны Якутии. Якутск, 1994. 140 с.
8. Колобкова М.В. Листоватые и кустистые лишайники окрестностей города Якутска // Биологические проблемы севера. Якутск, 1986. С. 46^7.
9. Huneck S., Yoshimura I. Identification of lichen substances. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1996. 493 p.
10. Yoshimurat I., Kinoshita Y., Yainumoloi Y., Huneck S., Yamada Y. Analysis of Secondary Metabolites from Lichen by High Performance Liquid Chromatography with a Photodiode Array Detector // Phytochemical analysis. 1994. Vol. 5. Pp. 197-205.
11. Сильверстейн P., Вебстер Ф., Кимл Д. Спектрометрическая идентификация органических соединений. М., 2014. 557 с.
12. Lawrey J.D. Biological Role of Lichen Substances // The Bryologist. 1986. Vol. 89. Pp. 111-122.
Поступило в редакцию 16 февраля 2016 г.
После переработки 10 мая 2016 г.
78
H.A. npoKontEB, Jl.H. noPii^HHA, r.B.®HJiHnnoBA, A. A. IIIehh
Prokopiev I.A* Poryadina L.N., Filippova G.V., Shein A.A. SECONDARY METABOLITES CONTENT IN PINE FORESTS LICHENS OF CENTRAL YAKUTIA
Institute for Biological Problems of Cryolithozone SB RAS, pr. Lenina, 41, Yakutsk, 677980 (Russia), e-mail: ilya. a.prokopiev@gmail. com
The studies were identified secondary metabolites of fruticoses lichens Cladonia amaurocraea, C.arbuscula, C.stellaris, C. rangiferina and Flavocetraria cucullata, grows in the pine forests of Central Yakutia, which were identified as lichen acid (Dibenzofuranes, Depsides, and a-Methylene-y-lactones). It was shown that the content of lichens acid in thalli of lichens depend on the pine forest type, from which they were selected. The highest content of usnic acid in all studied lichens, as well as content lichesterinic, protolichesterinic acids in F. cucullata thalli, was observed in samples taken in the lichen-cowberry, bear-berry-cowberry-lichen and crowberry-cowberry-lichen pine forests. At the same time, the content perlatolic acid, orcinol depsid and atranorin on the contrary higher in the samples C. stellaris C. amaurocraea and C. rangiferina, selected in the lichen-cowberry pine with larch admixture. Is assumed that the different contents of secondary metabolites in lichens growing in the studied types of Central Yakutia forest communities, may be due to the influence of abiotic environmental factors (light, temperature, humidity), and competition from other plant species.
Keywords: lichen, pine forests, secondary metabolites, lichen acids.
References
1. Buraeva L.B., Nikolaeva M.G., Pozharitskaia O.N., Dugarova G.O., Nikolaev S.M., Aseeva T.A. Rastitel'nye resursy, 1998, no. 1, pp. 77-81. (inRuss.).
2. Kershengol'ts B.M., Zhuravskaia A.N., Khlebnyi E.S., Shein A.A., Filippova G.V., Shashurin M.M., An'shakova V.V. Ekologiia cheloveka, 2010, no. 3, pp. 8-15. (in Russ.).
3. An'shakova V.V. Biotekhnologicheskaia mekhanokhimicheskaia pererabotka lishainikov roda Cladonia. [Biotechno-logical mechanochemical processing lichen genus Cladonia], Moscow, 2013, 116 p. (in Russ.).
4. Ravinskaia A.P., Vainshtein E.A. Ekologiia, 1975, no. 3, pp. 82-85. (in Russ.).
5. Rundel P.W. Biochemical Systematics and Ecology, 1978, vol. 6, pp. 157-170.
6. Utkin A.I. Lesa Tsentral'noi Lakutii. [The forests of Central Yakutia], Moscow, 1965, 208 p. (inRuss.).
7. Timofeev P.A., Isaev A.P., Shcherbakov LP. Lesa srednetaezhnoi podzony Lakutii. [Forests middle taiga subzone of Yakutia], Iakutsk, 1994, 140 p. (inRuss.).
8. Kolobkova M.V. Biologicheskie problemy severa. [Biological problems of the north], Iakutsk, 1986, pp. 46^17. (inRuss.).
9. Huneck S., Yoshimura I. Identification of lichen substances. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1996, 493 p.
10. Yoshimurat I., Kinoshita Y., Yainumoloi Y., Huneck S., Yamada Y. Phytochemical analysis, 1994, vol. 5, pp. 197-205.
11. Sil'verstein R., Vebster F., Kiml D. Spektrometricheskaia identifikatsiia organicheskikh soedinenii. [Spectrometric identification of organic compounds], Moscow, 2014, 557 p. (in Russ.).
12. Lawrey J.D. The Bryologist, 1986, vol. 89, pp. 111-122.
Received February 16, 2016 Revised May 10, 2016
Corresponding author.
