CC BY
100
УДК 615.273454.23.014.22.015.144
РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СУППОЗИТОРИЕВ, СОДЕРЖАЩИХ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВУЮ КИСЛОТУ И ДИПИРИДАМОЛ
Разработаны композитные суппозитории, содержащие кислоту ацетилсалициловую и дипиридамол, изучена их антиаг-регантная активность. В результате исследований было доказано, что ректальная форма композитных суппозиториев с ацетилсалициловой кислотой и дипиридамолом оказывает выраженное антиагрегантное действие по сравнению с лекарственными препаратами моносостава.
Ключевые слова: суппозитории, антиагрегантное действие, ацетилсалициловая кислота, дипиридамол.
В настоящее время инсульт - вторая после ишемической болезни сердца (ИБС) причина смертности в мире, поэтому одной из основных задач современной медицины является профилактика инсульта. Применяется достаточно много средств для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), терапии ИБС. Применение этих препаратов для многих пациентов становится пожизненным, поэтому к их эффективности и безопасности необходимо предъявлять самые высокие требования.
Накопленные к сегодняшнему дню результаты исследований позволили признать назначение антиагрегантов наиболее перспективным путем профилактики и терапии сердечно-сосудистых заболеваний.
Целями наших исследований стали: подбор оптимальной основы для суппозиториев с ацетилсалициловой кислотой (АСК) и дипиридамолом, технология и биофар-мацевтическое исследование.
При разработке суппозиториев одним из значимых фармацевтических факторов, оказывающим значительное влияние на высвобождение и всасывание вещества, является основа [3, 4].
При разработке суппозиториев с АСК и дипиридамолом к основе предъявляли такие требования, как отсутствие раздражающего действия и одновременно наличие достаточно высоких адгезивных свойств по отношению к слизистой оболочке кишечника, стабильность при хранении, совместимость с лекарственными веществами, а также способность легко их отдавать. В результате анализа литературы, для проведения эксперимента были использованы основы гидрофильного и липофильного характера [4, 5]. Среди гидрофильных суппозиторных основ в отечественной и зарубежной фармации широкое применение находят полиэтиленгликоли (ПЭГ). При разработке суппозиториев многими авторами чаще используются сплавы ПЭГ-400 и ПЭГ-1500 в соотношении 1:9 и 2:8. На основании этого и учитывая содержание лекарственных веществ, вводимых по типу суспензии, в эксперименте использовали сплав ПЭГ-400 и ПЭГ-1500 в соотношении 2:8.
Учитывая литературные данные, использовали традиционную дозировку дипи-ридамола. Как антиагрегант кислота ацетилсалициловая действует в диапазоне доз 30-325 мг, поэтому в эксперименте использовали дозу на человека 1 мг/кг и
0,5мг/ кт. Эффект дипиридамола, по данным литературы, достигается уже при дозировке 0,25 мг. Нами предварительно были проведены биофармацевтические исследования по выбору оптимальной основы для суппозиториев комбинированного состава, содержащих кислоту ацетилсалициловую и дипиридамол. Для этого мы использовали метод высвобождения в желатиновый гель с индикатором - раствором хлорида железа 1%.
После взаимного контакта действующих веществ с желатиновой массой наблюдали окрашенные зоны. Анализируя полученные данные, можно заключить, что оп-
Т.Н. Глижова Э.Ф. Степанова
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
e-mail: [email protected]
тимальные результаты в плане высвобождения обеспечивает основа ПЭГ 400 и ПЭГ 1500 в соотношении 2:8.
Выполнение биологических исследований на лабораторных животных проводилось с учетом Рекомендации по этике Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (2000) [6]. В этой связи, эксперимент обоснован и направлен на получение результатов, не достижимых другими методами; при проведении эксперимента были приняты меры, позволяющие избежать излишних физических страданий экспериментальных животных.
Для фармакологического исследования были разработаны эксперимеральные образцы суппозиториев с разной дозировкой АСК для определения оптимального соотношения с дипиридамолом. Изучаемые суппозитории применяли в экспериментальной дозировке с учетом коэффициента межвидового переноса доз. С учетом коэффициента межвидового переноса доз с организма человека на крыс (0,59) изготовили лабораторные образцы суппозиториев с эквивалентным содержанием компонентов в разных дозах. Суппозитории экспериментальным животным (крысы) вводили ректально в охлажденном виде ежедневно в течение 7 дней в одно и то же время. Диаметр лабораторных образцов суппозиториев составил 2,5-2,8 мм, длина 28-31 мм.
Наиболее эффективными оказалась суппозитории, содержащие небольшие дозы АСК. Комбинированные суппозитории с содержанием аспирина 0,89 и дипирида-мола 0,6 проявили наиболее благоприятный фармакологический эффект, интегрируя специфическое действие при минимизации отрицательного побочного воздействия.
Для идентификации АСК и дипиридамола, а также продуктов их деструкции был использован метод хроматографии в тонком слое сорбента. Был изучен ряд систем, содержащих полярные и неполярные растворители.
На хроматографическую пластинку «Сорбфил» наносили по 1 мкл 0,1% растворов АСК, кислоты салициловой (СК) - продукта её деструкции и 0,01% раствора дипи-ридамола в спирте этиловом 95%. Пятна высушивали на воздухе и хроматографировали восходящим способом. Хроматограмму высушивали и проявляли сначала в УФ-свете (254 нм). Дипиридамол обнаруживали по ярко-зеленой флуоресценции на фиолетовом фоне. Затем хроматограмму обрабатывали раствором хлорида железа (III) с последующим нагреванием в сушильном шкафу при температуре 105°С в течение 5 минут. АСК и СК обнаруживали по появлению фиолетовых пятен на желтом фоне. Значения Rf приведены в табл. 1.
Таблица 1
Выбор системы растворителей
Состав системы Кг
дипиридамол КАС КС
Хлороформ-ацетон-ледяная уксусная кислота (10:10:0,2) 0,35 0,51 0,21
Хлороформ-ацетон-ледяная уксусная кислота (19:0,2:0,8) 0 0,49 0,43
Хлороформ-ацетон (1:1) 0,24 0,19 0,15
Этанол-вода-25% раствор гидроксида аммония (25:0,3:0,25) 0,95 0 0,30
Хлороформ-этанол-ледяная уксусная кислота (19:2,5:2,5) 0,56 0,61 0,45
Хлороформ-этанол-ледяная уксусная кислота (95 : 1 :4) 0,84 0,87 0,80
Этанол 0,73 0,68 0,61
Хлороформ-ацетон-ледяная уксусная кислота 5:15:0,2) 0,66 0,70 0,68
Для определения предела обнаружения на хроматографическую пластинку наносили микрошприцем по 0,1; 0,2; 0,3; 1,0 мкл 0,1% растворов АСК и СК и такие же количества 0,01% раствора дипиридамола. Хроматографировали по описанной выше методике и проявляли. Установленные пределы обнаружения приведены в табл. 2.
Для изучения продуктов деструкции проведено термическое разложение лекарственных веществ. Индивидуальные лекарственные вещества и искусственную смесь, содержащую 0,070 г АСК и 0,025 г дипиридамола, помещали в бюксы и нагревали в сушильном шкафу при температуре 105°С. Отбор проб проводили через 1, 3, 6, 24, 36 и 48 часов. Отбирали по 0,01 г каждого лекарственного вещества из пробы, растворяли в
10 мл спирта этилового 95% и наносили по 1 мкл на хроматографическую пластинку. Параллельно наносили пятна свидетелей - такие же количества растворов стандартных образцов лекарственных веществ и искусственной смеси ингредиентов. Хроматограммы рассматривали в УФ-свете и после обработки раствором хлорида железа (III).
Таблица 2
Пределы обнаружения лекарственных веществ
Лекарственное вещество Предел обнаружения в мкг
Дипиридамол 0,1
АСК 10
СК 1
Установлено, что через 1 час термического разложения в АСК и в смеси ингредиентов были обнаружены пятна с Rf=0,2l, соответствующие кислоте салициловой.
Проведенные исследования продемонстрировали перспективность разработанной лекарственной формы для дальнейшего более подробного исследования в экспериментальной и клинической фармакологии, конечной целью которых является выпуск лекарственного препарата суппозиториев, содержащих ацетилсалициловую кислоту с дипиридамолом.
Литература
1. Барене, И.А. Разработка ректальной формы производного дигидронитидина сердечно-сосудистого действия / И.А. Барене, И.Н. Консантинова, В.Г. Микожан // Актуальные вопросы фармацевтической жизни и практики: Тез. докл. в 2 ч. - 4.1. - Курск, 1991. - С. 136-137.
2. Большаков, О.П. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных / О.П. Большаков, Н.Г. Незнанов, Р.В. Бабаханян // Качественная клиническая практика - 2002. - №1.
3. Головин, В.А. Лекарственные средства для ректального введения / В.А. Головин, Л.А. Пешехонтова, Е. Лукаш // Врачебное дело. - 1984. - № 11. - С. 7-11.
4. Гуревич, К.Г. Клиническое применение дипиридамола/ К.Г. Гуревич //Вопросы биологической медицины и фармации. - 2003. - № 3. - С.3-4.
5. Козлова, Н.Г. Некоторые особенности создания лекарственных свойств в форме суппозиториев / Н.Г. Козлова, Е.Е. Замараева, Л.И. Драник//Фармация. - 1992. - Т.41, № 6. -С.80-83.
6. Ушкалова, Е.А. Ацетилсалициловая кислота в первичной и вторичной профилактике инсульта / Е.А. Ушкалова // Фарматека. - 2007. - № 15. - С. 15-21.
THE DEVELOPMENT OF THE TECHNOLOGY AND BIOPHARMACEUTICAL STUDIES OF SUPPOSITORIES CONTAINING ACETYLSALICYLIC ACID AND DIPYRIDAMOLE
Composite suppositories containing acetylsalicylic acid and dipyridamole were developed, and their antiplatelet activity was studied. As a result of these studies it was shown that the rectal suppository forms of composite with acetylsalicylic acid and dipyridamole has a strong antiplatelet effect compared with monocomposition medicine agents.
Key words: suppositories, antiplatelet effect, aspirin,
dipyridamole.
T.N. Glizhova E.F. Stepanova
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
e-mail: [email protected]
