CC BY
60
Из данных, представленных в таблице, следует, что крем-эмульсии, мази с коллоидными ионами серебра превышают лечебную эффективность Мастисон-А, Эн-трофлоксоцина на 17 - 18%, а крем-эмульсия с 0,2% глутарового альдегидом, Биопагом-Д, этонием на 3% при этом следует учитывать, что крем-эмульсии с коллоидными ионами серебра с глутаровым альдегидом и этонием обладают ранозаживляющим действием в отношении поврежденной поверхности вымени.
Информация об авторах Евглевский Дмитрий Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Курского НИИ АПП.
Соколовский Сергей Игоревич, начальник управления ветеринарии Калужской области.
Смирнов Игорь Иванович, кандидат ветеринарных наук, гл. врач Жуковского района Калужской области.
THE EFFICIENCY OF COWS INFECTED WITH MASTITIS BY USING ARGENTUM COLLOIDAL IONS AND ANTIOXIDANTS D.A. Yevglevsky, S.I Sokolovsky, I.I Smirnov
Abstract. The efficiency of cream end emulsion containing argentum ions in the therapy of cows infected with Mastitis compared to antibiotic therapy has been presented.
Key words: Mastitis, argentum ions, microorganisms, antibiotics.
СЭНДВИЧ-ВАРИАНТ ИФА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА БЕШЕНСТВА В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ
С.А. Дяченко, И.Н. Матвеева, В.М. Попова, Д.П.Кузнецов, Ан.А. Евглевский
Аннотация. Разработан твёрдофазный сэндвич-вариант иммуноферментного анализа для диагностики бешенства животных на основе моноклональных антител к гликопротеину вируса бешенства и проведены его сравнительные испытания с реакцией иммунофлуорес-ценции. Испытание обоих методов показало сходство результатов в 100% случаев.
Ключевые слова: бешенство, гликопротеин вируса, диагностика, ИФА, головной мозг.
Основными методами диагностики бешенства являются реакция иммунофлуоресценции (РИФ) и биологическая проба на мышах, а также выделение вируса на культуре клеток, постепенно заменяющее биологическую пробу на мышах. Несмотря на высокую надёжность и чувствительность этих методов, они имеют ряд недостатков. Основным недостатком биологической пробы на мышах и выделения вируса в культуре клеток является то, что для получения результатов исследования может потребоваться длительное время. Точность постановки диагноза методом РИФ во многом зависит от наличия у персонала диагностических лабораторий необходимой квалификации. Кроме этого, для проведения диагностики с использованием этих методов, как правило, не годятся пробы с признаками частичного разложения мозговой ткани, в силу возможного получения ложноотрицательных результатов. Эти диагностические системы также малопригодны для широкомасштабного мониторинга бешенства. Перечисленных выше недостатков метод иммуноферментного анализа (ИФА) не имеет. Этот метод в числе других рекомендован для диагностики бешенства Всемирной Организацией Здравоохранения (ВОЗ) и Всемирной Организацией Охраны Здоровья Животных (OIE). Иммунофер-ментный анализ отличается простотой и быстротой выполнения, может обходиться без применения дорогостоящего оборудования в случае визуальной оценки результатов исследований. Он отлично подходит для проведения мониторинга бешенства, при этом позволяя интерпретировать полученные результаты с высокой степенью достоверности.
Разработан твёрдофазный сэндвич-вариант иммуноферментного анализа для диагностики бешенства животных, с использованием моноклональных антител,
полученных на разные эпитопы гликопротеина вируса бешенства.
Целью данной работы являлась разработка сэндвич-варианта ИФА для диагностики бешенства в головном мозге животных и птицы.
Результаты реакции учитывали с помощью спектрофотометра "Биотек" при длине волны 450 нм. Определяли среднюю оптическую плотность (ОП) положительного и отрицательного контролей, а также среднюю ОП тестируемых образцов. Рассчитывали ОП тестируемых образцов, положительного и отрицательного контролей. Согласно рекомендациям ВОЗ, расчётная ОП отрицательного и положительного контролей должна быть не выше 0,1 и не ниже 1,5 единиц, соответственно. Исследуемые образцы считали положительными, если их ОП превышала ОП отрицательного контроля на 0,2 единицы.
Для оценки диагностической специфичности сэндвич-варианта ИФА исследовали 100 проб головного мозга от разных животных, отрицательных и положительных по бешенству в РИФ. Расчётная оптическая плотность отрицательных проб составила 0,0530±0,041, что свидетельствует о высокой специфичности ИФА, которая в данном исследовании составила 100%.
С целью измерения предела чувствительности разработанного метода провели анализ с использованием гликопротеина известной концентрации. Проведённые исследования показали, что предел чувствительности метода находится в диапазоне 10-20 нг/мл.
Результаты сравнительных исследований мозговой ткани животных и птицы в ИФА и РИФ представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Результаты исследований мозговой ткани животных и птицы в ИФА и РИФ
Диагноз Вид животного РИФ ИФА
(головы) Положит. Отрицат.
Положи- мышата 24 24 0
тельные крольчата 2 2 0
морская свинка 10 10 0
крысята 22 22 0
перепелята 6 6 0
Отрица- крысята 16 0 16
тельные мышата 20 0 20
Всего 100 100
Из таблицы 1 следует, что результаты исследований в ИФА полностью совпали с РИФ.
Использование антител-подложки к одному эпитопу гликопротеина вируса, и конъюгированных с пероксида-зой антител к другому эпитопу вируса обеспечивает высокую диагностическую чувствительность и специфичность ИФА в гетерогенной жидкости и низкий уровень фона.
Выводы.
1. Разработан твёрдофазный сэндвич-вариант имму-ноферментного анализа для диагностики бешенства животных, с использованием моноклональных антител, полученных на разные эпитопы гликопротеина вируса бешенства.
2. В результате проведённого исследования было установлено, что разработанный сэндвич-вариант ИФА соответствует требованиям, предъявляемым к диагностическим тест-системам. Предел чувствительности в пределах 10-20 нг/мл. Постановка сэндвич-вариант ИФА занимает не более 4 часов и происходит при комнатной температуре.
Список использованных источников
1 Диагностика бешенства животных с использованием реакции иммунофюоресценции: библиография / А.Е. Метлин, Н.А. Назаров, С.С. Рыбаков [и др.]. // Ветеринария. - 2006. - № 2. - С. 20-23.
2 Разработка твердофазного непрямого сэндвич-варианта иммуно-ферментного анализа для диагностики бешенства животных / Н.А. Назаров, Н.М. Михайлина, С.С. Рыбаков [и др.] // Труды Федерального центра охраны здоровья животных - Владимир, 2006. - Т. 4 - С. 117-124.
3 Самуйленко А.Я., Сюрин В.Н., Воронин Е.С. Инфекционная патология животных // Инфекционная патология животных. - М.: ИКЦ «Академкнига». - 2006. - Т.1. - 910с.
4 Иммунопрофилактика и терапия инфекционных болезней / А.Я. Самуйленко, И.Н. Матвеева, А.А. Евглевский, Ю.Д. Фролов. - Курск, 2015.
5 Сухарьков А.Ю., Назаров Н.А., Метлин А.Е. Диагностика бешенства животных методом иммуноферментного анализа, сравнение прямого и непрямого сэндвич-варианта // Ветеринария Кубани. - 2011. - № 6. - С. 20-23.
6 Bourhy, H., Peirin P. Rapid rabies enzyme immunodiagnosis (RREID) for rabies antigen detection // Laboratory techniques in rabies. - 4th ed. - Geneva: World Health Organization, 1996. - P. 105-113.
7 Webster W.A., Casey G.A.Virus isolation in neuroblastoma cell culture // Laboratory techniques in rabies. - 4th ed. - Geneva: World Health Organization, 1996. - P. 96-103.
Информация об авторах
Дяченко Сергей Александрович, аспирант ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел. +79686306562.
Матвеева Ирина Николаевна, заведующая отделом молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук, профессор ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79164987282.
Попова Вера Михайловна, ведущий научный сотрудник отдела молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79164987282.
Кузнецов Дмитрий Павлович, ведущий научный сотрудник отдела молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук, профессор ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79164987282.
Евглевский Анатолий Алексеевич, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры эпизоотологии, радиобиологии и фармакологии ФГБОУ ВО Курская ГСХА.
ELISA FOR THE DETECTION RABIES VIRUS IN THE BRAIN OF ANIMALS AND BIRDS S.A. Dyachenko, I.N. Matveev, V.M. Popova, D.P. Kuznetsov, An.A. Yevglevsky
Annotation. Developed solid phase sandwich immunoassay embodiment for diagnosing rabies monoclonal antibody to the rabies virus glycoprotein and comparative tests with immunofluorescence. Test both methods showed similarity of the results in 100% of cases. Keywords: rabies virus glycoprotein, diagnostics, ELISA, brain.
ЭПИЗООТОЛОГИЯ ЭЗОФАГОСТОМОЗА СВИНЕЙ В ХОЗЯЙСТВАХ СУМСКОЙ ОБЛАСТИ
Ю.В. Негреба
Аннотация. Установлено, что эзофагостомозная инвазия у свиней доминирует над другими кишечными нема-тодозами, кроме этого, наблюдается тенденция к более частому заражению молодых животных, начиная с двухмесячного возраста.
Ключевые слова: свиньи, эзофагостомоз, аскароз, три-хуроз, экстенсивность инвазии, интенсивность инвазии.
Во многих странах мира свиноводство является одной из ведущих отраслей в обеспечении населения ценными пищевыми продуктами. Однако во многих свиноводческих хозяйствах как промышленного, так и частного типа продуктивность свиней остается не высокой. Это вызвано не только нарушениями технологических условий кормления и содержания животных, но и различными болезнями, в том числе паразитического характера [6. - С.394].
Наиболее распространенными гельминтозами свиней являются желудочно-кишечные нематодозы, среди которых не последнее место занимает эзофагостомоз свиней. Это заболевание регистрируется в течение всего года с небольшими сезонными колебаниями экстенсивности и интенсивности инвазии.
Ущерб у больных эзофагостомозом животных, складывается от снижения продуктивности, ухудшения качества мяса и падежа. Отсюда повышается расход кормов, ухудшается их усвояемость у больных животных, снижается качество получаемого потомства. Кроме того, большое число кишечников больных свиней выбраковывается при ветеринарно-санитарной экспертизе на мясокомбинате [5. - С.1].
Так как постоянный мониторинг гельминтозных заболеваний является одним из важнейших факторов при разработке лечебно - профилактических мероприятий, целью нашей работы было выяснение эпизоотологической ситуации относительно эзофагостомоза свиней в свиноводческих хозяйствах Сумской области. Материалом для исследования были пробы фекалий свиней отобранные у животных разных половозрастных групп в разное время года. Исследования проводились в хозяйствах промышленного типа и частного сектора Сумской области Крас-нопольского, Конотопского, Роменского, Лебединского и Сумского районов. Отобранный материал в дальнейшем исследовался флотационным методом Котельни-кова - Хренова с использованием нитрата аммония.
