CC BY
111
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОТИВОМЕТАСТАТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЫТЯЖЕК АКОНИТА СЕВЕРНОГО (ACONITUM SEPTENTRIONALE L.)
Т.Н. Поветьева1, Н.Н. Гайдамович2, В.Г. Пашинский1, А.А. Семенов1,
Ц. Жапова1, Ю.В. Нестерова1, В.Н. Жданов2
НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН1 Томский военно-медицинский институт2
На мышах линии C57BL6 с карциномой легких Льюис проведены экспериментальные исследования противометастати-ческих свойств растительных средств из надземной части (травы) и подземной части (корней) аконита северного - Aconitum septentrionale L. Обе вытяжки проявили высокую противометастатическую активность, сопоставимую с аналогичным действием растительного средства из аконита байкальского (АсошШт baicalense Turcz. ex Rapaics).
ANTIMETASTATIC EFFECT OF ACONITUM SEPTENTRIONALE L EXTRACTS
T.N. Povetjeva1, N.N. Gaidamovich2, V.G. Pashinskyi1, A.A. Semenov1,
Ts. Zhapova1, Yu.V. Nesterova1, V.N. Zhdanov2
Pharmacology Research Institute, Tomsk1 Military Medical Institute, Tomsk
The study of antimetastatic effect of Aconitum Septentrionale L extract (from leaves and roots) was carried out on C57BL6-line mice with Lewis’s lung carcinoma. The extract showed a high antimetastatic activity comparable with that observed from Aconitum baicalense Turcz.ex Rapaics.
В настоящее время не вызывает сомнений наличие противоопухолевых и противометастати-ческих свойств у растительных средств, полученных из надземной части (травы) аконита байкальского — АсошШш baicalense Тигсг. ex Rapaics (A.
Czekanovskyi Steinb.) [6, 9]. Нами получен патент № 2189832 на изобретение «Средство, обладающее противометастатической активностью», созданное на основе этого вида аконита [3]. Однако хорошо известно, что растение это эндемично и произрастает только на территории Восточной Сибири [7]. Более обширный ареал распространения у другого вида аконита — аконита северного (Aconitum septentrionale L.). Алкалоидный состав,
как качественный, так и количественный, этих двух видов совершенно различен [4]. Однако ранее нами было выявлено наличие противоопухолевой активности и у аконита северного, причем сопоставимы по этому виду активности были и корни, и трава растения [5]. Исходя из этого, нам представлялось важным исследовать и антимета-статические свойства аконита северного.
Материалы и методы
Объектом исследования явились водно— этанольные вытяжки из надземной части (травы) и подземной части (корней) аконита северного,
Т.Н. ПОВЕТЬЕВА, Н.Н. ГАЙДАМОВИЧ, В.Г. ПАШИНСКИЙ и др.
которые представляют комплекс действующих и сопутствующих веществ, извлекаемых из высушенных и измельченных травы или корней 25— 40% раствором этилового спирта при соотношении сырья и экстрагента 1:20. Сырье было собрано в окрестностях города Томска.
Эксперименты проведены на мышах линии С57ВЬб, разводки питомника НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН. Карциному легких Льюис индуцировали путем введения в мышцу бедра взвеси 1 млн опухолевых клеток в физиологическом растворе. Лечение животных начинали на 10-е сут, т.е. моделировали «запущенный процесс». Исследуемые средства вводили ежедневно, в дозе 0,5 мл/кг, в течение 10 дней. Контрольные животные получали вводно-этанольный раствор. Животных выводили из опыта на 24-е сут после трансплантации. Об интенсивности развития метастатического процесса судили по среднему количеству гематогенных субплев-ральных метастазов на одно животное в группе, частоте метастазирования опухоли, которую вычисляли в процентах числа животных с метастазами к общему числу животных в группе, индексу торможения метастазирования, который рассчитывали по формуле
Влиянне вытяжек из АсошГит Ьаісаіспве н Асопішт беріетгіопаїе на мстасгазирование карциномы легкою Льюис у мышсй-самцов линии С^ВЬв (х ±т)
Препарат Доза мл/кг Число живот- ЧМ ,% Размер метастазов Среднее число Торможение росга ме-тасшзов, % ИИМ ВСП
ных < 1 мм — 1 мм > 1 мм метастазов, І1ГГ.
Интактные животные - 5 0 0 0 0 0 - -
Контроль - 14 100 15,7+1,6** 6,6±1,5** 73±1,6** 29,6±4,0 0 0 42,9
А. байкаль-
ский (тра- 0,5 5 100 7,8±1,4* ** 4,4±0,8** 5,6±1,7** 17,8±3,1* ** 39,9 39,9 0*
ва)
А. северный (трава) 0,5 5 о о 12,4+2,7** 2,8±0,8* ** 2,6+0,9* ** 17,8+4,0* ** 39,У 39,9 20,0
А. северный (корень) 0,5 5 80* 7,4±2,8+ ** 3,0±0,3 ** 4,8±2,6* 15,2±5,7*+* 48,6 58,9 20,0
Пр имечание. * - различия схгшстически достоверны в сравнении с контролем (р<0,05); ** - различия статистически достоверны в сравнении с интакгными животными (ГЧ, Ри ^ 0,05); ЧМ — частота метастзирования; ИИМ — индекс ингибирования метастазирования; ВСП - высокая степень поражения легких.
(Ак х Вк) - (А х В)
ИИМ =-------------------------х 100%,
(Ак х Вк)
где Ак - частота метастазирования в контрольной группе; А — частота метастазирования в опытной группе; Вк — среднее число метастазов у животных контрольной группы; В — среднее число метастазов в опытной группе [1].
Подсчитывали процент мышей с высокой степенью поражения легких (ВСП) метастазами (более 30 шт.) [10].
Статистическую обработку полученных результатов проводили путем расчета средней (Х) и среднеквадратичной ошибки (т). О достоверности различий судили, используя параметрический (критерий Стьюдента), в случае распределения, близкого к нормальному, и непараметрический (критерий Вилкоксона—Манна—Уитни) методы. Для сравнения результатов экспериментов, где показатели выражались в долях, достоверность определяли с помощью метода углового преобразования Фишера [2]. Значимость различий считали достоверной при Р1:, Ри<0,05. Часть результатов обработана на компьютере с использованием пакета прикладных программ ЗТАТКТТСА 5,0 РОЯ ШЫБОШЗ.
Противометастатические свойства вытяжек аконита северного (Aconitum septentrionale L.)
Результаты исследования
Адекватной моделью для поиска антимета-статических средств является карцинома легкого Льюис [8]. Использование этой модели позволило нам зафиксировать 100% метастазирования у мышей контрольной группы (таблица). Курсовое введение растительных средств аконита северного существенно снизило как рост, так и диссеминацию опухоли. Под действием вытяжки из травы аконита северного (0,5 мл/кг) у мышей в 1,7 раза снижалось среднее число метастазов, т.е. на 39,9 % тормозился рост метастазов, в сравнении с животными контрольной группы. Противометастатический эффект, в первую очередь, осуществлялся за счет снижения количества крупных метастазов, их было меньше контрольных показателей в 2,8 раза, а число средних метастазов уменьшалось в 2,4 раза. В меньшей степени снизилось количество точечных деструкций — в 1,3 раза.
У животных, получавших вытяжку из корней аконита (0,5 мл/кг), индекс ингибирования мета-стазирования был выше, чем у мышей, получавших вытяжку из надземной части аконита северного. Это связано с тем, что у 20% животных этой группы метастазы вовсе отсутствовали. Среднее число вторичных деструкций снижалось в 1,9 раза, и в первую очередь за счет средних метастазов (снижалось их количество в 2,2 раза). При применении обоих растительных средств в 2,1 раза снижалось число животных с высокой степенью поражения легких метастазами. Сравнение противометастатической активности вытяжек из травы и корней аконита северного с вытяжкой из травы аконита байкальского (0,5 мл/кг) позволило нам заключить, что эффекты их сопоставимы. Необходимо отметить, что вытяжка из корней аконита северного оказалась способной снижать и частоту метастазирования. Однако под действием растительного средства из аконита байкальского в опытной группе не наблюдалось животных с высокой степенью поражения легких метастазами. Поздние сроки начала лечения не позволили выявить достоверного влияния растительных средств на первичный опухолевый узел ни в одной из опытных групп.
Таким образом, в эксперименте на животных выявлен существенный противометастатический эффект у вытяжек из надземной (травы) и подземной (корней) частей аконита северного. Настойка корней аконита снижала частоту и интенсивность метастазирования. Действие вытяжек из аконита северного сопоставимо с противомета-статическим эффектом растительного средства из аконита байкальского.
ЛИТЕРАТУРА
1. Архипов С.А., Юнкер В.М. Изменение интенсивности метастазирования в легкие перевиваемых опухолей мышей в зависимости от величины перевивочной дозы опухолевых клеток // Исследование по индукции и мета-стазированию опухолей у экспериментальных животных. Новосибирск, 1984. С. 14-32.
2. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. М.: Медицина, 1978. 293 с.
3. Патент РФ № 2189832. Средство, обладающее противометастатической активностью / Пашинский В.Г., Семенов А.А., Поветьева Т.Н., Погодаева Н.Н., Жапова Ц. Приоритет от 31.07.2001. от 27.09.2002.
4. Погодаева Н.Н., Жапова Ц., Верещагин А.Л. и др. Исследование сибирских аконитов как сырья для производства перспективного лекарственного средства Баякон // Физио-лого-биохимические аспекты изучения лекарственных растений: Тез. докл. Междунар. совещания, посвященного памяти В.Г. Минаевой. Новосибирск, 1998. С. 148-149.
5. Поветьева Т.Н., Лысенкова М.Г. Сравнение противоопухолевой активности препаратов разных видов и вегетативных органов // Вклад молодых биологов в решение вопросов продовольственной программы и охраны окружающей среды: Тез. докл. 11 конференции. Улан-Удэ, 1987. С. 116-117.
6. Поветьева Т.Н., Пашинский В.Г., Семенов А.А. и др. Исследование противоопухолевых и антиметастатических свойств растительных средств из аконита байкальского // Сибирский онкологический журн. 2002. № 4. С. 138-141.
7. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав Magnoliaceae. Л.: Наука, 1984. 460 с.
8. Hellman K. Antimetastatik drugs: from laboratory to clinic // Clin. and Exp. metastas. 1984. Vol. 2. P. 1-4.
9. Povetjeva T.N., Pashinski V. G., Zhapova C. et al. Antitumor and Cytotoxic Effect of Herbal Flavonoids // Eighth International Congress on Anti-Cancer Treaetment: Abstr. Paris, 1998. P. 87.
10. Sergent N.S.F., Price I.E., Tarin D. Effect of enzymic removal of cell surface constituents on metastatic colonisation potential of mouse mammara tumor cells // The British J. of Cancer. 1983. Vol. 48, № 4. P. 569-577.
Поступила 3.11.03
