CC BY
79
УДК 576.316.353.7:582.475
ПЫЛЬЦА ЕЛИ СИБИРСКОЙ, ПРОИЗРАСТАЮЩЕЙ В РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ
О.С. Владимирова, Е.Н. Муратова, М.И. Седаева
Институт леса им. В .Н.Сукачева СО РАН 660036 Красноярск, Академгородок, 50; е-шаП: [email protected]
В работе представлены результаты изучения пыльцы ели сибирской (Picea obovata Ledeb.), произрастающей в различных экологических условиях: на южной границе ареала (Республика Тыва), при антропогенной нагрузке (г. Красноярск), в условно контрольных насаждениях Погорельского бора (38 км от г. Красноярска). Изучены фертильность (жизнеспособность в течение семи суток) и морфологические характеристики пыльцы. Также уч и-тывалось разнообразие аномалий. Обсуждается возможность использования полученных данных как одного из критериев экологического мониторинга.
Ключевые слова: ель сибирская, морфология пыльцы, жизнеспособность пыльцы, стрессовые факторы
The results of Picea obovata Ledeb. pollens investigation are presented in this study. The investigation includes data from ecological conditions: south limit of the natural habitat (Tuva Republic), antropogenic pressure (Krasnoyarsk), co n-trol plantations (38 km from Krasnoyarsk) where there are more or less opt imal conditions. Pollen fertility (vital capacity during 7 days) and morphological characteristics were investigated. Also percent and diversity of pollen anomalies were taken into account. Possibility of obtained data using as one of criteria for ecologic al monitoring is discussed.
Key words: Siberian spruce, pollen morphology, p ollen fertility, stress factors
ВВЕДЕНИЕ
Показатели морфологии и качества пыльцы растений представляют значительный интерес для многих научных и практических направлений - систематики, филогении, палинологии, палеогеолог и-ческой датировки, генетико -селекционных исследований, лесоводства, семеноводства, пчеловодства и медицины (Козубов, 1974; Смирнов, 1977; Некр а-сова, 1983; Третьякова, Носкова, 2004; Бажина,
2005 и др.).
В последние годы особенно актуально провед е-ние комплекса мероприятий по биомониторингу и биоиндикации, поскольку загрязнение окружающей среды все в большей степени отражается на состо я-нии растительных сообществ. Одним из направлений биомониторинга является изучение действия поллютантов на генеративную систему растений, определяющую успешность их репродуктивной деятельности. Под воздействием таких воздушных поллютантов, как Б02, О2, Г и др., качество пыльцы изменяется у большинства растений, в том числе и хвойных. Жизнеспособность пыльцы в основном снижается под влиянием загрязнителей высокой концентрации и в зависимости от длительности воздействия. Отрицательное воздействие возду ш-ных поллютантов на качество пыльцы усиливается в период выпадения туманов и кислых дождей (Третьякова, 1990; Третьякова, Бажина, 1994; Осколков, 1998; Махнева, 2005; Носкова, 2005; Третьякова, Носкова, 2006; и др.).
Исследования Н.Е. Носковой (2005) показали, что параметры пыльцы сосны обыкновенной позв о-ляют судить об условиях произрастания конкрет-
*Работа поддержана РФФИ (грант 06 -04-81026) и РФФИ-Енисей (грант 07-04-96823)
ной особи. В оптимальных условиях произрастания существенных аномалий в развитии не наблюдае т-ся. К стрессовым автор относит в первую очередь погодно-климатический фактор, а во вторую - техногенез, поскольку полученные ею данные свид е-тельствуют о том, что неблагоприятные метеорол о-гические условия являются доминирующим факт ором и перекрывают влияние поллютантов на пр о-цессы развития пыльцы. Автор также отмечает, что наиболее высокую чувствительность к стрессу имеют хвойные растения и особенно ель.
В настоящей работе представлены результаты исследования пыльцы ели сибирской - Picea obovata Ledeb., произрастающей в различных экологических условиях. Объект исследования выбран не случайно. Ель сибирская является одним из лесооб-разователей темнохвойных лесов. Благодаря своей декоративности, этот вид широко используется в озеленении крупных промышленных це нтров, что позволяет проводить анализ его состояния как в городских условиях, так и в природных. Другими словами, ель сибирскую удобно использ овать в качестве объекта для биомониторинга.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Материалом для исследований послужила св е-жесобранная пыльца ели сибирской и ее декор а-тивных форм из трех мест произрастания:
1) ель сибирская, произрастающая в Республике Тыва, п. Хандагайте, граница с Монголией. Изучено 10 деревьев. Сбор производили 6-8 мая
2006 г.
2) декоративные формы ели сибирской из ден д-рария Института леса им. В.Н. Сукачева СО РАН -(Красноярск, Академгородок) форма длиннохвойная №5, 11, 12; плакучая №14, семинская №9, 10.
Сбор осуществляли 10-12 мая 2006 г.
3) Семинская форма ели сибирской №1 и №2 из дендрария «Погорельский бор». Сбор проводили 14 мая 2007 г.
Юг Республики Тыва характеризуется резко континентальным климатом. Зима холодная, безветренная, с преобладанием ясной и солнечной п о-годы. Средние температуры января - от -25 до -34оС, иногда температура опускается до - 55-58оС. Лето теплое, нередко даже жаркое. Июльские температуры - 19-20оС, временами жара достигает 35-40оС. Изученные популяции относятся к злак ово-разнотравным ельникам, произрастающим в усл о-виях с повышенным проточным увлажнением; оп и-саны в юго-западной части Южнотаннуольского округа горных степей и пристепных горных лесов на высоте 1239 м над уровнем моря. Округ захватывает южные макросклоны хребтов Запа дного и Восточного Тану-Ола с преобладанием горного сухостепного пояса (Типы лесов..., 1980).
Дендрарий Института леса им. В.Н. Сукачева СО РАН находится в Академгородке г. Красноярска. Он расположен на высокой террасе левого б е-рега Енисея. Климат южной части Средней С ибири, где расположен дендрарий, континентал ьный - с холодной зимой и коротким жарким летом. Самый холодный месяц - январь. Его средняя месячная температура - 17,1°С. Минимальная температура в отдельные годы снижается до -53°С. Самый теплый месяц - июль, средняя месячная температура +18,7°С. В районе жилая застройка и научноисследовательские учреждения в окружении березняков и сосновых культур (Лоскутов, 1991).
«Погорельский бор» находится в Красноярской лесостепи в бассейне р. Бузим на водоразделе двух ее притоков, в 38 км от г. Красноярска. Терр итория «Погорельского бора» относится к центральным районам Красноярского края. Произрастают сосняки, березняки, единично встречается ель, листве н-ница, во влажных понижениях - осина. Подлесок представлен шиповником, спиреей, боярышником, черемухой и др. (Носкова, 2005).
Жизнеспособность пыльцы определялась проращиванием на 15%-ном растворе сахарозы при
температуре 22°С посуточно в течение 7 дней. Проросшие пыльцевые зерна подсчитывались под микроскопом в 10 повторностях для каждого д ере-ва. Жизнеспособными считали пыльцевые зерна, образующие трубки длина которых превышала диаметра самого зерна. Длина пыльцевых трубок и размеры зерен измерялись с помощью окуляр-микрометра (увеличением 7x10). Пыльцу окрашивали ацетокармином (на 10 мл дистиллированной воды 2 г. кармина и 45% ледяной уксусной кисл о-ты) с нагреванием по методике З. П. Паушевой (1980). Пыльцевые зерна фотографились.
Пыльцу высевали сразу же после сбора. Посев осуществлялся следующим образом: в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу помещались предметные стекла, прокаленные над плам енем спиртовки, на них наносилась капля сахарозы. Пыльца бралась стерильным скальпелем и стряхивалась на стекло с высоты 10-15 см, этим достигалось равномерное распределение пыльцы. Стекла с посеянной пыльцой помещались во влажную камеру. Каждые сутки подсчитывал ось количество проросших пыльцевых зерен в каждой из 10 повторностей, также проводилось измерение трубок у 100 пыльцевых зерен каждой формы ели сибирской. С помощью окуляр-микрометра измерялась общая длина пыльцевого зерна, высота и ширина тела пыльцевого зерна, высота и ширина воздушных мешков, т. е. определяли морфометрические параметры пыльцы. Все образцы пыльцы обрабатыв а-лись по единому методу, предложенному М. Х. Моносзон-Смолиной (1949). Сравнение полученных данных проводилось при помощи критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Одна из важнейших характеристик пыльцы - ее жизнеспособность. Исследования показали, что пыльцевые трубки появляются уже в первые сутки эксперимента (табл. 1). На 3-5 часов раньше других прорастали пыльцевые зерна из «Погорельск ого бора». К исходу первых суток у них были самые длинные трубки - до 306 мкм.
Таблица 1 - Интенсивность прорастания пыльцы в начале эксперимента
Место сбора пыльцы Время появления первых пыльце-вых трубок от начала эксперимента, часы Длина пыльцевых трубок в конце первых суток эк с-перимента, мкм
ШІП тах среднее значение
Респ. Тыва, п. Хандагайте 14 105 504 282,6 ± 3,25
г. Красноярск, Академгородок 16 112 475 263,3 ± 2,80
«Погорельский бор» 11 112 553 305,8 ± 2,05
В первые сутки интенсивность прорастания пыльцы из «Погорельского бора» прев ышает два других показателя на 25-35%. Вся фертильная пыльца в этом образце проросла за первые сутки. Пыльца из Тывы прорастала равномерно, пик интенсивности пришелся на 2-3 сутки. За это время проросло чуть более половины пыльц евых зерен. Пыльца из Академгородка в течение первых трех суток имела самый низкий показатель, однако п осле четвертых суток прорастание превысило пока-
затель тувинской популяции на 4%. Подробная д и-намика прорастания изученной пыльцы предста в-лена в таблице 2. Следует отметить, что при изучении жизнеспособности пыльцы во всех трех случ а-ях были обнаружены аномалии в морфологии пыльцевых трубок. Встречались трубки, разветвленные в основании пыльцевого зерна, различные вздутия и изгибы по всей длине трубки. Такие ан о-малии отмечены у 0,7% проросших пыльцевых зерен из Тывы, у 4% - из Красноярска, у 1 ,5% - из
«Погорельского бора». Интересно, что ветвление трубок у сосны обыкновенной, как и в нашем сл у-чае с елью, чаще встречалось у деревьев именно из Академгородка (Носкова, 2005).
Результаты морфомерического анализа (табл. 3) показывает, что размеры пыльцевых зерен из т у-винской популяции меньше по сравнению с пыл ь-цой из двух других мест. Эти различия оказались статистически достоверными. Так, напр имер, длина пыльцевого зерна в тувинской пыл ьце в среднем на 5 мкм меньше, чем в красноярской и на 8 мкм меньше, чем в «погорельской». Различия между размерами пыльцы из Красноярска и «Погорельск ого бора» недостоверны.
Морфометрический анализ позволил выявить различные типы аномалий в строении пыльцевых зерен (табл. 4). Самый низкий уровень нарушений в морфологии пыльцы был отмечен у ели из «Пог о-рельского бора». Около 1% приходилось на мелкие пыльцевые зерна. Чуть больше 1% аномальных зерен пыльцы наблюдался в Академгородке. Здесь, наряду с мелкими, встречались пыльц евые зерна с неразвитым телом или воздушными мешками. С о-всем другая картина наблюдалась с обра зцами пыльцы из Тувы. Широкий спектр аномалий проявился в 1/3 части изученной пыльцы. Были обнаружены 6 типов аномалий, отличным и из которых являлись сросшиеся пылинки, пыльца с 3 -мя, 4-мя и воротничковыми воздушными мешками. Некот о-рые типы аномальных пыльцевых зерен предста в-лены на рисунке 1-4.
Рисунок 1 - Пыльцевое зерно с воздушным мешком воротничкового типа
Рисунок 2 - Сросшиеся пыльцевые зерна
Исследование показало, что пыльца ели сиби р-ской из Т увы отличается более мелкими размер ами
и высокой долей процентом аномалий в морфологии. Однако, ее жизнеспособность сравнительно высокая (более 57%), учитывая, что 30% составляют аномальные, в большинстве случаев стерил ь-ные, пыльцевые зерна.
Рисунок 3 - Пыльца с 4-мя воздушными мешками
Рисунок 4 - Мелкое стерильное пыльцевое зе рно
Пыльца из Красноярска начинала прорастать позднее других. До 4-х суток динамика ее прорастания была самая низкая. Кроме того, доля разветвленных трубок в этом случае была самый высокой. В целом, фертильными оказались более 60% пыл ь-цевых зерен, а аномальных пылинок было 1,4.
Пыльца из «Погорельского бора» прорастала уже через 11 часов после пос ева и интенсивность ее прорастания в первые сутки превысила 60%. Всего фертильных пыльцевых зерен оказалось более 70%. В этом случае зарегистрирован самый низкий пок а-затель аномалий и пыльцевых трубок, и пыльцевых зерен. Размеры пыльцы из «Погорельского бора» превышали размеры из других образцов.
Таким образом, можно сделать вывод о том, что пыльца действительно является чувствител ьным элементом растения и чутко реагирует на факторы среды, в связи с чем ее характеристики могут у спешно использоваться в экологическом мониторинге. Анализируя данные, полученные в настоящем исследовании, можно предположить, что условия произрастания ели сибирской на южной границе ареала являются неблагоприятными, что подтве р-ждает высокий процент и разнообразие морфолог и-ческих аномалий. Этим подтверждается известный факт, что в центре ареала - более оптимальные усло-
вия для вида, тогда как на окраинах - экстремальные. Само существование границы ареала означает, что вид в своей естественной экспансии «натолкну л-ся» в этом месте на «стенку» экологической ниши по тому или иному фактору среды (Геодакян, 1978). Сравнивая показатели тувинской пыльцы с красн о-
ярской, мы предполагаем, что, вероятно, климатич е-ский и географический факторы в данном случае оказывает более сильное влияние на генерати вную сферу растений, чем техногенный. Этот вывод с о-гласуется с результатами и выводами Н. Е. Носковой (2005) в ее исследованиях по сосне обыкновенной.
Таблица 2 - Динамика прорастания пыльцы ели сибирской из трех мест произрастания
Номер растения Число изученных пыльцевых зерен Количество проросших пыльцевых зерен, %
1-е сутки 2-е сутки 3-е сутки 4-е сутки 5-е сутки 6-е сутки 7-е сутки
Тувинская популяция, пос. Хандагайте
№22 1182 18,2±1,62 22,6±1,55 25,5±1,20 27,8±1,10 28,9±2,05 28,9±1,12 28,9±1,11
№26 702 40,9±2,05 64,0±2,06 65,8±1,95 67,0±1,54 68,2±1,65 68,5±1,60 68,5±1,52
№7 1208 38,0±1,18 52,1±1,00 52,8±2,25 54,1±2,07 54,5±1,82 54,5±2,08 54,5±2,10
№11 1116 50,3±1,90 63,1±1,17 65,5±1,11 67,0±1,60 67,7±1,03 67,7±2,27 67,7±2,30
№19 728 17,4±2,20 55,8±2,30 59,3±1,46 64,3±1,05 64,4±2,04 64,4±1,00 64,4±1,46
№21 1160 41,1±1,68 46,0±1,75 54,1±2,05 56,1±2,55 56,1±2,21 56,1±1,84 56,1±1,90
№32 701 27,8±1,54 42,5±1,25 49,5±1,35 50,6±1,05 50,6± 1,45 50,6±2,00 50,6±2,01
№36 805 37,8±2,02 51,7±0,95 56,4±2,06 57,0±1,25 57,0±1,84 57,0±2,80 57,0±2,75
№27 1332 38,0±2,30 49,3±1,69 55,4±1,51 55,5±2,22 55,5±1,20 55,5±1,34 55,5±1,16
№30 1005 38,9±1,9 65,9±2,05 69,1±2,30 69,1±1,00 69,1±2,22 69,1±2,50 69,1±2,30
Всего 9939 34,8 51,3 55,3 56,9 57,2 57,2 57,2
Насаждения в дендрарии Института леса, г. Красноярск
№5 1564 14,6±2,10 34,2±1,30 65,5±1,70 75,4±1,80 75,7±1,70 75,7±1,70 75,7±1,70
№9 1376 41,6±1,20 48,7±1,60 63,1±1,20 68,6±1,60 68,6±1,60 68,6±1,60 68,6±1,60
№10 2148 55,2±1,90 58,9±2,00 65,4±2,20 66,9±2,10 66,9±2,10 66,9±2,10 66,9±2,10
№11 1353 13,2±1,60 30,5±1,10 55,1±1,70 60,3±1,60 62,1±1,20 62,1±1,20 62,1±1,20
№12 1452 15,2±1,00 34,2±1,90 36,2±1,20 47,7±1,10 49,9±1,60 49,9±1,60 49,9±1,60
№14 1328 3,9±1,50 16,7±1,70 38,7±1,80 44,1±1,00 45,6±1,80 45,6±1,80 45,6±1,80
Всего 9221 24,0 37,2 54,0 60,5 61,5 61,5 61,5
Насаждения в ОЭП «Погорельский бор»
№1 1446 75,9±3,15 82,1±2,65 83,2±2,90 83,2± 2,75 83,2± 2,80 83,2± 2,45 83,2± 2,55
№2 398 44,5±1,27 51,3±1,11 63,7±1,45 63,7± 1,10 63,7± 1,44 63,7± 1,05 63,7± 1,00
Всего 1844 60,2 66,7 73,5 73,5 73,5 73,5 73,5
Таблица 3 - Морфометрические параметры пыльцевых зерен ели сибирской*
№ дерева Е А В С Э
Тыва, пос. Хандагайте
7 114,2±0,64 81,5±0,63 58,1±1,31 47,3±0,65 54,4±0,53
11 115,1 ±0,67 85,1 ±0,63 69,4±0,57 39,3±0,55 56,4±0,75
19 103,9±0,79 73,6±0,60 58,5±0,70 34,1±0,43 49,9±0,70
21 112,6±0,50 80,4±0,56 52,6±1,09 38,6±0,53 54,6±0,67
22 111,9±0,70 74,9±0,84 60,5±0,70 37,3±0,70 50,5±0,81
26 104,1 ±0,62 75,5±0,39 59,4±0,39 35,0±0,40 47,0±0,51
27 104,3±0,60 76,4±0,70 64,0±0,65 34,4±0,52 53,0±0,76
30 120,0±0,83 80,9±1,09 67,0±0,70 38,8±0,70 55,7±0,87
32 114,1 ±0,53 78,3±0,41 60,2±0,27 34,5±0,43 49,6±0,43
36 114,3±0,64 73,1 ±0,53 61,5±0,55 32,8±0,70 58,1 ±0,75
Дендрарий Института леса, г. Красноярск
5 114,9 ± 0,13 85,0 ± 0,51 70,7 ± 0,71 40,8 ± 0,82 52,8 ± 0,68
9 119,1± 0,60 89,1 ± 0,62 73,5 ± 0,43 45,1 ± 0,40 56,8 ± 0,44
10 116,1 ± 0,44 87,5 ± 0,52 72,5 ± 0,32 43,7 ± 0,62 55,7 ± 0,60
11 113,6 ± 0,11 85,6 ± 0,56 72,7 ± 0,84 41,9 ± 0,89 53,3 ± 0,72
12 115,9 ±0,55 86,0 ± 0,48 75,2 ± 0,76 42,7 ± 0,52 54,9 ± 0,43
14 118,1 ± 0,51 86,4 ± 0,52 71,9 ± 0,30 42,2 ± 0,47 54,6 ± 0,55
Дендрарий в ОЭП «Погорельский бор»
1 119,6 ± 0,89 87,9 ± 0,90 79,5 ± 0,96 42,3 ± 0,67 59,6 ± 0,91
2 119,5 ± 0,74 87,7 ± 0,56 80,0 ± 0,90 43,8 ± 0,61 62,0 ± 0,94
Примечание:* Для каждого дерева изучали по 100 пыльцевых зерен ; Е - средняя величина длины тела пыльцевого зерна с воздушными мешками, мкм; А - средняя величина длины тела пыльцевого зерна, мкм; В - средняя величина высоты тела пыльцевого зерна, мкм; С - средняя величина длины пыльцевого мешка, мкм; Э - средняя величина высоты пыльцевого мешка, мкм
Также следует учитывать, что в Тыве изучалась ноярске и в «Погорельском бору» декоративные
ель сибирская из природных популяций, а в Крас- формы. Этот факт может объяснять достоверные
различия в морфометрических параметрах тувинской пыльцы по отношению к красноярской и «п о-горельской». Имеются данные, что величина пыл ь-цы у одних и тех же видов хвойных может изменяться в зависимости от формовой принадлежности материнских деревьев и географического региона их произрастания (Козубов, 1974).
Авторы благодарят к.б.н. О. В. Дробушевскую за помощь в геоботаническом описании и сборе материала из Тывы. Также авторы выражают признательность д.б.н. И.Н. Третьяковой и к.б.н. Н.Е. Носковой за ценные советы и обсуждение работы.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
Бажина, Е.В. Жизнеспособность пыльцы и изменчивость признаков побегов Abies sibirica, пораженной ржавчинным раком (Melampsorella cerastii) / Е.В. Бажина // Ботан. журн. - 2005. - Т. 90. - № 5. - С. 696-702. Геодакян, В.А. Количество пыльцы как передатчик экологической информации и регулятор эволюционной пластичности растений / В.А. Геодакян // Журн. общ. биол. - 1978. - Т. XXXIX. - № 5. - С. 743-753. Козубов, Г.М. Биология плодоношения хвойных на Севере / Г.М. Козубов. - Л.: Наука. Ленингр. отд-ние, 1974.-134 с.
Лоскутов, Р.И. Интродукция декоративных древесных растений в южной части Средней Сибири / Р.И. Лоскутов. - Красноярск: ИЛиД СО АН СССР, 1991.- 189 с.
Махнева, С.Г. Состояние мужской генеративной системы сосны обыкновенной при техногенном загрязнении среды / С.Г. Махнева: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Екатеринбург, 2005. - 24 с. Моносзон-Смолина, М.Х. К вопросу о морфологии
пыльцы некоторых видов рода Pinus / М.Х. Моно-сзон-Смолина // Ботан. журн. - 1949. - Т. 34. - № 4. -С. 352-380.
Некрасова, Т.П. Пыльца и пыльцевой режим хвойных Сибири / Т.П. Некрасова. - Новосибирск: Наука, 1983.-169 с.
Носкова, Н.Е. Половая репродукция сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L) в условиях экологического стресса / Н.Е. Носкова: автореф. дис. ... канд. биол. наук. -Красноярск, 2005. -20 с.
Носкова, Н.Е. Влияние стресса на репродуктивные способности сосны обыкновенной / Н.Е. Носкова, И.Н. Третьякова // Хвойные бореальной зоны. - 2006. -Вып. 3.-С. 54-63.
Осколков, В.А. Состояние репродуктивного процесса сосны обыкновенной в условиях промышленного загрязнения лесов Верхнего Приангарья / В.А. Осколков: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Красноярск, 1998. - 23 с.
Паушева, З.П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева,. - М.: Колос, 1980. -304 с.
Смирнов, И.А. Жизнеспособность пыльцы некоторых видов хвойных интродуцентов / И.А. Смирнов // Бюл. ГБС АН СССР. - 1977. -№ 106. - С. 32-38.
Типы лесов гор Южной Сибири / В.Н. Смагин, Ильинская С.А. , Назимова Д.И., Новосельцева И. Ф., Череднико-ва Ю. С. - Новосибирск: Наука, 1980. - 336 с.
Третьякова И.Н. Эмбриолого-физиологические основы семеношения хвойных в Сибири / И.Н. Третьякова: автореф. дис. ... док. биол. наук. - Новосибирск, 1990.-32 с.
Третьякова, И.Н. Жизнеспособность пыльцы пихты сибирской в нарушенных лесных экосистемах гор Ю ж-ной Сибири / И.Н. Третьякова, Е.В. Бажина // Экология. - 1994. -№ 6.-С. 20-28.
Третьякова, И.Н. Пыльца сосны обыкновенной в условиях экологического стресса / И.Н. Третьякова, Н.Е. Носкова // Экология. - 2004. - № 1. - С. 26-33.
Поступила в редакцию 13 ноября 2007 г. Принята к печати 16 мая 2008 г.
