Научная статья на тему 'Ростстимулирующий эффект штамма Bасillus megaterium в вегетационном опыте'

Ростстимулирующий эффект штамма Bасillus megaterium в вегетационном опыте Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
337
74
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
РОСТСТИМУЛИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ / ВСХОЖЕСТЬ / ВЕГЕТАЦИОННЫЙ ОПЫТ / ВИГНА / БОБОВАЯ КУЛЬТУРА / ПОЧВЕННЫЕ БАКТЕРИИ / КЛУБЕНЬКИ / РАЗВИТИЕ РАСТЕНИЙ / GROWTH PROMOTING EFFECT / GERMINATION / BACILLUS MEGATERIUM / POT EXPERIMENT / VIGNA / LEGUME CROP / SOIL BACTERIA / ROOT NODULES / PLANT DEVELOPMENT

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Чан Минь Куан, Егоров Михаил Алексеевич, Батаева Юлия Викторова

Исследована способность штамма Bacillus megaterium стимулировать рост растений вигна (Vigna cylindrica) в вегетационном опыте на начальном этапе развития растений в условиях Астраханской области. Показано, что оптимальной концентрацией клеток в суспензии при бактеризации семян растений является титр 10 в 7-ой степени кл/мл.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

The ability of the strain Bacillus megaterium to stimulate the plant growth Vigna cylindrica in pot experiments at the initial stage of plant development in the Astrakhan Region is investigated. It is shown that the optimal concentration of cells in the suspension for inoculation of plant seeds is the titer of 10 to the 7th power cells/ml.

Текст научной работы на тему «Ростстимулирующий эффект штамма Bасillus megaterium в вегетационном опыте»

Таблица 2

Характеристика древесины по крупности и подроста по высоте

Расст. от ист., км Запас, м3/га В т.ч. по крупности, % Подрост, шт/га

крупная средняя мелкая дрова всего в том числе

крупн. средн. мелк.

1 576 65,9 21,5 3,4 9,2 40 - - 40

2 444 69,6 16,5 2,8 11,1 800 40 160 600

4 420 49,0 31,4 8,1 11,5 2310 40 990 1280

5,5 416 54,8 25,9 8,6 10,7 3980 240 3260 480

Библиографический список

1. Валетова Е.А. Влияние техногенного загрязнения на содержание тяжелых металлов в хвое сосны. Восстановление нарушенных ландшафтов. — Барнаул: Изд-во АлтГУ,

2004. — С. 261-264.

2. Валетова Е.А. Морфологические изменения хвои сосны под влиянием поллю-тантов // Состояние и перспективы развития плодоводства, овощеводства и лесного хозяйства Западной Сибири. — Барнаул: Изд-во АГАУ, 2005. — С. 223-225.

3. Трунов М.И. Влияние техногенного загрязнения на жизнеспособность сосновых

насаждений // Вестник АГАУ. — 2001. — № 4. — С. 279-281.

4. Трунов М.И. Сосновые экосистемы в условиях техногенного загрязнения. — Барнаул, 2002. — 105 с.

5. Побединский А.В. Изучение лесовосстановительных процессов. — М.: Наука,

1962. — 63 с.

6. Сукачев В.Н. Руководство по исследованию типов леса. — М.: Государственное сельскохозяйственное изд-во, 1930. — 318 с.

7. Анучин Н.П. Сортиментные товарные таблицы. — М.: Лесная промышленность. — 1968. — 479 с.

+ + +

УДК 579.64 Чан Минь Куан,

М.А. Егоров, Ю.В. Батаева РОСТСТИМУЛИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ ШТАММА ВАСИШБ MEGATERIUM В ВЕГЕТАЦИОННОМ ОПЫТЕ

Ключевые слова: ростстимулирующий эффект, всхожесть, Bacillus megaterium, вегетационный опыт, вигна, бобовая культура, почвенные бактерии, клубеньки, развитие растений.

Введение

В настоящее время перспективным направлением является разработка безопасных и эффективных биологических средств для стимуляции роста растений, так как химические средства отрицательно влияют на окружающую среду, качество продукции, плодородие и супрессивность почв. Биологические средства для стимуляции роста и развития растений предполагают широкое применение препаратов на основе бактерий и их метаболитов.

Спорообразующие бактерии рода Bacillus являются основной составляющей сообщества почвы и ризосферы растений [1, 2]. Они обнаружены на поверхности и внутри различных частей растений: семенах, стеб-

лях, корнях, клубеньках, что свидетельствует об их тесном взаимоотношении с растениями. Бактерии рода Bacillus обладают широким набором свойств, оказывающих положительное действие на рост и развитие растений, а также защищающих их от болезней [3-6]. Некоторые виды рода Bacillus обладают фосфатмобилизующими, фос-фатминерализующими и азотфиксирующи-ми свойствами, поэтому являются для растений поставщиками доступных форм азота и фосфора [7-10]. Бактерии рода Bacillus являются составляющими группы «стимуляторов роста растений» (plant growth-promoting bacteria — PGPR), а также биоконтролирующими агентами, т.е. микроорганизмами, которые используют для защиты растений от фитопатогенов.

За счет образования эндоспор род Bacillus способен выживать в экстремальных условиях, что очень важно при использовании бацилл в качестве биопрепаратов в условиях аридного климата Астраханской области.

Объекты и методы

Из клубеньков бобового растения — виг-ны (Vigna cylindrica), выращенной на почвах Астраханской области, с помощью чашечного метода на твердых средах выделены бактерии, получен их изолят. На основании секвенирования гена 16 S рРНК изучаемый изолят идентифицирован как Bacillus megaterium.

Способность исследуемого штамма стимулировать рост растений в условиях Астраханской области определялась в вегетационном опыте на семенах растения вигна Vigna cylindrica на начальном этапе развития растений. Для исследования характера воздействия выделенного изолята на растения проводили бактеризацию семян вигны суспензией на основе штамма с различными концентрациями (титрами клеток): 5,2х106, 4,5х107 и 3,7х108 кл/мл. Титр клеток подсчитывали в камере Горяева [11]. Для приготовления суспензии вносили 2 петли биомассы исследуемого штамма, культивируемого на бобовом агаре, в 200 мл бобового отвара и культивировали 3 суток при температуре 28еС при постоянном перемешивании на качалке (120 об/мин.). В контрольных вариантах семена обрабатывали стерильной дистиллированной водой.

Для опыта использовали пластиковые кассеты с ячейками с отверстиями в нижней части объемом 50 мл, заполненные почвой (аллювиально-луговая), на которой планировалось проведение полевого опыта. Высаживали по одному семени в ячейку, глубина заделки — 1,5-2 см. Влажность почвы на протяжении опыта поддерживали на уровне оптимальной, соответствующей 60% от полной влагоемкости. Опыт проводили при комнатной температуре и естественном освещении в течение 20 дней в трех повторностях. В течение опыта отмечали всхожесть, длину побега, длину корня, массу сырых и сухих побегов и корней.

Результаты и их обсуждение

Проведенные исследования показали, что бактеризация семян не оказывает ингибирующего воздействия на их прорастание. Всхожесть семян в опыте была 100%-ной и в контроле, и в вариантах. Бактеризация исследуемым штаммом увеличивала скорость прорастания семян. Появление первых про-

ростков вигны наблюдалось на 3-и сутки вегетации, проростки контрольных растений появились только на 4-е сутки.

Анализ полученных данных показал, что бактериальная суспензия во всех исследуемых концентрациях обладает стимулирующим действием на рост и развитие проростков Vigna cylindrica (табл. 1-3).

На пятые сутки вегетации проводили первое измерение высоты растения. Анализ данных показал, что у всех экспериментальных растений высота в вариантах превышала высоту растений в контроле. Самая большая высота растений наблюдалась в варианте с титром 3,7х108 кл/мл, превышая контроль на 2,1 см (табл. 1).

Измерение высоты растений на 10-й и 20-й день вегетации показало, что наибольшая длина побега наблюдалась в варианте с титром клеток 4,5х107 кл/мл, на 2,64 и 6,07 см превышая контрольный вариант соответственно (рис. 1, 2). Титр 5,2х106 кл/мл оказался неэффективным по сравнению с титрами 4,5х107 и 3,7х108 кл/мл, хотя во всех случаях был больше, чем в контроле (рис.).

Анализ данных по измерению длины корня показал, что у всех экспериментальных растений в вариантах этот показатель превышал вариант (табл. 2). На 10-й день культивирования титры 5,2х106 и 4,5х107 кл/мл практически в равной степени стимулировали рост корней: 6,86 ± 0,74 см и 6,83 ±

0,21 см соответственно (рис.). Титр 3,7х108 кл/мл в наименьшей степени оказал влияние на рост корней.

Наибольшая длина корня в опыте наблюдалась при обработке семян титром 4,5х107 кл/мл и равна 9,43 ± 0,41 см, что превышает длину корня в контроле на 2,65 см.

Анализ данных по определению сырой и сухой массы побега и корня семи растений показал, что во всех вариантах эти показатели превышали контрольный вариант.

На 10-й и 20-й день культивирования сырая масса побега была максимальной при обработке титром 4,5х107 кл/мл и превышала контроль на 0,74 и 2,6 г соответственно (табл. 3). Сухая биомасса побега в те же дни вегетации была максимальной также при титре 4,5х107 кл/мл и равна 0,3 и 1,25 г.

Таблица 1

Влияние исследуемого штамма на длину побега вигны во время вегетации

Вариант Длина побега, см

5-й день 10-й день 20-й день

Контроль 2,16±0,37 10,12±0,36 25,5±0,36

Титр 5,2х106 кл/мл 2,43±0,44 11,67± 0,32 30,36±0,84

Титр 4,5х107 кл/мл 3,22±0,09 12,76±0,30 31,57±0,57

Титр 3,7х108 кл/мл 4,26±0,07 12,46 ±0,19 30,14±0,30

а б

Рис. Влияние исследуемого штамма на развитие вигны на 10-й (а) и 20-й (б) дни вегетации

Таблица 2

Влияние исследуемого штамма на длину корня вигны по время вегетации

Вариант Длина корня, см

10-й день 20-й день

Контроль 6±0,41 6,78±0,39

Титр 5,2х106 кл/мл 6,86±0,74 7,64±0,26

Титр 4,5х107 кл/мл 6,83±0,21 9,43±0,41

Титр 3,7х108 кл/мл 6,23±0,25 8,29±0,36

Таблица 3

Влияние исследуемого штамма на массу побега и корня вигны во время вегетации

Вариант Побег (7 растений) Корень (7 растений)

10-й день 20-й день 10-й день 20-й день

сырая масса, г сухая масса, г сырая масса, г сухая масса, г сырая масса, г сухая масса, г сырая масса, г сухая масса, г

Контроль 3,16 0,25 8 0,96 0,77 0,14 3,86 0,25

Титр 5,2х106 кл/мл 3,54 0,28 10,5 1,2 1,26 0,21 4,12 0,34

Титр 4,5х107 кл/мл 3,9 0,3 10,6 1,25 1,3 0,19 5,21 0,41

Титр 3,7х108 кл/мл 3,85 0,29 10,1 1,22 1,1 0,18 4,5 0,33

Сырая масса корня на 10-й и 20-й дни вегетации была наибольшей при титре 4,5х107 кл/мл (табл. 3). Сухая масса корней на 10-й день вегетации была самой большой в варианте с титром 5,2х106 кл/мл, на 20-й день культивирования максимальной была масса корней с титром 4,5х107 кл/мл.

Выводы

Проведенные эксперименты показали, что штамм Bacillus megaterium Q57-31 положительно влияет на всхожесть, рост и развитие растений Vigna cylindrica в раннем периоде роста, и выяснено, что концентрация 107 кл/мл оказалось самой эффективной. На 20-й день культивирования семена, обработанные титром 4,5х107 кл/мл показали наилучшие результаты по длине растений, длине корня, сырой и сухой массе побегов и корней. Следовательно, для дальнейших исследований необходимо применять концентрацию 107 кл/мл

Bacillus megaterium Q57-31 как наиболее эффективную для роста и развития растений Vigna cylindrica.

Библиографический список

1. Joseph B, Patra RR, Lawrence R, 2007. Characterization of plant growth romoting Rhi-zobacteria associated with chickpea (Cicer arietinum L). International Journal of Plant Production, 1 (Suppl 2): 141-152.

2. Kloepper JW, Lifshitz R, Zablotowicz RM, 1989. Free-living bacterial inocula for enhancing crop productivity. Trends in Biotechnology, 7 (Suppl 2): 39-43.

3. Barriuso J, Solano BR, 2008. Ecology, Genetic Diversity and Screening Strategies of Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR). Journal of Plant nutrition: 1-17.

4. Charest MH, Beauchamp CJ, Antoun H,

2005. Effects of the humic substances of deinking paper sludge on the antagonism be-

tween two compost bacteria and Pythium ultimum. FEMS Microbiology Ecology, 52(Suppl 2): 219-227.

5. Gutierrez Macero FJ, Probanza A, Ramos B, Colyn Flores JJ, Lucas GarcHa JA, 2003. Ecology, Genetic Diversity and Screening Strategies of Plant Growth Promoting Rhi-zobacteria (PGPR). Journal of Plant Nutrition, 26 (Suppl 5): 1101-1115.

6. Probanza A, Lucas GarcHa JA, Ruiz Palomino M, Ramos B, Gutierrez Macero FJ, 2002. Pinus pinea L seedling growth and bacterial rhizosphere structure after inoculation with PGPR Bacillus (B. licheniformis CECT 5106 and B. pumilus CECT 5105). Applied Soil Ecology, 20 (Suppl 2): 75-84.

7. Han HS, Supanjani, Lee KD, 2006. Effect of co-inoculation with phosphate and potassium solubilizing bacteria on mineral uptake and growth of pepper and cucumber. Plant soil and Environment, 52 (Suppl 3): 130-136.

8. Kaymak HC, Yarali F, Guvenc I, Donmez MF, 2008. The effect of inoculation with plant growth Rhizobacteria (PGPR) on root formation of mint (Mentha piperita L) Cuttings. African Journal of Biotechnology, 7 (Suppl 24): 4479-4483.

9. Orhan E, Esitken A, Ercisli S, Turan M, Sahin F, 2006. Effects of plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) on yield, growth and nutrient contents in organically growing raspberry. Scientia Horticulturae, 111 (suppl 1): 38-43.

10. Supanjani, Han HS, Jung JS, Lee K.D.

2006. Rock phosphate-potassium and rock-solubilising bacteria as alternative, sustainable fertilisers. Agronomy for Sustainable Development, 26 (Suppl 4): 233-240.

11. Нетрусов А.И., Егорова М.А., Захарчук Л.М. и др. Практикум по микробиологии: учеб. пособие для высших учеб. заведений / под ред. А.И. Нетрусова. — М.: Академия, 2005. — 352 с.

+ + +

УДК 619:615.32(031) М.С. Данилов

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО

Ключевые слова, бадан толстолистный, биологически активные вещества, экстрагенты, спектр поглощения, антимикробное действие.

Введение

Бадан толстолистный (Bergenia Crassifolia) — многолетнее травянистое растение семейства камнеломковых, с толстым ползучим корневищем, является одним из перспективных лекарственных растений для создания фармакологических препаратов. Сведения о его химическом составе и биологических свойствах ограничены. По данным ряда авторов, корни растения содержат дубильные вещества, флавоноиды, ку-марины, арбутин, гидрохинон, каротиноиды, витамины А и Е.Растение обладает вяжущими, противовоспалительными, антибактериальными и кровоостанавливающими свойствами [1-3].

В ветеринарии отвар бадана толстолистного применяют при расстройствах желудочно-кишечного тракта у животных, а также для орошений ротовой полости при стоматитах [4, 5].

Необходимо отметить, что как в медицине, так и в ветеринарии применяются только корневища указанного растения. Листья бадана в процессе заготовки не используются.

Целью работы явилось изучение биологически активных соединений в корнях и листьях бадана толстолистного и их антимикробного действия.

Материалы и методы

Для исследования использованы корни и зеленые листья бадана толстолистного, заготовленные в высокогорье Западного Алтая.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Изучение биохимического состава проводили согласно Государственной фармакопее СССР [6] и соответствующих ГОСТов. У растения определяли содержание экстрактивных веществ, флавоноидов, каротинои-дов, аскорбиновой кислоты, дубильных веществ, а также количество микро- и макроэлементов. Содержание последних определяли методом атомно-абсорбционной спектрометрии с помощью атомно-абсорбционного спектрометра с электротермической атомизацией «МГА-915» и флуори-метра «Флюорат-02-2м». Работу проводили в лаборатории экологии Восточно-Казахстанского государственного университета им. С. Аманжолова совместно с научным сотрудником С.Ю. Юлтыевым.

Далее исследовали антимикробные свойства у бадана толстолистного. С этой целью из корней и листьев растения по общепри-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.