CC BY
90
УДК 612.64:615.9
РЕАКТИВНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС И ИХ ПОТОМСТВА В АНТЕНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД ОНТОГЕНЕЗА НА ФОНЕ НАГРУЗКИ
ШРОТОМ СЕМЯН КУНЖУТА
*Павлова О.Н. - к.б.н., доцент;. Гарипов Т.В. - д.в.н., профессор, зав. кафедрой;
*Пинаева О.Н.
НОУ ВПО «Самарский медицинский институт «РЕАВИЗ» Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана
тел.: (843) 273-97-05
Ключевые слова: шрот семян кунжута, крысы, репродуктивная система, гибель зародышей доимплантационная, гибель зародышей постимплантационная, кранио-каудальные размеры, плодово-плацентарный индекс.
Key words: sesame seed meal, rats, reproductive system, pre-implantation embryonic death, fetal death postimplantation, cranio-caudal dimensions of fruit-placental index.
Состояние репродуктивной системы является прямым отражением особенностей поддержания динамического постоянства состава и свойств внутренней среды и устойчивости основных физиологических функций организма [6]. Исходя из этого нами изучено состояние репродуктивной системы крыс при нагрузке шротом семян кунжута. Кунжутный шрот обладает специфическим химическим составом. В нем содержатся насыщенные и полиненасыщенные жирные кислоты, триглицериды и глицериновые эфиры, витамины А, Вь Е, С, РР, влияющие на состав крови, скорость роста, состояние нервной и пищеварительной системы [1, 2, 3, 4].
Из минеральных компонентов шрот богат кальцием, фосфором, железом, калием, магнием, что делает его незаменимым для костей и суставов. В состав шрота семян кунжута также входит вещество фитин - способствующее восстановлению минерального баланса организма; пищевые волокна, лецитин и сезамин - антиоксидант, используемый для профилактики многих заболеваний, в том числе раковых и способствующий снижению уровня холестерина в крови. Аналогичную функцию снижения холестерина выполняет содержащийся в шроте Р-фитостерин. Благодаря наличию Р-фитостерина, снижается риск заболевания атеросклерозом, проявляется
противовоспалительное действие шрота [1, 2, 3, 4].
Кунжутный шрот в технологическом
плане отход пищевых производств, что делает его привлекательным в использовании, так как для терапевтического эффекта достаточно малых концентраций активных субстратов, что выгодно с экономической стороны [3].
Целью данной работы явилось изучение состояния репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период для выявления возможного биологического действия шрота семян кунжута.
Для реализации поставленной цели предстояло решить следующие задачи: в зависимости от длительности поступления шрота семян кунжута в организм крыс оценить эмбриональную (пред- и постимплантационную) гибель плодов; развитие, массу тела и кранио-каудальные размеры плодов, плодово-плацентарный индекс, а также состояние органов репродуктивной системы самцов и самок.
Материалы и методы. Исследование проводили на 80 самках и 32 самцах беспородных половозрелых крыс массой тела 190-210 г (табл. 1).
Суспензию шрота семян кунжута готовили на дистиллированной воде и вводили животным ежедневно в соответствии с групповой
принадлежностью и установленным сроком внутрижелудочно в дозе 10 мг/100 г веса тела, объемом 1 мл. Контрольным животным вводили дистиллированную воду объемом 1 мл. За животными вели ежедневное наблюдение.
Таблица 1 - Группы экспериментальных животных
Номер группы Материалы исследования
1 Самки и самцы получали суспензию шрота семян кунжута в течение 21 дня до оплодотворения.
2 Самки получали суспензию шрота семян кунжута в течение 21 дня до оплодотворения, самцы получали воду дистиллированную
3 Самцы получали суспензию шрота семян кунжута в течение 21 дня до спаривания с самками, самки получали воду дистиллированную.
4 Самки получали суспензию шрота семян кунжута 21 день до наступления беременности, а также с 1 по 13 сутки беременности
5 Самки получали суспензию шрота семян кунжута 21 день до наступления беременности, а также с 14 по 20 сутки беременности
6 Самки получали суспензию шрота семян кунжута с 1 по 13 сутки беременности
7 Самки получали суспензию шрота семян кунжута с 14 по 20 сутки беременности
8 Контрольная группа животных
9 Самцы получали суспензию шрота семян кунжута в течение 41 дня
Для получения самок с датированным сроком беременности использовали 4-4,5 месячных крыс-самок, к которым вечером подсаживали самцов (из расчета 1 самец на 2-3 самки), а утром брали влагалищные мазки. День обнаружения спермиев в мазке считали первым днем беременности. Беременных крыс содержали в отдельных клетках, обеспечив их необходимой подстилкой для устройства гнезда. У них учитывали общее состояние, поведение, регистрировали динамику изменения массы тела, продолжительность беременности, течение родов.
Учет результатов эксперимента проводили на 20-й день беременности. После эвтаназии крыс на вскрытии в яичниках подсчитывали количество желтых тел, в матке - места имплантации, число живых и погибших зародышей. Учитывали также состояние плаценты. Оценивали анатомическое строение плодов, определяли массу плодов и кранио-каудальные размеры [5].
Показателями негативного действия шрота семян кунжута считали эмбриональную (пред- и
постимплантационную) гибель плодов и отставание в развитии, проявляющееся уменьшением массы тела и кранио-каудальных размеров плодов.
Предимплантационную эмбриональную смертность рассчитывали по разнице между количеством желтых тел и количеством
мест имплантации в матке. Постимплантационную гибель определяли по разнице между числом имплантаций и числом живых плодов. Изучали также общую эмбриональную смертность, размер помета, выход живых плодов [5].
Цифровой материал подвергали статистической обработке с определением критерия Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0 [5] .
Результаты исследования. На протяжении всего периода беременности не было отмечено достоверных различий в динамике массы тела беременных самок во всех экспериментальных группах по сравнению с контролем.
Установлено, что среднее количество крысят в помете только в 7 экспериментальной группе соответствовало контролю, в остальных группах было достоверно больше: в 1 группе на 22,4 %, во 2 - на 26,2 %, в 3ей -на 18,7 %, в 4 - на 31,8 %, в 5 ой - на 24,3 % и в 6 ой - на 13,1%. Количество желтых тел из расчета на одну самку в 1, 2, 3, 6 и 7 экспериментальных группах было примерно на одном уровне и соответствовало контролю. При этом в 4 группе среднее количество желтых тел из расчета на одну самку было больше на 21,0 %, а в пятой группе - больше на 12,3 % относительно контроля. Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3 и 7 так же соответствовало контролю, а в группах 1, 2, 4, 5 и 6 было
больше на 19,82 %, 24,32 %, 41,44 %, 27,93 % и 12,62 % соответственно.
Доимплантационная гибель
зародышей во всех экспериментальных группах была достоверно ниже, чем в контроле на 18,5 (3-я группа) - 62,96% ( 4-ая группа). Постимплантационная гибель зародышей в 6 экспериментальной группе соответствовала контролю. В группах 1 и 3 она была ниже, чем в контроле на 50%, а во второй экспериментальной группе ниже на 25%. В экспериментальных группах 4, 5 и 7 постимплантационная гибель зародышей была выше, чем в контрольной группе на 300%, 125% и 75% соответственно.
Общая смертность зародышей во всех экспериментальных группах была достоверно ниже, чем контроле на 16,13 -54,84%.
Средняя масса плодов у 3, 6 и 7 групп почти не отличалась от контроля. В остальных группах масса плодов была достоверно выше, чем у животных контрольной группы на: в 1 группе - 18,3 %, во 2 группе - 15,3 %, в 4 группе - 17,5 %, а в 5 группе - 13,1 %. Кранио-каудальный размер плодов в группах 3, 6 и 7 соответствует контролю, а в группах 1,2, 4 и 5 достоверно больше на 15,6 %, 18,3 %, 19,8 % и 12, 6 % соответственно относительно контроля. При этом коэффициент массы/длинны плодов во всех группах был примерно одинаков и соответствовал контролю. Средняя масса плаценты в группах 2, 6 и 7 соответствовала контролю. В группах 1, 4 и 5 масса плаценты была больше, чем в контроле на 13,2 %, 28,9 % и 23,7 % соответственно, а в группе 3 она была меньше, чем в контроле на 10,5 %. Плодо-плацентарный индекс во всех экспериментальных группах, кроме 4 группы был примерно одинаков и соответствовал контролю. В 4 группе он на 11,1 % был выше, чем в контроле.
В группах 1, 2, 4 и 7 аномалий развития не наблюдается. В контрольной группе выявлено 3 плода с нарушениями внешнего развития (2,6 %), в третьей - 1 крысенок (0,8 %), в 5-ой - 2 плода (1,6 %), и
ЛИТЕРАТУРА: 1. Биктулов Л.Н.
в 6-ой - 2 крысенка (1,7 %). Результаты оценки состояния внутренних органов плодов показали, что аномалии в развитии наблюдались в контрольной группе у 7 крысят (6,1 %), во 2 и 5 группах по 1 крысенку (0,7 % и 0,8 %), в 3 группе у 2 крысят (1,6 %) и в 6 группе у 3 крысят (2,5 %). Задержка оссификации грудной кости наблюдалась у 1 крысенка (0,9 %) в 7 экспериментальной группе, подъязычной кости - у 2 крысят в контрольной (1,7 %), а также 3 и 6 группах (1,6 % и 1,7 % соответственно). Задержка оссификации костей пясти и плюсны зафиксирована у 1 крысенка во 2, 5 и 6 экспериментальных группах (0,7 %, 0,8 % и 0,8 % соответственно).
Результаты оценки репродуктивной системы свидетельствуют, что в сперме у самцов, получавших шрот семян кунжута, спермиев с патологией меньше на 16-19%%, чем в контроле.
У самок крыс, по сравнению с контролем, меньше на 20,6% количество атретических тел яичников, граафовых пузырьков больше на 18,5 %; фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток больше на 29,0 %. Однако фолликул с одним слоем гранулезных клеток меньше на 4,2 % по сравнению с контролем. Выводы:
- шрот семян кунжута обладает гонадотропным действием, проявляющимся у самцов в увеличении массового коэффициента семенников и предстательной железы; уменьшением патологических форм спермиев, а у самок уменьшением атретических тел яичников и увеличением зрелых фолликул;
- в зависимости от длительности поступления шрота в организм самок отмечено увеличение среднего количества крысят в помете и мест имплантации из расчета на самку;
- на фоне нагрузки шротом семян кунжута снижается общая смертность эмбрионов, увеличивается масса и кранио-каудальный размер плодов, также средняя масса плаценты; уменьшается вероятность кровоизлияния в мозговых оболочках плодов.
Исследование токсичности шрота кунжута для
получения биологически активной добавки к пище / Л.Н. Биктулов, Ю.Л. Герасимов, П.П. Пурыгин, С.В. Первушкин //Известия Самарского научного центра Российской академии наук, т.11, №1(5), 2009. 2. Куркин А.В. Флавоноиды как перспективный источник экопротекторов / А.В. Куркин // Экология и здоровье человека: труды XI Всероссийского конгресса на тему: «Проблемы выживания человека в техногенной среде современных городов» 5-7 декабря 2006.-
Самара, 2006.- С. 159-160. 3. Павлова О.Н. Оценка морфологического состава крови крыс на фоне нагрузки внутрижелудочно шротами семян винограда, граната и кунжута // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии: Выпуск №1/2012 - Самара, 2012. - С. 43-47. 4. Павлова О.Н. Гистоморфологическая характеристика ткани печени и морфологического состава крови крыс как реакции на шрот семян кунжута / О.Н. Павлова, Ю.В. Григорьева // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье: Выпуск № 2 (6)/2012 - Самара, 2012. - С. 65-73. 5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Р. У. Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - 832 с. 6. Каримова Р.Г., Гарипов Т.В. Формирование сенсорно-двигательных рефлексов белых крыс в ранний постнатальный период онтогенеза под влиянием фуроксанов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2004. - Т 179. - С. 177182.
РЕАКТИВНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС И ИХ ПОТОМСТВА В АНТЕНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД ОНТОГЕНЕЗА НА ФОНЕ НАГРУЗКИ ШРОТОМ СЕМЯН
КУНЖУТА
Павлова ОН., Гарипов ТВ., Пинаева О.Н.
Резюме
В статье рассмотрены реактивные изменения репродуктивной системы крыс на фоне нагрузки шротом семян кунжута. В эксперименте использованы 80 - самок и 32 - самца, массой 190-210 г, которые были разделены поровну на 8 групп и получали шрот семян кунжута в виде суспензии в дозе 10 мг/100 г веса тела, объемом 1 мл. Контрольным животным вводили дистиллированную воду объемом 1 мл. За животными вели ежедневное наблюдение. Оценивали эмбриональную (пред - и постимплантационную) смертность; у плодов - массу тела, кранио-каудальные размеры, а также состояние органов репродуктивной системы самцов и самок. Установлено, что нагрузка шротом семян кунжута оказывает гонадотропное действие, уменьшает число спермиев с патологией; у самок в уменьшении атретических тел яичников и увеличении зрелых фолликул. Выявлено увеличение среднего количества крысят в помете и мест имплантации из расчета на самку, снижение общей смертности эмбрионов, увеличение массы и кранио-каудальных размеров плодов, а также массы плаценты.
REACTIVE CHANGES IN REPRODUCTIVE SYSTEM OF RATS AND THEIR OFFSPRING antenatal ONTOGENESIS ON THE BACKGROUND OF LOAD SCHROTH SESAME SEEDS
Pavlova O.N., Garipov T.V., Pinaeva O.N.
Summary
The article describes the reactive changes of the reproductive system of rats against the background load Schroth sesame seeds. The experiment involved 80 - and 32 females - male one month of birth, weighing 190-210 g, were divided equally into 8 groups, affiliation prepared meal of sesame seeds in the form of a suspension at a dose of 10 mg / 100 g body weight, 1 ml. Meal suspension was prepared in distilled water. Control animals received distilled water 1 ml. The animals were monitored daily. Depending on the duration of receipt of sesame seed meal in the rats was assessed fetal (pre-and post-implantation) death of the fetuses; underdevelopment, manifested by a decrease in body weight and cranio-caudal size of fruit, as well as the state of the reproductive system of males and females. The experiment revealed that the additional workload Schroth sesame seeds has gonadotropic effect, which manifests itself in males increasing mass ratio of the testes and prostate cancer; reduction of pathological forms of sperm; females in reducing atretic bodies mature ovarian follicles increases. Depending on the duration of the meal proceeds to the body of females showed an increase in the average number of pups per litter and implantation sites based on a female, reduction in total mortality of embryos, weight and cranio-caudal size of fruit, as well as the mass of the placenta. Marked decrease in the likelihood of hemorrhage in the meninges of fruits and nonsignificant increase in the probability of local bleeding, possibly due to the increase of blood clotting.
