CC BY
58
УДК 618.2/.3:616.523:612.1-083 Г.А.Макарова
СОДЕРЖАНИЕ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ:
ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ И ИНТЕРЛЕЙКИНА 8 В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С ХРОНИЧЕСКОЙ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
Проведено иммунологическое обследование 26 женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией, из них: 20 беременных женщин в стадию обострения (n=10) и ремиссии (n=10) заболевания, и 6 клинически здоровых, небеременных женщин, составивших группу контроля. Методом иммуно-ферментного анализа определяли содержание провоспалительных цитокинов: ФНО-а и ИЛ-8. Выявлено достоверное повышение уровня ФНО-а в сыворотке крови у беременных женщин по сравнению с контрольной группой, а также более чем в 3 раза повышение содержание ФНО-а у беременных женщин при обострении герпеса по сравнению со стадией ремиссии данной инфекции.
SUMMARY
G.A.Makarova
ANTIINFLAMMATION CYTOKINE CONTENT:
TUMOR NECROSIS AND INTERLEUKINE 8 FACTORS IN BLOOD SERUM OF PREGNANT PATIENTS WITH CHRONIC HERPES INFECTION
We carried out immunology study which included 26 patients with chronic herpes-virus infection. 20 pregnant patients were in acute stage (n=10) and remission stage (n=10), and 6 healthy patients constituted control group. We used method of immuno- enzyme analysis to determine the level of anti inflammation cytokines: TNF-а and IL-8. We showed significant increase in TNF-а in blood serum of pregnant women in comparison with control group, as well as increase in more that three times of TNF-а content in pregnant women with acute herpes infection compared with those in a remission stage. We suggest that increased content of TNF-а can be behind placenta injury in herpes infection and can lead to fetoplacenta insufficiency.
Известно, что цитокины как эндогенные медиаторы воспаления участвуют в формировании и регуляции защитных реакций организма, определяют направленность, степень активности и тяжесть патологического процесса [3, 4, 10, 11, 12,14, 15].
Концентрации большинства цитокинов быстро и значительно изменяется при развитии воспаления и иммунопатологических процессов и могут служить
диагностическими маркерами развития ряда заболеваний [9]. Так, описано, что возрастание уровня про-воспалительных цитокинов: фактора некроза опухоли (ФНО-а) и интерлейкина 8 (ИЛ-8) у родильниц после кесарева сечения на 2-е и 3-е сутки после операции может служить надёжным критерием доклинической диагностики эндометрита [1], угроза прерывания беременности сопровождается увеличением ИЛ-1, развитие хронического ДВС-синдрома у беременных с поздними гестозами сопровождается усилением продукции цитокинов: ИЛ-1, ИЛ-8, ФНО-а [2]. Отмечено повышение содержания ФНО-а и ИЛ-4 в вагинальном секрете у беременных женщин при обострении генитального герпеса по сравнению с ремиссией , более выраженное при сочетании герпетической инфекции с вирусом папилломы человека [10].
Полученные в последние года данные свидетельствуют о том, что герпетическая инфекция может индуцировать функциональные повреждения в неспецифических иммунных эффекторных клетках (изменяет многие функции макрофагов, включая угнетение хемотаксиса, снижение фагоцитоза), при острой инфекции возможно значительное угнетение бласттрансформации лимфоцитов и продукции цито-кинов. Перед рецидивом или сразу после рецидива герпеса имеет место транзиторный дефицит в продукции лимфокинов. При выздоровлении продукция этих медиаторов возрастает [5, 6, 14].
Беременные женщины в связи с физиологическим снижением активности их иммунитета всегда оказываются в группе риска по развитию острой или рецидива латентной герпетической инфекции. Механизм несостоятельности иммунитета женщин во время беременности не до конца изучен.
Цель нашего исследования: определить содержание провоспалительных цитокинов: ФНО-а и ИЛ-8 в периферической крови у беременных женщин в стадию ремиссии и при обострении хронической герпесвирусной инфекции (ХГВИ).
Материалы и методы
Было обследовано 26 женщин с ХГВИ в возрасте от 18 до 28 лет. Из них 20 женщин- беременных, при сроке беременности от 12 до 28 недель и 6 клинически здоровых, небеременных женщин, составивших группу контроля.
Беременные женщины были разделены на 2 группы:
1. Беременные женщины с ХГВИ в стадии ремиссии: без клинических проявлений герпетической
инфекции, с титрами антител к вирусу простого герпеса (ВПГ) иммуноглобулинов G (IgG) в сыворотке крови от 1:800 до 1:3200.
2. Беременные женщины с обострением ХГВИ (герпетические высыпания, явления острого ринофа-рингита и т.д., с титрами антител к ВПГ IgG в пределах от 1:6400 до 1:12800 и выше).
В группе контроля титры антител к ВПГ IgG определялись в пределах 1:1600- 1:3200.
Исследовалась сыворотка периферической крови. Забор крови производился из локтевой вены, натощак при поступлении женщин в стационар. Сыворотку отделяли в течение 1 часа от момента забора крови на исследование.
Определяли содержание провоспалительных цитокинов: ФНО-а и ИЛ-8 методом твёрдофазного им-муноферментного анализа с использованием наборов моноклональных антител и реактивов фирмы «IMMUNOTECH» (Франция). Чувствительность метода составляла 5 пг/мл.
Полученные данные статистически обработаны при помощи критерия Стьюдента.
Результаты исследования и обсуждение
В результате проведенного исследования было установлено, что уровень цитокинов внутри обследуемых групп подвержен значительным колебаниям от 0 (содержание ниже порога чувствительности ИФА 5 пг/мл) до 220 пкг/мл.
ФНО-а удалось определить в сыворотке крови у всех обследованных беременных женщин. Диапазон колебаний показателя от 10 до 145 пг/мл. Среднее содержание ФНО-а у беременных женщин с ХГВИ вне обострения составило 25,6±3,8 пг/мл , у беременных с обострением ХГВИ 77,8±14,7 пг/мл.
В контрольной группе ФНО-а обнаружен у 50% обследованных женщин (ранжирование показателя от 0 до 27, 3 пг/мл), его среднее содержание составило 9, 5±3, 4 пг/мл .
ИЛ-8 (обеспечивающий хемотаксис нейтрофилов в очаг воспаления) выявлен в сыворотке крови только у одной беременной женщины с обострением генитального герпеса и с титром антител к ВПГ IgG свыше 1:12800 , её показатель содержания ИЛ-8 составил 220 пкг/мл.
В группе контроля ИЛ-8 также отсутствовал (уровень ниже порога чувствительности метода).
Таким образом, наиболее показательным из исследованных нами цитокинов (ФНО-а , ИЛ-8) у беременных женщин с ХГВИ в сыворотке периферической крови явилось содержание провоспалительного цитокина ФНО-а. Обнаружено достоверное повышение уровня ФНО-а у беременных женщин с ХГВИ в стадию ремиссии по сравнению с контрольной группой (небеременные женщины) - в 2,5 раза (25,6±3,8 и 9,5±4,3 пг/мл, соответственно, р<0,05) и более чем в 8 раз в группе беременных с обострением герпетической инфекции по сравнению с контролем (77,8±14,7 и 9,5±4,3 пг/мл, соответственно, р<0,001). Также, достоверно увеличение уровня ФНО-а в группе беременных с обострением ХГВИ более чем в 3 раза
при сравнении с группой беременных женщин с ХГВИ в ремиссии (77,8±14,7 пг/мл и 25,6±3,8 соответственно, р<0,001).
Полученные нами данные согласуются с данными других авторов.
Известно, что в норме цитокины в системном кровотоке не обнаруживаются или содержатся в очень низких концентрациях от 0 до 50 пг/мл (ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а) [1, 2, 7, 8, 10, 13]. Повышение содержания цитокинов в периферической крови всегда свидетельствует о патологическом процессе и адекватно отражает тяжесть этого процесса. Например, повышенное содержание провоспалитель-ных цитокинов (ФНО-а ,ИЛ-1, ИЛ-8) обнаружено у женщин при беременности осложнённой гестозом, причем уровень этих цитокинов повышается уже при лёгком течении гестоза, увеличиваясь соответственно тяжести заболевания [2].
Значение повышения уровня ФНО-а в организме беременной женщины с ХГВИ можно оценить исходя их биологических эффектов этого цитокина.
Как известно, одним из главных продуцентов ФНО-а является активированный макрофаг, который еще на стадии доиммунного воспаления начинает интенсивно вырабатывать провоспалительные цито-кины биологическая функция которых заключается в развитии локального воспаления в месте проникновения инфекта.
Биологическая активность ФНО-а многообразна: он активирует гранулоциты, макрофаги, эндотелиальные клетки, гепатоциты (продукция белков острой фазы) остеокласты и хондроциты (резорбция костной и хрящевой ткани), стимулирует пролиферацию и дифференцировку нейтрофилов, фибробла-стов, гемопоэтических клеток, Т- и В-лимфоцитов, усиливает поступление нейтрофилов из костного мозга в кровь, оказывает противоопухолевую и противовирусную активность, активирует гипоталамиче-ский центр терморегуляции [4].
ФНО -а один из немногих цитокинов обладающих эндокринным дистантным механизмом действия, т.е. реализующим свои эффекты не только локально в месте выработки, но и может оказывать системный эффект. Значительное повышение уровня этого цито-кина наблюдается при массивной антигенной нагрузке на организм (тяжелые инфекции, септический шок, тяжелые операции, сопровождающиеся большим повреждениям тканей и т. д). В этих случаях гиперпродукция ФНО-а обуславливает гипертермию, кахексию, гипотонию, гипогликемию, развитие ДВС-синдрома [13].
Приведенные данные иллюстрируют крайний вариант неблагоприятного воздействия ФНО- на организм больного.
В случае с умеренным повышением ФНО-а у беременных женщин, по сравнению с небеременными женщинами (в пределах физиологической нормы), данные изменения, очевидно, носят компенсаторный характер на фоне снижения активности иммунного ответа, характерного для периода беременности, и, возможно, являются одним из факторов обуславли-
вающих наличие лейкоцитоза и ускоренного СОЭ у беременных.
При выраженном обострении ХГВИ у беременных женщин с интенсивным иммунным ответом, выражающимся в 4-х кратном и более нарастании титра противогерпетических антител ^ в и/или появлении острофазовых IgM, активизацией клеточных реакций иммунитета, а также при частых обострениях герпетической инфекции, уровень ФНО-а у беременных женщин, очевидно, может достигать значений, при которых возможно развитие неблагоприятных реакций в органах-мишенях, например, в плаценте: нарушения микроциркуляции, отёк, склерозирование тканей и т.д.
Эти нарушения могут стать причиной формирования у беременной женщины фетоплацентарной недостаточности, и, как следствие, вызвать нарушение в развитии плода.
ВЫВОДЫ
1. Обострение хронической герпетической инфекции (обусловленной вирусом простого герпеса) у беременных женщин сопровождается повышением содержания провоспалительного цитокина ФНО- в сыворотке крови более чем в 3 раза по сравнению с периодом ремиссии данной инфекции.
2. У беременных женщин по сравнению с небеременными при сходной выраженности иммунного ответа (титра антител к ВПГ ^в) в период ремиссии ХГВИ уровень ФНО-а в сыворотке крови в 2,5 раза выше.
3. Содержание ИЛ-8 в периферической крови у беременных женщин с ХГВИ, за редким исключением, крайне низкое (менее 5 пг/мл).
ЛИТЕРАТУРА
1. Белокриницкая Т.Е., Витковский Ю.А. Про-воспалительные цитокины в ранней диагностике эндометритов после кесарева сечения//Клин. лаб. ди-агн.-1999.-№4.-С.33-35.
2. Витковский Ю.А., Белокриницкая Т.Е, Кузник Б.И. О возможной роли цитокинов и нейтрофилов в патогенезе хронического ДВС-синдрома у беременных с поздним гестозом//Акуш. и гин.-1998.-№3.-С.13-15.
3. Иммунология инфекционного процесса/Под
ред. В.И.Покровского, С.П.Гордиенко,
В .И. Литвинова.-М., 1994.-С.144-145.
4. Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность (лекция)//Клин.лаб.диагн.-1998.-№11.-С.21-32.
5. Кущ А.А., Хахалин Л.Н. Клиника, лечение и лабораторная диагностика герпесвирусных заболеваний человека: Руководство для врачей.-М., 1998.-С.5.
6. Латышева Т.В., Хутиева Л.М. Герпесвирусная инфекция в конце ХХ века//Аллергия, астма и клиническая иммунология.-2001.-№4.-С.16-21.
7. Лобкова Ю.С., Калинина Н.М., Лобкова О.С. и др. Цитокиновый профиль как критерий оценки специфической иммунотерапии атопических аллергических заболеваний//Иммунология.-1999.-№2.-С.35-37.
8. Макаров О.В, Савченко Т.Н, Сумеди Т.Н. и др. Определение роли иммунитета беременных на локальном и системном уровнях в генезе невынашивания беременности в 1 триместре при наличии урогенитальной инфекции//Аллергология и иммунология.-2003.-№2.-С.156.
9. Симбирцев А. С. Цитокины новые подходы к диагностике и терапии//Там же.-С.62-63.
10. Чиркова Л.Н. Динамика содержания ФНО-а и интерлейкина 4 в сыворотке крови и вагинальном секрете беременных женщин с генитальным герпе-сом//Там же.-С.120.
11. Хаитов Р.М. Взоимодействие клеток иммунной системы: физиологические и медицинские аспекты иммунитета//Аллергия, астма и клиническая им-мунология.-1999.-№1.-С.6-20.
12. Хаитов Р. М. Физиология иммуните-та//Аллергия, астма и клиническая иммунология.-2000.-№2.-С.3-16.
13. Хаитов Р.М, Игнатьева Г.А, Сидорович И.Г. Иммунология: Учебник.-М.: Медицина, 2000.-С.177-202.
14. Герпетическая инфекция и беремен-ность/В.К.Ярославский, В.А.Исаков, А.Е.Семенов, А.А.Анчуков.-СПб., 1996.-С.32.
15. Ярилин А. А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патоло-гии//Иммунология.-1997.-№5.-С.7-14.
□ □□
