CC BY
2Оригинальные исследования УДК 577.151.042+57.084.1 doi:10.25298/2616-5546-2024-8-2-85-89
РОЛЬ РЕЦЕПТОРОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ ПЕРОКСИСОМ PPARA В ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКОМ ДЕЙСТВИИ БЕТУЛИНА ПРИ
НЕАЛКОГОЛЬНОЙ ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ У КРЫС
1А. Г. Шляхтун, 2Ю. З. Максимчик, 1В. Ч. Полубок, 1И. П. Сутько, 1Е. Ф. Радута, 1Е. В. Букша, 1Е. В. Богдевич, 3Е. А. Мойсеёнок, 1Ж. В. Мотылевич
1 Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук
Беларуси, Гродно, Беларуь
2Отраслевая научно-исследовательская лаборатория «ДНК-технологий» учреждения
образования «(Гродненский государственный аграрный университет», Гродно, Беларуь 3Гродненский государственный медицинский университет, Гродно, Беларусь
Введение. Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) - важная медико-биологическая проблема. Одно из перспективных соединений для использования в терапии НАЖБП - тритерпеноид бетулин. Высказана гипотеза о реализации гиполипидемических эффектов бетулина через рецепторы пролиферации пероксисом (PPAR), в частности, PPARa.
Цель исследования - оценить роль PPARa в гиполипидемическом действии бетулина при НАЖБП у крыс.
Материал и методы. Исследование проведено на крысах линии Wistar c использованием современных биохимических и молекулярно-биологических методов.
Результаты. Введение бетулина (100 мг/кг/сут, 28 дней) крысам с НАЖБП оказывало выраженное ге-патопротекторное и гиполипидемическое действие. Бетулин препятствовал развитию гепатомегалии и нормализовал липидный профиль сыворотки крови и печени крыс с НАЖБП, увеличивая уровни экспрессии PPARa в печени. Введение антагониста PPARa (GW6471) животным, получавшим бетулин при НАЖБП, снижало экспрессию PPARa в ткани печени, индуцированную бетулином, и блокировало его гиполипидемическое действие.
Заключение. Гиполипидемическое действие бетулина при НАЖБП обусловлено усилением уровней экспрессии PPARa в печени.
Ключевые слова: бетулин, рецепторы пролиферации пероксисом a, неалкогольная жировая болезнь печени, метаболизм липидов.
THE ROLE OF PEROXISOME PROLIFERATION RECEPTORS PPARA IN THE LIPID-LOWERING EFFECT OF BETULIN IN NONALCOHOLIC
FATTY LIVER DISEASE IN RATS
1A. H. Shlyahtun, 2Yu. Z. Maksimchik, 1V. Ch. Polubok, 1I. P. Sutsko, 1A. F. Raduta, 1E. V. Buksha, 1Y. V. Bogdevich, 3E. A. Moiseenok, 1Zh. V. Motylevich
1The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of
Sciences of Belarus, Grodno, Belarus;
2Applied-Research Laboratory of «DNA-technologies» of Educational Institution «Grodno State
Agrarian University» Grodno, Belarus;
3Grodno State Medical University, Grodno, Belarus
Background. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a significant biomedical challenge. The triterpenoid botulin is one of promising therapeutic agents for NAFLD treatment. It is hypothesized that betulin exerts its lipid-lowering effects through the activation of peroxisome proliferator-activated receptors (PPAR), specifically PPARa.
Objective. The aim of this study was to assess the role of PPARa in mediating the lipid-lowering effects of betulin in a rat model of NAFLD.
Materials and methods. The study was performed on Wistar rats utilizing contemporary biochemical and molecular biological techniques.
Results. Administration of betulin (100 mg/kg/day for 28 days) to rats with NAFLD resulted in significant hepatoprotective and lipid-lowering effects. Betulin prevented the development of hepatomegaly and normalized the lipid profiles in both the blood serum and liver of NAFLD rats by increasing PPARa expression levels in the liver tissue. The administration of the PPARa antagonist GW6471 to betulin-treated NAFLD-rats reduced the betulin-nduced increase in PPARa expression and inhibited hypolipidemic effect of betulin.
Conclusion. The lipid-lowering effect of betulin in NAFLD is attributed to the increased expression levels of PPARa in the liver.
Keywords: betulin, peroxisome proliferator-activated receptor a, non-alcoholic fatty liver disease, lipid metabolism
Original Studies
Автор, ответственный за переписку:
Шляхтун Алексей Генрихович, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, e-mail: [email protected], ORCID: 0000-0002-7618-9589
Для цитирования: Роль рецепторов пролиферации пероксисом PPARa в гиполипидемическом действии бету-лина при неалкогольной жировой болезни печени у крыс / А. Г. Шляхтун, Ю. З. Максимчик, В. Ч. Полубок, И. П. Сутько, Е. Ф. Радута, Е. В. Букша, Е. В. Богдевич, Е. А. Мойсеёнок, Ж. В. Мотылевич // Гепатология и гастроэнтерология. 2024. Т. 8, № 2. С. 85-89. https://doi.org/10.25298/2616-5546-2024-8-2-85-89.
Введение
Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) представляет собой значимую медико-биологическую проблему. Распространенность НАЖБП составляет до 30%, а стеатоге-патита - до 3% взрослого населения мира [1]. Протоколы лечения НАЖБП включают консервативные немедикаментозные и фармакологические вмешательства [2]. Следует признать, что имеющиеся на сегодняшний день знания мало что сделали для сдерживания распространения данной патологии.
Из-за низкой эффективности синтетических препаратов и их побочных эффектов на протяжении десятков лет сохраняется интерес к поиску природных соединений с гепатопротектор-ным и гиполипидемическим действием.
Одно из таких соединений - пентациклический тритерпеноид - бетулин, который нормализует уровни триацилглицеролов (ТГ), липопротеинов и свободных жирных кислот (СЖК) в крови и печени крыс при экспериментальных нарушениях липидного обмена, в том числе при алкогольном стеатогепатите и сахарном диабете 2 типа [3, 4].
Установлен ряд сигнальных молекул и путей, обуславливающих гепатопротекторные эффекты бетулина, в частности, показано, что бетулин влияет на АМРК, МАРК, NF-кB, N1^2, STAT3, PI3K/Akt/mTOR и другие [5]. Считается, что ги-полипидемическое действие бетулина обусловлено его способностью селективно блокировать созревание факторов транскрипции SREBP-2 и снижать активность сигнального пути SREBP-2/ SCAP/INSIG1, что приводит к снижению биосинтеза холестерина [6]. Однако, так как SREBP-2 напрямую не влияет на метаболизм ТГ и СЖК, требуется уточнение механизмов гиполипиде-мического действия бетулина [7].
Учитывая то, что под влиянием бетулина происходит нормализация уровней ТГ и СЖК в тканях, увеличиваются активность и уровни экспрессии скорость-лимитирующего фермента р-окисления жирных кислот, карнитинпальмито-илтрансферазы-1, можно предположить, что в гиполипидемических эффектах бетулина задействованы рецепторы пролиферации пероксисом (PPAR), в частности PPARa [8,9].
Corresponding author:
Shlyahtun Alexej, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, e-mail: [email protected], ORCID: 00000002-7618-9589
For citation: Shlyahtun AH, Maksimchik YuZ, Polubok VCh, Sutsko IP, Raduta AF, Buksha EV, Bogdevich YV, Moiseenok EA,. Motylevich ZhV. The role of peroxisome proliferation receptors PPARa in the lipid-lowering effect of betulin in nonalcoholic fatty liver disease in rats. Hepatology and Gastroenterology. 2024;8(2):85-89. https://doi.org/10.25298/2616-5546-2024-8-2-85-89.
PPAR представляют собой семейство ли-ганд-индуцируемых ядерных гормональных рецепторов. У млекопитающих идентифицированы три изоформы (а, y, ß/5) PPAR. В печени и скелетных мышцах PPARa регулируют экспрессию генов, участвующих в энергетическом метаболизме, в том числе в транспорте, активации, a-, ß- и ы-окислении СЖК [10].
Цель исследования - оценить роль PPARa в гиполипидемическом действии бетулина при НАЖБП у крыс.
Материал и методы
Все использованные в исследовании реактивы имели квалификацию не ниже чем «химически чистый». Бетулин получали путем экстракции [3, 4]. Для приготовления буферных растворов применяли деионизированную воду (DirectQ3, Merk, США).
Моделирование НАЖБП проводили на самцах крыс линии Wistar. Животные содержались в стандартных условиях с регулируемыми уровнями освещенности, температуры и влажности.
При работе с животными соблюдались этические нормы, установленные «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях». Дизайн эксперимента одобрен комитетом по биоэтике ГП «Институт биохимии биологически активных соединений НАН Беларуси» (протокол № 2 от 12.02.2020).
НАЖБП индуцировали содержанием животных на протяжении 42 суток на высокожировой диете (ВЖД; 45% калорий за счет животных жиров), с дополнительным введением стрептозото-цина в дозе 25 мг/кг на 14 и 28-й день от начала эксперимента [11]. Через 42 дня отбирали животных с признаками НАЖБП и далее использовали в эксперименте.
Были сформированы 4 экспериментальные группы по 8 особей в каждой - «Контроль», «ВЖД», «ВЖД + Бетулин» и «ВЖД + Бетулин + GW6471». Крысы в контрольной группе содержались на обычной диете вивария, тогда как остальным скармливали ВЖД до конца эксперимента. Крысам, включенным в группы «ВЖД + Бетулин» и «ВЖД + Бетулин + GW6471» в тече-
ние 28 дней внутрижелудочно вводили суспензию бетулина в дозе 100 мг/кг/сут в 2% крахмале. Контрольные животные и группа «ВЖД» получали эквиобъемные количества 2% крахмала. Животные в группе «ВЖД + Бетулин + GW6471» в течение 28 дней получали внутрибрюшинно инъекции препарата GW6471 (Selleck, США; кат. № S2798) по 2,5 мг/кг/сут в физиологическом растворе с 5% ДМСО + 40% ПЭГ 300. Животным остальных групп внутрибрюшинно вводили эквиобъемные количества физиологического раствора с 5% ДМСО + 40% ПЭГ 300.
По окончании эксперимента крыс эвтанази-ровали под эфирным наркозом. После декапи-тации у животных получали сыворотку. Печень выделяли без перфузирования, на льду, взвешивали для расчета печеночного индекса, определяемого как отношение массы печени к массе тела. Для исследований отбирали левую латеральную долю печени. Образцы тканей хранили до исследования при -80°С.
В сыворотке крови определяли уровни ТГ, общего холестерола (ОХ) и холестерола липопро-теидов высокой плотности (ХЛВП), а в липидной фракции печени - содержание ТГ и ОХ при помощи наборов реагентов («НТПК АнализХ», Беларусь). Определение концентрации СЖК проводили по методу Duncombe. Содержание PPARa в печени оценивали иммуноферментным методом (FineTest, КНР; кат. № ER1283). Количество белка в пробах определяли по Bradford c Coomassie Brilliant Blue G-250 (Sigma-Aldrich, США).
РНК из ткани выделяли с использованием TRIzol, очищали препаратом смеси ДНКаз. Изолированную РНК хранили при температуре -80°С до анализа.
Экспрессию мРНК Ppara оценивали метод ПЦР с обратной транскрипцией. Использовали набор iTaq Universal SYBR Green (Bio-Rad, США) и систему CFX96 (Bio-Rad, США), программа амплификации включала этапы обратной транскрипции, последующей денатурации и 40 циклов собственно ПЦР (денатурация при 95°С 10 секунд, отжиг и элонгация при 60°С 30 секунд), в соответствии с рекомендациями производителя. Дизайн праймеров разработан с помощью Primer-BLAST - к мРНК Ppara (NM_013196.2)
- F: TAATTTGCTGTGGAGATCGGC и R: GGAGTTTTGGGAAGAGAAAGGT; к мРНК р-актина Actb (NM_031144.3) -F: ATGGATGACGATATCGCTGC и R: CTTCTGACCCATACCCACCA. Данные ПЦР анализировали с помощью программного обеспечения CFX Manager 3.1 (Bio-RAD, США). Расчет относительной экспрессии мРНК Ppara проводили по методу 2-ДДСТ с нормализацией по мРНК Actb.
Данные обрабатывали статистически с использованием пакета Prism v.8.0 (GraphPad, США). Нормальность распределения оценивали по критерию Шапиро-Уилка. Для выявления значимости различий использовали однофакторный дисперсионный анализ и тест Тьюки в случае нормального распределения и равенства дисперсий, в противном случае - тест Краскела-Уо-ллиса с тестом Данна для множественных сравнений. Различия считали значимыми при p<0,05. Данные в таблицах представлены в виде M±m, где М - среднее арифметическое значение, m -стандартная ошибка среднего значения.
Результаты и обсуждение
Длительное содержание крыс на ВЖД (70 суток) сопровождалось развитием НАЖБП, проявляющейся гепатомегалией, гепатостеатозом и дислипидемией атерогенного типа. Обнаружено, что в сыворотке крови крыс в группе «ВЖД» концентрации ТГ увеличились в 2,47 раза, уровни ОХ возрастали на 76,2%, концентрации СЖК повышались на 36,7% по сравнению с аналогичными показателями в контрольной группе, при этом содержание ХЛВП было ниже на 33,3%, чем в контроле (табл. 1).
У животных в группе «ВЖД» печеночный индекс увеличился на 54,3%. Значительно повышалось содержание липидов в печени - уровни ТГ и ОХ были выше в 2,5 и 1,4 раза, соответственно, чем в контрольной группе (табл. 2).
Бетулин в условиях эксперимента проявлял выраженное гепатопротекторное и гиполипиде-мическое действие, предотвращая развитие ге-патомегалии и снижая уровни ТГ, ОХ и СЖК в сыворотке крови и печени у крыс по сравнению с группой «ВЖД» (табл. 1-2), что согласуется с
Таблица 1. - Влияние бетулина на липидный профиль сыворотки у крыс с НАЖБП Table 1. - The effect of betulin on the serum lipid profile of rats with NAFLD
Группы Показатели
ОХ, ммоль/л ХЛВП, ммоль/л ТГ, ммоль/л СЖК, ммоль/л
Контроль 4,29±0,65 3,12±0,55 0,72±0,07 0,49±0,03
ВЖД 7,56±1,08 А 2,08±0,25 А 1,78±0,09 А 0,67±0,07 А
ВЖД + Бетулин 3,60±0,75 B 2,57±0,51 1,08±0,14 B 0,59±0,04
ВЖД + Бетулин + GW6471 7,90±1,08 А 1,76±0,14 А 1,95±0,22 А 0,74±0,06 А
Примечание - здесь и далее - А - р<0,05 по сравнению с группой «Контроль», В - р<0,05 по сравнению с группой «ВЖД».
Origi,
nal Studies
Таблица 2. - Влияние бетулина на маркеры НАЖБП в печени у крыс
Table 2. - The effect of betulin on NAFLD markers in rat liver
Группы Печеночный индекс, / Содержание липидов, мг/г печени
ТГ ОХ
Контроль 3,13±0,29 10,91±0,98 3,43±0,24
ВЖД 4,83±0,18 А 25,98±1,21 А 4,87±0,21 А
ВЖД + Бетулин 3,56±0,18 B 15,50±1,07B 3,86±0,49
ВЖД + Бетулин + GW6471 4,67±0,20 А 23,89±1,11 А 4,35±0,19
ранее полученными данными [3-6, 8-9].
Уровни мРНК Ppara и содержание PPARa в ткани печени животных с НАЖБП (группа «ВЖД») были снижены по сравнению с контрольными (табл. 3).
Таблица 3. - Влияние бетулина на уровни экспрессии PPARa в печени у крыс с НАЖБП Table 3. - Effect of betulin on expression of PPARa in the liver of rats with NAFLD
Группы Нормализованный уровень мРНК Ppara Содержание PPARa, нг/мг белка
Контроль 1,00±0,10 128,01±15,33
ВЖД 0,80±0,09 А 70,75±7,20 А
ВЖД + Бетулин 2,54±0,45 AB 135,50±7,47 B
ВЖД + Бетулин + GW6471 0,55±0,08 А 61,90±6,94 А
Введение бетулина крысам с НАЖБП сопровождалось значительным увеличением экспрессии PPARa - наблюдалось увеличение содержания мРНК Ррага и белка PPARa как по сравнению с группой «ВЖД», так и по сравнению с контрольными животными (табл. 3).
Для проверки гипотезы о реализации гипо-липидемического действия бетулина через активацию PPARa крысам, которые получали бе-тулин на фоне НАЖБП, дополнительно вводили соединение GW6471, которое является селективным антагонистом PPARa с 1С50=0,24 ^М. Как известно, GW6471, связываясь с молекулой PPARa, приводит к нарушению белок-белковых взаимодействий PPARa с ко-активаторами SRC-1 и CRB, увеличивает аффинность к ко-ре-прессорам N-CoR и SMRT, что в конечном итоге снижает функциональную активность рецептора [12].
Введение антагониста PPARa животным, получавшим бетулин на фоне НАЖБП, снижало экспрессию мРНК Ррага в ткани печени, индуцированную бетулином, и в значительной степени блокировало его гиполипидемическое действие, что нашло свое отражение в повышенных уровнях липидов в сыворотке крови и в печени крыс.
Полученные данные значительно расширяют понимание механизмов действия бетулина, показывая, что его гиполипидемические эффекты обусловлены повышением экспрессии PPARa в гепатоцитах. В перспективе результаты исследования могут быть применены для разработки препаратов, направленных на лечение НАЖБП и связанных с ней осложнений.
Выводы
1. Бетулин усиливает экспрессию PPARa в печени крыс при НАЖБП, что сопровождается уменьшением выраженности гепатомегалии, стеатогепатоза и проявлений дислипидемии.
2. GW6471 в значительной мере блокирует эффекты бетулина на липидный обмен в печени крыс при НАЖБП, что подчеркивает ключевую роль PPARa в механизмах гиполипидемического действия бетулина.
Благодарность. Авторы выражают свою искреннюю благодарность M. Tomulewicz и A. Zakrzeska, M.D., PhD. (Высшая медицинская школа, г. Белосток, Польша), S. Szycko, M.D., PhD. (Гданьский медицинский университет, Польша) за бескорыстное предоставление некоторых реагентов и доступа к оборудованию, использованных в настоящей работе.
Teng ML, Ng CH, Huang DQ, Chan KE, Tan DJ, Lim WH, Yang JD, Tan E, Muthiah MD. Global incidence and prevalence of nonalcoholic fatty liver disease. Clin Mol Hepatol. 2023;29(Suppl):32-42. doi: 10.3350/cmh.2022.0365. Rinella ME, Neuschwander-Tetri BA, Siddiqui MS, Abdelmalek MF, Caldwell S, Barb D, Kleiner DE, Loomba R. AASLD Practice Guidance on the clinical assessment and management of nonalcoholic fatty liver disease. Hepatology. 2023;77(5):1797-1835. doi: 10.1097/ HEP.0000000000000323.
Buko V, Kuzmitskaya I, Kirko S, Belonovskaya E, Naruta E, Lukivskaya O, Shlyahtun A, Ilyich T, Zakreska A, Zavodnik I. Betulin attenuated liver damage by prevention of hepatic mitochondrial dysfunction in rats with alcoholic steatohepatitis. Physiol Int. 2019;106(4):323-334. doi: 10.1556/2060.106.2019.26.
References
4
Buko V, Zavodnik I, Palecz B, Stepniak A, Kirko S, Shlyahtun A, Misiuk W, Belonovskaya E, Lukivskaya O, Naruta E, Kuzmitskaya I, Ilyich T, Erdenebayar B, Rakhmadiyeva S. Betulin/2-hydroxypropyl-p-cyclodextrin inclusion complex: Physicochemical characterization and hepatoprotective activity. J Mol Liq. 2020;309:113118. doi: 10.1016/j.mol-liq.2020.113118.
Adepoju FO, Duru KC, Li E, Kovaleva EG, Tsurkan MV. Pharmacological potential of betulin as a multitarget compound. Biomolecules. 2023;13(7):1105. doi: 10.3390/ biom13071105.
Tang JJ, Li JG, Qi W, Qiu WW, Li PS, Li BL, Song BL. Inhibition of SREBP by a small molecule, betulin, improves hyperlipidemia and insulin resistance and reduces atherosclerotic plaques. Cell Metab. 2011;13(1):44-56. doi: 10.1016/j.cmet.2010.12.004.
7. Rakhshandehroo M, Knoch B, Müller M, Kersten S. Peroxisome proliferator-activated receptor alpha target genes. PPAR Res. 2010;2010:612089. doi: 10.1155/2010/612089.
8. Shlyahtun AH, Maksimchik YuZ, Raduta EF, Sutsko IP. Vlijanie betulina na aktivnost karnitin-palmitoiltransferazy 1 tipa v mitohondrijah pecheni krys [Effect of betulin on car-nitine-palmitoyltransferase-1 activity in rats liver]. Vestnik Polesskogo gosudarstvennogo universiteta. Serija priro-dovedcheskih nauk [Bulletin of Palesky state university. Series in Natural Sciences]. 2022;2:57-63. edn: WEPMXG. (Russian).
9. Shlyahtun AH, Maksimchik YuZ, Raduta EF, Polubok VCh, Buksha EV, Bogdevich EV, Sutsko IP, Gurinovich VA, Astrovski AA. Vlijanie triterpenoida betulina na jekspressiju karnitinpalmitoiltransferazy v pecheni krys pri nealkogolnoj zhirovoj bolezni pecheni s priznakami steatogepatita [Effect of triterpenoid betulin on expression of carnitine palmitoyltransferase in liver of rats with nonalcoholic fatty liver disease with signs of steatohepatitis]. Vestnik Polesskogo gosudarstvennogo universiteta. Serija prirodovedcheskih nauk [Bulletin of Palesky State University. Series in Natural Sciences]. 2024;1:46-55. (Russian).
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование. Разработка способов получения и анализа бетулина выполнена при финансовой поддержке Белорусского фонда фундаментальных исследований (грант № Б16М-120, Рег. № 20163318). Разработка экспериментальной модели и некоторых методов исследований выполнены в рамках выполнения задания 2.14 ГПНИ «Физическое материаловедение, новые материалы и технологии» подпрограмма «Наноматериалы и нано-технологии» (2016-2018 гг., рег. № 20160600) и задания 5.18 ГПНИ «Химические технологии и материалы» подпрограмма «Фармакология и фармация» (2019-2020 гг., рег. № 20190937).
Соответствие принципам этики. Исследование одобрено локальным этическим комитетом. Сведения об авторах:
Шляхтун Алексей Генрихович, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, e-mail: [email protected], ORCID: 0000-0002-7618-9589
Максимчик Юрий Зигмундович, Отраслевая научно-исследовательская лаборатория «ДНК-технологий» учреждения образования «Гродненский государственный аграрный университет», ORCID: 0009-0004-6132-230X
Полубок Вячеслав Чеславович, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0000-0002-9418-7069
Сутько Ирина Петровна, канд. биол. наук, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0000-0001-9599-6944
Радута Елена Францевна, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0000-0001-8020-1838
Букша Екатерина Витальевна, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0009-0001-0236-9691
Богдевич Евгений Валерьянович, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0009-0003-9825-098X
Мойсеёнок Евгений Андреевич, канд. мед. наук, доц., Гродненский государственный медицинский университет, ORCID: 0000-0001-9488-9290
Мотылевич Жанна Витальевна, канд. биол. наук, Институт биохимии биологически активных соединений Национальной академии наук Беларуси, ORCID: 0009-0004-3311-9320
10. Semenenya IN, Shlyahtun AH, Raduta HF. Rol receptorov, aktivirujushhih proliferaciju peroksisom, v kontrole alkogolnoj zavisimosti i lechenii soputstvujushhih zabolevanij pecheni [Role of peroxisome proliferator-activated receptors in the control of alcohol dependence and concomitant liver pathology]. Izvestija Nacionalnoj akademii nauk Belarusi. Serija medicinskih nauk [Proceedings of the National Academy of Sciences of Belarus. Medical series]. 2019;16(2):244-256. doi:10.29235/1814-6023-2019-16-2-244-256. edn: AKDUNT. (Russian).
11. Lo L, McLennan SV, Williams PF, Bonner J, Chowdhury S, McCaughan GW, Gorrell MD, Yue DK, Twigg SM. Diabetes is a progression factor for hepatic fibrosis in a high fat fed mouse obesity model of non-alcoholic steato-hepatitis. J Hepatol. 2011;55(2):435-44. doi: 10.1016/j. jhep.2010.10.039.
12. Xu HE, Stanley TB, Montana VG, Lambert MH, Shearer BG, Cobb JE, McKee DD, Galardi CM, Plunket KD, Nolte RT, Parks DJ, Moore JT, Kliewer SA, Willson TM, Stimmel JB. Structural basis for antagonist-mediated recruitment of nuclear co-repressors by PPAR alpha. Nature. 2002;415(6873):813-7. doi: 10.1038/415813a.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Financing. The methods for the isolation and analysis of betulin were developed with the financial support of the Belarusian Foundation for Fundamental Research (Grant No. B16M-120, Reg. No. 20163318). The experimental model and some research methods were developed as part of task 2.14 of the State Scientific Research Program "Physical Materials Science, New Materials and Technologies" subprogram "Nanomaterials and Nanotechnology" (2016-2018, reg. No. 20160600) and task 5.18 of the State Scientific Research Program "Chemical Technologies and Materials" subprogram "Pharmacology and pharmacy" (2019-2020, reg. No. 20190937).
Conformity with the principles of ethics. The study was approved by the local ethics committee. Information about authors:
Shlyahtun Alexej, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, e-mail: [email protected], ORCID: 00000002-7618-9589
Maksimchyk Yuri, Applied-Research Laboratory of «DNA-technologies» of Educational Institution «Grodno State Agrarian University», ORCID: 0009-0004-6132-230X
Polubok Vyacheslav, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, ORCID: 0000-0002-9418-7069
Sutsko Irina, PhD (Biology), The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus cm, ORCID: 0000-0001-9599-6944
Raduta Alena, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, ORCID: 0000-0001-8020-1838
Buksha Ekaterina, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, ORCID: 0009-0001-0236-9691
Bogdevich Yauheni, The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, ORCID: 0009-0003-9825-098X
Evgenij Moiseenok, PhD (Medicine), Associate Professor, Grodno State Medical University, ORCID: 0000-0001-9488-9290 Zhanna Motylevich, PhD (Biology), The Institute of Biochemistry Biologically Active Compounds, The National Academy of Sciences of Belarus, ORCID: 0009-0004-3311-9320
Поступила: 26.08.2024 Принята к печати: 04.10.2024
Received: 26.08.2024 Accepted: 04.10.2024
