CC BY
70
13. Graatsma E. M., Jacod B. C., van Egmont L. A. J. et al. Fetal electrocardiography: feasibility of long-term fetal heart recordings // Br. j. obstet. gynaec. - 2009. - Vol. 116. № 2. - Р. 334-338.
14. Башмакова Н. В., Цывьян П. Б., Ковалев В. В., Шаманская Е. Ф., Паначева Н. М., Тарасова Н. В. Опыт неинвазивной регистрации электрокардиограммы плода с суправентрикулярной тахикардией (клиническое наблюдение) // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2010. - № 5. - С. 40-42.
15. Рымашевский Н. В. Дыхательные движения плода (обзор литературы) // Вопросы охраны материнства и детства. - 1982. -№ 3. - С. 59-62.
16. Курманавичюс Ю. Ю., Венцкаускас А. В., Алишаускас И. П. Диагностика внутриутробного страдания плода путем оценки его дыхательной и двигательной активности // Акуш. и гин. - 1984. -№ 6. - С. 42-44.
Поступила 26.05.2013
Г. Т. ГУСЕЙНОВ, О. С. ПОЛУНИНА, Т. А. УКЛИСТАЯ, А. Х. АХМИНЕЕВА
роль полиморфизма С-262Т ГЕНА КАТАЯАзы: связь с хобл и особенностями её течения
Кафедра внутренних болезней педиатрического факультета ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Минздрава России», Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 52-41-43. E-mail: [email protected]
В общей сложности было обследовано 120 жителей Астраханской области (90 больных ХОБЛ и 30 практически здоровых лиц). Установлено, что у больных ХОБЛ и практически здоровых жителей Астраханской области преобладал гомозиготный генотип С/СТ полиморфного локуса С-262Т гена каталазы. Не выявлено статистически значимых различий по частоте генотипов и аллелей по полиморфизму С-262Т гена каталазы между больными ХОБЛ и практически здоровыми. Установлена ассоциация генотипа СС по полиморфизму С-262Т гена каталазы с риском развития тяжелой и крайне тяжелой степени ХОБЛ.
Ключевые слова: каталаза, хроническая обструктивная болезнь легких, гены, полиморфизм.
G. T. GUSEINOV, О. S. POLUNINA, T. A. UKLISTAYA, A. H. AKHMINEEVA
THE ROLE OF POLYMORPHISM OF CATALASE GENE 262T: CONNECTION WITH COPD AND ITS COURSE PECULIARITIES
Department of internal diseases of pediatric faculty, state budget educational institution of higher professional education «Astrakhan state medical academy», Russia, 414000, Astrakhan, Bakinskaya str., 121, tel. (8512) 52-41-43. E-mail: [email protected]
120 people were observed in the Astrakhanian region (90 patients wits COPD and 30 healthy persons). It was found out that patients and healthy persons the citizens of the Astrakhanian area had homozygote genotype C/Ct of radiocontaminated with-catalase gene 262T. No statistically significant differences genotypes and alleles on polymorphism of catalase gene 262T-between COPD patients and almost healthy persons were defined. The association of genotype CC on C-262T gene polymorphism of catalase with risk of developing the the severe and extremely severe COPD was determined.
Key words: catalase, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), genes, polymorphism.
Хроническая обструктивная болезнь легких ним из механизмов, участвующих в формировании
(ХОБЛ) характеризуется широким распространени- индивидуальной вариабельности уровня продукции
ем, неуклонно прогрессирующим течением и ростом антиоксидантов. Роль генов, кодирующих ферменты
числа инвалидизирующих форм [1, 3]. Когорта паци- антиоксидантной системы, в том числе каталазы, при
ентов с ХОБЛ неоднородна. Сложный механизм фор- ХОБЛ является недостаточно изученной, а результа-
мирования клинического фенотипа ХОБЛ обусловлен ты исследований, как правило, носят противоречивый
большим количеством различных биомолекулярных, характер [2, 4]. Ген каталазы расположен в локусе
клеточных и генетических факторов, вовлеченных в 11p13 и состоит из 13 экзонов. Известно несколько
патогенез заболевания. Важную роль в патогенезе аллельных вариантов этого гена, ассоциированных
ХОБЛ играет окислительный стресс, основной причи- со снижением каталитической активности фермента,
ной которого является дисбаланс в системе «оксидан- среди них полиморфизм C-262T в промоторной обла-
ты - антиоксиданты», выражающийся в чрезмерном сти гена каталазы [5].
усилении образования активных форм кислорода и Цель исследования - изучить ассоциации по-
ослаблении эффективности антиоксидантной защи- лиморфного локуса С-262Т гена каталазы с риском
ты, прежде всего ее ферментативного звена. Поли- развития хронической обструктивной болезни легких
морфизм генов продуктов антиоксидантной защиты, и особенностью ее течения у жителей Астраханской
в частности в промоторном регионе, может быть од- области.
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования послужила популя-ционная выборка не родственных между собой жителей Астраханской области (120 человек). В исследование включено 90 больных ХОБЛ, находящихся на обследовании и стационарном лечении в пульмонологическом отделении ГБУЗ АО «Городская клиническая больница № 4 имени В. И. Ленина» г. Астрахани в течение 2009-2011 гг., и 30 практически здоровых жителей, не имеющих патологии со стороны бронхолегочной системы. Группы были сопоставимы по полу и возрасту. Диагноз ХОБЛ и стадии заболевания устанавливались по рекомендациям, представленным программой «Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни лёгких» (GOLD, 2008 г.).
У обследуемых проводился забор венозной крови из локтевой вены в количестве 10 мл в пробирки типа «вакутейнер» с ЭДТА, с целью экстракции ДНК. Генетическое исследование для определения полиморфизма С-262Т гена каталазы выполнялось в лаборатории пренатальной диагностики наследственных болезней Института акушерства и гинекологии имени Д. О. Отта (г. Санкт-Петербург). Определение полиморфных вариантов С-262Т гена каталазы проводили методом ПЦР со специфическими олигопраймерами с последующим рестрикционным анализом.
Статистическая обработка данных выполнена с помощью программы «Statistica for Windows» v. 6.0. Распределение генотипов по исследованным полиморфным локусам проверяли на соответствие ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга с помощью точного теста Фишера. Об ассоциации аллелей или генотипов с патологическим фенотипом судили по величине отношения шансов (ОШ).
Результаты исследования и их обсуждение
На первом этапе исследования была определена частота встречаемости полиморфизма С-262Т гена каталазы в группе больных ХОБЛ и у практически здоровых лиц (рисунок). Частоты генотипов в группе больных ХОБЛ составили: СС - 24 (26,7%), СТ - 61 (67,8%), ТТ - 5 (5,6%), в группе практически здоровых: СС -9 (30%), CT - 21 (70,0%), ТТ - 0. Частоты аллелей в группе больных ХОБЛ составили: C - 109 (60,6%), Т - 71 (39,4%), в группе практически здоровых: С - 39 (65%), t - 21 (35%). У больных ХОБЛ и практически здоровых жителей г. Астрахани преобладал гомозиготный генотип С/СТ (рисунок). Различия между больными
ХОБЛ и практически здоровыми по частоте генотипов и аллелей были статистически не значимы (х2=1,77, df=2, р=0,412 и х2=0,21, df=1, р=0,646 соответственно).
группа практически здоровых лиц
группа больных ХОБЛ
| и генотип сс и генотип (Л □ генотип Ц и аплель с ов аллепь 11
Ассоциации полиморфизма С-262Т гена каталазы у больных ХОБЛ и соматически здоровых лиц
На следующем этапе работы нами определена частота встречаемости полиморфизма локуса С-262Т гена каталазы в группах практически здоровых лиц и больных ХОБЛ в зависимости от пола (табл. 1). Различия по частоте генотипов и аллелей между мужчинами и женщинами в группе как больных ХОБЛ, так и практически здоровых лиц были статистически не значимы (х2=0,20, df=2, р=0,903, х2=2,43, df=1, р=0,119 и х2=0,33, df=2, р=0,846, х2=0,01, df=1, р=0,902 соответственно).
Таким образом, при изучении полиморфного локуса С-262Т гена каталазы у жителей Астраханской области мы не выявили достоверных ассоциаций данного полиморфизма с предрасположенностью к формированию ХОБЛ.
Нарушения со стороны антиоксидантной защиты организма могут оказывать влияние на течение брон-холегочной патологии [6, 7]. Представляет интерес изучение вклада эндогенных антиоксидантов наряду с генами - модификаторами защиты от свободных радикалов в формирование характера течения ХОБЛ.
В таблице 2 представлены результаты изучения частоты полиморфизма С-262Т гена каталазы у больных ХОБЛ в зависимости от клинических типов заболевания. Не выявлено статистически значимых различий в распределении частот генотипов и аллелей у больных ХОБЛ с бронхитическим и эмфизематозным типами.
У больных ХОБЛ с различными стадиями заболевания обнаружены статистически значимые различия в частоте регистрации генотипов по полиморфизму
Таблица 1
Анализ полиморфного локуса С-262Т гена каталазы в зависимости от пола в исследуемых группах
Генотип/ аллель Практически здоровые (n=30) Достоверность Больные ХОБЛ (n=90) Достоверность
Мужчины (n=19) Женщины (n=11) Мужчины (n=64) Женщины (n=26)
СС 5 (26,3%) 4 (36,4%) Х2=0,33, р=0,846 17 (26,6%) 7 (26,9%) Х2=0,20, р=0,903
СТ 14 (73,7%) 7 (63,7%) 43 (67,2%) 18 (69,2%)
ТТ - - 4 (6,3%) 1 (3,9%)
С 24 (63,2%) 15 (68,2%) Х2=0,01, р=0,902 77 (60,2%) 52 (72,2%) Х2=2,43, р=0,119
Т 14 (36,8%) 7 (31,8%) 51 (39,8%) 20 (27,8%)
Таблица 2
Типы клинических форм заболеваний ХОБЛ (М±SD) в подгруппах больных с различным генотипом полиморфного локуса С-262Т гена каталазы
Генотип/аллель Бронхитический тип (n=48) Эмфизематозный тип (n=17) Достоверность различий
СС 14 (29,2%) 6 (35,3%) Х2=0,22, р=0,895
СТ 31 (64,5%) 10 (58,8%)
ТТ 3 (6,3%) 1 (5,9%)
С 59 (61,5%) 22 (64,7%) Х2=0,02, р=0,897
Т 37 (38,5%) 12 (35,3%)
Таблица 3
Распределение частот аллелей полиморфного локуса С-262Т гена каталазы у больных ХОБЛ с разной стадией заболевания (абс/частота)
Генотип/ аллель Практически здоровые (n=30) Больные ХОБЛ II стадии (n=25) Больные ХОБЛ III стадии (n=37) Больные ХОБЛ IV стадии (n=28) Достоверность
1 2 3 4
СС 9 (30,0%) 2 (8%) 14 (37,8%) 8 (28,6%) Р1_2=0,127 (Х2=4,1)
СТ 21 (70,0%) 23 (92%) 21 (56,8%) 17 (60,7%) Р1_3=0,304 (Х2=2,4), Рм=0,181 (Х2=3,4)
ТТ - - 2 (5,4%) 3 (10,7%) Р2_3=0,011 (Х2=9,1), Р2_4=0,025 (Х2=7,4) Р3_4=0,597 (Х2=1,0)
С 39 (65%) 27 (54%) 49 (66,2%) 33 (58,9%) Р1-2=0,329 (Х2=0,95)
Р1_3=0,972 (Х2=0,1)
Рм=0,630 (Х2=0,2)
Т 21 (35%) 23 (46%) 25 (33,8%) 23 (41,1%) Р2_3=0,237 (Х2=1,4) Р2_4=0,753 (Х2=0,1) Р3_4=0,503 (х2=0,5)
С-262Т гена каталазы (табл. 3). Так, обнаружены статистически значимые различия в распределении частоты генотипов по полиморфизму С-262Т гена каталазы у больных ХОБЛ со 2-й и 3-й стадиями (х2=9,1, df=2, р=0,011) и со 2-й и 4-й стадиями (х2=7,4, df=2, р=0,025). Только у больных с 3-й (5,4%) и 4-й (10,7%) стадиями ХОБЛ выявлялся генотип ТТ. Показатель отношения шансов, определяющий риск развития тяжелой и крайне тяжелой стадии ХОБЛ, у носителей генотипа СС составил 5,9 (доверительный интервал 1,3-26,1, р=0,026). Отмечены достоверно более низкие показатели ОФВ1 у больных ХОБЛ - носителей генотипа СС по сравнению с больными - носителями генотипа СТ (34,8±12,3% против 44,8±16,3%, р=0,027).
Данные проведенного исследования свидетельствуют об отсутствии ассоциации полиморфного локуса С-262Т гена каталазы с риском развития хронической обструктивной болезни легких у жителей Астраханской области. Вместе с тем выявленные взаимосвязи полиморфизма С-262Т гена каталазы с особенностями клинических проявлений ХОБЛ могут являться дополнительным критерием при прогнозировании формирования ее тяжелого и крайне тяжелого течения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Синопальников А. И., Воробьев А. В. Эпидемиология ХОБЛ: современное состояние актуальной проблемы // Пульмонология. - 2007. - № 6. - С. 78-86.
2. Соодаева С. К. Окислительный стресс и антиоксидантная терапия при заболеваниях органов дыхания // Пульмонология. -2006. - № 5. - С. 122-126.
3. Татарский А. Р., Бабак С. Л., Кирюхин А. В., Баскаков А. В. Хроническая обструктивная болезнь легких // CONSILIUM MEDICUM. - 2004. - Т. 6. № 4.
4. Чучалин А. Г. Система «оксиданты и антиоксиданты» и пути коррекции // Пульмонология. -2004. - № 4. - С. 111-115.
5. Nadif R., Mintz M., Jedlicka A., Bertrand J., Kleeberger S., Kauffmann F. Association of САТ polymorphisms with catalase activity and exposure to environmental oxidative stimuli// Free radic. res. -2005. - Vol. 39. № 12. - Р. 1345-1350.
6. Repine J. E. Oxidant - antioxidant imbalances. In: COPEt diagnosis and treatment. Eds. C. L. A. van Herwaarden., et al. // Exceipta medica. - 1996. - Р. 40-44.
7. Repine J. E., Bast A., Lankhorst I. Oxidative stress in chronic obstructive pulmonary disease // Am. j. respir. crit. care med. -1997. - V. 156. - Р. 341-357.
Поступила 18.04.2013
