Содержание арбутина в листьях некоторых видов рода рододендрон Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© Коллектив авторов., 2008 УДК 582.912.4:547.918

СОДЕРЖАНИЕ АРБУТИНА В ЛИСТЬЯХ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ РОДА РОДОДЕНДРОН

М. Е. Жаворонкова, М. В. Белоусов, Н. С. Фурса

Ярославская государственная медицинская академия Сибирский государственный медицинский университет, Томск

С использованием хроматоспектрофотометрического метода наибольшее содержание арбутина выявлено в листьях рододендрона даурского и р. Адамса, а наименьшее - в листьях р. Фори (разновидность короткоплодный), р. понтийского и р. желтого.

Растения рода рододендрон (Rhododendron L.) семейства вересковые (Ericaceae Juss.) находят применение в традиционной медицине и гомеопатии. В качестве лекарственного сырья используют листья, у отдельных видов также цветки [3]. Среди действующих веществ важное место занимают фенольные соединения, в том числе арбутин, обуславливающий мочегонное и антисептическое действие.

Цель исследований - сравнительный анализ образцов листьев различных видов рода рододендрон по содержанию арбутина.

Материалы и методы

Традиционной методикой количественного определения арбутина является методика, в основу которой положено йодометрическое титрование [2]. Вместе с тем она громоздка и длительна. Одним из наиболее объективных для количественного определения арбутина в фитосырье представляется хроматоспектрофотометрическое [4, 5]. В его основе лежит измерение оптической плотности извлечения из лекарственного растительного сырья в УФ-области после очистки извлечения от сопутствующих веществ.

Из сравнения спектральных характеристик 70% этанольного извлечения из листьев рододендронов и арбутина-стандарта (фирма «Sigma», США) следует, что арбутин - основной фенологликозид исследуемого сырья.

Для количественного определения арбутина в листьях рододендронов использовали методику прямого спектрофотометрического определения после очистки извлечения на колонке с алюминия оксидом [2].

При разработке методики количественного определения арбутина вначале выявили оптимальные условия экстрагирования арбутина. Для определения условий его максимального извлечения нами использованы листья рододендрона желтого (Rhododendron luteum Sweet), заготовленные в Главном ботаническом саду РАН (г. Москва) 5 сентября 2006 г. Так, наибольший выход арбутина наблюдался при экстракции 70% спиртом этиловым (табл. 1).

Таблица 1

Выявление оптимального экстрагента

Концентрация спирта этилового, % D X, %

40 0,340 1,304

50 0,183 0,741

70 0,348 1,371

90 0,322 1,266

96 0,141 0,543

При исследовании влияния на выход арбутина продолжительности и кратности экстрагирования, а также объема экстрагента, взятого для отдельной экстракции, обнаружено, что больше всего арбутина извлекалось при двукратной экстракции 30 мл 70% этанола продолжительностью 30 мин (табл. 2).

Таблица 2

Определение оптимальных условий экстракции______________________

Количество экстракций Время одной экстракции, мин Объем экстрагента, мл Б X, %

2 15 30 0,253 0,989

3 15 20 0,212 0,827

1 30 60 0,236 0,927

2 30 30 0,258 1,011

3 30 20 0,223 0,900

Кроме того, нами определен выход арбутина из сырья различной степени измельченности. Полнее всего он экстрагировался из сырья с размером частиц до 1

мм (табл. 3).

Таблица 3

Обнаружение зависимости выхода арбутина от степени измельчения сырья

Размер частиц сырья, мм Б X, %

Цельное сырье 0,264 1,781

5 0,256 1,736

3 0,248 1,735

2 0,252 1,856

1 0,248 2,127

С учетом изложенных данных нами проведено количественное определение арбутина в листьях некоторых видов рододендронов по приведенной ниже методике.

Методика количественного определения арбутина в листьях рододендронов. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 30 мл 70% спирта этилового, колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали при умеренном кипении на водяной бане в течение 30 мин. Извлечение охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. Операцию повторяли. Извлечение доводили до метки 70% этанолом. После этого 6 мл извлечения помещали в колонку с алюминия оксидом и элюировали 15 мл 70% спирта этилового. Элюат собирали в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводили объем до метки 70% этанолом и перемешивали. Оптическую плотность данного раствора измеряли на спектрофо-

тометре СФ-46 при длине волны 285 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Раствором сравнения служил 70% спирт этиловый, пропущенный через колонку с алюминия оксидом.

Подготовка хроматографической колонки: 2,0 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии (Ь40/250) фирмы «ЬаеЬеша» (Чехия), промытого водой очищенной до нейтральной реакции, помещали в стеклянную колонку диаметром 1,5 см и высотой 25 см и промывали 10 мл 70% этанола.

Содержание арбутина в сырье вычисляли по следующей формуле:

Х(%)= Б ■ 100 ■ 25 ■ К ,

Е 1% 1 см ■ ш ■ а о

где Б - оптическая плотность исследуемого раствора; Е1" ! см - удельный показатель поглощения арбутина-стандарта, равный 72,23; а - аликвота, мл; ш -навеска сырья, г; К - коэффициент неполного элюирования, равный 1,14095.

Результаты и их обсуждение Обобщенные данные количественного определения арбутина в листьях 9 видов рододендрона, заготовленных в различных регионах РФ, отражены в таблице

4.

Таблица 4

Содержание арбутина в листьях 9 видов рода рододендрон

Вид Место сбора Дата сбора D X, %

Р. даурский (R. dauricum L.) Г. Переславль-Залесский (Ярославская обл.), дендро-сад 30.09.2005 г. 1,298 12,798

Р. Адамса (R. adamsii Rehd.) Окрестности г. Иркутска Июль 2005 г. 1,410 12,214

Р. кавказский (R. caucasicum Pall.) Карачаево-Черкесская республика, Даутское ущелье 26.07.2006 г. 0,907 5,722

Р. золотистый (R. aureum Georgi) Окрестности г. Иркутска Июль 2005 г. 0,570 5,584

Р. Смирнова (R. smirnovii Trautv.) Г. Санкт-Петербург, ботанический сад БИН Май 2006 г. 0,812 5,135

Р. Симса (R. simsii Planch.) Комнатное растение Январь 2006 г. 0,491 3,191

Р. Фори (R. fauriei Franch.) var. короткоплодный (R. brachycarpum) Г. Москва, ГБС РАН 05.09.2006 г. 0,415 2,751

Р. понтийский (R. ponticum L.) Г. Санкт-Петербург, ботанический сад БИН Май 2006 г. 0,415 2,645

Р. желтый (R. luteum Sweet) Г. Москва, ГБС РАН 05.09.2006 г. 0,258 2,022

Примечание. Виды расположены в порядке убывания содержания арбутина.

Из данных, приведенных в таблице 4, видно, что наиболее высокое содержание арбутина определено в листьях рододендрона даурского и р. Адамса, а наименьшее - в листьях р. Фори, р. понтийского и р. желтого.

В сравнении с фармакопейной методикой [2] хроматоспектрофотометрическое определение арбутина в листьях рододендронов менее длительно и более достоверно. Из сравнения результатов количественного определения, полученных йодометрически [1] и хроматоспектрофотометрически, следует, что содержание арбутина в листьях рододендрона даурского и р. Адамса более высокое при хроматоспектрофотометрическом определении, чем по методике, принятой ГФ [2].

Выводы

Выявлены оптимальные условия экстрагирования арбутина, положенные в основу методики его хроматоспектрофотометрического определения в листьях 9 видов рода рододендрон.

ЛИТЕРАТУРА

1. Белоусов М. В. Фармакогностическая характеристика и биологическая активность представителей семейства вересковые (Ericaceae) флоры Сибири и Дальнего Востока: Автореф. ... дисс. д. фармац. наук. - Томск, 2004. - 38 с.

2. Государственная фармакопея СССР. XI изд. Вып. 2. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.

3. Виды рода рододендрон - потенциальные лекарственные растения: особенности применения, биологически активные вещества органической природы, макро- и микроэлементы / М. Е. Жаворонкова, М. В. Белоусов, М. С. Александрова, Н.С. Фурса // Естествознание и гуманизм: Сб. науч. работ: Современный мир, природа и человек / Под ред. Н. Н. Ильинских. - Томск, 2007. - Т. 4, №1. - С. 40-44.

4. Лубсандоржиева П. Б., Жигжитов Б. С., Даргаева Т. Д. и др. Хроматоспектрофотометрическое определение арбутина в листьях Bergenia crassifolia (L.) Fritsh. // Химико-фармацевтический журнал. - 2000. - №5. - С. 38-40.

5. Онегин С. В., Фурса Н. С. Выявление объективной и разработканаиболее достоверной методики количественного определения арбутина в траве вереска обыкновенного / Современные вопросы фармакогнозии: Межвуз. сб. науч. трудов с меж-дународ. участием, посвященный 20-летию кафедры фармакогнозии / Под ред. Н. С. Фурсы. - Ярославль: ЯГТУ, 2004. - С. 235-248.

ARBUTIN LEVELS IN THE LEAVES OF SEVERAL SPECIES OF THE GENUS RHODODENDRON

M. E. Zhavoronkova, M. V. Belousov, N. S. Fursa

By the chromatospectrophotometric method the highest content of arbutin was determined in the leaves of Rhododendron dauricum and R. adamsii and the lowest one in the leaves of R. fauriei var. brachycarpum, R. ponticum and R. luteum.