CC BY
26
Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014
УДК 547:589.4
РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНЫХ ПАРАМЕТРОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ 4-(ГЕТ)АРИЛ-2-ГИДРОКСИ-4-ОКСО-2-БУТЕНОВЫХ КИСЛОТ
В ТОНКОМ СЛОЕ СОРБЕНТА
Ф.В. Собин, Н.А. Пулина, Л.А. Чекрышкина, Е.А. Непогодина, А.С. Кузнецов,
В.Ю. Кожухарь, К.В. Липатников
Пермская государственная фармацевтическая академия, г. Пермь
E-mail: [email protected]
Произведен подбор оптимальных условий хроматографического контроля четырех классов потенциально биологически активных производных 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот.
Ключевые слова: 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновые кислоты,
тонкослойная хроматография.
DEVELOPMENT OF OPTIMAL PARAMETERS FOR NEW DERIVANTS DETERMINATION OF 4-(GET)ARYL-2-HYDROXY-4-OXO-2-BUTENIC ACIDS IN
THIN LAYER OF SORBENT
F.V. Sobin, N.A. Pulina, L.A. Chekryshkina, E.A. Nepogodina, A.S. Kuznetsov,
V. Yu. Kozhukhar, K. V. Lipatnikov
Perm State Pharmaceutical Academy, Perm
Е-mail: [email protected]
We have carried out a selection of optimal conditions for chromatographic control of four classes of potentially biologically active derivants of 4-(get)aril-2-hydroxy-4-oxo-2-butenic acids.
Keywords: 4-(get)aril-2-hydroxy-4-oxo-2-butenic acids, thin-layer chromatography.
Ранее нами целенаправленно были получены новые производные 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот в следующих рядах: N-замещенных 5-арил-3-имино-3Н-фуран-2-онов (I), 2-адамантаноил-метиленгидразино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот (II), 2-адамантаноилметиленгидразоно-5-арилфуран-3-онов (III), 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксобутеноатов гетариламмония (IV). Данные продукты синтеза обладают противовоспалительным, анальгетическим, гипогликемическим, антикоагулянтным, гемостатическим действием [1, 2, 3, 4, 5]. Представляло интерес более детально изучить наиболее активные соединения, в частности, провести исследование по подбору оптимальных условий их хроматографического контроля в тонком слое сорбента.
Чистоту полученных соединений подтверждали методом тонкослойной хроматографии. В процессе проведения испытания использовались пластинки марок «Silufol» УФ-254 и «Sorbfil» ПТСХ-П-А-УФ. Исследования проводили с применением 15 составов подвижных систем, описанных в литературе для анализа азотсодержащих соединений [6]. Количество наносимого вещества на линию старта составило 200 мкг. Детектирование зон проводили в видимой и УФ областях спектра и цветореагентами:
59
Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014
парами йода, реактивом Марки, раствором натрия гидроксида, железа (III) хлорида и меди (II) сульфата.
Исходя из химической структуры и физико-химических свойств соединений, были подобраны возможные составы элюентов. Для производных иминофуранонов I, адамантаноилметиленгидразинов II и адамантаноилметиленгидразонов III: бензол -спирт 96% (9:1), вода очищенная - спирт 96% - аммиака раствор 10% - хлороформ (30:10:5:1), вода очищенная - ацетон - спирт 96% - аммиака раствор 10% (30:1:10:5), спирт 96% - аммиака раствор 25% (8:2), ацетон - аммиака раствор 25% (95:5), хлороформ - спирт 96% - аммиака раствор 25% (9:1:1), толуол - ацетон - спирт 96% -аммиака раствор 25% (45:45:7,5:2,5), бензол - спирт 96% - аммиака раствор 25% (95:15:5), бензол - ацетон - эфир - аммиака раствор 25% (4:6:1:0,3), хлороформ - спирт 96% (8:2). Для бутеноатов гетериламмония (IV) - хлороформ - метанол (1:1), этанол - аммиак 25% (8:2), этилацетат - метанол - аммиак 25% (17:6:5), метанол - аммиак 25% (95:5), ИПС -вода - аммиак 25% (20:2:1), толуол - эфир - аммиак 25% (96:3:1).
По результатам исследования наиболее оптимальными для проведения тонкослойной хроматографии иминофуранонов I на пластинках марки «Silufol» УФ-254 являются подвижные фазы состава спирт 96% - аммиака раствор 25% (8:2) и толуол -ацетон - спирт 96% - аммиака раствор 25% (45:45:7,5:2,5); на пластинках марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А-УФ: толуол - ацетон - спирт 96% - аммиака раствор 25% (45:45:7,5:2,5) и хлороформ - спирт 96% (8:2). Для соединений II на пластинках марки «Silufol» УФ -254 выбраны подвижные фазы состава ацетон - аммиака раствор 25% (95:5), толуол - ацетон -спирт 96% - аммиака раствор 25% (45:45:7,5:2,5) и бензол - спирт 96% - аммиака раствор 25% (95:15:5); для гидразонопроизводных III: бензол - спирт 96% (9:1), хлороформ -спирт 96% - аммиака раствор 25% (9:1:1). На пластинках марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А-УФ оптимальное разделение анализируемых соединений и примесей наблюдалось при использовании подвижных фаз состава ацетон - аммиака раствор 25% (95:5), бензол -спирт 96% - аммиака раствор 25% (95:15:5), бензол - спирт 96% (9:1) для соединений II и бензол - спирт 96% (9:1), толуол - ацетон - спирт 96% - аммиака раствор 25% (45:45:7,5:2,5) для продуктов III. В качестве детектирующих агентов для соединений I-III предлагается использовать раствор меди (II) сульфата или натрия гидроксида, реактив Марки.
Для бутеноатов IV после проведенных опытов были выбраны две системы -хлороформ - метанол (1:1); спирт 96% - аммиака раствор 25% (8:2). При этом только на пластинках марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А-УФ удалось достигнуть полного разделения пятен целевых соединений и примесей. В качестве детектирующего агента выбран раствор железа (III) хлорида, а также УФ облучение, т.к. полупродукты синтеза (возможные примеси) обладают желто-зеленой флюоресценцией в данной области спектра.
Выводы
Осуществлен подбор оптимальных растворителей, систем элюентов, вариантов детекции на двух типах пластин для тонкослойной хроматографии («Sorbfil» ПТСХ-П-А-УФ и «Silufol» УФ-254) для четырех классов перспективных биологически активных соединений, что может быть использовано в процессе препаративного синтеза, а также для определения чистоты и доброкачественности потенциальных фармацевтических субстанций.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект № 14-03-96016р_урал_а).
Библиографический список
1. Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова и др. // Фармация. - 2009. - №7. - С. 36-38.
2. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: пер. с англ. -М.: Мир, 1981. - 2 т.
60
Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014
3. Синтез и биологическая активность солей гетероциклических аминов и гетериламидов на основе 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот / Н.А. Пулина, В.В. Залесов,
В.В. Юшков и др. // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. - 2008. - №2. - С. 37-40.
4. Синтез и антикоагулянтная активность производных а-оксокарбоновых кислот / Н.А. Пулина, Ф.В. Собин, Б.Я. Сыропятов и др. // Хим.-фармац. журн. - 2012. - Т. 46, № 12. -\С. 15-19.
5. Синтез и изучение биологической активности замещенных 2-метиленгидразоно-5-арил-2Н-фуран-3-онов и продуктов их гидролиза / Н.А. Пулина, А.С. Кузнецов, Т.Ф. Одегова и др. // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. - 2013. - №8. - С. 3-7.
6. Синтез и анальгетическая активность гетариламидов 4-арил-2-ариламино-4-оксо-2-бутеновых кислот / Н.А. Пулина, Ф.В. Собин, В.Ю. Кожухарь и др. // Хим.-фарм. журн. -2014. - Т. 48, № 1. - С. 14-17.
***
Собин Федор Владимирович - кандидат фармацевтических наук, ассистент кафедры фармацевтической технологии Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: синтез, свойства и биологическая активность соединений на основе химических превращений гетариламидов 4-ацил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот.Е-mail: [email protected].
Пулина Наталья Алексеевна - доктор фармацевтических наук, профессор, зав. кафедрой фармацевтической технологии Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: разработка, усовершенствование методов синтеза и поиск новых биологически активных веществ среди производных а-оксокарбоновых кислот, обладающих противовоспалительной, жаропонижающей, анальгетической, гипогликемической, антикоагулянтной и противомикробной активностью, с целью создания новых фармацевтических субстанций. E-mail: [email protected].
Чекрышкина Людмила Александровна - доктор фармацевтических наук, профессор, зав. кафедрой фармацевтической химии ФДПО и заочного факультета Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: стандартизация новых БАВ, разработка способов контроля их содержания в биологических жидкостях, способов утилизации фальсифицированных и забракованных лекарственных средств.
Непогодина Екатерина Александровна - кандидат фармацевтических наук, ассистент кафедры фармацевтической химии Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: изучение свойств и
стандартизация новых потенциальных лекарственных средств. E-mail: [email protected].
Кузнецов Александр Сергеевич - ассистент кафедры биологической химии Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: синтез и химические превращения 2(3)-адамантаноилметиленгидразонов пятичленных 2,3-диоксогетеро циклов. E-mail: [email protected].
Кожухарь Вячеслав Юрьевич - ассистент кафедры фармацевтической технологии Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: синтез, свойства и биологическая активность N-замещенных 5-арил-3-имино-3Н-фуран-2-онов. E-mail: [email protected].
Липатников Константин Викторович - аспирант Пермской государственной фармацевтической академии. Область научных интересов: синтез, биологические и технологические исследования производных 1,3,4-тиадиазола и бензо^]тиазола. E-mail: [email protected].
61
