CC BY
43
УДК 616.316-002-07:616-008.8:616-006-091.818
ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЦИТОКИНЫ И МАТРИКСНЫЕ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ В СЛЮННОМ СЕКРЕТЕ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ СИАЛОДОХИТОМ
© А.С. Алейников, И.В. Гайдук, Л.Т. Лякина, А.М. Панин
Ключевые слова: слюнной секрет; протоковый сиаладенит; TNF-a; ИЛ-6; ММП-2; ММП-9.
Провели лечение 24 пациентов с обострением хронического сиалодохита. Острые воспалительные явления купировали при проведении стандартной комплексной терапии, после стихания обострения проводили забор слюнного секрета. Иммуноферментным методом исследовано содержание TNF-a, ИЛ-6, ММП-2, ММП-9 в слюнном секрете околоушной слюнной железы больных хроническим протоковым сиаладенитом. Обнаружено достоверное сочетанное увеличение уровней TNF-a и ИЛ-6 в слюнном секрете пациентов. Уровень ИЛ-6 достоверно взаимосвязан со стадией заболевания, клиническим характером воспалительного процесса.
Хронический сиаладенит - воспалительное заболевание слюнной железы. Этиология и патогенез заболевания до конца не изучены [1-2]. Клинические признаки хронического сиалодохита: незаметное начало (клиническая манифестация обычно после 40 лет), периодические обострения воспаления, длительное (десятилетиями) течение процесса [3].
В патогенетических механизмах сиаладенитов особое внимание исследователи уделяют изучению секреции различных молекулярно-биологических маркеров, которые сопровождают хронический воспалительный процесс, в частности, цитокинам - группе белков и пептидов, которые синтезируются и секретируются клетками иммунной системы и другими типами клеток. Важную роль играют такие цитокины, как фактор некроза опухолей-а (ЮТ-а) [4-6], ИЛ-1Р - медиатор острого и хронического воспаления [7] и ИЛ-8, основной функцией которого является обеспечение хемотаксиса в зону воспаления различных типов клеток: нейтрофи-лов, моноцитов, эозинофилов, Т-лимфоцитов. Известно, что ИЛ-8 обладает выраженными провоспалитель-ными свойствами, вызывает экспрессию молекул межклеточной адгезии и усиливает прилипание нейтрофи-лов. ИЛ-8 продуцируют макрофаги, лимфоциты, эпителиальные клетки и фибробласты [8]. Еще одним молекулярным фактором, который изучали при хронических сиаладенитах, является онкостатин М - цитокин плейотропного действия, который принадлежит к группе ИЛ-6 [9]. У больных хроническим сиаладенитом отмечен повышенный уровень онкостатина М в клетках эпителия протоков слюнной железы, а также в воспалительном инфильтрате. Выявлена гиперэкспрессия этого маркера при хроническом сиаладените, что позволяет предположить возможное вовлечение онко-статина М в патологический процесс при данном заболевании. Однако остается неизвестной роль онкостатина М в нормальной слюнной железе [10].
Секреция цитокинов при воспалении происходит последовательно: сначала интенсивно выделяется ЮТа, затем ИЛ-1, позже ИЛ-6 [11-12]. Повышение уровней ЮТ-а и ИЛ-6, одних из важнейших медиаторов острой фазы воспаления как реакции организма на
повреждение ткани, отмечается при многих травматических, хирургических, аутоиммунных заболеваниях.
Цель настоящего исследования - сравнительное изучение уровней TNF-a, ИЛ-6, ММП-2, ММП-9 в слюнном секрете околоушной слюнной железы больных хроническим протоковым сиаладенитом с учетом основных клинико-лабораторных показателей.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследование включены 24 пациента в возрасте от 26 до 67 лет (женщин - 20, мужчин - 4) с хроническим сиалодохитом и 20 практически здоровых людей соответствующего возраста.
У всех пациентов исследуемой группы в анамнезе выявлялось обострение хронического воспалительного процесса в виде одностороннего болезненного увеличения околоушной слюнной железы и выделением гноя из выводного протока. Острые воспалительные явления купировались при проведении стандартной комплексной терапии. После стихания воспалительных явлений проводили сиалометрию при помощи капсулы Лешли-Ющенко-Красногорского. Слюнной секрет собирали в градуированную пробирку, которую затем помещали в контейнер со льдом и в течение двух часов доставляли в лабораторию для биохимического исследования.
В лаборатории слюнной секрет разливали на алик-воты по 1 мл, замораживали и хранили при -70 °С до исследования. Определение концентрации TNF-a, ИЛ-6, ММП-2, ММП-9 в слюнном секрете проводили в лаборатории клинической биохимии ФГБНУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохи-на» методом ELISA наборами реактивов фирм «Invitro-gen» (США) и «R&D Systems» (США).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
В исследование включены пациенты, у которых на сиалограмме выявляли расширение протоковой системы различной степени выраженности, что указывало на наличие хронического сиаладенита. Стадии устанавли-
вали на основании классификации И.Ф. Ромачевой, В.В. Афанасьева, А.Н. Морозова: в начальной стадии расширение главного выводного протока составило 0,24 ± 0,07 см, в клинически выраженной стадии -0,34 ± 0,03 см и в поздней стадии - 0,55 ± 0,09 см.
Наиболее низкие значения сиалометрии наблюдали при начальной стадии хронического протокового сиа-ладенита. В группе больных преобладала 2 степень гипосаливации. В контрольной группе все показатели были в пределах нормы и в среднем составили 4 мл.
Содержания ИЛ-6, ММП-2 обнаружены во всех контрольных образцах секрета и не превышали 2,6 пг/мл, 0,7 нг/мл соответственно, Т№-а и ММП-9 были равны нулю, данные показатели мы принимали за норму.
Следует отметить, что наибольшая частота обнаружения высоких значений ТОТ-а - 0,54-1392 пг/мл (33 %), ИЛ-6 - 2,6-683,3 пг/мл (50 %), ММП-2 -
0.7.5,0 нг/мл (49 %), ММП-9 - 0-854 пг/мл (33 %) отмечена при наличии клинических признаков: периодического припухания околоушной слюнной железы, солоноватого привкуса, характер секрета - мутный с включениями.
В группе больных значения сиалометрии и содержание ТОТ-а, ИЛ-6 были связаны обратной достоверной корреляционной зависимостью. Меньшему объему секретируемой слюны соответствовали большие значения цитокинов.
Таким образом, почти в половине образцов слюны больных хроническим протоковым сиаладенитом уровни маркеров достоверно превышали таковые в контроле.
Представленные результаты исследования свидетельствуют о том, что секреция биохимических маркеров ИЛ-6, ЮТ-а и ММП-2 в слюнном секрете околоушной слюнной железы характеризует состояние пациента с хроническим протоковым сиаладенитом. Маркеры ИЛ-6, ТОТ-а, ММП-2 и ММП-9 обладают прогностической ценностью, что указывает на возможность использования этих факторов в клинической практике как дополнительных маркеров в мониторинге клинического течения заболевания.
ЛИТЕРАТУРА
1. Афанасьев В.В. Слюнные железы. Болезни и травмы. М.: ГЭО-
ТАР-Медиа, 2012. С. 103-163.
2. Ромачева И.Ф., Юдин Л.А., Морозов А.Н. Заболевания и повреждения слюнных желез. М.: Медицина, 1987. 240 с.
3. Панин А.М., Гайдук И.В. Хирургическая стоматология. Воспалительные и дистрофические заболевания слюнных желез. М.: Литература, 2011. С. 126-143.
4. Wang Y., Shnyra A., Africa C., Warholic C., McArthur C. Activation of the extrinsic apoptotic pathway by TNF-alpha in human salivary gland (HSG) cells in vitro, suggests a role for the TNF receptor (TNF-R) and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in Sjogren's syndrome-associated autoimmune sialadenitis // Arch. Oral. Biol. 2009. V. 54. № 11. P. 986-996.
5. Matsumura R., Umemiya K., Kagami M., Tomioka H., Tanabe E., Sugiyama T., Sueishi M., Kayagaki N., Yagita H., Okumura K. Expression of TNF-related apoptosis inducing ligand (TRAIL) on infiltrating cells and of TRAIL receptors on salivary glands in patients with Sjogren's syndrome // Clin. Exp. Rheumatol. 2002. V. 20. № 6. P. 791798.
6. Yamakawa M., Weinstein R., Tsuji T., McBride J., Wong D.T., Login G.R. Age-related alterations in IL-1beta, TNF-alpha, and IL-6 concentrations in parotid acinar cells from BALB/c and non-obese diabetic mice // J. Histochem. Cytochem. 2000. V. 48. № 8. P. 10331042.
7. Tsuneyama K., Saito K., Ruebner B.H., Konishi I., Nakanuma Y., Gershwin M.E. Immunological similarities between primary sclerosing cholangitis and chronic sclerosing sialadenitis: report of the overlapping of these two autoimmune diseases // Dig. Dis. Sci. 2000. V. 45. P. 366-372.
8. Baggiolini M., Clark-Lewis I. Interleukin-8, a chemotactic and inflammatory cytokine // FEBS Lett. 1992. V. 307. № 1. P. 97-101.
9. Tanaka M., Miyajima A. Oncostatin M, a multifunctional cytokine // Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. 2003. V. 149. P. 39-52.
10. Lee H.M., Cho J.G., Kang H.J., Chae S.W., Hwang S.J., Jung K.Y., Woo J.S. Expression of oncostatin M in chronic obstructive sialadenitis of the submandibular gland // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 2008. V. 117. № 5. P. 347-352.
11. Cauli A., Yanni G., Pitzalis C., Challacombe S., Panayi G.S. Cytokine and adhesion molecule expression in the minor salivary glands of patients with Sjogren's syndrome and chronic sialoadenitis // Ann. Rheum. Dis. 1995. V. 54. № 3. P. 209-215.
12. Wong D.T. Salivary Diagnostics. N. J.: Wiley-Blackwell, 2008. P. 167-174.
Поступила в редакцию 14 января 2015 г.
Aleinikov A.S., Gaiduk I.V., Lyakina L.T., Panin A.M. PROINFLAMMATORY CYTOKINES AND MATRIX ME-TALLOPROTEINASES IN THE SALIVA SECRETION OF PATIENTS WITH CHRONIC SIALODOXIT
24 patients with exacerbation of chronic ductal sialadenitis underwent standard anti-inflammatory complex therapy, and after abatement of acute inflammation salivary fluid was collected. TNF-a, IL-6, MMP-2, MMP-9 content in parotid gland salivary fluid was measured by ELISA techniques. Highly significant concordant increase of TNF-a and IL-6 levels was found in saliva. IL-6 level was significantly positively associated with disease stage and clinical character of inflammatory process.
Key words: saliva secretion; ductal sialadenitis; TNF-a; IL-6; MMP-2; MMP-9.
Алейников Александр Сергеевич, Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, г. Москва, Российская Федерация, аспирант, кафедра хирургии полости рта, e-mail: [email protected]
Aleinikov Aleksander Sergeyevich, Moscow State University of Medicine and Dentistry, Moscow, Russian Federation, Post-graduate Student, Surgery of Mouth Department, e-mail: [email protected]
Гайдук Игорь Викторович, Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, г. Москва, Российская Федерация, кандидат медицинских наук, доцент кафедры хирургии полости рта, e-mail: [email protected]
Gaiduk Igor Viktorovich, Moscow State University of Medicine and Dentistry, Moscow, Russian Federation, Candidate of Medicine, Associate Professor of Surgery of Mouth Department, e-mail: [email protected]
Лякина Любовь Тимофеевна, Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, г. Москва, Российская Федерация, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории клинической биохимии, e-mail: [email protected]
Lyakina Lubov Timofeevna, Russian Cancer Research Center named after N.N. Blokhin, Moscow, Russian Federation, Candidate of Biology, Senior Scientific Worker Laboratory of Clinical Biochemistry, e-mail: [email protected]
Панин Андрей Михайлович, Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, г. Москва, Российская Федерация, доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой хирургии полости рта, e-mail: [email protected]
Panin Andrey Mikhailovich, Moscow State University of Medicine and Dentistry, Moscow, Russian Federation, Doctor of Medicine, Professor, Head of Surgery of Mouth Department, e-mail: [email protected]
