CC BY
24
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 8 (17), 2015 | МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
65
3. Група постнатальной профилактики АтД (LGG у детей) показала себя как менее эффективная статистическая модель. Однако, АтД в данной группе регистрировался реже - 44,11% против 57, 14% в контрольной группе.
Список литературы
1. Камашева Г.Р. Атопический дерматит у детей раннего возраста: особенности диагностики и лечения / Г. Р. Камашева.//Российский аллергологический журнал. - 2008. - №1. - С.126-127.
2. Лютина Е.И. К вопросу об эпидемиологии аллергических заболеваний/ Е. И. Лютина, Ф.К. Манеров// Аллергология.- 2004.- №4,- С. 55-57.
3. Лян Н. А. К вопросу о применении антигистамин-ных препаратов при бронхиальной астме у детей, имеющих сочетанную аллергическую патологию/ Н.А. Лян, Ю. С. Смолкин//Аллергология и иммунология в педиатрии.- 2007.- №1 (Ю), август.- С. 2932
4. Молчанов Г.М. Сенсибилизация беременных фактор риска невынашивания/ Г.М. Молчанов, А.В.
Петухова, Н.М. Пирожникова, М.М. Падруль// Материалы юбилейной научной сессии 2006 г.- Том 2.-Клинические науки.- Пермь, 2006.- С. 123-125.
5. Садикова Т. Е., Балаболкин И. И. Клинико-патогенетические варианты атопического дерматита у детей// Российский педиатрический журнал, 2011.-N
6.-С.18-23.
6. Johansson SGO, Bieber T, Dahl R, et al. Revised nomenclature for allergy for global use: Report of the Nomenclature Review Committee of the World Allergy Organization, October 2003. J Allergy Clin. Immunol. 2004;113:832-6.
7. Jones A. IFN-y and proliferative responses from fetal leukocytes during 2nd and 3 rd trimesters of pregnancy/ A. Jones, E. Miles, J. Warner I.// J. Allergy Clin. Immunol.- 1995.- Vol. 95.- P. 380.
8. Williams H. C. et al. Worldwide variations in the prevalence of symptoms of atopic eczema in the International Study of Asthma and Allergies in Childhood//J. Allergy. Clin. Immunol. 1999; 103: 125138.
РОЛЬ МАГНИЯ В МЕХАНИЗМАХ ХРОНИЗАЦИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО
ВОСПАЛЕНИЯ ЭНДОМЕТРИЯ У КРЫС
Тихаева Ксения Юрьевна
Соискатель кафедры патологической физиологии, Волгоградского Государственного Медицинского Университета
АННОТАЦИЯ
в статье представлены данные о корреляции содержания магния в крови и интенсивностью пероксидации и активностью фермента антиоксидантной защиты у животных на фоне хронического экспериментального воспаления эндометрия.
Ключевые слова: хронический эндометрит, магний, пероксидация.
ABSTRACT
the article presents data about the correlation of the content of magnesium in the blood and the intensity of peroxidation and activity of antioxidant enzymes in animals on the background of chronic experimental inflammation of the endometrium.
Keywords: chronic endometritis, magnesium, peroxidation
Хронический эндометрит (ХЭ) — клинико-морфологический синдром, характеризующийся комплексом морфофункциональных изменений эндометрия воспалительного генеза, приводящих к нарушению нормальной циклической трансформации и рецептивности тка-ни[8,14]. В зоне повреждения эндометрия компелируются процессы деструкции и репарации. Значимая роль в балансе между деструкцией и репарацией отводится макроэлементам и в первую очередь ионам магния [7,13].
Ион Mg2+ образует прочные связи и является активным катализатором ферментативных процессов.В организме человека существует не менее 500 магний-зави-симых белков. В частности, магний необходим для функционирования более 300 ферментов, в том числе ферментов энергетического метаболизма, включая ферменты синтеза АТФ[2,11]. Магний-содержащие ферменты и свободные ионы Mg2+, кроме поддержания разнообразных энергетических и пластических процессов, обеспечивают фазу покоя при проведении нервно-мышечных импульсов, участвуют в регулировании осмотического баланса, регулируют синтез ряда нейропептидов головного мозга и, в частности, синтез и деградацию катехоламинов и ацетилхолина. Стресс и обмен магния являются взаимозависимыми процессами: при достаточном снабжении клеток
магнием эффекты катехоламинов удаётся компенсировать, в результате чего повышается устойчивость к стрессу[1,2,3,9].
Разноплановый эффект воздействия Mg2+ на любую ткань заключается в том, что ионы Mg2+ необходимы для стабилизации некодирующих РНК. В частности, ион Mg2+ стабилизирует структуру транспортной РНК (тРНК), а дефицит Mg2+ приводит к увеличению числа дисфункциональных молекул тРНК, снижая и замедляя общую скорость белкового синтеза. Содержание Mg2+ непосредственно влияет на активность таких ферментов, как металлопротеиназы, гиалуронидаза, гиалуронсинте-таза, лизилоксидаза, трансглутаминаза, которые, в свою очередь, регулируют скорость синтеза различных белков. Содержание магния непосредственно влияет на баланс между агрессивными и защитными факторами тканей организма и универсальный механизм повреждения тканей - пероксидацию. [2,6,11,15]
Цель исследования: оценить роль магния, как одного из факторов хронизации экспериментального воспаления эндометрия у крыс.
Материалы и методы
Эксперименты были выполнены на 40 половозрелых самках белых крысах линии Вистар массой 198±3,8 г. Животные содержались в обычных условиях вивария на
66
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 8 (17), 2015 | МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
стандартной диете. Все эксперименты проводились в утренние часы натощак под наркозом Рометар (2-3 мг на 1 кг массы животного) с соблюдением стандартов.
Животные перед экспериментом были поделены на 3 группы. В 1 группе ( n=10) определяли изучаемые параметры в исходном состоянии, во второй-контрольная серия (n=10), выполняли те же манипуляции, что и в основной (третьей группе), но не моделировали хроническое воспаление эндометрия, в третьей (n=20) моделировали хроническое воспаление эндометрия. Экспериментальное хроническое воспаление эндометрия моделировали по оригинальной методике, путем введения в полость матки аутокаловой взвеси в объеме 0,1 мл.(Тихаева К.Ю., Рогова Л.Н., Ткаченко Л.В. 2015г.) С третьего дня после операции животным 2, 3 и 4 групп проводили антибактериальную терапию препаратом Цефтриаксон в соответствии с весом животного в течение 7 дней.
На 51 сутки проводили выведение животных из эксперимента, путем введения летальной дозы Рометара. Осуществляли забор 2 мл крови из подключичной и нижней полой вен, в и забор биологического материала для гистологического исследования (матку). Полученный препарат из ткани фиксировали в нейтральном забуферен-ном формалине и после обезвоживания в серии спиртов возрастающей концентрации заливали парафином по общепринятой методике. Гистологические методы включали окраску гематоксилин-эозином.
Диеновые коньюгаты (ДК) определяли спектрофотометрическим методом, малоновый диальдегид (МДА) -по реакции с тиобарбитуровой кислотой, активность каталазы (КА) - по методу Королюк М.А. (1988).
Концентрацию магния в эритроцитах определяли по реакции с титановым жёлтым. Для определения концентрации магния плазмы использовали диагностический набор фирмы «Лахема» (Чехия).
Гистологическая верификация диагноза проводилась на основании обнаружения типичной картины хронического эндометрита: лимфоплазмоцитарные инфильтраты, очаги фиброза в строме и в стенках спиральных артерий, преимущественно в базальном слое эндометрия^]. Для оценки морфологической картины ткани эндометрия применяли полуколичественный метод оценки степени выраженности лимфоцитарной, плазмацитарной инфильтрации стромы эндометрия в биопсийном материале, разработанный Э. А. Казачковой [5]. Для статистической обработки результатов исследования использовали критерий Стьюдента (средние величины выражали как М±т) при нормальном распределении величин. При распределении, отличном от нормального, использовали критерий Манна-Уитни (средние величины выражали как Ме [25 и 75 перцентиль]). Проводили корреляционный анализ по Спирмену.
Полученные результаты и их обсуждение.
Табл.1
Содержание магния в эритроцитарной массе у крыс на фоне хронического воспаления эндометрия (ммоль\л)
Кровеносный сосуд Группа 1 Группа 2 Р Группа 3 Р 1
НПВ (эр.масса) 1,91±0.07 1,871±0.09 >0,1 1,63±0,06 <0,01
ПК (эр.масса) 1,78±0.12 1,73±0.12 >0,1 1,49±0,06 <0,05
Р - достоверность различий между исходным состоянием и контролем Р 1 -достоверность различий в сравнении с контролем
сдвиге баланса в сторону пролиферации значимая роль отводится магнию. При усилении регенеративных процессов формируются временные TRAMP 6,7 каналы, по которым в клетку поступают, в первую очередь Mg, Ca, активизирующие ферменты энергообразования и энергопотребления, синтез белков и других биологически активных молекул. Снижение уровня магния в эритроцитарной массе крови из разных коллекторов, очевидно приводит к уменьшению скорости регенерации и усилению деструктивных процессов. Обращает на себя внимание, более интенсивное снижение содержания магния, на фоне хронического воспаления эндометрия в крови из нижней полой вены- коллектора, собирающего кровь из зоны повреждения. Такое снижение является, очевидно, следствием перераспределительного процесса и усиления его потерь с мочой. В такой ситуации оправданным является предположить усиление деструктивного процесса.
Табл.2
Содержание ДК, МДА, активность КА в эритроцитах крови из нижней полой вены у крыс с экспериментальным ___________________хроническим воспалением эндометрия до и после применения МСК._______________
Показатели пероксидации и антиоксидантной защиты Группа 1 Группа 2 Группа 3 Р Р 1
ДК едА/мл 0,029±0.0012 0.029±0,008 0,049±0,009 >0,1 <0,01
МДА, мкмоль/л 4.22±0,36 4,86±0,29 6,09±0,64 >0,1 <0,01
КА, мкатал/л 60.98±1.5 61,68±2.5 60,6±2,7 >0,1 >0,1
Р - достоверность различий между исходным состоянием и контролем;
Р 1 -достоверность различий между группой с экспериментальным хроническим воспалением эндометрия и контролем;
Содержания магния в эритроцитарной массе крови, полученной из нижней полой и подключичной вен, у крыс групп контроля и в исходном состоянии значимо не отличалось и составляло: 1,91±0.26 ммоль\л в исходном состоянии и 1,871±0.21 в контрольной группе (р>0,1) Значимых различий в содержании магния в эритроцитарной массе в крови из подключичной вены так же не обнаружено: в исходном состоянии 1,78±0.52 ммоль\л в группе контроля 1,73±0.31 (р>0,1). На фоне хронического экспериментального хронического воспаления эндометрия в крови из нижней полой и подключичной вен отмечалось снижение уровня магния на 18%, (p< 0,01) и 14% (p< 0,01)соответ-ственно.
Известно, что воспаление, сопровождается изменением интенсивности деструкции м пролиферации в разных тканях. Нами установлено, что в зоне воспаления, выявляются деструктивно-пролиферативные процессы. В
Как видно из табл. 2, содержание ДК в эритроци- серии и у крыс в исходном состоянии практически не от-тарной массе из нижней полой вены у крыс контрольной личается: 0.029±0,008 едА/мл у животных группы контроля и 0,029±0.012 едА/мл в исходном состоянии (Р>0,1).
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 8 (17), 2015 | МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
67
Не выявлено, так же, различий между показателями МДА и активностью каталазы в вышеуказанных группах. Содержание МДА 4,86±0,29 мкмоль/л в контрольной группе 4.22±0,36 мкмоль/л в исходном состоянии, (Р>0,1), активность каталазы 61,68±2.5 мкатал/л у крыс в контрольной группе и 60.98±1.5 мкатал/л у крыс в исходном состоянии (Р>0,1). На фоне хронического воспаления эндометрия на сроке 51 сутки увеличилось содержание ДК по отношению к контролю с 0.029±0,008 едА/мл в контрольной группе до 0,049±0,009 едА/мл у крыс с эндометритом (Р<0,01). Содержание МДА увеличилось с 4,86±0,29 мкмоль/л до 6,09±0,64 мкмоль/л соответственно, (Р<0,001). При этом активность каталазы оставалась практически без изменений 61,68±2.5 мкатал/л в контрольной группе и 60,6±2,7 мкатал/л в группе с эндометритом, (Р>0,1).
Эти данные показывают, что система «перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» в крови у животных с экспериментальным хроническим воспалением эндометрия отличается, значительной интенсификацией процесса перекисного окисления липидов, при отсутствии ожидаемого увеличения активности антиоксидантных ферментов, которое в данной ситуации могло быть оценено, как защитно-приспособительная реакция. Снижение уровня магния, нарастание интенсивности пероксидации без адекватного увеличения активности фермента антиоксидантной защиты должно сдвигать баланс в очаге поражения в сторону деструктивного процесса. Для подтверждения этого положения было проведено морфологическое исследования тканей матки
Табл.3
Экспериментальная группа нейтрофил макрофаг лимфоцит плазмоцит эозинофил
Группа 1 1[0;1] 1[0;1] 1[1;1] 0[0;0] 1[1;2]
Группа 2 1 [1;2] 1[0;1] 1[0,25;1] 0[0;0] 1[1;0]
Группа 3 1 [0;1] 1,5[1,5;2] 2,5[1,5;3] 2[1;3] 1,5[1,5;2]
Q >0,1 >0,1 >0,1 >0,1 >0,1
Q 1 >0,1 <0,05 <0,01 <0,001 <0,01
Q - достоверность различий между исходным состоянием и контролем Q1 -достоверность различий в сравнении с контролем
Как видно из таблицы 1, статистически достоверных различий в показателях клеточной инфильтрации эндометрия между первой и второй группами не выявлено: число нейтрофилов, макрофагов, лимфоцитов, плазмоци-тов и эозинофилов в исходном состоянии: 1[0;1] 1; 1[0;1]; 1[1;1]; 1[0;1]; 0[0;0]; 1[1;2], в контроле: 1 [1;2], (р>0,1); 1[0;1], (р>0,1); 1[0,25;1], (р>0,1); 0[0;0], (р>0,1); 1[1;0], (р>0,1) соответственно.
В третьей группе в гистологическом материале обнаружены: воспалительные инфильтраты из лимфоидных элементов, в меньшей степени из лейкоцитов, расположенных чаще вокруг желез и кровеносных сосудов, реже диффузно, плазматические клетки, единичные макрофаги, слабовыраженный фиброз стромы, незначительный склероз стенок артерий эндометрия. Показатели клеточной инфильтрации в баллах в третьей группе составили: нейтрофилов 1 [0;1], (р>0,1), макрофагов 1,5[1,5;2], (р<0,05), лимфоцитов 2,5[1,5;3], (р<0,01), плазмоцитов 2[1;3], (р<0,001), эозинофиллов 1,5[1,5;2], (р<0,01). В пользу усиления воспалительно-деструктивных процессов свидетельствуют увеличение макрофагально-лимфоцитарной и плазмоцитарно - клеточной инфильтрации тканей эндометрия. Проведенное исследование показало, что у животных с экспериментальным хроническим эндометритом, существует положительная корреляционная связь между уровнем магния в нижней полой вене и уровнем каталазы в крови из нижней полой вены; отрицательная корреляционная связь между уровнем магния в нижней полой вене и содержанием МДА в эритроцитарной массе из нижней полой вены. Между уровнем магния и каталазой в нижней полой вене (г - 0.4), между уровнем магния и МДА в эритроцитарной массе из НПВ (г - 0.7), между уровнем магния и ДК в эритроцитарной массе из НПВ (г - 0.6). Значимых корреляционных связей между содержанием магния в
эритроцитарной массе крови из подключичной вены и содержанием каталазы, МДА и ДК в эритроцитарной массе из нижней полой вены не обнаружено. Определение такой закономерности отражает регулирующую роль магния в региональных механизмах повреждения и защиты тканей.
Выводы: у экспериментальных животных с хроническим воспалением эндометрия уменьшается содержание магния в крови регионарной по отношению к патологически измененному органу и находится в отрицательной корреляционной связи с показателями пероксидации
Список литературы
1. Громова О.А. (2006). Магний и пиридоксин: основы знаний ПротоТип, 234 с.
2. Казачкова, Э.А. Патогенез, клинико-морфологическая характери- стика и лечение воспалительных заболеваний матки и придатков: дис. ... д-ра мед. наук / Э.А.Казачков. - Челябинск, 2000. - 303 с.
3. Особенности перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у женщин с хроническим эндометритом и репродуктивными нарушениями/ Л.И.Колесникова.[и др.] // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 9-5. - С. 829-832.
4. Рогова, Л.Н. Макро- и микроэлементы в патогенезе экспериментальных эрозивно-язвенных повреждений желудка и их коррекция: дис. ... д-ра мед. наук: 14.00.16/ JI.H. Рогова - Ростов на/Д, 2001. -271с.
5. Патогенетическое обоснование применения магнийсодержащей лекарственной композиции при лечении экспериментальной язвы желудка/ В.А.Ста-равойтов, Л.Н.Рогова, А.В.Смирнов // Вестник новых медицинских технологий. - T. XVI, №2-2009.-С. 202-204.
68
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 8 (17), 2015 | МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
6. Дисплазия соединительной ткани, магний и нуклеотидные полиморфизмы И.Ю.Трошин, О.А.Гро-мова // Кардиология. - 2008.- №10. - С.14-21.
7. Хронический эндометрит/ А.В.Кузнецова // Архив патологии.- 2000. №3. С 48-52.
8. Шестернина, Н.В. Влияние магнийсодержащей композиции на магниевый баланс, интенсивность пероксидации и активность антиоксидантных ферментов у крыс с ацетатной язвой желудка/ Л.Н. Ро-
гова, Н.В. Шестернина, В.А. Старавойтов // Вестник новых медицинских технологий. - 2011. -№2 С. 89-91
9. Шуршалина А.В. Хронический эндометрит у женщин с патологией репродуктивной функции. авто-реф. дис. ... д-ра мед. наук.- М, 2007.
10. Rubin,H. The logic of Membrane, Magnesium, Mitosis (MMM) model for the regulation of animal cell proliferation// Science.-2003.-V.261.-P.1280-1281
