УДК 615.32
САПОНИНЫ И ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЕ В КОРНЕВИЩАХ АРАЛИИ МАНЬЧЖУРСКОЙ В УСЛОВИЯХ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ
© Д.И. Писарев, Н.А. Мартынова, Н.Н. Нетребенко, О.О. Новиков, В.Н. Сорокопудов
Белгородский государственный университет, ул. Победы, 85, Белгород,
308015 (Россия) E-mail: [email protected]
Действующими веществами аралии маньчжурской являются тритерпеновые сапонины. Установлено количественное содержание сапонинов аралии маньчжурской, интродуцируемой в Белгородской области, в пересчете на олеаноловую кислоту методом ультрафиолетовой спектрофотометрии. Содержание сапонинов составило 9,145±0,055%.
Ключевые слова: Aralia L., сапонины, олеаноловая кислота.
Введение
Род Аралия - Aralia L. представлен 35 видами деревьев, кустарников и травянистых многолетников. В России произрастает 3 вида, из которых только аралия высокая (или маньчжурская) деревянистое растение.
Аралия маньчжурская - кустарник или дерево высотой до 3-7, а иногда и 12 м с серым стволом или стволиками, усаженными крепкими треугольными и острыми шипами, обладает высокой способностью к вегетативному размножению. Ареал произрастания - Приамурье, Приморье, юг Сахалина и Курильских островов, Китай, Корея и Япония. Основные ее промысловые районы - Приморский и Хабаровский края [1].
Химический состав Аралии маньчжурской достаточно хорошо изучен. Установлено, что ее основными действующими веществами являются тритерпеновые сапонины - гликозиды олеаноловой кислоты (аралози-ды А, В и С) [2].
Аралия маньчжурская обладает ценными фармакологическими свойствами. В научной медицине ее препараты применяют как активные адаптогенные, тонизирующие, гонадотропные, радиопротекторные, антистрессорные средства. В качестве сырья заготавливаются корневища, из которых получают настойку и препарат сапарал, представляющий собой сумму тритерпеновых гликозидов олеаноловой кислоты (аралозидов) [3].
Учитывая ограниченный ареал Аралии маньчжурской, она введена в культуру в ряде регионов.
Цель настоящей работы - установить количественное содержание суммы сапонинов Аралии маньчжурской, культивируемой в Белгородской области.
Экспериментальная часть
Корневища Аралии маньчжурской заготавливали в мае 2007 г. на базе ботанического сада Белгородского государственного университета, сушили и измельчали.
В основу разработанного нами количественного определения тритерпеновых сапонинов в корневищах Аралии маньчжурской в пересчете на олеаноловую кислоту положен метод прямой спектрофотометрии. Спектрофотометрическое определение тритерпеновых сапонинов базируется на реакции с серной кислотой, в результате которой тритерпеноиды протонируются по двойной связи с образованием карбокатиона, а при наличии карбоксильной группы при С-28 имеет место последующая лактонизация. При этом наблюдается характерный максимум поглощения при 310 нм.
2,0 г измельченного воздушно-сухого сырья корневищ Аралии маньчжурской пятикратно экстрагировали 96% этиловым спиртом порциями по 50 мл на кипящей водяной бане в круглодонной колбе на 200 мл с об-
* Автор, с которым следует вести переписку.
ратным холодильником. Полученные извлечения фильтровали и объединяли в мерную колбу на 250 мл (раствор А), недостающий объем восполняли экстрагентом. Далее из полученного извлечения отбирали аликвоту объемом 10 мл и выпаривали на выпарительной чашке досуха. Остаток растворяли в 10 мл смеси для гидролиза (ледяная уксусная кислота - хлористоводородная кислота - вода 3,5 : 1 : 5,5), помещали в круглодонную колбу для гидролиза и нагревали на водяной бане в течение 2 ч с момента закипания бани. После кипячения гидролизную смесь разбавляли водой в 2 раза, выпавший осадок отделяли фильтрованием. Осадок на фильтре промывали водой, растворяли в 25 мл горячего 96% этилового спирта и собирали в мерной колбе на 25 мл (раствор Б). К 1 мл полученного раствора прибавляли 4 мл концентрированной серной кислоты, выдерживали 10 мин и определяли оптическую плотность на спектрофотометре СФ-56 в области 220-450 нм, раствор сравнения - концентрированная серная кислота. Параллельно выясняли оптическую плотность стандартного раствора олеаноловой кислоты в аналогичных условиях проведения эксперимента. Полученные спектры продуктов реакции суммы аралозидов и стандарта олеаноловой кислоты представлены на рисунке.
Приготовление стандартного раствора олеаноловой кислоты. 0,0025 г ГСО олеаноловой кислоты растворяли в 10 мл 96% этилового спирта.
Расчет содержания суммы сапонинов в корневищах Аралии маньчжурской в пересчете на олеаноловую кислоту проводили по формуле
Ах • т0 •250•25-100-100
X % = —---0--------------,
А0 • тх • 25• (100-Ш0)
где А0 - оптическая плотность исследуемого раствора; т0 - масса ГСО олеаноловой кислоты в г; тх - масса сырья в г; - потеря в массе сырья при высушивании (5%).
Результаты количественного определения суммы сапонинов обрабатывали с использованием параметрического критерия Стьюдента согласно ГФ XI [4]. Установлено, что общее содрежание сапонинов в корневищах Аралии маньчжурской в пересчете на олеаноловую кислоту составило 9,145±0,055%.
УФ-спектр реакции взаимодействия сапонинов Аралии маньчжурской с концентрированной серной кислотой
Заключение
Таким образом, содержание суммы сапонинов в пересчете на олеаноловую кислоту в корневищах Аралии маньчжурской, культивируемой на территории Белгородской области, составило 9,145±0,055%, что значительно выше устанавливаемого минимального предела в 5,0% [5]. Следовательно, можно утверждать, что создание сырьевой базы Аралии маньчжурской в условиях Белгородской области является целесообразным.
Список литературы
1. Алексеев Ю.Е. и др. Деревья и кустарники. Энциклопедия природы России. М., 1997. 592 с.
2. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. М., 1983. 175 с.
3. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология: Рук. для врачей. М., 2000. 976 с.
4. Правила сбора и сушки лекарственных растений (Сборник инструкций). М., 1985. 328 с.
5. Государственная фармакопея СССР. Вып. 1. Общие методы анализа. 11-е изд., доп. М., 1987. 334 с.
Поступило в редакцию 2 сентября 2009 г. После переработки 15 сентября 2009 г.